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MICOLOGÍA DIAGNÓSTICA DIAGNOSTICO DE MICOSIS SUPERFICIALES (Micosis superficiales) Diagnóstico de Dermatofitosis, Pitiriasis versicolor y Exofialosis INTRODUCCIÓN enfermedades que hoy conocemos como micosis existían antes del descubrimiento de los hongos microscópicos. Se tienen indicios de la existencia de las micosis desde el antiguo Egipto, textos siglo I, Celso dejo una detallada descripción del querión, termino con el que se ha conocido a la tiña inflamatoria profunda del cuero cabelludo (en la actualidad). Los romanos usaron el nombre de sicosis (sykós, higo abierto) a las dermatitis profundas y supurantes de la barba. Sin duda, es hasta que surge la dermatología como especialidad (finales del siglo XVIII) que las tiñas ocupan un capítulo importante. En 1837, Robert Remak un judío polaco ayudante de Schölein en la universidad de Berlín, descubrió la presencia de hifas en una enfermedad que hoy conocemos como favus. Sin embargo, temeroso de que se le pudiera atribuir la propagación de la epidemia, debido a sus orígenes judíos y a los pensamientos que existían en contra de ellos, Remak mostró su descubrimiento a su jefe Schölein, por lo que el hongo se conoce actualmente como Trychophyton scholeinii. Remak prosiguió su investigación cultivando el hongo y demostró que se podía inocular en pacientes sanos. Este descubrimiento introdujo un nuevo concepto a la dermatología. Podemos considerar el hallazgo de Schölein y Remak como el inicio de la micología o de algunos conocimientos precursores. El nacimiento real de la micología surge en el año de 1841 con David Gruby quien logra identificar al hongo productor de la enfermedad de flavus, también unos años más tarde descubre la relación de otro organismo al que propone llamar aphtophytes (en la actualidad C. albicans). En 1843 creó el género Microsporum. Los trabajos de Gruby tuvieron gran repercusión en su época y dieron lugar a grandes y apasionadas controversias. Tras algunos años, las ideas de Gruby encontraron eco y sentaron las bases para que se continuara con el estudio de la relación entre hongos y enfermedades. a) Dermatofitosis o tiñas Las hifas de los dermatofitos invaden en forma excéntrica las capas de células queratinizadas de la piel lampiña y cabelluda, formando las placas redondeadas típicas, escamosas y de bordes activos. De acuerdo a su topografía se les divide en tiñas de la piel lampiña subdividida en tiña pedís, manus, cruris, corporis. La tiña de la piel cabelluda o tiña capitis en: tiña de la barba y bigote (tiña barbae), la de las uñas, como tiña ungueum. Los agentes etiológicos están incluidos en tres géneros Trichophyton, Microsporum, Epidermophyton. En México la especie más común y más importante Trichophyton rubrum que origina el 85% de los casos, mientras que el resto es ocasionado por Microsporum canis, Trichopyton mentagrophytes, Epidermophyton floccosum y Trichophyton concentricum. Otras micosis superficiales que se encuentran exclusivamente en el estrato corneo de la piel son: b) Pitiriasis versicolor Es un padecimiento caracterizado por manchas finas, escamosas, de color variable, no inflamatorias y carentes de sintomatología. Las lesiones se localizan con mayor frecuencia en tórax anterior y posterior, así como en los hombros y en cuello el agente etiológico es un hongo levadurifirme denominado Malassezia furfur que coloniza en forma saprobia la piel. c) Tiña negra ( exofialosis) Es una entidad micológica que ataca el estrato corneo de la piel y que se caracteriza por la presencia de una mancha negra hiperpigmentación en palmas o plantas producida por Exophiala werneckii. d) Piedra negra y blanca ( Piedras) Las piedras micosis poco frecuentes que se caracterizan por la presencia de nódulos o concreciones duras y negras en el caso de piedra negra cuyo agente etiológico es Piedraie hortae lo largo de la vaina del pelo y se presentan en personas con nulos hábitos de aseo. En el caso de piedra blanca, son nódulos mucilagenosos de color blanco a lo largo del pelo, axilas (Trichosporun beigellii). Estos hongos pueden ser, de acuerdo