Valoración AST ALT clínica

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Valoración de la actividad enzimática del hígado:
Determinación de ASL Y AST
FASE PRE ANALÍTICA
Toma de muestra
1. Recibir al paciente.
2. Llevar al paciente a la zona de toma de muestra.
3. Sentar al paciente en una silla para empezar con el proceso.
4. Pedir permiso al paciente para poder inspeccionar los brazos para determinar cuál
es la mejor vena para sacar la sangre.
5. Una vez identificado el brazo y por ende la vena, limpiar la zona ejerciendo
un poco de presión con una torunda con alcohol.
6. Colocar el torniquete alrededor de la parte superior del brazo con el fin de
aplicar presión en la zona y permitir que la vena se llene de sangre.
7. Introducir la aguja en la vena en un ángulo aproximado de 25°.
8. Colocar los tubos de tapón rojo para empezar a extraer la sangre y retirar el
torniquete inmediatamente. En caso de ser con jeringa, extraer la cantidad de
sangre necesaria y retirar el torniquete.
9. Una vez obtenida la cantidad de muestra necesaria en los tubos, colocar una
torunda con alcohol en la zona en donde está la aguja y retirar la misma.
10. Pedir al paciente que ejerza un poco de presión con la torunda para que la
sangre deje de salir.
11. Colocar un curita en la zona donde se introdujo la aguja.
12. Agradecer al paciente y guiarlo a la recepción.
13. Llevar la muestra a la zona de análisis.
*NOTA: Es importante verificar que el paciente se sienta bien al momento de estar
realizando la extracción, en caso de que presente mareos detener la toma de muestra,
retirar la aguja, brindarle una torunda con alcohol, esperar a que el paciente se recupere y
proceder a tomar la muestra en otro brazo o en otra vena*
FASE ANALÍTICA
Los análisis de función hepática son análisis de sangre utilizados para diagnosticar y
supervisar enfermedades o daño en el hígado. Miden los niveles de determinadas enzimas
y proteínas en la sangre.
Algunos de estos análisis miden la forma en la que el hígado está desempeñando sus
funciones normales para producir proteínas y eliminar la bilirrubina, un producto de desecho
de la sangre. Otros análisis de función hepática miden las enzimas que liberan las células
del hígado en respuesta al daño o a la enfermedad.
(MayoClinic, 2021).
Las transaminasas AST y ALT catalizan la conversión de aspartato y alanina a oxalacetato y
piruvato respectivamente. En el hígado se encuentran los niveles más altos de ALT,
mientras que la AST se encuentra presente en el corazón, músculo esquelético e hígado en
cantidades similares.
La medición de los niveles séricos de AST y ALT es valiosa para el diagnóstico de la
enfermedad del hígado; sin embargo, lo mejor es tener estos análisis en conjunto con otros
análisis de enzimas como la lactato deshidrogenasa (LDH) y la creatina cinasa, y con otras
mediciones de la función renal y hepática como la urea sanguínea, creatinina, amoníaco y
bilirrubina.
(UNAM, 2009).
1. DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE ALANINA AMINOTRANSFERASA GPT
(ALT) IVD.
Fundamento del método
La alanina aminotransferasa cataliza la transferencia reversible de un grupo amino de la
L-alanina al α-cetoglutarato, formando piruvato y L-glutamato. Luego, ese piruvato se
reduce a lactato en presencia de lactato deshidrogenasa (LDH) con la oxidación de
alfa-dinucleótido de nicotinamida adenina reducido (NADH) a dinucleótido de nicotinamida
adenina (NAD). La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio es
proporcional a la concentración catalítica de ALT en la muestra ensayada.
Esquema de la reacción
Procedimiento
A) PREPARACIÓN DE REACTIVOS
R1 (Tampón)
TRIS pH 7.8……………….….. 100 mmol/L
L-Alanina ………………..…..... 500 mmol/L
R2 (Sustrato)
NADH ……………………….…. 0.18 mmol/L
Lactato deshidrogenasa ….... 1200 U/L
alfa-cetoglutarato ………….... 15 mmol/L
Reactivo de trabajo (RT)
Mezclar 4 vol. de R1 + 1 vol. de R2.
B) CONDICIONES DEL ENSAYO Y PROCEDIMIENTO
Kit: SPINREACT
Longitud de onda: 340 nm
Celda: 1 cm paso de luz
Temperatura constante: 25ºC / 30ºC / 37ºC 2.
1. Se debe ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.
2. Se debe pipetear en una celda 1 mL del reactivo RT y 100 microlitros de la muestra
y luego mezclar.
3. Incubar 1 minuto a baño maría de 25°-37°C.
4. Leer la absorbancia inicial de la muestra, después leer la absorbancia cada minuto
durante 3 minutos.
5. Calcular el promedio de la diferencia de absorbancia por minuto (A/min).
C) Cálculos
⧍A/min x 1750 = U/L de ALT
(UI)= cantidad de enzima que convierte 1 mol de sustrato x minuto, en condiciones
estándar. La concentración se expresa en unidades por litro (U/L).
Según la temperatura utilizada, los factores de conversión pueden ser:
(SPINREACT, 2016)
2. DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE ASPARTATO AMINOTRANSFERASA (AST) O
TRANSAMINASA GLUTÁMICA OXALACÉTICA (GOT) IVD.
