Histología, Hígado y Páncreas

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Fisiología de organismos acuáticos 
 
 
Práctica 2 
Histología: Hígado y Páncreas 
 
 
Docente: Xochitl Guzmán García 
 
 
Equipo: 4 
 
Integrantes: 
Anaya Mendieta Miriam Alejandra 
Castillo Lomeli Annie Hellen 
Elizalde Jaime Dafne Junue 
Hernández García Mariel 
Miranda Valencia Israel 
 
 
 
 
 
 
Introducción
 
 
El hígado es uno de los órganos extramurales más grandes. Tiene una forma aproximada de U, está 
situado ventralmente al esófago. El color varía de marrón oscuro a crema o incluso amarillo. Las 
funciones del hígado incluyen la asimilación de nutrientes, la producción de bilis, la desintoxicación, 
la hematopoyesis y la destrucción efectiva de los glóbulos rojos. El parénquima del hígado está 
compuesto principalmente por hepatocitos poliédricos con núcleos centrales. La inoculación de los 
hepatocitos resultantes del almacenamiento de glucógeno y/o grasa puede producir una gran 
variabilidad histológica. Otros tipos de células que se encuentran en el parénquima hepático incluyen 
tejido hematopoyético y agregados de macrófagos. Para el proceso de circulación en el hígado la 
sangre venosa ingresa caudalmente desde el intestino a través de las venas porta hepáticas y se 
ramifican en capilares (sinusoides). Después se acumulan en las venas centrales, la sangre sale del 
hígado a través de las venas hepáticas y finalmente regresa al corazón a través del seno venoso. Los 
sinusoides están revestidos de células reticuloendoteliales y separados entre sí por, al menos, dos 
hepatocitos. Los conductos biliares pasan dentro del parénquima del hígado. Al originarse entre 
hepatocitos adyacentes, los canalículos biliares se comunican para producir conductos de diámetro 
creciente, y finalmente unirse para formar el conducto biliar común. Los conductos más pequeños 
dentro del hígado están cubiertos con una sola capa de células epiteliales cuboidales donde los 
conductos más grandes pueden incorporar una capa de tejido conectivo y muscular delgada. Para 
cuando el conducto biliar común sale del hígado, está compuesto por las cuatro capas básicas del 
tracto digestivo; mucosa (epitelio columnar), submucosa (tejido conectivo laxo), muscular (circular 
y longitudinal) y serosa (mesotelial) (Yonkos, et. al, 2000). 
El páncreas, diseminado dentro de la grasa y los mesenterios de la cavidad peritoneal, está compuesto 
de exocrinos y endocrinos. Tiene dos funciones principales, la función exocrina y la función 
endocrina (Pancreatic Cancer Action Network, 2020). El páncreas exocrino consiste en grupos de 
células acinares piramidales unidas para formar acinos lobulares con lumen central. Las células 
exocrinas del páncreas producen enzimas que ayudan a la digestión. Las células acinares tienen 
citoplasma basófilo oscuro, núcleos basales distintos y muchos gránulos de zimógeno eosinófilos 
grandes. Estos gránulos se encuentran apicalmente alrededor de la lumena y contienen zimógenos, 
enzimas responsables de la digestión de proteínas, carbohidratos, grasas y nucleótidos. Las enzimas 
se envían al intestino anterior a través de conductos pancreáticos revestidos con epitelio cuboidal a 
columnar (Yonkos, et. al, 2000). La segunda función del páncreas es la función endocrina, que 
envuelve la producción de hormonas y sustancias que se producen en una parte del organismo, estas 
circulan en el torrente sanguíneo para influir en otra parte distinta del organismo. Las dos hormonas 
pancreáticas principales son la insulina y el glucagón. Las células del islote de Langerhans dentro del 
páncreas producen y secretan insulina y glucagón al torrente sanguíneo. La insulina sirve para bajar 
el nivel de glucosa en la sangre (glucemia) mientras que el glucagón lo aumenta. Juntas, estas dos 
hormonas principales trabajan para mantener el nivel adecuado de glucosa en la sangre (Pancreatic 
Cancer Action Network, 2020). 
 
 
Objetivo
 
 
● Conocer la citología, la histología y los procesos fisiológicos de dos de los órganos que 
conforman el sistema digestivo: hígado y páncreas. 
 
