El casco equino laminitis, progenitor Células (madre) y desarrollo de terapias

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Departamento  de  Ciencias  Clínicas  Veterinarias,  Laboratorio  de  Equinos  y
Investigación  ortopédica  comparativa,  Baton  Rouge,  LA,  EE.  UU.
Autor  correspondiente:  Mandi  
J.  Lopez,  1909  Skip  Bertman  Dr,  Baton  Rouge,  LA  70803,  EE.  UU.
DOI:  10.1177/0192623319880469
Correo  electrónico:  mlopez@lsu.edu
El  casco  equino:  laminitis,  progenitor
Células  (madre)  y  desarrollo  de  terapias
1
Resumen  La  
cápsula  del  casco  equino,  compuesta  por  epidermis  y  dermis  modificadas,  es  vital  para  proteger  la  tercera  falange  de  las  fuerzas  de  locomoción.  Hay  descripciones  de  laminitis,  
definida  como  la  inflamación  de  los  tejidos  sensibles  de  las  pezuñas,  pero  reconocida  como  cambios  patológicos  con  o  sin  mediadores  inflamatorios,  en  los  primeros  registros  
de  caballos  domesticados.  La  laminitis  puede  variar  de  leve  a  grave,  y  los  signos  pueden  ser  agudos,  crónicos  o  pasar  de  una  inflamación  aguda  y  grave  a  un  tejido  
permanentemente  anormal.  El  daño  dentro  de  las  intrincadas  conexiones  dérmicas  y  epidérmicas  de  las  laminillas  primarias  y  secundarias  a  menudo  se  asocia  con  cambios  de  
por  vida  en  el  crecimiento,  la  reparación  y  la  conformación  del  casco.  Décadas  de  investigación  contribuyen  a  los  estándares  de  atención  contemporáneos  que  incluyen  terapias  
sistémicas  y  locales,  así  como  soporte  mecánico  para  los  cascos.  A  pesar  de  esto,  faltan  mecanismos  consistentes  para  restaurar  la  formación  de  tejido  sano  después  de  un  
insulto  laminítico.  Las  contribuciones  de  las  células  progenitoras  endógenas  y  exógenas  a  la  formación  de  tejido  sano  se  establecen  para  la  mayoría  de  los  tejidos.  
Comparativamente,  hay  poca  información  sobre  las  células  progenitoras  de  pezuña  equina.  En  esta  revisión  se  tratan  la  anatomía  del  casco  equino,  la  laminitis  y  las  células  
progenitoras.  El  potencial  de  las  células  progenitoras  para  avanzar  en  modelos  de  tejido  de  pezuña  equina  in  vitro  y  traducirse  en  terapias  clínicas  puede  mejorar  significativamente  
la  prevención  y  el  tratamiento  de  una  condición  devastadora  que  ha  afectado  a  los  compañeros  equinos  a  lo  largo  de  la  historia.
Colección  Especial  sobre  Células  Madre
Patología  toxicológica  
2021,  vol.  49(7)  1294­1307  ª  
The  Author(s)  2019  
Pautas  para  la  reutilización  
de  artículos:  sagepub.com/journals­permissions
de  células  progenitoras  para  crear  modelos  ex  vivo,  aumentará  significativamente  el  
armamento  actual  contra  esta  condición  devastadora.
Palabras  clave  
dermis,  epidermis,  inflamación,  tejido,  mesodermo,  caballo
Las  células  estromales  multipotentes  (MSC)  adultas  se  encuentran  en  la  mayoría  
de  los  tejidos  de  los  mamíferos,  incluido  el  casco  equino.11  Las  células  inmaduras  
pueden  diferenciarse  en  diversos  linajes  celulares  y  exhiben  un  privilegio  inmunitario  
variable  y  capacidades  de  autorrenovación.12  El  tejido  lamelar  formado  después  de  
una  laminitis  grave  contiene  epidermis  disqueratinizada.  lo  que  sugiere  una  formación  
anormal  y/o  maduración  de  células  progenitoras.13  Gran  parte  de  la  investigación  de  
CMM  equinas  adultas  se  centra  en  las  de  la  médula  ósea,  la  sangre  del  cordón  
umbilical  y  el  tejido  adiposo,  con  la  intención  de  promover  la  curación  en  huesos,  
tendones  o  tejidos  adiposos.  cartílago.14­16  Sin  embargo,  las  células  progenitoras  
del  casco  equino  están  en  gran  parte  inexploradas  y  pueden  proporcionar  un  nuevo  
objetivo  para  el  estudio,  la  prevención  y  el  tratamiento  de  la  laminitis.
Aristóteles  describió  la  relación  entre  la  laminitis  equina,  comúnmente  llamada  
“fundadora”,  y  la  sobrealimentación  de  cebada  alrededor  del  año  350  a .  o  cascadas  
endocrinas  o  compromiso  vascular.2­4  Con  base  en  una  revisión  sistemática  de  
evidencia  publicada,  la  incidencia  de  laminitis  varía  ampliamente,  1.5%  a  34%,  
dependiendo  de  la  población  equina  específica  evaluada.5  Ha  habido  relativamente  
poco  progreso  para  prevenir  o  revertir  este  trastorno  devastador,  a  pesar  de  décadas  
de  investigación  que  han  contribuido  a  intervenciones  terapéuticas  útiles.6  Los  
esfuerzos  se  ven  complicados  por  las  numerosas  afecciones  asociadas  con  la  
laminitis,  que  van  desde  la  obstrucción  intestinal  y  la  cojera  unilateral  grave  hasta  
las  agresiones  dietéticas  y  las  enfermedades  endocrinas  y  metabólicas.7  ,8  
Independientemente  de  la  causa  desencadenante,  el  tejido  lamelar  dentro  de  un  
casco  afectado  por  laminitis  a  menudo  no  vuelve  a  la  normalidad,  y  el  casco  afectado  
puede  requerir  un  manejo  continuo  para  mantener  la  comodidad  y  cierto  grado  de  
función.9,10  Los  tratamientos  contemporáneos  para  la  laminitis  generalmente  
consisten  en  de  una  o  más  terapias  sistémicas  y  locales,  así  como  soporte  mecánico  
del  tejido  laminítico.6,10  Mayor  conocimiento  y  aplicación  de  enfoques  novedosos  
para  estudiar,  prevenir  y  tratar  la  laminitis,  incluido  el  uso
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Qingqiu  Yang1  y  Mandi  J  López1
Introducción
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yang  y  lopez
las  laminillas  epidérmicas  y  dérmicas  tienen  forma  de  fronda,  laminillas  
primarias,  que  tienen  estructuras  similares  a  fronda  más  pequeñas,  
laminillas  secundarias,  en  su  superficie.  La  unión  entre  los  componentes  
epidérmico  y  dérmico  de  las  laminillas  es  una  membrana  basal  
compleja  a  la  que  se  unen  las  células  basales  epiteliales  a  través  de  
hemidesmosomas  (Figura  2)  o  placas  de  adhesión  densas  en  
electrones,  y  la  dermis  está  conectada  a  través  de  la  inserción  de  fibrillas  de  anclaje.
La  cápsula  del  casco  equino  es  una  epidermis  cornificada  y  modificada  
que  consta  de  5  regiones:  perioplo,  pared,  línea  blanca,  suela  y  ranilla.  
La  pared  tiene  3  capas:  desde  el  exterior,  son  el  estrato  externo  
(tectorium),  el  estrato  medio  y  el  estrato  interno  (lamellatum;  Figura  1).  
El  estrato  externo  consiste  en  unos  pocos  milímetros  de  tejido  
cornificado  formado  por  células  germinales  en  el  corion  perióplico  
situado  superficialmente  al  corion  coronario  que  produce  el  estrato  
medio.17  El  estrato  medio  grueso  está  compuesto  por  tejido  córneo  
tubular  e  intertubular  pigmentado.18  A  medida  que  se  forman  nuevas  
células  en  el  corion  coronario,  las  células  existentes  se  queratinizan  y  
eventualmente  cornifican  a  medida  que  se  mueven  distalmente.19
1295
El  foco  de  esta  revisión,  el  estrato  interno,  está  compuesto  por  
laminillas  epidérmicas  y  dérmicas  que  se  continúan  con  los  cuernos  
tubulares  del  estrato  medio  y  el  periostio  de  la  falange  distal,  
respectivamente.  El  aparato  suspensorio  de  la  falange  distal  es  una  
red  de  haces  de  colágeno  que  conecta  la  falange  distal  con  el  estrato  
interno  y  permite  que  la  pared  del  casco  actúe  como  una  estructura  
principal  de  soporte  de  peso.20  Los  haces  de  colágeno  se  extienden  
desde  la  falange  distal  y  se  insertan  en  la  membrana  basal  lamelar  
entre  las  laminillas  dérmicas  y  epidérmicas  secundarias.21  Mientras  
que  la  epidermis  no  es  sensible  y  es  avascular,  la  dermis  tiene  arterias,  
venas,  nervios  y  capilares  en  una  matriz  densa  de  tejido  conjuntivoresistente.22,23  Ambos
Estructura  del  casco  equino
Figura  1.  Ilustración  de  los  componentes  internos  del  casco  equino  (A)  en  imágenes  sin  (B)  a  aumentos  progresivamente  mayores  (C,  objetivo  original  
10;  D,  objetivo  original  20).  Se  muestran  el  corion  perioplico  (PC;  B)  y  el  corion  coronario  (CC;  B)  además  de  las  laminillas  epidérmicas  primarias  (PEL;  
C,  flecha  negra)  y  las  laminillas  dérmicas  primarias  (PDL;  C)  y  las  laminillas  epidérmicas  secundarias  (SEL;  D)  y  laminillas  dérmicas  secundarias  (SDL;  
D).  P3  ¼  tercera  falange.
Figura  2.  Electrofotomicrografía  de  transmisión  de  una  estructura  similar  
a  un  desmosoma  densa  en  electrones  (flecha)  entre  células  cultivadas  
del  estrato  lamellatum  de  la  pezuña  equina.
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entre  las  laminillas  dérmicas  y  epidérmicas  secundarias  (Fig  ure  3).  Como  su  
nombre  lo  indica,  las  queratinas  blandas  suelen  ser  las
por  células  residentes.  Proteínas  como  los  inhibidores  tisulares  de  
metaloproteinasas  y  metaloproteinasas  (MMP)  parecen  ser  importantes  para  el  
proceso  de  recambio  tisular  controlado  requerido  para
al  desplazamiento  de  la  tercera  falange,  que  se  cree  que  es  el  resultado  de  una
en  comparación  con  la  distribución  citoplasmática  normal.40  Basado  en
y  esfuerzos  de  carga.26
diferentes  regiones  del  casco.  27­29  Los  enlaces  disulfuro  dentro  de  los  filamentos  
de  queratina  transmiten  fuerza  y  dureza  proporcionales  al  número  de  enlaces  
presentes,  y  las  queratinas  duras  tienden  a  tener  más  de
Hay  varios  informes  que  describen  el  crecimiento  del  tejido  circundante
de  pezuñas  no  afectadas  versus  laminíticas.  En  la  laminitis  endocrinopática,  se  
informa  que  el  tejido  lamelar  se  reemplaza  parcialmente  con
claras  diferencias  en  las  queratinas  dentro  del  estrato  lamellatum
interleucina  [IL]  1b  y  8).43­46  Si  bien  está  claro  que  la  coordinación  de  la  
producción  y  degradación  de  tejidos  se  ve  interrumpida  por
tejido.
cambian  con  la  edad  y  la  patología.35,36  En  consecuencia,  hay
estrato  medio  se  mantiene  mientras  crece  hacia  abajo.19  Es
la  queratohialina  en  el  estrato  externo  del  casco  normal  y  las  citoqueratinas  en  
las  células  basales  epidérmicas  no  son  evidentes  en  laminitis.
