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Alicia de los Ángeles Zamudio Sánchez 
Cuestionario de Espectrofotometría. 
 
1. ¿Qué es Espectrofotometría? 
Es utilizada para cuantificar las propiedades de reflectancia y transmitancia de un material 
en términos de longitudes de onda de luz a los que está expuesto el material. Es una 
técnica empleada en muchas disciplinas como ingeniería, química y biología. 
2. ¿Qué es un Espectrofotómetro? 
Un espectrofotómetro es un instrumento usado en el análisis químico que sirve para 
medir, en función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma 
magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentración o 
reacciones químicas que se miden en una muestra. 
 
3. Describir el concepto de absorbancia. 
Se refiere a la medida de cantidades relativas de luz absorbida por una muestra, en 
función de la longitud de onda. Se mide con un colorímetro o con un espectrómetro. Los 
valores de la absorbancia se usan para detectar el crecimiento de bacterias en cultivos en 
suspensión y para determinar la concentración de moléculas en solución. 
4. Describir el concepto de transmitancia. 
La transmitancia se define como la cantidad de energía que atraviesa un cuerpo en 
determinada cantidad de tiempo. Se calcula dividiendo la intensidad de la luz que sale del 
material (o sea, que lo atraviesa) por la de la luz incidente. 
5. Define la Ley de Beer. 
La ley de Beer declaró que la absorbancia es proporcional a las concentraciones de las 
especies atenuantes en la muestra de material. La derivación moderna de la ley de Beer- 
Lambert combina las dos leyes y correlaciona la absorbancia tanto a las concentraciones 
de las especies atenuantes, así como el espesor del material de muestra. 
Relaciona la atenuación de la luz y las propiedades del material a través del cual viaja la 
luz. La ley se aplica comúnmente a análisis químicos mediciones y se utiliza en la 
comprensión de la atenuación de la luz a las propiedades del material a través del cual 
viaja la luz. 
http://www.glosariografico.com/luz
Alicia de los Ángeles Zamudio Sánchez 
Para cada longitud de onda de luz que pasa a través del espectrómetro, se mide la 
intensidad que pasa a través de la célula de referencia, la intensidad de la luz que pasa a 
través de la célula de referencia. La intensidad de la luz pasa a través de la muestra y se 
mide por la longitud de ondas, dado por el símbolo I. 
6. ¿Qué entiendes por longitud de onda? 
En una onda periódica la longitud de onda es la distancia física entre dos puntos a partir 
de los cuales la onda se repite. 
 
 
 
 
 
7. En la espectrofotometría visible ¿cuál es el rango de longitud de onda? 
La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometría ultravioleta-visible (UV/VIS) es 
una espectroscopia de emisión de fotones y una espectrofotometría. Utiliza radiación 
electromagnética (luz) de las regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja 
cercana (NIR) del espectro electromagnético, es decir, una longitud de onda entre 380nm 
y 780nm. 
8. Explica el fundamento del espectrofotómetro. 
El espectrofotómetro es un dispositivo que se usa en diferentes campos de las técnicas 
de medición para el análisis de color. 
El fundamento de la espectroscopía se debe a la capacidad de las moléculas para 
absorber radiaciones, entre ellas las radiaciones dentro del espectro UV- visible 
Se usa en el análisis químico que sirve para medir, en función de la longitud de onda, la 
relación entre valores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos haces de 
radiaciones y la concentración o reacciones químicas que se miden en una muestra. 
 
