Reporte práctica 9 inmuno

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Escuela de Ciencias de la Salud
Práctica No. 9: Determinación de grupos sanguíneos. Titulación de antisueros.
Becerril García Diana María, Contreras Reynoso Maricielo, Juárez Espinosa
Fernanda Elizabeth, López Vilchis Ximena, Polo Contreras Sabrina, Ramírez
Romero Karime.
Asignatura: Técnicas de inmunología.
Licenciatura: Químico Farmacéutico Biotecnólogo.
Periodo: 2021-01
Fecha de entrega: 04 de junio de 2021
Docente: M en C. Araceli Álvarez Cruz.
RESUMEN
Se revisaron resultados de un estudio sobre la presencia de anticuerpos en recién
nacidos mediante una investigación teórica para comprender el fundamento de las
pruebas de antisueros, y la relación entre la inmunidad de la madre y de hijo. Se
obtuvo que un recién nacido no posee anticuerpos producidos por el mismo; por lo
que se concluyó que lo obtenido es correcto ya que, comparado contra la literatura,
la presencia de anticuerpos de los recién nacidos se debe a la inmunidad pasiva
que la madre les ha transferido.
Palabras clave: Anticuerpos, antisueros, grupos sanguíneos, inmunidad pasiva,
recién nacidos.
INTRODUCCIÓN
La determinación del grupo sanguíneo
y el factor Rh son importantes en el
campo de la biología, genética y en la
práctica médica por su valor clínico en
las transfusiones sanguíneas.
La sangre tiene propiedades
antigénicas distintas en cada individuo
al igual que propiedades inmunitarias
diferentes, estas diferencias
permitieron el descubrimiento de
varios sistemas de grupos
sanguíneos.
Determinar el grupo sanguíneo de
cada donación de sangre permite
prevenir reacciones de rechazo
cuando se hagan transfusiones de
sangre. Los glóbulos rojos tienen unos
marcadores en la superficie que los
caracterizan. Estos marcadores
(también conocidos como antígenos)
son proteínas y azúcares que utiliza
nuestro cuerpo para saber que
nuestros glóbulos rojos nos
pertenecen.
Cabe señalar que Landsteiner, médico
patólogo que trabajó en Viena,
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descubrió en 1901 el primer grupo
sanguíneo, que fue el ABO.
El sistema de grupos sanguíneos ABO
tiene importancia en las transfusiones
sanguíneas, obstetricia, neonatología
y en medicina legal; además los
antígenos eritrocitarios se utilizan
como marcadores genéticos en
estudios poblacionales, familiares y de
clasificación fenotípica.
Los dos principales sistemas para
determinar el grupo sanguíneo de una
persona son el ABO y el Rh.
(Cossio, 2012)
El sistema sanguíneo ABO tiene
cuatro grupos sanguíneos:
Grupo A. Este grupo sanguíneo tiene
un marcador conocido como “A”.
Grupo B. Este grupo sanguíneo tiene
un marcador conocido como “B”.
Grupo AB. Este grupo sanguíneo
tiene tanto marcadores A como
marcadores B.
Grupo O. Este grupo sanguíneo no
tiene marcadores A ni B.
La sangre también se clasifica como
"Rh positiva" (lo que significa que
tiene el factor Rh) o "Rh negativa" (sin
el factor Rh).
Por lo tanto, hay ocho grupos
sanguíneos en total:
O negativo. Este grupo sanguíneo no
tiene marcadores A ni B y tampoco
presenta el factor Rh.
O positivo. Este grupo sanguíneo no
tiene marcadores A ni B pero sí que
presenta el factor Rh. Se trata de uno
de los grupos sanguíneos más
frecuentes (junto con el A positivo).
A negativo. Este grupo sanguíneo
solo tiene el marcador A.
A positivo. Este grupo sanguíneo
tiene el marcador A y el factor Rh,
pero no tiene el marcador B. Junto con
el O positivo, se trata de uno de los
dos grupos sanguíneos más
frecuentes.
B negativo. Este grupo sanguíneo
solo tiene el marcador B.
B positivo. Este grupo sanguíneo
tiene el marcador B y el factor Rh,
pero carece del marcador A.
AB negativo. Este grupo sanguíneo
tiene los marcadores A y B, pero
carece del factor Rh.
AB positivo. Este grupo sanguíneo
tiene los tres marcadores: A, B y factor
Rh.
El hecho de tener cualquiera de los
marcadores (o de carecer de todos
ellos) no hace que la sangre de una
persona sea más saludable o más
resistente que las demás. Solo se trata
de una diferencia genética.
