Técnicas de análise da glicose e diabetes

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GLUCOSA 
Técnicas en bioquímica clínica: 
Cuando un haz de luz incide en una molécula pueden ocurrir tres situaciones de interés para el 
análisis: 
1. Parte de la luz se absorbe y otra parte se transmite sin pérdida de energía → 
espectrofotometría 
2. La luz se dispersa por las partículas, cambia de dirección, pero con la misma energía → 
turbidimetría y nefelometría 
3. La luz absorbida se pierde por la interacción intra y extramoleculares y por calor. En 
algunas moléculas parte de esa luz se pierde por emisión de un fotón de menor energía. → 
Fluorescencia y fosforescencia. 
METABOLISMO DE LA GLUCOSA 
Métodos enzimáticos: 
1. Hexocinasa. Incremento en la absorbancia a 340nm, es directamente proporcional a la 
concentración de glucosa. Lo q se mide es el 6-fosfoglutanato 
 Inconvenientes: no es lineal en concentraciones altas de 
glucosa. 
 
2. Glucosa-oxidasa. El incremento de color es proporcional a la concentración de glucosa 
 Inconveniente: la reacción acoplada de Trinder es 
susceptible a inteferencias por compuestos reductores 
(ácido ascórbico, bilirrubina o ácido úrico) que producen 
resultados de glucosa falsamente disminuidos. 
3. Glucosa deshidrogenasa. Mide la formación de NADH a 340 nm durante la oxidación de la 
B-D-glucosa a D-gluconalactona 
 
Glucosa sanguínea: 
En los eritrocitos, como no tienen mitocondria, la glucosa se convierte en lactato deshidrogenasa, 
por eso, en hemolisis no se debe medir la cantidad de LDH. Al igual que el potasio. Estudiar 
glucogénesis y glucogenólisis. 
GLUT 4: Altamente sensibles a altos niveles de glucosa → se activan sensibles también a insulina 
Estimulo de insulina → se expresan mayores niveles de GLUT 4 → entra mayor cantidad de glucosa 
a la célula 
Hipoglucemiantes: insulina 
Hiperglucemiantres: glucagón, adrenalina, somatotropina, tiroxina, cortisol 
El ayuno, la dieta o la gestación modifican el numero de… VER IMAGEN DIAPOS 
• Glucemia arterial mayor a la venosa (de 20 a 70 mg/dL) 
• La glucosa es menor en sangre total y 5% inferior en plasma. 
• En las muestras de suero no centrifugadas se produce un descenso de glucosa del 5-7% 
por hora. 
Medidas a tomar: tubos con gel separador, tubos de plasma con fluoruro sódico, centrifugación en 
tiempo adecuado (1h), separar el suero/plasma del paquete celular. 
 
Sobrecarga de glucosa: 
Determinaciones de glucosa antes y después de ingerir 75 g de glucosa o 1.75 g/kg hasta un 
máximo de e75g en px pediátricos. Mayor o igual a 200 mg/dL después de dos horas 
Condiciones preanalíticas específicas: 
• Ayuno de 10-12 horas 
• Dieta rica en carbohidratos 3 días previos (150g/día) 
• Interrumpir medicamentos que afecten los niveles de glucosa 
Diabetes gestacional: 
Test de O-Sullivan: carga de 50 g de glucosa, glucemia >140 mg/dL → administrar sobrecarga de 
100 g. 
Diagnóstico: 
92 mg/dL en ayuno 
180 mg/dL 1h 
153 mg/dL 2h 
140 mg/dL 3 h 
Glucosuria: 
Método cuantitativo o semicuantitativo en tira reactiva de orina, emplea la reacción de glucosa-
oxidasa acoplada a una reacción cromogénica sensible a H2O2 
• Falsos negativos: sustancias reductoras 
• Falsos positivos: sustancias oxidantes 
Cuerpos cetónicos: 
Métodos de detección semicuantitativos, usando tiras reactivas o tabletas. 
 
HbA1c 
1. Basado en la diferencia de carga, como son los de cromatografía de intercambio iónico. 
2. Basados en la diferencia estructural entre Hb glucosilada y la no glucosilada, como los 
inmunoanálisis o métodos enzimáticos. 
>6.5 criterio diagnóstico 
Fructosamina: albúmina (vida media: tres semanas) pegada a glucosa. 
Insulina y péptido C 
• Métodos de inmunoanálisis competitivo o tipo sándwich. 
Interferencias por ac heterófilos o FR. Hemólisis. 
La determinación del péptido C presenta varias ventajas: 
• Concentración más elevada 
• No está influido por la administración de insulina exógena 
• No es metabólicamente activo 
Insulina: 2-25 mU/L 
Péptido C: 1-4 ng/mL 
Albuminuria: 
Técnicas semicuantitativas en tira reactiva y métodos cuantitativos por inmunonefelometría o 
inmunoturbidimetría. 
Orina matutina (microalbuminuria) >30 mg/L. mg de albúmina / g de creatinina = >0.3 mg/g 
Orina de 24 horas: albuminuria de 300 mg/día. 
DIABETES 
Conjunto de enfermedades caracterizadas por alteraciones metabólicas que generan hiperglicemia 
persistente. 
Se debe a una alteración principalmente debida a dos factores: 
➔ Resistencia a la insulina 
➔ Déficit de esta 
Primera etapa: 
• Hiperinsulinismo normoglicémico. 
• Resistencia a la insulina 
• Años antes del diagnostico 
Segunda etapa: 
• Hiperinsulinismo hiperglicémico 
• Déficit de insulina 
• Alteraciones en la funcionalidad 
Tercera etapa: 
• Hiperinsulinismo hiperglicémico 
• Déficit de insulina 
• Muerte celular. 
• Poliuria, polidipsia, polifagia. 
Prediabetes: 
GAA: 100 – 125 mg/dL 
SOG: 140 – 199 mg/dL 
A1c: >