 
https://www.espectrometria.com/espectrmetros
https://www.montereyinstitute.org/courses/DevelopmentalMath/TEXTGROUP-1-8_RESOURCE/U06_L1_T1_text_final_es.html
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9. ¿De qué material está construida la lámpara en el espectrofotómetro de luz 
visible? 
La lámpara de tungsteno está formada por un compuesto de cuarzo, que soporta mucho 
mejor el calor (lo cual permite lámparas de tamaño mucho menor para potencias más 
altas), un filamento y una pequeña cantidad de gas halógeno en equilibrio térmico en su 
interior. Se utilizan, generalmente, para longitudes de onda del espectro visible y el 
ultravioleta próximo. Estas lámparas producen un espectro radiante entre 360-950 nm. 
10. ¿Qué es el monocromador y cuál es su función? 
La función primordial del monocromador es proporcionar un haz de energía radiante con 
una longitud de onda y una anchura de banda dada. 
Es un dispositivo óptico capaz de suministrar o filtrar luz de una determinada longitud de 
onda (color), dentro de una banda estrecha de longitudes de onda. Se puede reducir el 
ancho de banda entre 1 nm y 5 nm. Los monocromadores poseen un elemento 
dispersante que puede ser un prisma, una rejilla o red de difracción. 
11. ¿Para que se utilizan las fotoceldas en el uso del espectrofotómetro? 
Dada la geometría de un espectrofotómetro lo que es medido en la fotocelda es la cantidad 
de luz que llega a la celda. El medidor de voltaje lee la cantidad de luz transmitida a la 
fotocelda. 
12. ¿Cuál es la diferencia de un espectrofotómetro de haz sencillo y uno de haz 
doble? 
 
 
 
 
 
 
 
 
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 Los instrumentos de haz sencillo son adecuados para las mediciones cuantitativas de 
absorción a una sola longitud de onda. En este caso, las ventajas son la sencillez del 
instrumento, su bajo costo y la facilidad de mantenimiento. 
Los instrumentos de doble haz tienen la ventaja de que compensan todo menos la mayoría 
de las fluctuaciones cortas en la radiación de salida de la fuente. También compensan las 
variaciones amplias en la intensidad de la fuente con la longitud de onda. Los diseños de 
doble haz son adecuados para el registro continuo del espectro de absorción. 
13. Describe las partes externas de un espectrofotómetro. 
• Botón selector de la longitud de onda. Nos permite seleccionar la longitud de onda de 
trabajo en nm y la izquierda la escala de longitud de onda en nm. 
• Botón de calibración con el blanco o testigo. Nos permite calibrar el aparato al valor de 
cero A o 100% de T. utilizando el blanco o testigo. 
• Compartimiento de la muestra (simple comperment). Nos permite colocar la celda 
(recipiente) que contenga la muestra. 
• Pantalla digital. Lector óptico (digital readout). En ella podemos leer el valor de la 
absorbancia, transmitancia, concentración o el factor que registre el aparato. 
• Tecla MODE o selectora de funciones (Duv mode selector). T (ttransmitancia9, A 
(absorbancia), C (concentración) y F factor). Nos permite seleccionar la función deseada 
T, A, C, o F. 
• Botón encendido y calibración al aire (0% T). Nos permite primeramente encender y 
apagar el aparato, posteriormente, calibrar el aparato al valor de 0%de T. 
• Con la celda partimiento de la muestra. Nos permite colocar la celda (recipiente) que 
contenga la muestra 
• Foco del piloto. Nos indica que el aparato este encendido y podemos leer las escalas de 
absorbancia y transmitancia: la primera logarítmica, de 0 a 2.0, en ella podemos leer el 
valor de absorbancia que registre el aparato y, en la segunda escala decimal de 0 a 100%, 
el valor de transmitancia que registre el aparato. 
• Tecla DEC (concentración adjustment controls). De ajuste de concentración para 
incrementar los valores. Cuando de seleccione la función de concentración para ajustar el 
valor de concentración de la solución estándar (St). Con esta tecla se puede ir 
aumentando el valor que se observa en la escala digital. 
• Tecla INC (concentración adjustment controls). De ajuste de concentración para disminuir 
los valores. Cuando se seleccione la función de concentración para ajustar el valor de la 
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solución estándar (St), con esta tecla se puede ir disminuyendo el valor que se observaen la escala digital. 
• Tecla para imprimir (Print Button). Cuando el aparato está conectado a una computadora 
o con un registrador de datos, con esta tecla se puede mandar a imprimir los valores 
obtenidos de las lecturas. 
• Interruptor (Lctmp Power Switch). Se utiliza para encender las lámparas de Tungsteno 
(VIS) y deuterio (UV). Sirve para encender la fuente luminosa que se requiere trabajar. 
• Botón de encendido y apagado del aparato (Power Switch) (ON-OFF). Nos permite 
encender o apagar el aparato. 
• Botón selector de longitud de onda (Wavelength Selection). Nos permite seleccionar la 
longitud de onda de trabajo en nm y al lado izquierdo inmediatamente la escala de longitud 
de onda, en ella se lee la longitud de onda en nm, que se va seleccionando mientras se 
gira el botón selector de longitud de onda. 
• Botón selector de sensibilidad (Lo-M-Hi) (Sensitivity Switch). Según las necesidades de 
trabajo nos permite seleccionar una sensibilidad baja. (Lo), media (M) o alta (Hi). 
• Botón de ajuste a O de A y 100% de T (100% T Zero A Control). Nos permite calibrar el 
aparato al valor de O de A o 100% de T, utilizando el blanco o testigo. 
• Botón de encendido de la lámpara de deuterio (Deu-terium LampStarter Button). Cuando 
se requiere utilizar la fuente luminosa de deuterio, después de colocar el interruptor en la 
posición correspondiente, es necesario oprimir este botón durante unos tres segundos 
para que la fuente se encienda, si no se oprime este botón, aunque el interruptor indique 
deuterio, la fuente luminosa no se encenderá. 
• Botón de espejos (Mirror Lever) (VIS-UV). Nos permite seleccionar la posición de VIS 
cuándo se requiere utilizar el aparato en la región visible, y UV, para la región ultravioleta, 
orientando una serie de espejos que se encuentran en la parte interna del aparato y así 
reflejar de la fuente luminosa adecuada la energía necesaria y, después de atravesar la 
muestra problema, reflejar la radiación transmitida hacia el íotodetector correspondiente 
de acuerdo con la radiación utilizada. 
 