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Figura 1. Grupos sanguíneos.
Pruebas de aglutinación:
a) Cuando las células sanguíneas se
aglutinan al mezclarse con anticuerpos
monoclonales anti A, anti B,
corresponden al grupo de sangre A y
B respectivamente, cuando aglutinan
con ambas corresponde al grupo AB.
b) Si las células sanguíneas no se
aglutinan con ninguno de los
anticuerpos, el grupo sanguíneo es O.
c) Cuando las células sanguíneas se
aglutinan al mezclarlas con
anticuerpos anti D es RH positivo, si
no aglutina es negativo.
(TeensHealth, 2018)
El conocimiento del tipo de grupo
sanguíneo es indispensable, por la
susceptibilidad que tiene cada
individuo de sufrir accidentes en el
diario vivir, lo que conlleva a la
necesidad de recibir transfusiones
sanguíneas.
Las transfusiones de sangre y de sus
componentes constituyen el
tratamiento más utilizado para corregir
las pérdidas de sangre agudas y las
anemias crónicas.
Los antígenos (tipo A y tipo B)
aparecen en las superficies de los
eritrocitos en una gran proporción de
los seres humanos; son estos
antígenos (llamados también
aglutinógenos porque aglutinan a
menudo los eritrocitos) los que causan
la mayoría de las reacciones
transfusionales sanguíneas.
Figura 2. Compatibilidad sanguínea.
El sistema Rh representa un papel
importante en obstetricia, las madres
Rh negativas al ser sensibilizadas por
antígenos eritrocitarios de un producto
Rh positivo, producirán anticuerpos
Anti-Rh que al cruzar la barrera
placentaria pueden producir hemólisis
de eritrocitos fetales, causando la
enfermedad hemolítica del recién
nacido.
(Cossio, 2012)
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Se determinarán los grupos
sanguíneos por titulación de
antisueros.
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JUSTIFICACIÓN
Las reacciones de aglutinación ayudan
a identificar una respuesta en las
reacciones antígeno-anticuerpo.
OBJETIVOS
General
Interpretar reacciones de aglutinación.
Específicos
● Determinar los grupos ABO y
Rh (D) en hematíes.
● Determinar ABO en suero.
● Obtener antisueros para tipaje.
● Titular un antisuero.
HIPÓTESIS
Si se presenta aglutinación en las
pruebas correspondientes entonces
está indicará el grupo sanguíneo de la
muestra a analizar.
MÉTODO
Se visualizaron diversos videos para
comprender el principio y
procedimiento empleado en las
pruebas para determinar los grupos
sanguíneos ABO y Rh (D) por
titulación de antisueros.
Posteriormente, se buscaron
documentos científicos que contuviera
información sobre dicha prueba de
identificación de ABO y Rh para
comparar sus resultados. Por último,
se analizó la importancia de la
identificación de los grupos
sanguíneos.
RESULTADOS
Se estudiaron 46 recién nacidos a
término con diagnóstico de
EHRN-ABO en el Hospital General
Docente “Enrique Cabrera”, entre junio
de 2004 y marzo del 2006. El
diagnóstico se realizó por el examen
físico: palidez o ictericia; exámenes de
laboratorio: cifras de hemoglobina (Hb)
o hematocrito (Hto), reticulocitos y de
bilirrubina indirecta; y exámenes
inmunohematológicos: fenotipificación
de grupo ABO, CD y el título de IgG
anti-A/B materno. Se estableció como
positivo un valor superior o igual a
1:64 (valor crítico para el laboratorio).
El resto de los datos se obtuvo de la
revisión de las historias clínicas.
En 30 de 46 casos (65,2 %) la
enfermedad se produjo en la primera
gestación. En el resto la enfermedad
se manifestó entre la segunda (15
casos; 32,6 %) y la tercera gestación
(1 caso; 2,2 %). La mayoría de los
recién nacidos fue de fenotipo A (60,8
%) y procedían de madres de fenotipo
O (tabla 1). La prueba de CD fue
negativa en 44 recién nacidos y
positiva solo en 2. El fenotipo ABO de
estos dos últimos fue diferente y el
título de IgG materno varió en todas
las madres. Todas las madres
presentaron un título de IgG anti-A/B
superior o igual a 64. En el caso de las
madres cuyos neonatos presentaron
un CD positivo, el título fue mayor o
igual a 1024 (tabla 2).
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Tabla 1. Tipo de incompatibilidad ABO
entre las madres y los reciénnacidos.
Tabla 2. Resultados del Coombs
directo en los recién nacidos y el título
de IgG anti -A/B materno.
