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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA CÓDIGO: FDOC-090 VERSIÓN: 01 EMISIÓN: 02/03/2020 PÁGINA 1 DE 7 GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO Si usted ha accedido a este formato a través de un medio diferente al sitio web del Sistema de Control Documental del SIGEC asegúrese que ésta es la versión vigente FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD DEPARTAMENTO: BACTERIOLOGÍA PROGRAMA: BACTERIOLOGÍA NOMBRE DEL CURSO: PARASITOLOGÍA NOMBRE DE LA PRÁCTICA: PROTOZOOS INTESTINALES Clase Sporozoa (Coccidias) 1. OBJETIVOS ▪ Dominar conocimientos teóricos y prácticos de coccidias intestinales con el fin de aplicarlos al realizar una adecuada identificación de estos mediante técnicas utilizadas en el laboratorio. ▪ Aplicar las técnicas de coloraciones especiales (Ziehl Neelsen modificada) y lectura de extendidos de materia fecal con el fin de realizar una correcta identificación microscópica de los ooquistes de los protozoarios intestinales tipo coccidias. ▪ Valorar la importancia que tiene la correcta identificación de las coccidias intestinales en el examen coprológico como ayuda diagnostica. ▪ Desarrollar juicios de valor dentro de las actividades realizadas en forma consiente, sistemática y coherente; así contribuir con el equipo de salud en las acciones de prevención, tratamiento, solución de la enfermedad y promoción de la salud. ▪ Garantizar la obtención de buenos resultados que permitan brindar una atención en salud humanitaria con calidad continua y oportuna. ▪ Dominar técnicas de extendido y coloraciones de muestra de materia fecal con el fin de identificar las diferentes estructuras encontradas. ▪ Interpretar los diferentes resultados obtenidos en la coloración de Ziehl Neelsen modificada, con ello realizar un diagnostico adecuado y preciso de estas parasitosis. ▪ Dominar los conocimientos necesarios sobre las características morfológicas y estructurales de coccidias intestinales y así realizar su correcta identificación en el laboratorio. 2. INTRODUCCIÓN Las coccidias intestinales que producen infección en humanos son especies de los géneros Cryptosporidium spp, Isospora belli, Sarcocystis spp, Microsporidium spp y Cyclospora spp. Esto parásitos han adquirido últimamente junto al Neumocystis carinii y Toxoplasma spp, una gran importancia como agentes oportunistas, productores de infecciones en pacientes UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA CÓDIGO: FDOC-090 VERSIÓN: 01 EMISIÓN: 02/03/2020 PÁGINA 2 DE 7 GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO Si usted ha accedido a este formato a través de un medio diferente al sitio web del Sistema de Control Documental del SIGEC asegúrese que ésta es la versión vigente inmunocomprometidos. Todos ellos durante su ciclo de vida presentan una fase asexuada y otra sexuada. Cryptosporidium spp Es el principal parásito productor de diarreas en pacientes inmunocomprometidos (ej: VIH/SIDA), es monoxeno ya que todas las faces de su ciclo de vida se llevan a cabo en el hombre. Se reproduce en el borde del cepillo intestinal, principalmente en el epitelio del yeyuno. El ooquiste, forma infectante, es esférico, mide entre 4-6micras y en su interior generalmente se encuentran 4 esporozoitos. Existen algunos ooquistes capaces de producir autoinfección en el huésped debido a su delgada membrana, que se destruye liberando el parasito dentro de este; otros de pared gruesa son eliminados en las heces siendo infecciosos para otras personas y animales. La infección que produce se denomina criptosporidiosis, la cual se adquiere por vía oral al ingerir los ooquiste infectantes presentes en alimentos o bebidas contaminadas con materia fecal. También puede haber transmisión durante las relaciones sexuales tipo oral-anal especialmente en homosexuales. Las especies mas importantes son: C. murris (parasita ratones), C. baileyi (pollos) y C. parvum y hominis (humanos y ganado vacuno). Isospora belli Este parásito ha tomado importancia debido al aumento de su frecuencia en pacientes inmunocomprometidos, su único huésped definitivo es el hombre. Se