 
 
Material y Método 
 
La preparación histológica de muestras de hígado y páncreas comprende los mismos pasos que las 
demás preparaciones; toma de muestra, fijación, inclusión, microtomía, desparafinación-
rehidratación, tinción y montaje. En el caso de la tinción es posible realizarla mediante hematoxilina-
eosina o azul de toluidina. La tinción por hematoxilina-eosina permite diferenciar el núcleo celular 
del citoplasma mientras que por azul de toluidina, se obtiene una variación de colores de acuerdo al 
material celular; núcleo de color azul, carbohidratos de color azul o púrpura, citoplasma y ARN de 
color azul o verde brillante. Esto debido a la reacción metacromática que posee el colorante (Rojas, 
et. al, 2012). 
La obtención de las muestras de tejido del hígado y páncreas debe realizarse bajo consideraciones 
éticas del uso de organismos acuáticos provocando la menor cantidad de dolor y estrés a los 
organismos. Posterior a la extracción de las muestras se realiza la fijación de los tejidos para evitar 
los procesos autolíticos que puedan producir cambios en la estructura de las células. De forma 
estándar la fijación se lleva a cabo con formalina al 10% durante 24 hrs para después transferir los 
tejidos a etanol al 70%, de esta manera se evita el deterioro por endurecimiento. 
Después de la fijación de los tejidos estos se montan en casetes para inclusión y para garantizar su 
observación bajo el microscopio son aclarados. Este procedimiento se efectúa en procesador de 
tejidos donde las muestras pasan por un tren de alcohol que aumenta gradualmente de concentración 
para deshidratarlas, se aclaran con xileno y se incluyen en parafina. En este punto es importante 
verificar la correcta posición de los tejidos previo al corte. 
Una vez incluidas las muestras en parafina se fijan en el microtomo para efectuar cortes de entre 3 y 
9µm, los cuales son transferidos a un baño de flotación a través de un sistema de transferencia de 
tejidos, donde son recuperados con un portaobjetos. Los siguientes pasos se orientan para retirar la 
parafina, rehidratar los tejidos y teñirlos. Estas tres etapas se llevan a cabo en el tren de tinción de 
hematoxilina-eosina comenzando con dos baños en xileno para remover la parafina. Posteriormente 
se lleva a cabo un tren de alcohol de 100% a 80% terminando en agua destilada para después colorear 
Hematoxilina, decolorar con algún hidróxido ácido y enjuagar con agua corriente, amoniacal y 
destilada. Para aplicar el segundo colorante se sumergen los tejidos en alcohol al 80% y después en 
la eosina. De ahí en adelante se pasa por una serie de pares de enjuagues de alcohol al 95% y 100% 
y xileno. Por último, se realiza el montaje final en portaobjetos con medio de montaje entellan o resina 
sintética colocando al final un cubreobjetos para conservar los tejidos. 
Resultados
 
 
A continuación se muestran múltiples cortes histológicos de hígado y páncreas. 
 
 
Fig 1. Cavidad abdominal anterior, sección transversal. (1) esófago; (2) asas del intestino; (3) hígado; 
(4) páncreas; (5) cabeza del riñón; (6) músculo esquelético; (7) tejido adiposo; (8) peritoneo. 
 
 
Fig. 2. Corte de hígado: Cordones de hepatocitos y vena central, sección transversal 
Cordones de hepatocitos y vena central, sección transversal. (1) cápsula hepática; (2) cordones de 
hepatocitos; (3) sinusoides que contienen glóbulos rojos; (4) vena central; (5) conducto biliar. 
 
 
Fig 3. Corte de hígado: Sinusoides y conductos biliares. (1) hepatocitos con vacuolas de glucógeno y 
núcleos excéntricos; (2) sección transversal de los conductos biliares; (3) sección transversal de una 
sinusoide compuesta de seis hepatocitos que rodean un capilar; (4) sección sagital de un capilar 
sinusoide; (5) tejido conectivo; (6) macrófagos tisulares; (7) vena central. 
 
Fig 4. Corte de hígado: Sinusoides y canulículosbiliares (1) hepatocitos; (2) sección sagital a través 
de sinusoides; (3) conducto biliar canuliculi. 
 