aguda,  subaguda  y  crónica.47  La  fase  de  desarrollo
fibrosa  a  amorfa.32,33  En  la  epidermis,  las  queratinas  producidas
esta  información,  los  cambios  en  la  citoqueratina  y  el  contenido  de  queratina
distintas  propiedades  fisicoquímicas,  estructuras  intermedias,
en  papilas  dentro  del  corion  coronario.20  Como  las  células  basales
compuesto  de  proteínas  como  colágeno  y  laminina.24,25  El en  el  estrato  interno  que  se  cree  que  ocurre,  en  parte,  por
la  queratina  aberrante  y  la  queratinización  de  las  caras  abaxiales  de  las  laminillas  
epidérmicas  primarias  aumentan  en  comparación  con  lo  normal.37
soft.30  Las  secuencias  de  aminoácidos  determinan  las  secuencias  secundaria,  terciaria  y
crecimiento  y  reparación  de  las  pezuñas.42  Las  enzimas  también  pueden  causar  
una  degradación  excesiva  de  proteínas  clave  que  estabilizan  la  epidermis.
componente  más  grande  de  epitelio  cornificado  relativamente  suave,  mientras  que
combinación  de  tensión  del  tendón  flexor  digital  profundo,
mediadores  inflamatorios,  aún  no  se  han  determinado  las  contribuciones  exactas  
y  las  consecuencias  de  las  células  progenitoras  residentes.
generalmente  aceptado  que  la  homeostasis  tisular  incluye  equilibrio
tejido  de  la  pezuña.39,40  Citoqueratina  14  se  agrupa  alrededor  del  núcleo  en
se  produce  entre  el  primer  insulto  y  la  aparición  de  inicial
por  los  queratinocitos  existen  como  gránulos  de  queratohialina  dentro  de  la
y  comportamientos  mecánicos  que  los  dividen  ampliamente  en  blandos
se  dividen,  conducen  a  las  células  más  viejas  hacia  la  superficie  del  suelo  para
morfología  altamente  compleja  de  la  primaria  y  secundaria
1296
fuerzas  de  soporte  de  peso  y  ruptura  de  la  unión  dermal­epidérmica.  Si  la  tercera  
falange  no  se  desplaza  dentro  de  los  72
las  queratinas  duras  son  la  población  principal  en  el  tejido  cornificado  duro.
interfaz  dérmica  como  la  laminina  cuando  la  homeostasis  del  tejido  se  ve  
interrumpida  por  el  aumento  de  MMP  de  neutrófilos  (p.  ej.,  MMP2  y  MMP9)
y  la  ubicación  proporcionan  un  mecanismo  único  para  determinar  la  celda
Además,  la  hiperproliferación  de  queratinocitos  está  documentada  en
y  estructuras  cuaternarias  de  las  queratinas.31  A  menudo  se  combinan  con  otras  
proteínas,  como  las  proteínas  asociadas  al  filamento  de  queratina.
proliferación  de  células  basales  en  las  laminillas  proximales.  teorías
La  pared  del  casco  de  un  caballo  adulto  normal  crece  a  un  ritmo  de
Las  queratinas  son  las  principales  proteínas  estructurales,  el  subgrupo  más  grande  de
crear  los  cuernos  tubulares  e  intertubulares  de  la  pared  del  casco.17
Patología  Toxicológica  49(7)
síntesis  y  degradación  enzimática  de  la  matriz  extracelular
pezuñas  con  laminitis  inducida  por  sobrecarga  de  carbohidratos  (CHO)
células.34  La  queratina  14  es  una  citoqueratina  que  se  encuentra  típicamente  en  
el  citoesqueleto  de  las  células  epidérmicas,  y  es  expresada  por  las  células  basales
signos  clínicos.  La  fase  aguda  se  extiende  desde  los  primeros  signos  clínicos
producción  en  presencia  de  citocinas  proinflamatorias  (p.  ej.,
fenotipo,  nivel  de  madurez  y  patología  dentro  del  casco  equino
las  láminas  pueden  variar  regionalmente,  probablemente  debido  a  diferentes  funciones
o  queratinas  duras  y  contribuyen  a  las  propiedades  variables  de
pezuñas  afectadas  por  laminitis  insulínica.37,38  Abundante
proteínas  y  enzimas  de  unión  a  minerales  y  puede  variar  de
existen  sobre  el  proceso  por  el  cual  el  fuerte  apego  con  el
Hay  4  etapas  reconocidas  de  laminitis:  desarrollo,
El  tipo  y  número  de  queratinas  dentro  de  un  tejido  tiende  a
horas,  la  condición  se  clasifica  como  subaguda.  Subsecuente
proteínas  de  filamentos  intermedios  y  participantes  en  la  señalización  de  células  
vitales  en  las  células  epiteliales.  Son  proteínas  no  solubles  con
aproximadamente  de  0,23  a  0,35  pulgadas  (6­9  mm)  por  mes.41  El  crecimiento  
medio  del  estrato  ocurre  por  división  de  las  células  basales  epidérmicas
(SEL)  y  laminillas  dérmicas  secundarias  (SDL)  dentro  del  estrato  interno  del  
tejido  del  casco  equino.  Los  núcleos  están  teñidos  de  azul.
Figura  3.  Fotomicrografía  que  muestra  el  marcaje  fluorescente  de  la  queratina  14
(flecha,  verde),  en  células  basales  entre  laminillas  epidérmicas  secundarias
Crecimiento
Mediadores  del  daño  tisular
Queratinas
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Sobrecarga  de  carbohidratos  con  almidón  de  maíz  y  celulosa  de  madera
La  obesidad  puede  aumentar  la  predisposición  a  la  laminitis  al  alterar
características,  la  gravedad  de  la  enfermedad  y  la  progresión  varían  ampliamente se  acumulan  alrededor  de  la  microvasculatura  y  la  lámina  del  estrato
yang  y  lopez
cambios  en  la  pezuña  que  se  asemejan  a  los  de  la  laminitis  en  anillo  que  ocurre  
naturalmente  (Figura  5).57,63  La  oligofructosa  derivada  de  la  raíz  de  achicoria  
y  la  hiperinsulinemia  también  se  usan  para  crear
citocinas  inflamatorias  como  el  factor  de  necrosis  tumoral  a,  IL  1b  e  IL­6,  todaslas  cuales  disminuyen  el  receptor  de  insulina  sistémico
Estudiar  la  cronología  y  fisiopatología  de  la  laminitis,
históricamente  para  inducir  repetidamente  la  condición  en
o  insultos  locales.  Cascadas  inflamatorias  o  endocrinas  también
producción,  incluido  el  aumento  de  leptina  y  la  disminución  de  adiponectina,  una  
hormona  sensibilizadora  de  la  insulina.53  La  obesidad  también  se  asocia  con  
niveles  elevados  de  cortisol  debido  a  la  sobreexpresión  de
de  mecanismos  para  inducir  laminitis  con  fines  de  estudio.
que  van  desde  el  síndrome  metabólico  equino  hasta  la  pars  pituitaria
resistencia  a  la  insulina,  diabetes  tipo  2  e  hiperlipidemia.54
Los  cambios  patológicos  varían  con  la  toxina  y  la  dosis.57­59  El  uso  de  
endotoxinas  para  causar  laminitis  es  controvertido  ya  que  la  administración  de  
lipopolisacáridos  a  caballos  normales  tiende  a  crear  signos  de
reparación,  consideración  cuidadosa  de  los  cambios  tanto  en  las  células  como  en  los  tejidos
la  falla  del  tejido  lamelar  con  desplazamiento  progresivo  de  la  tercera  falange  se  
considera  laminitis  crónica  (Figura  4).47,48
1297
diferencias  en  la  causa  raíz  de  la  laminitis,  así  como  las  diferencias  individuales
nivel  de  inflamación  sistémica  y/o  desequilibrio  hormonal.51
homeostasis  del  casco,  en  parte,  por  la  producción  de  tejido  adiposo  de
parecen  causar  laminitis  en  caballos  por  lo  demás  normales.46,60­62
condición  natural  (Tabla  1).  En  modelos  y  laminitis  natural,  las  células  inmunitarias  
innatas  y  adaptativas
señalización  y  sensibilidad  a  la  insulina.52  Además,  la  obesidad  contribuye  a  la  
desregulación  del  tejido  adiposo  y  a  la  alteración  de  la  adipocina.
La  laminitis  puede  ocurrir  secundaria  a  cualquier  número  de  sistémicos
tóxicos  y  altas  dosis  de  carbohidratos  e  insulina  han
en  individuos  equinos.
harina  o  extracto  de  nuez  negra  (BWE)  causa  microestructural
laminitis.58,64  Años  de  investigación  han  resultado  en  un  conjunto  diverso
ya  que  el  compromiso  circulatorio  puede  contribuir  al  daño  tisular.49,50  Las  
condiciones  predisponentes  para  la  laminitis  son  numerosas,
interfase  epidérmica­dérmica  (Tabla  1).65,66  Calprotectina,  un
Dado  el  papel  de  las  células  residentes  en  la  homeostasis  tisular  y
11b­hidroxiesteroide  deshidrogenasa  1  en  pacientes  humanos  con
caballos  para  evaluaciones  secuenciales  a  medida  que  avanza  la  enfermedad.55,56
Independientemente  de  la  causa  desencadenante,  la  laminitis  puede  dañar  
gravemente  el  enlace  epidérmico­dérmico  crucial  que  mantiene  la  integridad  
estructural  de  los  tejidos  blandos  del  casco.  Del  mismo  modo,  debido  a
sepsis  clínica  y  disminución  de  la  perfusión  digital,  pero  no
disfunción  intermedia,  y  la  mayoría  están  asociados  con  algunos
es  necesario  comparar  los  modelos  de  laminitis  aguda  con  los
Modelos  inducibles  de  laminitis
con  40
La  tercera  falange  (P3)  está  rotada  y  desplazada  distalmente  en  la  radiografía  de de  un  casco  no  afectado  (A)  y  laminítico  (B)  con  núcleos  teñidos  de  azul
Figura  4.  Radiografías  de  un  casco  no  afectado  (A)  y  laminítico  (B).  El Figura  5.  Microfotografías  fluorescentes  del  estrato  interno
la  pezuña  con  laminitis. ,  6­diamidino­2­fenilindol.  Las  laminillas  están  deformadas  en  el
pezuña  laminítica.
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señalización
e  integrina  b4
P63  disminuido
Sí44
Sí68 Sí65 Sí67
Sí65
gama  aumentada
Sí67
Tabla  1.  Comparación  de  cambios  tisulares  microestructurales  por  laminitis  inducida  y  natural.
Sí81
transductor  de  señal
Aumento  de  la  interleucina  6,
Sí82
Laminitis  (crónica)
Sí72
transcripción  3
motivo  XC)  ligando  8;  disminuido
endotelina­1
BWE
Leucocito
camino  de  Wnt
expresión75,84
receptor  1
daño  celular
DECHO
celda  interrumpida Aumento  de  CD163  y
b­catenina  reducida
similar  a  la  insulina
expresión37,74,75
De  forma  natural
Insulina
activador  de
expresión76,80
ciclooxigenasa  2,  quimiocina  (C expresión;
H2AX  y
Modelo
expresión77,83
Sí82
proteína  quimiotáctica  de  monocitos
factor  de  crecimiento
Sí68Basal  epitelial
acumulación
supresión;
Sí66
Disminuido
expresion79
y  pérdida
Células  
calprotectina  positivas
Abreviaturas:  BWE,  extracto  de  nuez  negra;  CHO,  sobrecarga  de  carbohidratos;  OF,  oligofructosa.