14. . ¿De qué material están construidas las celdas o cubetas? 
Plástico, vidrio o cuarzo. 
 
 
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15. ¿Cuál es la diferencia fundamental entre un colorímetro y un espectrofotómetro? 
El espectrofotómetro es usado para el análisis de alta precisión y manejo de color preciso 
principalmente en laboratorios y aplicaciones de investigación y desarrollo. 
El colorímetro se usa en el área de producción y en aplicaciones de color para mediciones 
de diferencia de color. 
16. ¿Qué son los filtros y cuando se emplean? 
Se emplean dos tipos de filtros para la selección de la longitud de onda: los filtros de 
interferencia (llamados en ocasiones filtros de FabryPerot) y filtros de absorción. Estos 
últimos se limitan a la región visible del espectro; mientras que los filtros de interferencia 
operan en la región ultravioleta, visible y buena parte del infrarrojo. 
• Filtros de absorción: Se han utilizado mucho para la selección de bandas en la región 
visible. Estos filtros funcionan absorbiendo ciertas zonas del espectro. El tipo más 
habitual es un vidrio coloreado o una suspensión de un colorante en gelatina que de 
coloca entre dos placas de vidrio. 
• Filtros de interferencia: Como su nombre lo indica se fundamentan en las 
interferencias ópticas para producir bandas estrechas de radiación. 
 
 
17. Realiza una tabla que contenga, dentro del rango de luz visible: la longitud de 
onda y el color de la luz absorbida en dicha longitud de onda. 
Luz visible 
 
 
Color Frecuencia Longitud de onda 
Violeta 668-789 THz 380-450 nm 
Azul 631-668 THz 450-475 nm 
Ciano 606-630 THz 476-495 nm 
Verde 526-606 THz 495-570 nm 
Amarillo 508-526 THz 570-590 nm 
Naranja 484-508 THz 590-620 nm 
Rojo 400-484 THz 620-750 nm 
 
 
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18. Enumera al menos tres aplicaciones de la espectrofotometría. 
1. Análisis cuantitativo y cualitativo de soluciones desconocidas en un laboratorio 
de investigación. 
2. Determinación de trazas de impurezas en alimentos y en reactivos. 
3. Estandarización de colores de diversos materiales, como plásticos y pinturas, 
detección de niveles de contaminación en aire y agua. 
 
19. Menciona cuales son los parámetros que se deben medir para verificar que el 
espectrofotómetro está funcionando de manera adecuada. 
La exactitud de la longitud de onda, precisión fotométrica, la linealidad fotométrica y la 
verificación de la luz. 
 
20. ¿Cuáles son las escalas de medición de la transmitancia y absorbancia? 
Rango de medida de 0-100% para transmitancia, 0-2,5 para absorbancia. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Alicia de los Ángeles Zamudio Sánchez 
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Alicia de los Ángeles Zamudio Sánchez 
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