Fig 5. Corte de páncreas: tejido exocrino y endocrino (a). (1) tejido pancreático exocrino (células 
acinares); (2) tejido pancreático endocrino encapsulado (islotes de Langerhans); (3) vaso sanguíneo; 
(4) conducto pancreático; (5) epitelio cuboidal; (6) gránulos de zimógeno. 
 
 
 
 
Figura 6. Corte de páncreas: tejido exocrino y endocrino (b). (1) tejido pancreático exocrino (células 
acinares); (2) tejido pancreático endocrino (islotes de Langerhans); (3) vaso sanguíneo; (4) endotelio; 
(5) tejido conectivo; (6) gránulos de zimógeno. 
 
 
Discusión
 
 
El realizar la práctica fue muy diferente a lo ya experimentado, ya que es distinto seguir una práctica 
presencial a una bibliográfica. Sin embargo, con la información obtenida se pudo discutir de una 
manera muy eficiente. 
La técnica tisular permite realizar el análisis de los tejidos básicos (muscular, conectivo, nervioso y 
epitelial) y sus alteraciones. El procedimiento incluye una serie de pasos posteriores a la fijación. La 
deshidratación de órganos o piezas disectadas mediante pasos sucesivos de alcohol hasta perfundir 
con ayuda de xilol y la parafina. La aclaración e inclusión de las muestras es un paso consecutivo, en 
donde se obtiene el bloque de parafina. Los bloques de parafina permiten obtener cortes microtómicos 
que son teñidos con colorantes básicos y ácidos. Un ejemplo de tinción es H-E (Hematoxilina- Eosina) 
coloración de contraste que permite diferenciar en los tejidos el núcleo y citoplasma celular (Guzmán-
García et. al, 2016), el cual podemos discutir que se ocupó para la tinción de las muestras expuestas 
en los resultados. Normalmente en una investigación, después se puede realizar un análisis de dichas 
muestras, denominado análisis tisular el cual sirve principalmente en la caracterización de los tejidos, 
los cambios patológicos y la presencia de parásitos, donde va a permitir evaluar lesiones reversibles 
e irreversibles que pueden asociarse con la exposición a contaminantes y a su vez facilitar la 
interpretación de la relación que guardan con su medio, por lo que gracias a este análisis se van a 
poder determinar un sin fin de acontecimientos o sucesos que le ocurrieron al organismos 
fisiológicamente. 
Para esta práctica se ocupó el procedimiento de fijación y tinción previamente mencionado, para así 
lograr la diferenciación de dos órganos sumamente importantes en los organismos acuáticos, el hígado 
y el páncreas. 
El hígado en los peces se localiza en la región media y anterior de la cavidad abdominal. Entre otras 
funciones, desintoxica al organismo de agentes tóxicos, produce la bilis y es una reserva de 
carbohidratos. Debido al doble abastecimiento de sangre que tiene el hígado, es importante considerar 
las dos vías de absorción que llevan a la distribución de compuestos potencialmente tóxicos, las cuales 
son: la ruta de absorción intestinal y la ruta branquial. Debido a su estructura y función, el hígado de 
los peces es considerado como un órgano destino para compuestos tóxicos, principalmente por la 
posición en la que se encuentra y su vascularización aferente y eferente; estas propiedades micro 
vasculares facilitan la absorción y la llegada de las toxinas, colocándolo como un órgano destino de 
gran interés, aunque básicamente el hígado en la mayoría de animales acuáticos es el mismo, 
dependiendo si es de agua dulce o salada, o la fisonomía del individuo es como este va a poder 
producir una leve diferencia (Guzmán-García et. al, 2009) 
Por otro lado, según Kobelkowsky (2007), el páncreas es relativamente pequeño y se localiza adosado 
a la superficie posterior de la vesícula biliar, con su conducto orientado hacia atrás, siguiendo en parte 
la trayectoria del estómago, se encuentra como infiltraciones a lo largo del intestino y del mismo 
hígado, el cual se denomina hepatopáncreas, donde se divide en dos funciones importantes, la función 
endocrina que es producir y secretar insulina y la función exocrina que es secretar enzimas 
proteolíticas que se vierten al intestino para hidrolizar las proteínas del bolo alimenticio. 
Particularmente se cree que el hígado y páncreas tienen una conexión con el sistema digestivo pero 
también se puede decir que como en cualquier animal vertebrado, cada órgano trabaja en conjunto 
uno con otro, ya que cada órgano tiene una función en específico. Esto hace que cada uno de los 
sistemas de los vertebrados sean indispensables para el individuo, en este caso tanto el hígado como 
el páncreas cuentan con estructuras sumamente diferentes. En el análisis de los cortes histológicos 
del hígado se observan estructuras tisulares características como lo son: sinusoides, cordones 
hepáticos, parénquima hepático conformado por hepatocitos poliédricos, parénquima pancreático, 
túbulos biliares, venas y arterias, mientras que en el páncreas se observa: el tejido pancreático 
exocrino (células acinares), tejido pancreático endocrino encapsulado (islotes de Langerhans), vaso 
sanguíneo, conducto pancreático, epitelio cuboidal y gránulos de zimógeno, donde cada una de estas 
estructuras tienen una función y fisonomía diferente, por lo que ocasiona que ambos órganos logren 
cada uno de sus propósitos. 
 