Células  estromales  multipotentes
Sí69,85 Sí38,71Sí70,72
factor  4,  antígeno  embrionario  específico  de  etapa  3  (SSEA­3),  SSEA  4  y  
podocalixina  (TRA­1­60).93,94  Por  lo  general,  las  MSC  poseen
laminitis  inducida.  El  colapso  del  citoesqueleto  de  las  células  basales  está  
asociado  con  la  privación  de  glucosa  y  la  activación  de  MMP  en  el  modelo  de  
oligofructosa.44  Los  hemidesmosomas  entre  las  células  basales  están
disminuye,  mientras  que  las  proteínas  implicadas  en  la  inflamación  vascular
distintos  tipos  de  células  de  la  misma  capa  embrionaria  bajo  condiciones  de  
inducción  específicas  (Figura  6).89,90  Criterios  adicionales
con  las  conexiones  celulares  intercelulares  y  la  comunicación,
para  contrarrestar  los  efectos  de  la  laminitis  que  cambian  la  vida.
curso  natural  de  la  enfermedad  que  a  menudo  incluye  persistente
1298
la  capacidad  de  alterar  su  morfología  y  función  para  abordar
aplicado  para  identificar  MSCS  incluyen  marcadores  asociados  con
células  totipotentes,  y  tienen  un  privilegio  inmunológico  variable.95el  linaje  epitelial  necesario  para  el  tejido  epitelial  organizado
entre  modelos  y  laminitis;  sin  embargo,  los  cambios  en  la  naturaleza
Expresión  génica  y  proteica  entre  las  de  origen  natural
sobre  células  viables  e  inmaduras  que  contribuyen  a  la  formación  de  tejido
proteína  inflamatoria,  se  expresa  por  sangre  blanca  extravasada
lamellae.72  Con  dosis  altas  de  insulina,  las  células  epiteliales  lamelares  son
del  mesodermo,  y  las  células  indiferenciadas  en  el  espacio  retienen
modelos  de  oligofructosa.75  La  señalización  celular  se  interrumpe  en  los  
modelos  de  oligofructosa  y  CHO.  De  particular  interés  es  que  la  supresión  
del  mecanismo  de  señalización  Wnt  necesario  para
mecanismos  de  la  afección  para  posibles  objetivos  terapéuticos.  
Desafortunadamente,  los  modelos  no  replican  exactamente  el
Las  MSC  exhiben  características  específicas  in  vivo,  como  la  capacidad
diferenciación  inducida.91,92  Otros  marcadores  de  células  madre  a  menudo
que  las  células  progenitoras  pueden  diferenciarse  en  células  distintas  de  
orígenes  similares,  así  como  de  otras  capas  embrionarias,  un  proceso
aumento  de  la  expresión.37,73,74  IL  inflamatorias  como  IL­8,
modelo  CHO,  hay  necrosis  de  la  membrana  basal  y  pérdida  de
se  reducen.  77­80  La  inducción  de  laminitis  en  por  lo  demás  normal
Como  se  indicó  anteriormente,  las  CMM  adultas  se  aíslan  rutinariamente  de
la  laminitis  que  ocurre  puede  ser  más  sutil  que  experimentalmente
expresión  de  parte  o  la  totalidad  de  un  panel  de  antígenos  de  superficie,  
incluidos  CD105,  CD44,  CD29,  CD73,  CD90,  y  ninguna  expresión  de
y  la  reparación  es  probable  que  revele  una  nueva  vía  de  descubrimiento  en  el
y  la  laminitis  inducida  experimentalmente  son  algo  comparables.  En  la  
laminitis  natural,  el  factor  de  transcripción,  P63  (un  determinante  de  la  
proliferación  de  células  madre  epiteliales  estratificadas),
formación.76  Expresión  génica  de  células  basales  de  factores  asociados
adherirse  al  poliestirenoy  la  capacidad  de  diferenciarse  en
alguna  capacidad  para  la  autorrenovación,  aunque  no  la  inmortalidad  como
células  con  múltiples  inmunofenotipos  que  reflejan  diferente  plasticidad  y  
madurez.96  A  pesar  de  esto,  las  células  tienen  características
apoptosis.13,38
la  pérdida  de  células  en  y  alrededor  de  la  membrana  basal  es  comparable
en  el  modelo  CHO  interfiere  potencialmente  con  el  compromiso  de
anomalías  en  la  producción  y  maduración  del  tejido  de  la  pezuña.  Enfocar
necesidades  de  reparación  y  mantenimiento  de  tejidos.88  Por  definición,
Patología  Toxicológica  49(7)
pezuñas  es  un  mecanismo  para  estudiar  la  patogenia  aguda
células  epiteliales  entre  la  epidermis  secundaria  y  la  dérmica
IL­1b  e  IL­6  suelen  aumentar  y  las  IL  antiinflamatorias  como  IL10  disminuyen  
en  el  BWE  y
numerosos  tejidos  en  el  caballo.86,87  El  estroma  tisular  se  deriva
CD45,  CD34,  CD14,  CD11b  o  CD19,  así  como  la  expresión  de  genes  y  
proteínas  específicas  del  linaje  siguiendo  químicamente
desarrollo  embrionario,  como  la  transcripción  de  unión  de  octámeros
transición  mesenquimal  a  epitelial  de  las  células  epiteliales  basales
células  en  el  lado  epidérmico  de  la  membrana  basal  en  laminitis  natural  e  
inducida.67,68  Daño  microestructural  y
perdido  en  los  modelos  de  oligofructosa,  CHO  e  insulina.69­71  En  el
reacciones  como  gamma­histona  H2AX  y  endotelina­1
como  la  b­catenina  y  las  integrinas  en  el  modelo  de  CHO  y  la  expresión  del  
receptor  del  factor  de  crecimiento  1  similar  a  la  insulina  en  el  modelo  de  insulina,
anormalmente  alargada  y  sujeta  a  disqueratosis  y
requeridos  por  la  Sociedad  Internacional  de  Terapia  Celular  son  los
Los  aislados  de  células  primarias  suelen  ser  colecciones  heterogéneas  de
microestructura  y  ultraestructura.97  El  conocimiento  actual  apoya
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yang  y  lopez
Las  MSC  autólogas  (mismo  individuo)  y  alogénicas  (misma  especie,  
diferente  individuo)  parecen  promover  la  cicatrización  de  tejidos  en  
caballos  (incluidos  los  cascos)  y  otras  especies.104­106  A  pesar  de  
esto,  se  cree  que  los  factores  epigenéticos  influyen  en  la  plasticidad  
de  las  células  progenitoras,  con  células  de  un  tejido  dado  que  tiene  
el  mejor  potencial  para  ayudar  a  reparar  ese  tejido.107  Los  informes  
son  mixtos  en  torno  a  la  eficacia  de  las  terapias  de  MSC  no  
específicas  de  tejido  en  el  casco  y  otros  tejidos  como  el  tendón,  
posiblemente  debido  a  las  consecuencias  de  la  programación  
epigenética  que  no  es  superado  por  manipulación  in  vitro  
limitada.108­110  Esta  evidencia  apoya  fuertemente  la  necesidad  de  
aislar  y  caracterizar  las  células  progenitoras  del  casco  para  comprender  los  efectos  de  la  patología  lamelar.
1299
comúnmente  conocida  como  transdiferenciación.98  También  
mantienen  la  capacidad  de  "retroceder"  a  una  etapa  anterior  de  
desarrollo  tanto  por  medios  naturales  como  sintéticos.99  Además,  
las  MSC  exógenas  pueden  guiar  y  ser  guiadas  por  células  
endógenas.100,101  A  pesar  de  comportamientos  y  morfologías,  las  
células  indiferenciadas  varían  entre  especies  y  tejidos.102  Esto  
requiere  una  caracterización  individual  para  dilucidar  las  distintas  
propiedades  y  el  potencial  de  las  células  de  cada  
tejido  original  y  especie.91,92  La  capacidad  de  cultivar  y  manipular  
células  progenitoras  in  vitro  crea  una  plétora  virtual  de  oportunidades  
para  estudiar  la  regeneración  tisular  normal  y  anormal  para  dirigir  el  
descubrimiento  terapéutico  progresivo  y  la  traducción  de  terapias  celulares.103
Figura  6.  Microfotografías  de  células  progenitoras  laminares  después  del  cultivo  en  medio  de  inducción  adipogénico  (A),  osteogénico  (B)  o  neurogénico  
(C),  así  como  en  medio  estromal  (D,  E,  F).  Las  gotitas  adiposas,  los  depósitos  de  calcio  y  la  expresión  de  la  proteína  2  asociada  a  los  microtúbulos  (Map2)  
se  tiñeron  con  Oil  Red  O  (A,  D,  rojo),  rojo  de  alizarina  (B,  E,  rojo)  y  anti­map2  con  IgG  anti­ratón  (C,  F,  verde),  respectivamente.  Los  núcleos  se  tiñeron  
con  40  \mu  l ,  6­diamidino­2­fenilindol  (C,  F,  azul).
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Las  células  progenitoras  epidérmicas  son,  como  su  nombre  lo  indica,  derivadas
la  clasificación  se  realiza  con  células  vivas  para  permitir  el  seguimiento  del  cultivo
Las  células  madre  del  prepucio  humano  expresan  CD90,  CD105,
detectores  de  fluorescencia  cuantifican  la  intensidad  de  la  luz  dentro  de  especficos
e  hígado.117,122  Se  han  identificado  varios  inmunofenotipos  entre  especies  como  los  
queratinocitos  inmaduros  K15þ,  CD34þ
células  progenitoras  y  homeostasis  interrumpida  en  la  piel  que  resulta
Citometría  de  flujo  y  clasificación  celular  activada  por  fluorescencia
CD105þ)  de  aislados  de  células  primarias  de  pezuña  equina  para  evaluación
se  asocia  con  leves  a  graves  y  potencialmente  mortales
5,  14  y  15  típicamente  expresadas  por  células  inmaduras  y  queratinas  1,  9  y  10  por  
células  maduras.36  Células  madre  epidérmicas  humanas
y  factores  de  crecimiento  de  fibroblastos.117,118  Al  igual  que  las  MSC,  también  
poseen  la  capacidad  de  diferenciarse  en  distintos  linajes  celulares.
plasticidad  a  las  células  progenitoras  de  otros  tejidos  y  puede  madurar
Coexpresión  de  queratinas  15  y  19  por  queratinocitos  basales
Según  se  informa,  las  células  progenitoras  en  las  lesiones  han  promovido  la  
cicatrización  local.132  Esto  da  credibilidad  al  potencial  de  las  células  progenitoras  
exógenas  o  factores  celulares  para  restaurar  el  potencial  de  cicatrización  de  las  lesiones.
según  el  tamaño  y  la  fluorescencia.  Para  lograr  esto,  se  aplica  una  carga  electrostática  
a  las  gotas  de  fluido  que  contienen
la  base  de  conocimientos  se  expande,  al  igual  que  la  conciencia  de  las  distinciones
número  de  células  CD200+,  CD34+  fue  menor  en  el  cuero  cabelludo  calvo,  lo  que  
llevó  a  la  conclusión  de  que  una  falla  o  diferencia  en  la  maduración
función(es)  específica(s)  (Figura  7).31  En  los  tejidos  epiteliales  humanos,
típicamente  compuesto  de  un  mecanismo  de  "flujo"  por  el  cual  las  células  pasan
detectores  de  luz  La  dispersión  de  luz  se  utiliza  para  evaluar  el  tamaño  y
células,  células  amplificadoras  del  tránsito  y  queratinocitos  con  queratinas
en  múltiples  linajes  que  incluyen  hueso,  tejido  adiposo,  nervio,
el  otro  extremo  del  espectro  es  la  epidermólisis  ampollosa,  un  trastorno  cutáneo  
hereditario  en  humanos  y  caballos  asociado  con  el  agotamiento
sobre  ellos,  así  como  el  potencial  de  las  células  exógenas  o  neotejidos  para  revertir  o  
prevenir  el  proceso  de  la  enfermedad.