ubica a nivel de intestino delgado donde se reproduce tanto asexual como sexualmente. En la región duodeno-yeyunal se produce desenquistacion y se liberan los esporozoitos que invaden las células epiteliales(enterocitos). El tamaño del ooquiste es aproximadamente 23 micras de largo por 13 micras de ancho, de forma ovalada, en su interior encontramos una masa esférica de protoplasma que se divide formando dos esporoblastos que desarrollan gruesas paredes quísticas y se denominan esporoquistes. La infección que produce se denomina isosporiosis, la cual se adquiere al ingerir alimentos o bebidas contaminadas con heces que contengan los ooquistes. Cyclospora cayetanensis Este parásito fue descubierto recientemente, es similar al Cryptosporidium spp. Se localiza al nivel del intestino delgado y se elimina como ooquiste, el cual es esférico mide de 8 a 10 micras, es acido alcohol resistente, la via de infección es oral. Debe diferenciarse del ooquiste de Cryptosporidium spp que mide de 4-6 micras. Microsporidium spp Este género parasitario ha adquirido importancia con la aparición del SIDA y es considerado altamente patógeno. Se conoce 5 géneros capaces de producir patologías en humanos: UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA CÓDIGO: FDOC-090 VERSIÓN: 01 EMISIÓN: 02/03/2020 PÁGINA 3 DE 7 GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO Si usted ha accedido a este formato a través de un medio diferente al sitio web del Sistema de Control Documental del SIGEC asegúrese que ésta es la versión vigente Encephalitozoon, Nosema, Pleistophora, Enterocytozoon y Septata. Los esporos miden de 1.5 a 5 micras, poseen de 1 a 2 núcleos y compleja estructura citoplasmática. Sarcocystis spp Existen dos especies que producen patologías, S. bovihominis y S. suihomonis. Los ooquistes son eliminados con las heces completamente desarrollados y con los esporoquistes ya liberados. La infección que produce se denomina sarcocistosis que se adquiere por la ingestión de carne (ganado vacuno y porcino) que contenga los quistes, en este caso el hombre actúa como huésped definitivo, o por la ingestión de esporoquistes actuando como huésped intermediario. 3. PROCEDIMIENTO ▪ Extender la muestra de materia fecal en un portaobjetos. ▪ Dejar secar y fijar durante un minuto con metanol. ▪ Colorear con fucsina durante 10 minutos, sin calentar. ▪ Lavar con agua. ▪ Decolorar con alcohol ácido durante 30 segundos. ▪ Lavar con agua. ▪ Colorear con azul de metileno durante 30 segundos. ▪ Lavar con agua. ▪ Dejar secar verticalmente y observa al microscopio con objetivo de 100X. 4. MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS. ▪ Muestras de materia fecal positivas par coccidias intestinales. ▪ Portaobjetos. ▪ Cubreobjetos. ▪ Aceite de inmersión. ▪ Coloración de Ziehl Neelsen Modificada (fucsina, alcohol ácido y azul de metileno) ▪ Microscopios. ▪ Papel Kraft ▪ Metanol ▪ Descartadores 5. EQUIPOS DE PROTECCIÓN PERSONAL Y/O COLECTIVA. ✓ Bata ✓ Guantes ✓ Gafas de bioseguridad UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA CÓDIGO: FDOC-090 VERSIÓN: 01 EMISIÓN: 02/03/2020 PÁGINA 4 DE 7 GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO Si usted ha accedido a este formato a través de un medio diferente al sitio web del Sistema de Control Documental del SIGEC asegúrese que ésta es la versión vigente ✓ Tapaboca ✓ Gorro 6. MANEJO DE RESIDUOS PELIGROSOS. UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA CÓDIGO: FDOC-090 VERSIÓN: 01 EMISIÓN: 02/03/2020 PÁGINA 5 DE 7 GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO Si usted ha accedido a este formato a través de un medio diferente al sitio web del Sistema de Control Documental del SIGEC asegúrese que ésta es la versión vigente 7. CUESTIONARIO O ACTIVIDADES COMPLEMENTARIAS. ✓ Cuáles son las características morfológicas que nos permiten diferenciar los ooquistes de Cryptosporidiumspp e Isospora belli ✓ Por qué los ooquistes se observan de color rojo o rosado con la coloración de Ziehl Neelsen modificada ✓ En qué tipo de pacientes es mas común encontrar infección por coccidias intestinales oportunistas y por qué ✓ Enuncie características