Conclusiones
 
Después de la elaboración de esta práctica el equipo logró conocer la citología, histología y fisiología 
de dos órganos conformadores del sistema digestivo: el hígado y páncreas. 
A través de la identificación de sus estructuras en los cortes pudimos observar las células que los 
forman, así mismo, por medio de métodos bibliográficos, conocimos un poco de los procesos 
fisiológicos que ambos órganos son capaces de llevar a cabo. 
En conclusión, el páncreas es el órgano esencial para el control de la glucemia haciendo posible el 
mantenimiento, prácticamente constante, de la concentración de glucosa en sangre. Esa función clave 
la desempeña a través de modificaciones en la relación de concentraciones plasmáticas de dos 
hormonas, insulina y glucagón que el propio órgano biosintetiza y secreta. Por otro lado, el hígado 
regula la mayor parte de los niveles químicos de la sangre y excreta un producto llamado bilis, que 
ayuda a descomponer las grasas y las prepara para su posterior digestión y absorción. Toda la sangre 
que sale del estómago y de los intestinos atraviesa el hígado. 
De manera general, se logró entender la importancia que poseen ambos y el papel que juegan en el 
metabolismo de un organismo. 
 
 
 
 
 
 
 
Referencias
 
 
● Guzmán-García, X., Ramírez-Romero, P. & S. López-Vite. 2009. Manual de procedimientos 
estándares para el análisis histológico e histopatológico en organismos acuáticos. Instituto 
Nacional de Ecología y Cambio Climático, México. 
● Guzmán-García, X., Hernández-Calderas, I., Luis-Hernández, D., Jerónimo-Juárez, J. R. & 
M. Luis-Hernández. 2016. Video Análisis tisular de organismos acuáticos y experimentales. 
Lab. De Ecotoxicología. UAMI, México. 
● Kobelkowsky A. 2007. Morphology of the digestive system of the Mexican flounder, 
Cyclopsetta chittendeni (Teleostei, Paralichthyidae). Bulletin of Fish Biology 9: 39-49. 
● Pancreatic Cancer Action Network. 2020. El Páncreas. En: 
https://www.pancan.org/section_en_espanol/learn_about_pan_cancer/what_is_the_pancreas.
php#:~:text=El%20p%C3%A1ncreas%20tiene%20dos%20funciones,que%20ayudan%20a
%20la%20digesti%C3%B3n. Consultado el: 27/06/2020 
● Rojas, Luz-Marina, Mata, Claunis, Oliveros, Aridays, & Salazar-Lugo, Raquel. (2013). 
Histología de branquias, hígado y riñón de juveniles del pez neotropical Colossoma 
macropomum (Characiformes, Characidae) expuesto a tres temperaturas. Revista de Biología 
Tropical, 61(2), 797-806. Retrieved June 28, 2020, from 
http://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-
77442013000300023&lng=en&tlng=es. 
●Yonkos, L. T., Fisher, D. J., Reimschuessel, R., & Kane, A. S. (2000). Atlas of fathead 
minnow normal histology. An online publication of the University of Maryland Aquatic 
Pathobiology Center (http://aquaticpath. umd. edu/fhm). En 
https://aquaticpath.phhp.ufl.edu/fhm/visceral.html Consultado el: 27/06/2020 
 
https://aquaticpath.phhp.ufl.edu/fhm/visceral.html