para  separar  las  células  que  expresaban  tanto  K14  como  CD105  (K14þ,
Falta  de  proliferación  de  células  basales  o  maduración  de  queratinocitos
renovación  bajo  la  dirección  de  factores  de  crecimiento  como  epidérmico
mismos  conceptos  pero  tiene  la  característica  adicional  de  ordenar  las  celdas
y  K6  también  se  utilizan  para  identificar  y  aislar  queratinocitos.125
mutaciones  genéticas.25,131  Inyección  de  mesodérmico  o  epidérmico
Las  células  progenitoras  de  la  piel  de  la  mayoría  de  las  especies  tienen
(Rh123)  versus  expresión  media  de  integrina  1b  y  alta  acumulación  de  rodamina,  
respectivamente.121  Como  la  célula  progenitora
ningunadiferencia  en  el  número  de  células  progenitoras  K15þ  pero  que  el
incluida  la  pezuña,  varían  con  la  etapa  de  maduración  celular  así  como
antígenos  de  interés  sobre  o  dentro  de  las  células.111  El  sistema  es
hay  una  expresión  distinta  de  queratina  en  las  células  basales,  suprabasal
a  través  de  un  aparato  de  detección  compuesto  por  un  activador  láser  y
fue  la  principal  distinción  entre  las  dos  condiciones.129  En
Patología  Toxicológica  49(7)
muchos  canales  de  detección  para  permitir  la  separación  de  células  que  expresan  una  
amplia  variedad  de  proteínas.  Recientemente,  se  utilizó  FACS
exclusivo  del  casco  de  los  caballos  y  de  la  membrana  periodontal  y
variedad  de  células  progenitoras  epidérmicas  dentro  de  aislados  de  células  primarias  
heterogéneas,  establece  la  plasticidad  de  las  células  y  resalta  los  antígenos  de  
superficie  comunes  con  las  MSC.
de  la  epidermis  y  participar  en  la  reparación  de  tejidos  y  cíclicos
forma  más  compleja  de  citometría  de  flujo  que  se  basa  en  la  mayoría  de  los
piel  humana,  murina  y  porcina.118,123,124  Los  marcadores  CD34
y  colágeno  en  la  unión  dermoepidérmica  debido  a  variables
expresión  de  integrina  1b  y  baja  acumulación  de  rodamina
y  una  población  celular  heterogénea.115
expresada  por  poblaciones  de  células  epiteliales  de  tejidos  complejos,
Las  células  progenitoras  en  el  cuero  cabelludo  calvo  versus  piloso  mostraron  que  había
intensidad  de  la  fluorescencia  de  los  anticuerpos  marcados  que  se  unen  a
repetibilidad  en  la  investigación  de  células  progenitoras.
se  recogen  en  depósitos  distintos.  113,114  El  proceso  de  celda
capacidades  de  producción  en  la  piel  humana.121,126  Similar  a  fibroblastos
1300
La  interfaz  epidérmica­dérmica  en  el  estrato  lamellatum  es
separación.  El  nivel  de  complejidad  varía  entre  los  sistemas  de  citometría  de  flujo  y  
FACS  y  puede  incluir  relativamente  pocos  a
CD166  y  CD73,  que  también  se  encuentran  en  MSC  derivadas  de  médula  ósea  
humana.124,127  Esta  información  confirma  una  amplia
rangos  de  longitud  de  onda.112  La  clasificación  celular  activada  por  fluorescencia  es  un
de  tejido  de  folículo  piloso  canino,  y  células  CD29þ,  K19þ  de
del  ectodermo  embrionario.116  Habitan  en  la  capa  basal
en  ampollas  o  descamación  de  la  epidermis.130  La  patología  subyacente  de  la  
enfermedad  es  la  falta  de  anclaje  de  proteínas  como  la  laminina
y  las  células  amplificadoras  del  tránsito  también  se  pueden  distinguir  por  su  alta
y  caracterización  de  un  subconjunto  distinto  de  células  progenitoras
patologías  de  la  piel.128  Un  estudio  sobre  el  folículo  piloso  del  cuero  cabelludo  humano
(FACS)  son  herramientas  universales  para  cuantificar  distintas  características  celulares  
dentro  de  un  aislado  de  células  progenitoras  heterogéneas.  La  citometría  de  flujo  se  
utiliza  para  diferenciar  las  células  según  su  tamaño,  volumen  y
de  múltiples  capas  embrionarias.119  En  particular,  se  informa  que  las  MSC  son  
capaces  de  asumir  un  fenotipo  epidérmico.120  Queratinas
disminuye  con  la  edad  e  indica  la  autorrenovación  celular  y  tejido
tejido  dañado  o  comprometido.
entre  poblaciones  celulares  únicas.  La  diligencia  continua  para  mantener  la  
nomenclatura  y  los  estándares  respaldará  la  consistencia  y
células.  Según  la  presencia  o  ausencia  de  carga,  las  células
Células  Progenitoras  Epidérmicas
Células  progenitoras  de  pezuña
Figura  7.  Microfotografía  fluorescente  de  células  progenitoras  de  pezuña  
equina  cultivadas  teñidas  con  anti­K14  y  anti­IgG­488  de  ratón  (verde).
Los  núcleos  se  tiñen  con  40,  6­diamidino­2­fenilindol  (azul).
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del  ligamento  periodontal  crioconservado  que  no  se  distinguía  de  los  aislados  de  
células  frescas,  las  células  de  los  crioconservados
contendría  razonablemente  células  progenitoras  de  transición  que  pueden
restos  de  tejido  con  combinaciones  de  filtración,  separación  por  gravedad  y  
centrifugación.138,139  En  particular,  las  células  progenitoras  de
Las  células  progenitoras  comparten  algunas  características  ultraestructurales  de  
las  células  progenitoras  equinas  epidérmicas  y  mesodérmicas,  como  vacuolas  
intracelulares  y  endoplasma  rugoso  dilatado  bien  desarrollado.
potencial  de  expansión  se  ven  afectados  en  consecuencia.141  Como  tal,  la  mayoría
las  células  pueden  asumir  fenotipos  de  piel  y  neurales.  146,147  De  manera  similar,
Las  células  progenitoras  de  las  pezuñas  pueden  proporcionar  una  visión  novedosa  de  la  
patología  de  la  laminitis.
tanto  ectodérmica  (neurogénica)  como  mesodérmica  (osteógena,
yang  y  lopez
con  transdiferenciación.144,145  Tanto  las  células  progenitoras  mesodérmicas  
como  las  epidérmicas  poseen  capacidades  de  transdiferenciación  como
típico  de  la  digestión  de  tejido  con  colagenasa  para  el  aislamiento  de  células  
progenitoras  del  tejido  adiposo  y  la  piel  con  varias  colagenasas
(Figura  9).140  Se  informa  que  la  crioconservación  "envejece"  las  células  frescas
confusión  con  células  que  resultan  de  la  fusión  de  células  progenitoras
modelos  del  estrato  interno  equino  pueden  ser  una  alternativa
(Figura  8).  El  conocimiento  actual  apoya  que  el  progenitor  primario
el  tejido  de  la  pezuña  muestra  signos  de  senescencia,  incluida  una  célula  irregular
La  transdiferenciación  es  un  proceso  complejo  por  el  cual  los  inmaduros
curación,  mientras  que  la  EMT  descontrolada  es  característica  de  la  neoplasia  
sia.149,150  Una  advertencia  planteada  por  los  investigadores  es  que  la  transición
función  en  la  reparación  y  mantenimiento  de  la  conexión  tisular  compleja.  155  
Recientemente,  las  células  que  expresan  epidérmico  (K15)  o
Las  células  progenitoras  se  han  descrito  recientemente  en  contraste  con
y  células  revitalizadas  como  lo  mismo.140,142
microvellosidades  (ectodérmicas).136,137  Las  células  también  producen  matriz  
extracelular  en  andamios  portadores  compuestos  de  poliéster
sido  aislado  por  digestión  con  colagenasa.  115  A  diferencia  de  las  células  aisladas
Morfología  celular  similar  a  la  cresta  neural  y  expresión  de  proteínas  neurales  
después  de  la  diferenciación  neural.148  Un  proceso  de  transdiferenciación  bien  
conocido  es  la  transición  epidérmica  a  mesenquimatosa.
que  en  la  piel  humana  así  como  en  el  estrato  lamellatum  de  la  pezuña  equina
con  células  somáticas.151­154  Elucidación  del  proceso  EMT  por
aislamientos  y  comportamiento  in  vivo,  plasticidad,  tasa  de  crecimiento  y
aludido  más  arriba.  En  ratones  y  humanos,  progenitor  de  médula  ósea
El  estrato  lamellatum  del  casco  equino  intacto  y  criopreservado  también
lecho  ungueal  en  humanos.133,134  Aislamiento  y  cultivo  de  pezuña
reticulum  cisternae  (mesodérmico),  así  como  la  superficie  celular
lamellatum  expresan  genes  y  proteínas  ectodérmicos  (K14,  K15,  K19)  y  
mesodérmicos  (CD29,  CD44,  CD105),  y  tienen
La  descripción  del  aislamiento  de  células  progenitoras  de  pezuña  equina  es
retículo  endoplásmico  y  cromatina  nuclear  agregada
Los  informes  advierten  contra  la  consideración  de  cultivos  continuamente
origen,  tejido  original  o  fenotipo  actual.  143  Numerosas  vías  de  señalización  celular  
distintas  y  superpuestas  están  asociadas
adipogénicos)  habilidades  de  diferenciación.135  Además,  el  casco  equino
1301
(porejemplo,  tipo  I  o  tipo  III),  seguido  de  la  separación  de  las  células  de
Muestran  células  progenitoras  mesodérmicas  de  médula  ósea  equina
caracterizarse  minuciosamente  para  confirmar  su  identidad  y  evitar
membrana,  citoplasma  denso  en  electrones,  rugosa  mal  organizada
a  la  inducción  in  vivo  de  laminitis  en  cascos  por  lo  demás  normales.
aislados  de  células  de  estrato  de  pezuña  equina  normal  y  anormal
Las  células  asumen  un  nuevo  linaje  que  es  distinto  de  su  embrionario.
células,  o  células  que  expresan  proteínas  de  múltiples  linajes,  deben
Una  interfaz  natural  entre  la  epidermis  y  la  dermis  como
proteínas  mesodérmicas  (CD105)  fueron  identificadas  en  el  estrato
aislamiento  de  células  progenitoras  de  los  otros  tejidos  de  interfaz
o  mineral  y  en  matriz  lamelar  descelularizada  in  vivo,  lo  que  confirma  la  capacidad  
de  formar  neotejido  en  plantillas  personalizadas.115,135  Esta  información  sugiere  
que  células  in  vitro
(EMT).  La  EMT  controlada  es  un  proceso  clave  en  el  tejido  normal
transdiferenciación
Figura  8.  Stratum  lamellatum  recolectado  de  una  pezuña  equina  (A)  y  el  sedimento  celular  resultante  (B)  después  de  la  digestión,  filtrado  y  centrifugación.
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Patología  Toxicológica  49(7)
pasajes  in  vitro  (Figura  10).135  Las  células  mostraron  plasticidad  
ectodérmica  y  mesodérmica  y  capacidades  de  transdiferenciación.
1302
Andamios  de  medicina  regenerativa  Los  andamios  
de  matriz  tisular  descelularizada  se  utilizan  con  frecuencia  para  la  
formación  de  neotejido  in  vitro  e  in  vivo  porque  brindan  soporte  estructural  
y  un  entorno  favorable  que  contiene  diversas  cantidades  de  proteínas  
tisulares  nativas  para  facilitar  la  unión  celular  y  ayudar  a  guiar  la  
diferenciación.158,159  Las  matrices  se  pueden  derivar  de  prácticamente  
cualquier  tejido  y,  por  lo  general,  se  descelularizan  y  se  desproteinizan  
parcialmente  mediante  procesos  químicos  y  térmicos.
El  potencial  de  que  la  EMT  contribuya  a  la  laminitis  se  sugiere  por  la  
abundante  cuña  mesodérmica  de  tejido  fibroso  típica  de  la  afección.  Esto  
es  especialmente  notable  dada  la  presentación  de  células  de  transición  en  
el  estrato  lamellatum.  Se  ha  demostrado  que  la  inflamación  favorece  la  
formación  de  tejido  mesodérmico.157  Esto  da  credibilidad  al  potencial  de  
la  EMT  inflamatoria  impulsada  por  citoquinas  en  las  pezuñas  laminíticas.  