ANÁLISIS DE RESULTADOS
El estudio realizado arrojó que, en 30
casos de los 46 pacientes estudiados,
la EHRN-ABO se produjo en la
primera gestación; lo cual, según la Dr.
Débora Villegas, et al (2007), puede
ocurrir debido a que el sistema ABO
tiene una característica especial
(además de antígenos presenta
anticuerpos de las clases IgM e IgG y
estos últimos son los que permiten
que la enfermedad puede
manifestarse desde la primera
gestación ABO incompatible). En el
resto de los casos la enfermedad se
manifestó entre la segunda y tercera
gestación, lo cual puede atribuirse a
que la madre presentara en su primera
gestación títulos de anticuerpos muy
bajos o a que el feto presentara
demasiada cantidad de antígenos A o
B solubles en sus líquidos corporales,
que compitieron con los antígenos A o
B situados en la membrana del
eritrocito e impidieron el desarrollo de
la enfermedad.
En la tabla 1, se puede apreciar que
cuando se realizó la fenotipificación
ABO de los 46 recién nacidos
afectados, la mayoría resultó ser de
fenotipo A y procedían de madres de
fenotipo O. Este resultado coincide
con lo reportado por Fernanda
Omeñaca, et al (2008), y obedece a la
presencia de anticuerpos de la clase
IgG dirigidos contra los antígenos A y
B en individuos de fenotipo O.
El CD fue negativo en 44 recién
nacidos y en solo 2 fue positivo. Petz y
Garratty (2004), sugieren que la
negatividad de esta prueba en los
neonatos es resultado de la pinocitosis
que provocan los complejos
antígeno-anticuerpo, el bajo número
de sitios A y B en eritrocitos fetales y
de recién nacidos, la poca ramificación
de las cadenas de oligosacáridos en
las membranas de los eritrocitos
fetales y de recién nacidos y la
presencia de antígenos A y B en los
fluidos corporales y otras células del
organismo que compiten con los
antígenos de eritrocitos.
Dan Voak y Charles Bowley (2000),
encontraron que del 66 % al 90 % de
los sueros de madres cuyos hijos
estaban afectados por este tipo de
enfermedad, tenían un título de IgG
anti-A y anti-B por CI mayor de 256.
En la tabla 2, el título de IgG materno
varió en todas las madres. Los títulos
cuyos valores oscilaron entre 64 y 512
se asociaron a una prueba de CD
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negativa en los hematíes neonatales y
en el caso de los neonatos que
presentaron una prueba de CD
positiva, el título de IgG en la madre
fue ≥ 1024. De acuerdo con la Dr.
Débora Villegas, et al (2007), en la
EHRN-ABO los neonatos que
presentan un CD positivo
generalmente son hijos de madres
cuyo nivel de anticuerpos en suero es
alto (≥ 256).
La modalidad de tratamiento más
empleada fue la fototerapia (44 casos)
y solo 2 neonatos necesitaron
fototerapia y además
exanguinotransfusión. En estos
neonatos el CD fue positivo y las cifras
de bilirrubina indirecta se encontraron
por encima del valor establecido como
normal para la edad.
Finalmente, de acuerdo con Fernanda
Omeñaca, et al (2008), un recién
nacido no posee anticuerpos ABO
bien desarrollados inmunológicamente
y los que se detectan son transferidos
pasivamente por la madre; por lo que
a medida que el niño crece y se
expone a dichos antígenos del medio
ambiente, desarrolla anticuerpos
contra los antígenos que no poseen
los que están bien formados
inmunológicamente a los 6 meses de
edad. Por lo tanto dichos anticuerpos
probablemente son resultado de la
inmunización a polisacáridos en
diversos agentes del medio ambiente.
Ahora, es de suma importancia
conocer el grupo sanguíneo ABO;
porque, como QFBT´s este
prodecimiento es el de mayor
importancia en la práctica
transfusional, y al conocer la correcta
técnica del procedimiento nos
permitirá brindar un tratamiento óptimo
en el momento adecuado para
disminuir la morbilidad.
Asimismo, aunque la EHRN-ABO es la
más ligera de todos los conflictos de
grupo sanguíneo eritrocitario entre la
madre y el recién nacido, se debe
estar alerta ante la ocurrencia de un
conflicto con un curso inusual y
brindar un tratamiento óptimo en el
momento adecuado para disminuir la
morbilidad de esta enfermedad.
CONCLUSIONES
Se comprendió el fundamento y la
importancia de la determinación de las
pruebas para la identificación de
grupos sanguíneos ABO así como la
determinación del Rh.
REFERENCIAS
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grupo sanguíneo A B O y el factor Rh
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