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Curso: Bioquímica y Toxicología Manipulación genética de plantas y bacterias INTRODUCCIÓN Desde el inicio de la agricultura la humanidad ha seleccionado las plantas que le proporcionaban un mayor rendimiento en alimentos o materias primas necesarias para la obtención de numerosos productos útiles como drogas, medicinas, colorantes y especias. Los primeros agricultores aumentaban la producción guardando para la siguiente siembra las semillas de las plantas más deseables. En los últimos cien años, con el descubrimiento de las leyes de la Herencia por Mendel y el avance de la biología vegetal, la mejora de las plantas se ha incrementado considerablemente. La biorremediación mediante plantas y bacterias ofrece grandes posibilidades de limpiar y descontaminar sistemas complejos y gracias a sus ventajas económicas y ambientales será una de las tecnologías más desarrolladas durante este siglo. Se están utilizando cepas especializadas de microorganismos de alta actividad para tratar agentes contaminantes en diferentes sectores, como las industrias que utilizan catalizadores, las textiles, las curtiembres, el procesamiento de celulosa y almidón, la galvanoplastia, la minería, el desengrasado y recubrimiento de superficies y la impresión. Además, debido a la excesiva contaminación por metales pesados se está trabajando en ingeniería genética para conseguir plantas transgénicas que puedan ser utilizadas en fitorremediación, ya que así se podrán obtener una gran diversidad de plantas que puedan acomplejar los metales pesados como anteriormente hemos indicado. MANIPULACIÓN GENÉTICA EN PLANTAS Y BACTERIAS MANIPULACIÓN GENÉTICA EN PLANTAS MANIPULACIÓN GENÉTICA EN BACTERIAS CASOS APLICATIVOS CASOS RELACIONADOS CON LA MANIPULACION GENETICA DE PLANTAS Y BACTERIAS CASO 1 : • FITODESCONTAMINACIÓN DE TNT La fitodescontaminación de TNT (2,4,6-Trinitrotouleno) se ha conseguido expresando el gen de la nitrorreductasa de bacterias en plantas de tabaco. Gracias a la enzima nitrorreductasa codificada por este gen se cataliza la reducción de TNT a hidroxiaminodinitrotolueno (HADNT) También tenemos otros contaminantes como el arsénico debido a que hasta 1968 se usaba como herbicida e insecticida por lo que aún se encuentra en altas concentraciones en los suelos donde se aplicaron estos productos. Se está experimentando con el uso de un helecho (Pteris vittata) que acumula grandes cantidades de arsénico aunque se desconoce el mecanismo y la razón de dicha acumulación ya que es altamente tóxico para los seres vivos. CASO 2: EL DESARROLLO DEL ÁLAMO AMARILLO PARA LA FITODESCONTAMINACIÓN DEL MERCURIO: Un grupo de investigación utilizó un gen llamado merA, que codifica para la enzima reductasa del ion mercúrico, altamente tóxico, que cataliza su reducción hasta la forma volátil y poco tóxica de mercurio elemental, gaseoso en condiciones de temperatura no muy elevadas. Estos investigadores, consiguieron la transferencia del gen bacteriano merA a cultivos de Liriodendro tulipifera (álamo amarillo). El gen se expresó adecuadamente en ese material vegetal, de modo que las plántulas regeneradas germinaron y crecieron vigorosamente en los medios de cultivo, que contenían niveles de iones mercurio que son normalmente tóxicos, siendo capaces de captarlo en su forma iónica y de reducirlo en el interior de la planta, tras lo cual era liberado en la forma gaseosa no tóxica. Esta investigación ha abierto el camino para que en el futuro sea posible realizar plantaciones arbóreas transgénicas que, mediante este proceso de fitovolatilización u otros parecidos, sean capaces de descontaminar terrenos con altos niveles de contaminantes. CASO 3: FITODESCONTAMINACIÓN DE CADMIO La expresión de la sintetasa de glutatión en mostaza india realza la acumulación y tolerancia del cadmio. Una de las formas por la cual las plantas desintoxican los metales pesados está en el secuestro con los péptidos de los metales pesados que atan a los llamados fitoquelantes o su precursor, el glutatión. Para desarrollar en estas plantas transgénicas la acumulación y/o tolerancia de metales pesados se usó Escherichia coli que tiene la sintetasa de codificación del glutatión en el gen gshII (GS) expresándolo en el citosol de la mostaza india (Brassica juncea). Las plantas transgénicas del GS acumulan considerablemente más cadmio que las de tipo salvaje, además las plantas GS demostraron tolerancia alta al Cd en las etapas de semilla y de planta adulta. CASO 4: LA FITODESCONTAMINACIÓN DE METILMERCURIO A TRAVÉS DE LA EXPRESIÓN DEL MERB EN ARABIDOPSIS DA RESISTENCIA A LOS ORGANOMERCURIALES: El metilmercurio es un tóxico ambiental que causa degeneración neurológica severa en animales. Es producido por las bacterias en los suelos y los sedimentos que se han sido contaminados por mercurio. Para aumentar el potencial de las plantas de extraer y desintoxicar este producto químico usamos una planta modelo de thaliana deArabidopsis, expresando gen modificado de bacterias llamado merBpe que actúa codificando la liasa organomercurial (MerB) bajo el control de un promotor de la planta. MerB cataliza la lisis del protón en el enlace del carbono-mercurio, eliminando el ligando orgánico y lanzando Hg(II), una especie menos móvil del mercurio. Las plantas transgénicas que expresan el merBpe crecen vigorosamente en una amplia gama de concentraciones del cloruro de monometilmercurio y del acetato de fenilmercurio. Las plantas que carecían de ese gen fueron inhibidas o muertas con las mismas concentraciones de organomercuriales. No se puede rechazar la ingeniería genética por ser peligrosa. Todos los adelantos lo parecen Mae-Wan Hu GRACIAS
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