Dado  el  potencial  para  la  formación  de  diversos  neotejidos,  las  células  
progenitoras  de  transición  pueden  ser  un  objetivo  terapéutico  significativo  
para  ayudar  a  evitar  el  daño  tisular  permanente  y  restaurar  la  formación  
normal  después  de  un  insulto  inflamatorio  en  el  casco  equino.
lamellatum.156  Los  aislados  de  células  progenitoras  que  expresaban  
ambas  proteínas  se  aislaron  posteriormente  de  aislados  de  células  
primarias  de  lamellatum  del  estrato  heterogéneo  y  se  cultivaron  a  través  de  múltiples
Figura  10.  Microfotografías  electrónicas  de  transmisión  de  células  
progenitoras  P3  del  estrato  lamellatum  del  casco  equino  cultivadas  en  
material  de  cultivo  (A)  y  en  matriz  de  tejido  lamelar  descelularizado  (B).
Marcas  de  anticuerpos  secundarios  marcados  con  oro  contra  K15  (10  nm)  
y  CD105  (20  nm)  localizados  en  el  citoplasma  celular  (A)  y  en  la  
construcción  fibrosa  (B).
Figura  9.  Microfotografías  electrónicas  de  transmisión  de  células  
progenitoras  cultivadas  de  estrato  lamel  latum  equino  fresco  (A)  y  
crioconservado  (B).  Las  células  del  tejido  criopreservado  muestran  signos  de  senescencia.
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El  futuro  de  la  terapia  con  células  progenitoras  La  terapia  con  
células  progenitoras  ha  ganado  gran  popularidad  en  las  últimas  décadas.  
Los  beneficios  potenciales  de  las  células  progenitoras  son  abundantes  
e  incluyen  propiedades  antiinflamatorias,  dirección  de  células  endógenas  
y  aceleración  de  la  cicatrización  o  formación  de  tejidos,  entre  otros .  
aislados  de  células  primarias.  Las  preocupaciones  potenciales  sobre  
su  uso  incluyen  la  falta  de  una  vida  media  y  una  vía  de  eliminación  
predecibles,  la  posibilidad  de  que  las  células  indiferenciadas  asuman  
fenotipos  patológicos  y  posibles  reacciones  inmunitarias  
peligrosas.171,172  A  pesar  de  esto,  se  han  obtenido  resultados  
prometedores .
La  complicada  estructura  de  la  piel  requiere  un  marco  de  matriz  que  
recapitule  o  facilite  la  formación  de  la  unión  epidérmica­dérmica  durante  
la  cicatrización.  La  maduración  de  los  queratinocitos  para  formar  las  
capas  externas  protectoras  de  la  piel  depende  de  una  conexión  saludable  
entre  la  epidermis  y  la  dermis.164  Se  ha  utilizado  matriz  tisular  sintética  
y  natural  sola  y  con  células  progenitoras  para  aumentar  la  cicatrización  
de  la  piel,  y  las  matrices  a  base  de  colágeno  son  muy  populares.  .157  
Un  informe  detalla  el  uso  de  matriz  de  submucosa  del  intestino  delgado  
porcino  para  tratar  heridas  granulares  en  las  extremidades  distales  de  
los  equinos.165  Se  informa  que  las  células  estromales  multipotentes  de  
la  sangre  del  cordón  umbilical  equino  incrustadas  en  un  gel  de  fibrina  
autóloga  mejoran  los  resultados  histológicos  de  las  heridas  cutáneas  de  
las  extremidades  distales.  166  El  armazón  de  hidrogel  a  base  de  
dextrano  mejoró  la  neovascularización  y  la  regeneración  de  la  piel  en  las  
heridas  por  quemaduras  porcinas  al  promover  la  infiltración  de  células  
angiogénicas  y  acelerar  la  cinética  de  curación .  .168  Si  bien  la  cápsula  
del  casco  tiene  muchas  diferencias  con  la  mayoría  de  la  epidermis,  el  
trabajo  anterior  establece  un  fuerte  precedente  para  la  matriz  tisular  y  la  
matriz  tisular  con  células  para  restaurar  el  crecimiento  y  la  reparación  
normales  del  casco.
ha  informado  de  la  administración  de  células  primarias.  También  hay  
otras  opciones  valiosas  para  los  aislados  de  células  primarias.  Algunos  
incluyen  modelos  de  tejido  vivo  que  recapitulan  la  formación  de  tejido  
embrionario  normal  y  anormal,  así  como  la  generación  de  injertos  de  
tejido  y  órganos  viables  para  la  implantación  a  partir  de  células  
progenitoras  autólogas  o  autógenas.  Es  concebible  que  los  modelos  de  
neotejido  a  partir  de  células  progenitoras  de  pezuñas  puedan  proporcionar  
un  recurso  valioso  para  el  estudio  y  tratamiento  de  la  laminitis  equina.  
Los  medios  de  cultivo  se  pueden  modificar  para  replicar  condiciones  
normales,  enfermas  e  inflamadas  para  evaluar  y  modificar  las  respuestas  
celulares  para  resistir  y  superar  las  anomalías  tisulares  causadas  por  
lesiones  o  enfermedades  sistémicas.  Los  modelos  de  neotejido  in  vitro  
también  pueden  dar  como  resultado  injertos  de  tejido  viables  y  respaldar  
el  desarrollo  de  una  matriz  terapéutica  personalizada  para  la  
administración  local.  Inherente  a  estos  objetivos  futuristas,  pero  
teóricamente  alcanzables,  está  la  necesidad  continua  de  aislar  y  
caracterizar  por  completo  las  poblaciones  de  células  progenitoras  
nativas.  Solo  a  través  de  avances  enfocados  e  incrementales  se  puede  
aprovechar  el  poder  de  la  célula  para  restaurar  la  función  normal  de  un  
órgano  o  sistema  para  la  salud  y  el  bienestar  de  todo  un  organismo.
significa  en  una  variedad  de  combinaciones.160,161Sin  embargo,  la  
matriz  tisular  no  necesariamente  tiene  que  provenir  de  la  especie  o  tejido  
receptor.  Se  han  utilizado  matrices  descelularizadas  para  apoyar  la  
regeneración  de  tejidos  desde  estructuras  musculoesqueléticas  
relativamente  simples  hasta  órganos  complejos  como  el  hígado.162,163
1303
Después  de  una  inflamación  severa,  algunos  cambios  en  la  zona  
de  la  membrana  basal  del  estrato  lamelar  incluyen  alteración  de  la  
proliferación  de  queratinocitos,  pérdida  o  reducción  de  proteínas  vitales  
como  laminina  y  colágeno,  y  disminución  de  las  conexiones  celulares  de  
los  hemidesmosomas.2,169  Al  igual  que  otros  tejidos,  parece  haber  
abundantes  células  progenitoras .  células  en  el  tejido  lamelar  dañado.  
Sin  embargo,  la  falta  de  dirección  estructural  y  proteica  puede  impedir  
la  diferenciación  adecuada  y,  de  hecho,  puede  desviar  la  diferenciación  
a  través  de  un  proceso  como  la  EMT.  Es  posible  que  la  implantación  
mínimamente  invasiva  de  estrato  lamelar  descelularizado  (Figura  11)  o  
neotejido  estrato  lamelatum  formado  por  células  progenitoras  en  
condiciones  de  laboratorio  controladas  pueda  proporcionar  las  señales  
necesarias  para  la  restauración  del  tejido  sano  del  casco.  Es  necesario  
continuar  con  la  investigación  in  vitro  para  avanzar  y  refinar  la  posible  
administración  de  tejidos  exógenos  o  construcciones  de  tejido  celular.
Declaración  de  Conflicto  de  Intereses  El(los)  
autor(es)  no  declararon  ningún  conflicto  de  interés  potencial,  real  o  
percibido  con  respecto  a  la  investigación,  autoría  y/o  publicación  de  este  
artículo.
yang  y  lopez
Figura  11.  Micrografía  electrónica  de  barrido  de  estrato  laminar  
descelularizado  que  muestra  la  estructura  lamelar  típica  (A,  flecha)  y  
la  superficie  cubierta  de  proteína  (B).
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identificación  ORCID
Financiamiento  Los  autores  declararon  haber  recibido  el  siguiente  apoyo  
financiero  para  la  investigación,  la  autoría  y/o  la  publicación  de  este  artículo:  El  
programa  de  estudios  de  salud  equina  de  la  Universidad  Estatal  de  Luisiana  
proporcionó  financiamiento  para  algunos  de  los  trabajos  descritos  en  esta  
revisión.  Escuela  de  Medicina  Veterinaria  de  la  Universidad  Estatal  de  Luisiana,  
Departamento  de  Agricultura  de  EE.  UU.  1433  Programa  de  Investigación  de  
Enfermedades  y  Salud  Animal,  y  la  Fundación  Tynewald.
1304
Mandi  J  López  https://orcid.org/0000­0002­5005­239X
Referencias
Patología  Toxicológica  49(7)
5.  Wylie  CE,  Collins  SN,  Verheyen  KL,  Richard  Newton  J.  Frecuencia  de  laminitis  equina:  una  
revisión  sistemática  con  evaluación  de  la  calidad  de  la  evidencia  publicada.  Vet  J.  
2011;189(3):248­256.
13.  Asplin  KE,  Patterson­Kane  JC,  Sillence  MN,  Pollitt  CC,  Mc  Gowan  CM.
32.  Yu  J,  Yu  DW,  Checkla  DM,  Freedberg  IM,  Bertolino  AP.  Cabello  humano
37.  Karikoski  NP,  McGowan  CM,  Singer  ER,  Asplin  KE,  Tulamo  RM,  Patterson­Kane  JC.  
Patología  de  casos  naturales  de  laminitis  endocrinopática  equina  asociada  a  hiperinsulinemia.  
Patol  veterinario.  2015;52(5):  945­956.
41.  Lockard  AJ,  Reinertson  EL.  Estimulación  del  crecimiento  de  la  pezuña  equina  mediante  un
2738­2746.
42.  Vu  TH,  Werb  Z.  Matrix  metaloproteinases:  efectores  del  desarrollo  y  la  fisiología  normal.  
Genes  Dev.  2000;14(17):2123­2133.
En:  Rutland  C,  ed.  Anatomía  y  Fisiología  Veterinaria.  Londres:  pluma  IntechO;  2019.
33.  Schweizer  J,  Bowden  PE,  Coulombe  PA,  et  al.  Nueva  nomenclatura  de  consenso  para  las  
queratinas  de  mamíferos.  J  Cell  Biol.  2006;174(2):169­174.
39.  Sistema  operativo  Wattle.  Citoqueratinas  de  las  matrices  del  castaño  (Torus  carpeus)  y  
perioplo  en  caballos  con  laminitis  aguda.  Soy  J  Vet  Res.  2001;62(3):
contrairritante.  Veterinario  de  la  Universidad  del  Estado  de  Iowa.  1986;48(2):4.
7.  Morgan  RA,  Keen  JA,  Walker  BR,  Hadoke  PW.  Disfunción  vascular  en  caballos  con  laminitis  
endocrinopática.  Más  uno.  2016;11(9):e0163815.
14.  Godwin  EE,  Young  NJ,  Dudhia  J,  Beamish  IC,  Smith  RK.  La  implantación  de  células  madre  
mesenquimales  derivadas  de  la  médula  ósea  demuestra  mejores  resultados  en  caballos  
con  lesión  por  sobreesfuerzo  del  tendón  flexor  digital  superficial.  Veterinario  Equino  J.  
2012;44(1):25­32.
muro.  Equine  Vet  J.  2004;36(3):236­241.