a su hábitat: antropofílicos, zoofílicos y geofílicos. En el caso de los antropofílicos, tienen únicamente al hombre como hospedero y reservorio (T. tonsurans, T. rubrum y E. floccosum). Los zoofílicos, parasitan determinados animales, infectando al hombre por contacto directo o por fomites (M. canis). Las especies geofílicas tienen su hábitat natural en el suelo (M. gypseum), desde donde tienen la capacidad de parasitar al ser humano. Las tiñas se clasifican de acuerdo al sitio de parasitación de los dermatófitos; su frecuencia de presentación es la siguiente: Tiña de la cabeza 4-10%, del cuerpo (piel lampiña) 15%, de la ingle 4%, de la mano 2%, de los pies 30-45%, de las uñas (onicomicosis dermatofíticas) 30%. 1 La selectividad con las que las diferentes especies de dermatofitos afectan estructuras queratinizadas distintas (capa córnea, pelos y uñas), probablemente se deba a que poseen queratinasas y enzimas proteolíticas específicas para cada una de ellas. Epidermophyton. Epidermophyton floccosum Microsporum Microsporum canis Microsporum gypseum Microsporum audouinii Microsporum ferrugineum Trichopyton Trichophyton rubrum Trichophyton tonsurans Trichophyton mentagrophytes Trichophyton violaceum Trichophyton verrucosum NOMBRE DESCRIPCIÓN Tinea capitis Es la infección del cuero cabelludo. Es una enfermedad propia de la infancia, que desaparece en la pubertad debido a los cambios en la secreción sebácea y en el pH, que tienen efecto fungistático. Cuando se presenta en la edad adulta suele haber un fondo de inmunosupresión. Tinea corporis Es la infección del tronco y extremidades. Es una dermatofitosis que afecta la piel glabra, ocasionada por algunas especies de Trichophyton y Microsporum y se caracteriza por presentar placas eritematoescamosas y pruriginosas. Las especies más frecuentes son Trichophyton rubrum 70% y M. canis 20%, 1 el resto son causadas por T. mentagrophytes, T. tonsurans, M. gypseum y E. flocossum. Tinea cruris (tiña crural) Es la afección en la ingle. La humedad y maceración por el uso de ropa ajustada y de material sintético favorece el desarrollo de estos hongos; otros factores predisponentes son: obesidad, mala higiene, clima tropical y húmedo, el uso de medicamentos como corticoides e inmunosupresores y diabetes mellitus. Tinea pedis (o "pie de atleta") Afecta principalmente a los pies en las plantas de los mismos y las zonas interdigitales. Los agentes causales más frecuentes son: T. rubrum 85%, T. menta- grophytes 10% y E. floccosum 5%. Tinea unguiüm (onicomicosis) Es la infección de la uñas. Infección crónica cosmopolita de la lámina ungueal por dermatofitos que se puede adquirir a partir de una tiña de los pies. Los agentes causales más frecuentes son: T. rubrum 87%, T. mentagrophytes 9% y otros dermatofitos 4%. En asociación con Candida 3% y con otros mohos 2%. Tinea faciale Es la infección de la cara. Tinea manum Es la infección de las palmas y región interdigital. Tinea barbae Es la infección de la barba y del área del cuello. OBTENCIÓN DE MUESTRAS Es de gran importancia conocer los procedimientos que deben seguirse para el manejo de estos tipos de micosis. Por eso es necesario conocer la manera en que debe de realizarse la toma de muestra y la manera de conservarlas viables para hacerlas llegar al laboratorio. Antes de realizar la toma de muestra, la piel, pelos o uñas deben limpiarse con etanol (70%) para eliminar la flora bacteriana o exudación. Recolección Escamas En las lesiones descamativas,deben recogerse las escamas de las zonas afectadas, raspando su borde activo con una hoja de bisturí o sindesmótomo estéril, ya que dicho borde es el que más probablemente contenga elementos fúngicos viables. Cuando existen lesiones satélites (candidiasis), el raspado se realiza de dichas lesiones por ser las más jóvenes. El material obtenido se recoge entre dos portaobjetos estériles. El uso de contenedores estériles de plástico puede tener el inconveniente de que las escamas se adhieran a sus paredes dificultando su recuperación. Los dermatofitos en las muestras de piel, pueden permanecer viables durante meses. En los intertrigos