Fundamento del método.
Cataliza la transferencia reversible de un grupo amino del aspartato al α-cetoglutarato con
formación de glutamato y oxalacetato. El oxalacetato producido es reducido a malato en
presencia de malato deshidrogenasa (MDH) y NADH.
Esquema de reacción.
Procedimiento
A) PREPARACIÓN DE REACTIVOS
Reactivo 1. Tampón.
- TRIS pH 7.8 → 80 mmol/L
- Lactato deshidrogenasa (LDH) → 800 U/L
- Malato deshidrogenasa (MDH) → 600 U/L
- L-Aspartato → 200 mmol/L
Reactivo 2. Sustrato.
- NADH → 0.18 mmol/L
- α-cetoglutarato → 12 mmol/L
B) CONDICIONES DEL ENSAYO Y PROCEDIMIENTO
Kit: SPINREACT
Longitud de onda → 340 nm
Celda → 1 cm paso de luz.
Temperatura constante → 25°C / 30°C / 37°C
1. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.
2. Pipetear una celda 1 mL del RT y 100 𝜇L de la muestra.
3. Mezclar e incubar por 1 min.
4. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronómetro y leer
la absorbancia cada minuto por 3 minutos.
5. Calcular el promedio del incremento de la absorbancia por minuto ( )∆𝐴/𝑚𝑖𝑛
C) CÁLCULOS
∆𝐴/𝑚𝑖𝑛 𝑥 1750 = 𝑈/𝐿 𝑑𝑒 𝐴𝑆𝑇
Según la temperatura usada, los factores de conversión pueden ser:
(SPINREACT, s.f).
FASE POST ANALÍTICA
VALORES DE REFERENCIA
● ALT
SEXO 25°C 30°C 37°C
Hombres Hasta 22 U/L 29 U/L 40 U/L
Mujeres Hasta 18 U/L 22 U/L 32 U/L
*Nota: En recién nacidos se han descrito valores de referencia de hasta el doble del de los adultos
debido a su inmadurez hepática; los valores se normalizan aproximadamente a los tres meses.
● AST
SEXO 25°C 30°C 37°C
Hombres Hasta 19 U/L 26 U/L 38 U/L
Mujeres Hasta 16 U/L 22 U/L 31 U/L
¿QUÉ PASA CON LA ALT Y AST EN ALGUNOS PADECIMIENTOS?
- La actividad en el suero de ambas aumenta rápidamente durante el comienzo de la
ictericia viral y permanece elevada por 1 a 2 semanas.
- En las hepatitis tóxicas también se elevan la ALT y la AST, pero la LDH se eleva
mucho más como resultado de la necrosis celular hepática.
- En los pacientes con hepatitis crónica activa también se observan aumentos en la
AST y ALT.
- La necrosis hepática aguda se acompaña por incrementos significativos en las
actividades tanto de la ALT y la AST. El aumento en la actividad de la ALT es
generalmente mayor que el incremento de la actividad de la AST.
- En la cirrosis del hígado las actividades de las transaminasas séricas generalmente
no se elevan por encima de 300 U/L, sin importar la causa de la enfermedad
cirrótica.
- En el síndrome de Reye (Hígado graso con encefalopatía), las elevaciones de la ALT
y AST séricas son atribuibles directamente al daño hepático, y el incremento en la
ALT es generalmente mayor al de la AST.
(UNAM, 2009).
REFERENCIAS
García, M., Zurita, A. (s.f). Transaminasas: Valoración y significación clínica. Consultado el
24 de agosto de 2021. Recuperado de:
https://www.aeped.es/sites/default/files/documentos/transaminasas.pdf
MayoClinic. (2021). Análisis de la función hepática. Consultado el 24 de agosto de 2021.
Recuperado de:
https://www.mayoclinic.org/es-es/tests-procedures/liver-function-tests/about/pac-20394595.
SPINREACT. (s.f). Determinación cuantitativa de aspartato aminotransferasa GOT (AST)
IVD. Consultado el 24 de agosto de 2021. Recuperado de:
https://www.spinreact.com.mx/public/_pdf/41270.pdfSPINREACT. (2016). GPT (ALT). Consultado el 24 de agosto de 2021. Recuperado de:
https://spinreact.com.mx/public/instructivo/QUIMICA%20CLINICA/LIQUIDOS/41280.82%20
GPT(ALT)-LQ%202011.pdf.
UNAM. (2009). Manual de prácticas de bioquímica clínica. Consultado el 24 de agosto de
2021. Recuperado de:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/MANUALBIOQUIMICACLINICA_10817.pdf
https://www.aeped.es/sites/default/files/documentos/transaminasas.pdf
https://www.mayoclinic.org/es-es/tests-procedures/liver-function-tests/about/pac-20394595
https://www.spinreact.com.mx/public/_pdf/41270.pdf
https://spinreact.com.mx/public/instructivo/QUIMICA%20CLINICA/LIQUIDOS/41280.82%20GPT(ALT)-LQ%202011.pdf
https://spinreact.com.mx/public/instructivo/QUIMICA%20CLINICA/LIQUIDOS/41280.82%20GPT(ALT)-LQ%202011.pdf
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/MANUALBIOQUIMICACLINICA_10817.pdf