9.  Steelman  SM,  Chowdhary  BP.  La  proteómica  del  plasma  muestra  una  elevación  de  la  proteína  
antiinflamatoria  APOA­IV  en  la  laminitis  equina  crónica.  BMC  veterinario  Res.  2012;8:179.
27.  Coulombe  PA,  Omary  MB.  Principios  'duros'  y  'blandos'  que  definen  la  estructura,  función  y  
regulación  de  los  filamentos  intermedios  de  queratina.  Curr  Opin  Cell  Biol.  2002;14(1):110­122.
35.  Giesen  M,  Gruedl  S,  Holtkoetter  O,  Fuhrmann  G,  Koerner  A,  Petersohn  D.
16.  Kim  YS,  Kwon  OR,  Choi  YJ,  Suh  DS,  Heo  DB,  Koh  YG.  Análisis  comparativo  de  pares  
emparejados  de  la  inyección  versus  la  implantación  de  células  madre  mesenquimales  para  
la  osteoartritis  de  rodilla.  Soy  J  Sports  Med.  2015;43(11):
21.  Pollitt  C.  Función  laminar  a  nivel  celular.  En:  Belknap  JK,  Geor  RJ,  eds.  Laminitis  equina.  1ra  
ed.  Hoboken,  Nueva  Jersey:  JohnWiley  &  Sons,  Inc;  2017:  22­38.
25.  McMillan  JR,  Akiyama  M,  Nakamura  H,  Shimizu  H.  Colocalización  de  múltiples  isoformas  de  
laminina  predominantemente  debajo  de  los  hemidesmosomas  en  la  lámina  densa  superior  
de  la  membrana  basal  epidérmica.  J  Histochem  Cytochem.  2006;54(1):109­118.
29.  Carter  RA,  Shekk  V,  de  Laat  MA,  Pollitt  CC,  Galantino­Homer  HL.  Nuevas  queratinas  
identificadas  mediante  análisis  proteómico  cuantitativo  como  las  principales  proteínas  
citoesqueléticas  del  tejido  laminar  del  casco  equino  (Equus  caballus).  J  Anim  Sci.  
2010;88(12):3843­3855.
11.  Linardi  RL,  Megee  SO,  Mainardi  SR,  Senoo  M,  Galantino­Homer  HL.
36.  Moll  R,  Divo  M,  Langbein  L.  Las  queratinas  humanas:  biología  y  patología.
18.  Lancaster  LS,  Bowker  RM,  Mauer  WA.  Densidad  y  morfología  de  los  túbulos  de  la  pared  del  
casco  equino.  J  Vet  Med  Sci.  2013;75(6):773­778.
6.  Kullmann  A,  Holcombe  S,  Hurcombe  SD,  et  al.  La  crioterapia  digital  profiláctica  se  asocia  con  
una  menor  incidencia  de  laminitis  en  caballos  diagnosticados  con  colitis.  Veterinario  Equino  
J.  2014;46(5):554­559.
3.  Pollard  D,  Wylie  C,  Verheyen  K,  Newton  J.  Identificación  de  factores  modificables  asociados  
con  la  laminitis  equina  informada  por  el  propietario  en  Gran  Bretaña  utilizando  un  enfoque  
de  estudio  de  cohorte  basado  en  la  web.  BMC  veterinario  Res.  2019;15(1):59.  4.  
de  Laat  MA,  Sillence  MN,  Reiche  DB.  Características  fenotípicas,  hormonales  y  clínicas  de  la  
laminitis  endocrinopática  equina.  J  Vet  Intern  Med.  2019;33(3):1456­1463.
23.  Al­Agele  R,  Paul  E,  Dvojmoc  VK,  Sturrock  CJ,  Rauch  C,  Rutland  CS.  La  anatomía,  histología  
y  fisiología  del  casco  equino  sano  y  cojo.
12.  Ankrum  JA,  Ong  JF,  Karp  JM.  Células  madre  mesenquimales:  inmunoevasivas,  no  
inmunoprivilegiadas.  Nat  Biotechnol.  2014;32(3):252­260.
31.  Bragulla  HH,  Homberger  DG.  Estructura  y  funciones  de  las  proteínas  queratínicas  en  epitelios  
simples,  estratificados,  queratinizados  y  cornificados.  J  Anat.  2009;  214(4):516­559.
Histochem  Cell  Biol.  2008;129(6):705.
40.  Wattle  O.  Citoqueratinas  del  estrato  medio  y  delestrato  interno  de  la  pared  del  casco  equino  
en  la  laminitis  aguda.  Acta  Vet  Scan.  2000;41(4):363­379.
19.  Daradka  M,  Pollit  CC.  Proliferación  de  células  epidérmicas  en  la  pezuña  equina
8.  Virgin  JE,  Goodrich  LR,  Baxter  GM,  Rao  S.  Incidencia  de  laminitis  de  las  extremidades  de  
apoyo  en  caballos  tratados  con  yesos  de  media  extremidad,  extremidad  completa  o  
pasadores  de  transfixión:  un  estudio  retrospectivo  de  113  caballos  (2000­2009).  Veterinario  
equino  J  Supl.  2011;(40):7­11.
24.  Pollit  CC.  La  membrana  basal  en  la  epidermis  dérmica  del  casco  equino
1.  Rendle  D.  Laminitis  equina.  1.  Manejo  en  la  etapa  aguda.  en  la  práctica  2006;28(8):434­443.  
2.  de  Laat  MA,  Pollitt  C.  
Examen  ultraestructural  de  la  patología  de  la  membrana  basal  en  caballos  con  laminitis  inducida  
por  insulina.  Domest  Anim  Endocrinol.  2019;69:30­34.
Histopatología  de  la  laminitis  inducida  por  insulina  en  ponis.  veterinario  equino  J.  2010;  
42(8):700­706.
queratinas.  J  Invest  Dermatol.  1993;101(1):  S56­S59.
34.  Sugita  T,  Huang  CC,  Abramson  M.  Efecto  de  la  endotoxina  en  la  producción  de  queratina  de  
queratinocitos  in  vitro.  Soy  J  Otorrinolaringol.  1986;7(1):42­46.
20.  Pollit  CC.  La  anatomía  y  fisiología  del  aparato  suspensorio  de  la  falange  distal.  Vet  Clin  North  
Am  Equine  Pract.  2010;26(1):29­49.
10.  Morrison  SJVCEP.  Laminitis  crónica:  manejo  del  pie.  Veterinario  Clin  Norte
unión.  Equine  Vet  J.  1994;26(5):399­407.
28.  Wattle  O.  Citoqueratinas  de  la  pared,  castaño  y  piel  del  casco  equino:  bioquímica  e  
inmunohistoquímica.  Veterinario  equino  J  Supl.  1998;(26):66­80.
Los  procesos  de  envejecimiento  influyen  en  la  expresión  de  queratina  y  KAP  en  los  folículos  
pilosos  humanos.  Exp.  Dermatol.  2011;20(9):759­761.
38.  Karikoski  NP,  Patterson­Kane  JC,  Asplin  KE,  et  al.  Cambios  morfológicos  y  celulares  en  
láminas  epidérmicas  secundarias  de  caballos  con  laminitis  inducida  por  insulina.  Soy  J  Vet  
Res.  2014;75(2):161­168.
15.  Kang  JG,  Park  SB,  Seo  MS,  Kim  HS,  Chae  JS,  Kang  KS.  Caracterización  y  aplicación  clínica  
de  células  madre  mesenquimales  de  sangre  de  cordón  umbilical  equino.  J  Vet  Sci.  
2013;14(3):367­371.
22.  Bowker  R,  Linder  K,  Sonea  I,  Guida  L.  Fibras  nerviosas  sensoriales  y  receptores  en  las  
extremidades  anteriores  distales  de  los  equinos  y  sus  funciones  potenciales  en  la  locomoción.  
Equine  Vet  J.  1995;27(S18):141­146.
Expresión  y  localización  de  células  madre  epiteliales  y  marcadores  de  diferenciación  en  
piel,  ojos  y  pezuñas  de  equinos.  Dermatol  veterinario.  2015;26(4):213­e247.
26.  Kawasako  K,  Higashi  T,  Nakaji  Y,  et  al.  Evaluación  histológica  de  la  diversidad  de  láminas  
epidérmicas  en  cascos  de  caballos  sin  signos  clínicos  de  laminitis.  Soy  J  Vet  Res.  
2009;70(2):186­193.
30.  Lynch  MH,  O'Guin  WM,  Hardy  C,  Mak  L,  Sun  TT.  Queratinas  ácidas  y  básicas  del  cabello/
uñas  (“duras”):  su  colocalización  en  las  células  corticales  superiores  y  de  la  cutícula  del  
folículo  piloso  humano  y  su  relación  con  las  queratinas  “blandas”.  J  Cell  Biol.  1986;  103  (6  
pt  2):  2593­2606.
Soy  práctica  equina.  2010;26(2):425­446.
17.  Pollitt  C.  Anatomía  y  fisiología  de  la  pared  interna  del  casco.  Práctica  equina  de  Clin  Tech.  
2004;3(1):3­21.
425­432.
Machine Translated by Google
https://orcid.org/0000-0002-5005-239X
1305yang  y  lopez
73.  Carter  R,  Engiles  J,  Megee  S,  Senoo  M,  Galantino­Homer  HL.  Disminución  de  la  expresión  de  
p63,  un  regulador  de  las  células  madre  epidérmicas,  en  la  pezuña  equina  crónica  laminítica.  
Equine  Vet  J.  2011;43(5):543­551.
Lesiones  histológicas  y  morfométricas  en  la  fase  de  desarrollo  preclínica  de  la  laminitis  
inducida  por  insulina  en  caballos  de  raza  estándar.  veterinario  J.  2013;  195(3):305­312.
71.  Nourian  AR,  Asplin  KE,  McGowan  CM,  Sillence  MN,  Pollitt  CC.  Laminitis  equina:  lesiones  
ultraestructurales  detectadas  en  ponis  tras  hiperinsulinemia.  Equine  Vet  J.  2009;41(7):671­677.
43.  Domeij  H,  Modeer  T,  Yucel­Lindberg  T.  Metaloproteinasa­1  de  matriz  e  inhibidor  tisular  de  la  
producción  de  metaloproteinasa­1  en  fibroblastos  gingivales  humanos:  el  papel  de  la  proteína  
quinasa  C.  J  Periodontal  Res.  2004;39(5):  308­314.
48.  Cripps  PJ,  Eustace  RA.  Mediciones  radiológicas  de  los  pies  de  caballos  normales  con  relevancia  
para  laminitis.  Equine  Vet  J.  1999;31(5):  427­432.
55.  De  Laat  M,  Kyaw­Tanner  M,  Sillence  M,  McGowan  C,  Pollitt  C.
78.  Leise  BS,  Watts  MR,  Roy  S,  Yilmaz  AS,  Alder  H,  Belknap  JK.  Uso  de  microdisección  de  captura  
láser  para  la  evaluación  de  la  señalización  de  células  epiteliales  basales  lamelares  equinas  
en  las  primeras  etapas  de  la  laminitis.  Equine  Vet  J.  2015;47(4):478­488.  79.  de  Laat  MA,  
Pollitt  CC,  Kyaw­Tanner  
MT,  McGowan  CM,  Sillence  MNJTVJ.  Un  papel  potencial  para  el  receptor  del  factor  1  de  
crecimiento  similar  a  la  insulina  lamelar  en  la  patogenia  de  la  laminitis  hiperinsulinémica.  Vet  
J.  2013;197(2):  302­306.
273­278.
Laminitis  equina  de  origen  alimentario:  un  modelo  experimental.  Soy  J  Vet  Res.  1975;  36  (4  
pt  1):  441­444.
46.  Patan­Zugaj  B,  Gauff  FC,  Egerbacher  M,  Licka  TF.  Cambios  inducidos  por  endotoxinas  de  las  
metaloproteinasas  de  la  matriz  que  escinden  el  colágeno  tipo  VII  en  tejido  lamelar  de  
miembros  equinos  perfundidos  extracorpóreamente.  Soy  J  Vet  Res.  2018;  79(9):986­994.