candidosicos, las lesiones no suelen ser descamativas sino exudativas, en cuyo caso el material se toma con hisopo estéril seco o húmedo. Si el espécimen no va a ser procesado inmediatamente, se prefiere el empleo de un hisopo con medio de transporte (Ej. medio de Stuart) ya que las levaduras pierden rápidamente la viabilidad en los hisopos secos. Pelos Dependiendo del tipo de lesión observada, los pelos deben recogerse mediante diversas técnicas: En la piedra blanca o piedra negra: Ambas están confinadas a la vaina del pelo, por lo que debe cortarse la porción suprafolicular de los pelos afectados. En las tiñas del cuero cabelludo o de la barba: es importante tomar los pelos parasitados arrancándolos con la raíz intacta, ya que cortarlos es menos eficaz. En muchas ocasiones los pelos parasitados se reconocen porque están rotos, friables o se desprenden fácilmente con el raspado. En las tiñas del cuero cabelludo o de la barba: es importante tomar los pelos parasitados arrancándolos con la raíz intacta, ya que cortarlos es menos eficaz. En muchas ocasiones los pelos parasitados se reconocen porque están rotos, friables o se desprenden fácilmente con el raspado. En las tiñas microspóricas: se reconocen por presentar una placa escamosa blanquecina con escasa o nula inflamación, que puede alcanzar varios centímetros de diámetro, y en el cual se observan pelos rotos a 5-10 mm de la superficie cutánea, estos pelos parasitados son friables y se arrancan con facilidad al raspar con el bisturí. Kerion de Celso: Son las formas supurativas de tinea capitis, es común en los niños. Se presentan como lesiones elevadas, hemisféricas de consistencia blanda, exhiben muchas pústulas foliculares y al ser apretadas manan pus por múltiples puntos. El diagnóstico se realiza por el examen microscópico de los cabellos (que se arrancan con gran facilidad). Los agentes más frecuentes aislados son: Microsporum canis, Microsporum gypseum, Trichophyton mentagrophytes var mentagrophytes y Trichophyton verrucosum. Onicomicosis distal y lateral subungueal: la lesión comienza por el borde libre de la uña y va extendiéndose hacia la matriz, la sustancia de la uña se sustituye por un material amarillento y friable, mientras que la lámina exterior puede estar infectada o destruida. Esta lesión puede deberse a dermatofitos, Scopulariosis spp o Scytalidium spp. En estos casos, aparecen uñas hiperqueratósicas siendo los alicates especiales para recoger el material subungueal y cortar trozos de la parte proximal de la uña, ya que aunque sea la menos accesible, es la que menos se contamina y presenta elementos fúngicos más jóvenes y viables. PRÁCTICA 1 2. OBJETIVOS a) Mencionar género y especie de los dermatofitos más frecuentes en México. b) Mencionar los agentes etiológicos de Pitiriasis versicolor, exofialosis y piedras. c) Describir la morfología macro y microscópica de cada uno de ellos. d) Realizar Examen directo de escamas de tiñas. 3. MATERIAL Muestra obtenida ( escamas de piel) que contengan dermatofitos Portaobjetos de 76 x 22 mm. Cinta adhesiva Asa micológica o bacteriológica Asas con punta Frascos con KAOH al 20 o 15 % Mecheros de bunsen o lámpara de alcohol Colorante azul de algodón, o de metileno, o verde de malaquita, lugol etc. Cajas con medios de cultivo de Sabouraud. MÉTODO 1. La obtención de escamas se efectuará con hojas de bisturí sin filo. 2. Examen directo: Los productos se colocan en un portaobjetos, se agrega una gota de KOH al 40%, colocar un cubreobjetos y pasar ligeramente por la flama del mechero; dejar que se impregnen de 15 a 30 minutos. 3. Cultivo: Se obtienen escamas de la zona de la piel afectada y posteriormente se siembran en los tubos con medio de cultivo de Sabouraud.se incuban a temperatura ambiente de 7 a 15 días observándolos continuamente, posteriormente se realizará examen directo. 4. Observar al Microscopio con objetivos 10x y 40x. MÉTODO KOH al 20% Escamas, pelo, uñas Escamas con KOH, para aclarar esperar o calentar OBSERVAR Filamentos o macroconidios con microconidios si se trata de cultivo CULTIVO MICOLÓGICO
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