comunes de las coccidias intestinales oportunistas. ✓ Qué otras técnicas son empleadas para la identificación de estos parásitos ✓ Qué métodos preventivos utilizaría para evitar la infección por coccidias CASO CLINICO Paciente VIH positivo, procedente de zona rural, consulta al médico por presentar episodios de diarrea crónica de aproximadamente 1 mes de duración, además cursa con dolor abdominal, fiebre y manifiesta haber perdido peso. El médico le ordena un examen coprológico de rutina, el cual resulta negativo para parásitos intestinales (NPPI), pero se encuentran Cristales de Charcot Leyden en cantidad moderada. ✓ Teniendo en cuanta las características del paciente ¿Cuál cree que debe ser el procedimiento a seguir para determinar el origen de la diarrea? ✓ Qué parásito podría estar produciendo la patología? ✓ En caso de obtener una coloración de Ziehl Neelsen Modificada negativa para coccidias intestinales ¿Descartaría una infección por estos parásitos? Si o no ¿Por qué? ¿Qué sugiere? 8. BIBLIOGRAFÍA ▪ JHON BERNARD HENRY. El laboratorio en el diagnóstico clínico. ▪ BAILEY Y SCOTT. Diagnóstico microbiológico. UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA CÓDIGO: FDOC-090 VERSIÓN: 01 EMISIÓN: 02/03/2020 PÁGINA 6 DE 7 GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO Si usted ha accedido a este formato a través de un medio diferente al sitio web del Sistema de Control Documental del SIGEC asegúrese que ésta es la versión vigente ▪ JAWETZ. Microbiología médica. ▪ MANUAL MODERNO. Diagnóstico clínico y de laboratorio. Manual moderno. ▪ FAUSTINA RUBIO CAMPAL. Inmunología (aplicaciones prácticas en hematología y microbiología). ▪ MANUAL DE LABORATORIO CLÍNICO DIAGNÓSTICO. LANSING M. PRESCOTT Microbiología. ▪ WALLACE PETER, GEOFFREY PASVOL Atlas de medicina tropical y parasitología () ▪ BURTON JEROME BOGITSH, CLINT EARL CARTER, THOMAS N. OELTMANN Human Parasitology ▪ LYNNE SHORE GARCIA Diagnostic medial parasitology ▪ PAUL SCHMID HEMPEL Evolutionary Parasitology: The Integrated Study of Infections, Immunology, ▪ Ecology, and Genetics ▪ GERALD D. SCHMIDT & LARRY S. ROBERTS' foundations of parasitology ▪ OLIVIER DE BRUYN Parasitology Research Trends. Advances in biology and medicine series. ▪ STEPHANE PEETERS Advances in biology and ▪ THEODOR, HIEPE, LUCIUS Parasitología general. ▪ THEODOR, HIEPE, LUCIUS Protozoologia Médica ▪ FRANCISCO BIAGI Enfermedades parasitarias ▪ Atlas de Parasitología. Laboratorio Italmex 1993. 9. RECOMENDACIONES ✓ Leer la guía y desarrollar las actividades propuestas ✓ Traer todos los elementos de bioseguridad y protección personal para el desarrollo de la práctica ✓ Revisar bibliografía referente al tema ▪ BOTERO DAVID Y RESTREPO MARCOS, Parasitosis Humanas, CIB, Tercera edición, Medellín 1998. ▪ DUQUE SOFIA Y Otros, Parasitismo Intestinales-Material de Referencia- Atlas, Instituto Nacional de ▪ Salud, Santafé de Bogotá-2000. ▪ ZAMAN VIGAR, Atlas de Parasitología Clínica, Medicina Panamericana ▪ PUMAROLA y Otros, Microbiología y Parasitología Médica, Salvat 1995. ▪ DELGADO-IRIBARREN ALBERTO, Manual de Laboratorio Clínico Básico-Microbiología, McGraw Hill. ▪ VELEZ H, Fundamentos de Medicina – Enfermedades Infecciosas. CIB, Medellín 1998. ▪ www.soton.ac.uk -ceb/diagnosis/vol 1. htm. ▪ www.tulane,edu/-dmsander/www/224/Enta.gif ▪ Clínica y Complicaciones de las Parasitosis: Iván Londoño Morales. Edit. U. De A. 1ª Edición 1993 ▪ Enfermedades Parasitarias. Clínicas de atención primaria. Interamericana. 1991. ▪ Parasitología Clínica. Beaver – Jung. Salvat. 2ª. edición 1986. http://www.soton.ac.uk/ http://www.tulane,edu/-dmsander/www/224/Enta.gif UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA CÓDIGO: FDOC-090 VERSIÓN: 01 EMISIÓN: 02/03/2020 PÁGINA 7 DE 7 GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO Si usted ha accedido a este formato a través de un medio diferente al sitio web del Sistema de Control Documental del SIGEC asegúrese que ésta es la versión vigente 10. ANEXOS http://www.scielo.org.pe/pdf/rins/v33n4/a19v33n4.pdf http://www.scielo.org.pe/pdf/rins/v33n4/a19v33n4.pdf
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