Laminitis  equina.  1ra  ed.  Hoboken,  Nueva  Jersey;  2017;  167­175.
52.  Vick  MM,  Adams  AA,  Murphy  BA,  et  al.  Relaciones  entre  citocinas  inflamatorias,  obesidad  y  
sensibilidad  a  la  insulina  en  el  caballo.  J  Anim  Sci.  2007;85(5):1144­1155.
San  Diego,  California;  2008.
81.  Bailey  SR,  Adair  HS,  Reinemeyer  CR,  et  al.  Concentraciones  plasmáticas  de  endotoxina  y  
activación  plaquetaria  en  la  etapa  de  desarrollo  de  laminitis  inducida  por  oligofructosa.  Vet  
Immunol  Inmunopatol.  2009;  129(3­4):167­173.
70.  Pollit  CC,  Visser  MB.  Laminitis  por  sobrecarga  alimentaria  de  carbohidratos.  Veterinario
66.  Black  SJ,  Lunn  DP,  Yin  C,  Hwang  M,  Lenz  SD,  Belknap  JK.  Emigración  de  leucocitos  en  las  
primeras  etapas  de  la  laminitis.  Vet  Immunol  Inmunopatol.  2006;109(1­2):161­166.
74.  Holm  A,  Venugopal  C,  Hosgood  G,  Eades  S,  Moore  R.  Comparación  del  efecto  de  dos  
antagonistas  de  la  endotelina  en  las  respuestas  in  vitro  de  los  anillos  venosos  y  arteriales  
digitales  palmares  equinos  a  la  endotelina­1  en  caballos  normales  y  aquellos  con  laminitis  
adquirida  naturalmente.  Trabajo  presentado  en:  Actas  del  Sexto  Simposio  de  Investigación  
sobre  Cólicos;  Manchester,  Reino  Unido;  2002.
57.  Minnick  PD,  Brown  CM,  Braselton  WE,  Meerdink  GL,  Slanker  MR.  La  inducción  de  la  laminitis  
equina  con  un  extracto  acuoso  del  duramen  del  nogal  negro  (Juglans  nigra).  Vet  Hum  Toxicol.  
1987;29(3):230­233.
Efectos  dispares  de  la  infusión  de  LPS  y  la  sobrecarga  de  carbohidratos  en  la  expresión  de  
genes  inflamatorios  en  láminas  equinas.  Vet  Immunol  Inmunopatol.  2013;155(1­2):1­8.
83.  Faleiros  RR,  Nuovo  GJ,  Flechtner  AD,  Belknap  JK.  Presencia  de  células  mononucleares  en  
láminas  normales  y  afectadas  del  modelo  de  laminitis  con  extracto  de  nuez  negra.  Veterinario  
Equino  J.  2011;43(1):45­53.
65.  Faleiros  RR,Johnson  PJ,  Nuovo  GJ,  Messer  NT,  Black  SJ,  Belknap  JK.
Vet  Immunol  Inmunopatol.  2012;145(1­2):395­401.  56.  de  Laat  MA,  
Patterson­Kane  JC,  Pollitt  CC,  Sillence  MN,  McGowan  CM.
68.  Faleiros  RR,  Nuovo  GJ,  Belknap  JK.  Calprotectina  en  células  mieloides  y  epiteliales  de  
láminas  de  caballos  con  laminitis  inducida  por  extracto  de  nuez  negra.  J  Vet  Intern  Med.  
2009;23(1):174­181.
laminitis  Equine  Vet  J.  1996;28(1):38­46.
59.  Stokes  SM,  Belknap  JK,  Engiles  JB,  et  al.  La  hipotermia  digital  continua  previene  la  falla  lamelar  
en  el  modelo  de  abrazadera  hiperinsulinémica  euglucémica  de  laminitis  equina.  Equine  Vet  
J.  2019;51(5):658­664.
63.  Garner  HE,  Coffman  JR,  Hahn  AW,  Hutcheson  DP,  Tumbleson  ME.
82.  Laskoski  LM,  Locatelli­Dittrich  R,  Valada˜o  CAA,  et  al.  Leucopenia  sistémica,  evaluación  de  la  
infiltración  de  leucocitos  laminares  y  lesiones  laminares  en  caballos  con  síndrome  cólico  
natural.  Res  Vet  Sci.  2015;101:  15­21.
54.  Pereira  CD,  Azevedo  I,  Monteiro  R,  Martins  MJ.  11b­Hidroxiesteroide  deshidrogenasa  tipo  1:  
relevancia  de  su  modulación  en  la  fisiopatología  de  la  obesidad,  el  síndrome  metabólico  y  la  
diabetes  mellitus  tipo  2.  Diabetes  Obes  Metab.  2012;14(10):869­881.
77.  Leise  BS,  Watts  M,  Tanhoff  E,  Johnson  PJ,  Black  SJ,  Belknap  JK.  Regulación  laminar  de  
STAT1  y  STAT3  en  modelos  de  laminitis  inducidos  por  extracto  de  nuez  negra  y  sobrecarga  
de  carbohidratos.  J  Vet  Intern  Med.  2012;26(4):  996­1004.
72.  Pollit  CC.  Patología  de  la  membrana  basal:  una  característica  del  equino  agudo
64.  de  Laat  MA,  McGowan  CM,  Sillence  MN,  Pollitt  CC.  Laminitis  equina:  inducida  por  
hiperinsulinemia  de  48  h  en  caballos  de  raza  estándar.  Equine  Vet  J.  2010;42(2):129­135.
53.  Frank  N.  Laminitis  endocrinopática,  laminitis  asociada  a  la  obesidad  y  laminitis  asociada  al  
pasto.  Ponencia  presentada  en:  Actas  de  la  54.ª  Convención  Anual  de  la  Asociación  
Estadounidense  de  Practicantes  Equinos.
45.  Kyaw­Tanner  MT,  Wattle  O,  van  Eps  AW,  Pollitt  CC.  Laminitis  equina:  la  metaloproteinasa  de  
matriz  tipo  membrana­1  (MMP­14)  está  involucrada  en  el  inicio  de  la  fase  aguda.  Equine  Vet  
J.  2008;40(5):482­487.
51.  Johnson  PJ.  El  síndrome  metabólico  equino  síndrome  de  Cushing  periférico.  Vet  Clin  North  
Am  Equine  Pract.  2002;18(2):271­293.
67.  De  Laat  M,  Van  Eps  A,  McGowan  C,  Sillence  M,  Pollitt  C.  Laminitis  equina:  histopatología  
comparativa  48  horas  después  de  la  inducción  experimental  con  insulina  u  oligofructosa  
alimentaria  en  caballos  de  raza  estándar.  J  Comp  Pathol.  2011;145(4):399­409.
Productos  finales  de  glicación  avanzada  en  caballos  con  laminitis  inducida  por  insulina.
76.  Pollit  CC.  Desregulación  de  la  célula  epitelial  basal  lamelar  en  laminitis:  papel  del  citoesqueleto  
y  las  uniones  celulares.  En  Belknap  JK,  Geor  RJ,  eds.
47.  Campana  DM.  Laminitis  en  el  caballo.  Vet  Clin  Norteamérica:  práctica  equina.  1999;15(2):287­294.
Práctica  equina  de  Clin  North  Am.  2010;26(1):65­78.
Vet  J.  2006;38(3):203­208.
80.  Wang  L,  Pawlak  EA,  Johnson  PJ,  et  al.  Impacto  de  la  laminitis  en  la  vía  de  señalización  
canónica  de  Wnt  en  células  epiteliales  basales  de  las  láminas  digitales  equinas.  Más  uno.  
2013;8(2):e56025.
75.  Belknap  JK,  Giguere  S,  Pettigrew  A,  Cochran  AM,  Van  Eps  AW,  Pollitt  CC.  Patrones  de  
expresión  de  citocinas  proinflamatorias  lamelares  en  laminitis  en  la  etapa  de  desarrollo  y  en  
el  inicio  de  la  cojera:  respuesta  inmune  innata  frente  a  adaptativa.  Veterinario  Equino  J.  
2007;39(1):42­47.
49.  Baxter  GM,  Laskey  RE,  Tackett  RL,  Moore  JN,  Allen  D.  Reactividad  in  vitro  de  arterias  y  venas  
digitales  a  mediadores  vasoconstrictores  en  caballos  sanos  y  en  caballos  con  laminitis  
temprana.  Soy  J  Vet  Res.  1989;50(4):508­517.  50.  de  la  Rebiere  de  Pouyade  G,  Serteyn  
D.  El  papel  de  los  neutrófilos  activados  en  la  etapa  temprana  de  la  laminitis  equina.  Vet  J.  
2011;189(1):27­33.
44.  Francés  KR,  Pollitt  CC.  Laminitis  equina:  la  privación  de  glucosa  y  la  activación  de  MMP  
inducen  la  separación  dermoepidérmica  in  vitro.  veterinario  equino  J.  2004;  36(3):261­266.
58.  Van  Eps  A,  Pollitt  C.  Laminitis  equina  inducida  con  oligofructosa.  Equino
61.  Menzies­Gow  NJ,  Bailey  SR,  Katz  LM,  Marr  CM,  Elliott  J.  Vasoconstricción  digital  inducida  por  
endotoxinas  en  caballos:  cambios  asociados  en  las  concentraciones  plasmáticas  de  
mediadores  vasoconstrictores.  Equine  Vet  J.  2004;36(3):
62.  Tadros  EM,  Frank  N.  Efectos  de  la  administración  continua  o  intermitente  de  lipopolisac  
charide  durante  48  horas  sobre  la  respuesta  inflamatoria  sistémica  en  caballos.  Soy  J  Vet  
Res.  2012;73(9):1394­1402.
Acumulación  laminar  de  leucocitos  en  caballos  con  laminitis  inducida  por  sobrecarga  de  
carbohidratos.  J  Vet  Intern  Med.  2011;25(1):107­115.
69.  Francés  KR,  Pollitt  CC.  Laminitis  equina:  la  pérdida  de  hemidesmosomas  en  las  laminillas  
epidérmicas  secundarias  del  casco  se  correlaciona  con  la  dosis  en  un  modelo  de  inducción  
de  oligofructosa:  un  estudio  ultraestructural.  Equine  Vet  J.  2004;36(3):230­235.
60.  Kwon  S,  Moore  JN,  Robertson  TP,  Hurley  DJ,  Wagner  B,  Vandenplas  ML.
Machine Translated by Google
Patología  Toxicológica  49(7)1306
103.  Poliachenko  I,  Driuk  M,  Dombrovs'kyı˘  DB.  Cambios  ultraestructurales  del  endotelio  vascular  
en  pacientes  con  isquemia  crónica  de  las  extremidades  después  de  la  conducción  de  células  
estromales  multipotentes  de  trasplante  de  tejido  adiposo.  Klin  Khir.  2010;(6):50­53.
115.  Yang  Q,  López  MJ.  La  morfología  ultraestructural  es  distinta  entre  las  células  progenitoras  
primarias  aisladas  de  tejido  de  pezuña  equina  normal,  inflamada  y  crioconservada  y  las  
células  progenitoras  CD105þ  K14þ .  In  Vitro  Cell  Dev  Biol  Anim.  2019;55(8):641­655.
Subpoblaciones  tamizadas  por  tamaño  de  células  madre  mesenquimales  de  matriz  de  
cordón  umbilical  equino  intervascular  y  perivascular.  Proliferación  celular.  2011;  44(4):330­342.
122.  Blanpain  C,  Fuchs  E.  Células  madre  epidérmicas  de  la  piel.  Anual  Rev  Cell  Dev
128.  Bath­Hextall  FJ,  Perkins  W,  Bong  J,  Williams  HC.  Intervenciones  para  el  carcinoma  de  células  
basales  de  la  piel.  Cochrane  Database  Syst  Rev.  2007;(1):  CD003412.
104.  Baksh  D,  Song  L,  Tuan  RS.  Células  madre  mesenquimales  adultas:  caracterización,  
diferenciación  y  aplicación  en  terapia  celular  y  génica.  J  Célula  Mol  Med.  2004;8(3):301­316.
de  laminitis  crónica  equina:  una  prueba  de  concepto.  Int  J  Mol  Sci.  2017;  18(10):E2122.
106.  Angelone  M,  Conti  V,  Biacca  C,  et  al.  La  contribución  de  las  células  madre  mesenquimales  
derivadas  del  tejido  adiposo  y  el  plasma  rico  en  plaquetas  al  tratamiento
105.  Tsuchida  H,  Hashimoto  J,  Crawford  E,  Manske  P,  Lou  J.  Células  madre  mesenquimales  
alogénicas  diseñadas  para  reparar  el  defecto  segmentario  femoral  en  ratas.  J  Orthop  Res.  
2003;21(1):44­53.
117.  Papini  S,  Cecchetti  D,  Campani  D,  et  al.  Aislamiento  y  análisis  clonal  de  células  madre  de  
queratinocitos  epidérmicos  humanos  en  cultivo  a  largo  plazo.  Células  madre.  
2003;21(4):481­494.
123.  Saichanma  S,  Bunyaratvej  A,  Sila­Asna  M.  Transdiferenciación  in  vitro  de  células  similares  al  
epitelio  corneala  partir  de  células  precursoras  derivadas  de  la  piel  humana.  Int  J  Ophthalmol.  
2012;5(2):158­163.
90.  da  Silva  Meirelles  L,  Chagastelles  PC,  Nardi  NB.  Las  células  madre  mesenquimales  residen  
en  prácticamente  todos  los  órganos  y  tejidos  posnatales.  Ciencia  celular  J.  2006;  119  (Pt  
11):  2204­2213.
84.  van  Eps  AW,  Leise  BS,  Watts  M,  Pollitt  CC,  Belknap  JK.  La  hipotermia  digital  inhibe  la  
señalización  inflamatoria  lamelar  temprana  en  el  modelo  de  laminitis  con  oligofructosa.  
Equine  Vet  J.  2012;44(2):230­237.
108.  Andreas  K,  Sittinger  M,  Ringe  J.  Hacia  la  ingeniería  de  tejidos  in  situ:  reclutamiento  de  células  
madre  guiado  por  quimiocinas.  Tendencias  Biotecnología.  2014;  32(9):483­492.
96.  Wojakowski  W,  Tendera  M.  Movilización  de  células  progenitoras  derivadas  de  médula  ósea  
en  síndromes  coronarios  agudos.  Folia  Histochem  Cytobiol.  2005;43(4):229­232.
86.  Spaas  JH,  De  Schauwer  C,  Cornillie  P,  Meyer  E,  Van  Soom  A,  Van  de  Walle  GR.  Cultivo  y  
caracterización  de  células  estromales  mesenquimales  de  sangre  periférica  equina.  Vet  J.  
2013;195(1):107­113.
98.  Eguchi  G,  Kodama  R.  Transdiferenciación.  Curr  Opin  Cell  Biol.  1993;  5(6):1023­1028.
110.  Schnabel  LV,  Fortier  LA,  McIlwraith  CW,  Nobert  KM.  Uso  terapéutico  de  células  madre  en  
caballos:  ¿qué  tipo,  cómo  y  cuándo?  Vet  J.  2013;197(3):  570­577.
Comparación  de  células  madre  mesenquimales  de  rata  derivadas  de  médula  ósea,  
membrana  sinovial,  periostio,  tejido  adiposo  y  músculo.  Res.  de  tejido  celular.  2007;  
327(3):449­462.
119.  Lavker  RM,  Sun  TT.  Células  madre  epidérmicas:  propiedades,  marcadores  y
Más  uno.  2010;5(1):e8968.
112.  Smolewski  P,  Bedner  E,  Du  L,  et  al.  Detección  de  activación  de  caspasas  por  inhibidores  
marcados  con  fluorocromos:  análisis  multiparámetro  por  citometría  de  barrido  láser.  
Citometría.  2001;44(1):73­82.
Análisis  comparativo  de  las  propiedades  inmunomoduladoras  de  células  madre  
mesenquimales  derivadas  de  equinos  adultos.  Med  celular.  2012;4(1):1­11.
Comparación  de  marcadores  de  células  madre  mesenquimales  en  múltiples  células  madre  
adultas  humanas.  Int  J  Stem  Cells.  2014;7(2):118.
100.  Shin  L,  Peterson  DA.  Los  injertos  de  células  madre  mesenquimales  humanas  mejoran  la  
cicatrización  de  heridas  normales  y  deterioradas  mediante  el  reclutamiento  de  células  madre/
progenitoras  de  tejidos  endógenos  existentes.  Células  madre  Transl  Med.  2013;2(1):33­42.
120.  Ma  K,  Laco  F,  Ramakrishna  S,  Liao  S,  Chan  CK.  Diferenciación  de  células  madre  
mesenquimales  derivadas  de  médula  ósea  en  células  similares  a  la  epidermis  de  varias  
capas  en  cocultivo  organotípico  3D.  Biomateriales.  2009;30(19):3251­3258.
Biol  Med.  2010;2(2):57­67.
107.  Maund  SL,  Cramer  SD.  La  célula  madre  específica  de  tejido  como  diana  para  la  
quimioprevención.  Stem  Cell  Rev.  2011;7(2):307­314.
7334­7341.
94.  Corradetti  B,  Lange­Consiglio  A,  Barucca  M,  Cremonesi  F,  Bizzaro  D.
89.  Lee  WC,  Lim  CHY,  Shi  H,  et  al.  Origen  del  crecimiento  mejorado  de  células  madre  y  
diferenciación  en  grafeno  y  óxido  de  grafeno.  ACS  Nano.  2011;5(9):
114.  Fong  CY,  Peh  GS,  Gauthaman  K,  Bongso  A.  Separación  de  células  madre  embrionarias  
humanas  no  diferenciadas  marcadas  con  SSEA­4  y  TRA­1­60  de  una  población  celular  
heterogénea  mediante  clasificación  de  células  activadas  magnéticamente  (MACS)  y  células  
activadas  por  fluorescencia  Clasificación  (FACS).  Stem  Cell  Rev.  2009;5(1):72­80.
102.  Orkin  SH,  Zon  LI.  Hematopoyesis  y  células  madre:  plasticidad  versus  heterogeneidad  del  
desarrollo.  Nat  Immunol.  2002;3(4):323.
Cell  Biol  Int.  2010;34(9):911­915.
127.  Huang  HI,  Chen  SK,  Ling  QD,  Chien  CC,  Liu  HT,  Chan  SH.  Potencial  de  diferenciación  de  
múltiples  linajes  de  células  estromales  similares  a  fibroblastos  derivadas  de  la  piel  humana.  
Tissue  Eng  Parte  A.  2010;16(5):1491­1501.
91.  Yoshimura  H,  Muneta  T,  Nimura  A,  Yokoyama  A,  Koga  H,  Sekiya  I.
85.  Nourian  A,  Baldwin  G,  Pollitt  CC.  Laminitis  equina:  lesiones  ultraestructurales  detectadas  
24­30  horas  después  de  la  inducción  con  oligofructosa.  Veterinario  Equino  J.  
2007;39(4):360­364.
109.  Harding  J,  Roberts  RM,  Mirocnitchenko  O.  Modelos  de  animales  grandes  para  la  terapia  con  
células  madre.  Stem  Cell  Res  Ther.  2013;4(2):23.
95.  Inglés  K,  Mahón  BP.  Células  madre  mesenquimales  alogénicas:  agentes  de  modulación  
inmune.  J  Cell  Biochem.  2011;112(8):1963­1968.
97.  Sathananthan  H,  Pera  M,  Trounson  A.  La  fina  estructura  de  las  células  madre  embrionarias  
humanas.  Reprod  Biomed  en  línea.  2002;4(1):56­61.
116.  Clayton  E,  Doupe  DP,  Klein  AM,  Winton  DJ,  Simons  BD,  Jones  PH.  Un  solo  tipo  de  célula  
progenitora  mantiene  la  epidermis  normal.  Naturaleza.  2007;  446  (7132):  185­189.
87.  Carrade  DD,  Lame  MW,  Kent  MS,  Clark  KC,  Walker  NJ,  Borjesson  DL.
111.  Sivamani  RK,  Schwartz  MP,  Anseth  KS,  Isseroff  RR.  La  proximidad  y  el  contacto  de  los  
queratinocitos  pueden  desempeñar  un  papel  importante  en  la  determinación  del  destino  de  
las  células  madre  mesenquimales  en  el  tejido  humano.  FASEB  J.  2011;25(1):122­131.
118.  Ito  M,  Liu  Y,  Yang  Z,  et  al.  Las  células  madre  en  la  protuberancia  del  folículo  piloso  contribuyen  
a  la  reparación  de  heridas  pero  no  a  la  homeostasis  de  la  epidermis.  Nat  Med.  2005;  
11(12):1351­1354.
92.  Maleki  M,  Ghanbarvand  F,  Behvarz  MR,  Ejtemaei  M,  Ghadirkhomi  E.
99.  Jopling  C,  Boue  S,  Belmonte  JC.  Desdiferenciación,  transdiferenciación  y  reprogramación:  
tres  rutas  hacia  la  regeneración.  Nat  Rev  Mol  Cell  Biol.  2011;12(2):79­89.
ubicación.  Proc  Natl  Acad  Sci  US  A.  2000;97(25):13473­13475.
Biol.  2006;22:339­373.
124.  Lermen  D,  Gorjup  E,  Dyce  PW,  von  Briesen  H,  Muller  P.  Diferenciación  neuromuscular  de  
células  similares  a  células  madre  derivadas  de  piel  porcina  adulta.
93.  Giorgetti  A,  Montserrat  N,  Aasen  T,  et  al.  Generación  de  células  madre  plur  ipotentes  
inducidas  a  partir  de  sangre  de  cordón  umbilical  humano  utilizando  OCT4  y  SOX2.  Célula  
Madre  Célula.  2009;5(4):353­357.
88.  Bielby  R,  Jones  E,  McGonagle  D.  El  papel  de  las  células  madre  mesenquimales  en  el  
mantenimiento  y  reparación  del  hueso.  Lesión.  2007;38(suplemento  1):S26­32.
113.  Tung  JW,  Parks  DR,  Moore  WA,  Herzenberg  LA,  Herzenberg  LA.  Nuevos  enfoques  para  la  
compensación  de  fluorescencia  y  visualización  de  datos  FACS.  Clin  Immunol.  
2004;110(3):277­283.
101.  Wu  RX,  Xu  XY,  Wang  J,  He  XT,  Sun  HH,  Chen  FM.  Biomateriales  para  la  medicina  regenerativa  
endógena:  persuasión  de  la  búsqueda  de  células  madre  y  más  allá.  Aplicación  Mater  hoy.  
2018;11:144­165.
121.  Pikula  M,  Kondej  K,  Jaskiewicz  J,  Skokowski  J,  Trzonkowski  P.  Clasificación  y  análisis  de  
citometría  de  flujo  de  candidatos  de  células  madre  epidérmicas  humanas.
125.  Balaji  A,  Jamil  K,  Maruthiram  G,  Habibulla  C.  Aislamiento  de  una  nueva  población  de  células  
madre  multipotentes  de  la  capa  epidérmica  de  la  piel  humana.
126.  Larouche  D,  Tong  X,  Fradette  J,  Coulombe  PA,  Germain  L.  Vibrissa  hair  bulge  alberga  dos  
poblaciones  de  células  madre  epiteliales  de  la  piel  distintas  por  su  perfil  de  queratina.  FASEB  
J.  2008;22(5):1404­1415.
Machine Translated by Google
143.  Cinti  S.  Transdiferenciación