Práctica Tripanosoma-Leishmania

Vista previa del material en texto

Práctica 1 Parasitología: Leishmania – T.Cruzi Materia: Parasitología 
• T. cruzi 
• Leishmania 
Tripanosoma Cruzi 
vector de T. cruzi. 
En tripanosoma debemos reconocer 3 formas. 
La forma tripanomastigote, que es la forma infectante del humano, la forma metacíclica, recuerden que entra por exposición al vector, donde uno se rasca y se da la entrada del parasito. Recuerden que hay otras formas de trasmisión. Entonces el diagnostico lo haremos a través de una gota gruesa, o en un extendido o en el cuadro hemático. Esta forma es en forma de herradura, con un núcleo y un cinetoplasmo, es supremamente fácil de 
diferenciar, pero recuerden que se encuentra circulando en el ser humano, por eso podemos hacer esas pruebas para diagnóstico. Recuerden que en fase aguda solo el 10% presenta sintomatología, el resto, 90% no. 
Hay una prueba muy importante que se hace en pacientes de enfermedad de Chagas aguda que es la prueba de Stroat, la cual toma aproximadamente 10mL de sangre, se deja coagular, se le saca el coagulo y el sedimento, se puede hacer un extendido o se puede mirar entre lámina y laminilla y ahí vamos a observar las formas tripanomastigotes. En general esas son las pruebas que se hacen para la fase aguda. 
Se le puede hacer histopatología, se le puede hacer todas las pruebas de biología molecular, el seno diagnóstico que es una prueba para el aislamiento del parásito donde se toman las formas iniciales de crecimiento de estos vectores desde los huevos, ninfas de 1er, 2do, 3er y 4to estadio. Las ninfas de 4to estadio, que son antes de pasar a adultos, son estériles, se mantienen en el laboratorio, se les da a que chupen sangre del paciente y desarrollen el parásito y en la materia fecal vamos a encontrar estas formas que pueden dar un diagnóstico de Chagas A partir del seno diagnóstico. 
Para la fase latente la prueba de elección son los anticuerpos y a veces las imágenes diagnósticas, porque el tripanosoma a pesar de que está en la fase latente, en el electrocardiograma o en el ecocardiograma se van a ver los daños eléctricos que está haciendo el parásito en el paciente, pero en primera instancia se eligen las pruebas de anticuerpos, los cuales se determinan a partir de 2 pruebas de principio diferente, una que se hace para tamizar y la otra que se hace para comprobar la enfermedad (esa segunda prueba tiene que tener una alta sensibilidad y una alta especificidad). Se pueden hacer otras pruebas, pero las sensibilidades son muy bajas cuando se quiere aislar el parásito. 
En la fase crónica vamos a hacer pruebas serológicas, electro, radiografía, ecocardiograma, porque la fase crónica es cuando el paciente ya presenta una sintomatología que se puede asociar y discriminar con las pruebas serológicas (También se utilizan dos pruebas serológicas). 
Cuando se hace cultivo podemos observar la forma epimastigota que es una forma fusiforme alargada con un núcleo y un Kinetoplasto cerca al núcleo (esta forma también la podemos encontrar en la parte media del estómago del vector). En el tejido vamos a encontrar la forma amastigota (cuando se le hace la biopsia al paciente), esta forma hace un pseudoquiste en el corazón, esófago o colon, el cual está lleno de formas amastigotas que son formas redondeadas muy pequeñas con un núcleo y un kinetoplasto. 
*En las cepas de Colombia hay muy pocos casos (2 o 3) en los que estas formas amastigotas hacen megacolon y megaesófago (común en cepas del cono sur), las cepas colombianas hacen cardiopatía chagásica. 
En un estudio cuando hay un brote se pueden encontrar en los pacientes estas 3 formas y estos brotes se van a ver en pacientes crónicos. 
Cuando se hacen marcapasos, o en los pacientes que estén listos para trasplantar se debe hacer todas las pruebas pues el donante debe estar libre de este parásito porque si no el/los receptores pueden desarrollar una enfermedad crónica. 
*En el laboratorio se observan algunos vectores como Triatoma dimidiata, maculata, Rhodnius Prolixus, Astróngilus, los cuales se encuentran en casi toda Colombia (son muy pocos los departamentos en los que no hay circulación del vector). 
Epimastigote T. Cruzi: 
Amastigote T. Cruzi Tejido cardiaco: 
Trypomastigote T. Cruzi: 
Promastigote T. Cruzi: 
Leishmania 
Hay varias especies de Leishmania, que se pueden clasificar en cutánea y visceral (en el laboratorio no se va a hacer esa diferenciación pues para eso se necesita saber de donde vienen las muestras y hacer pruebas de biología molecular). 
En leishmania vamos a ver en general Leishmania sp y vamos a encontrar: 
• Forma amastigota→ Forma supremamente pequeña, a veces redondeada otras veces alargada fusiforme, con un núcleo y un kinetoplasto, en ocasiones se le ve una vacuola. El diagnóstico es un poco difícil y las muestras para observar esta forma las vamos a tomar de piel (en el caso de Leishmania cutánea), en lesiones a nivel del tabique (en Leishmania mucocutánea), en médula o bazo (en Leishmania visceral). 
• Forma Promastigota → Forma alargada fusiforme, presenta núcleo y Kinetoplasto cercano al flagelo. Puede confundirse con la forma epimastigote, pero es esta la que se encuentra en el cultivo y en el vector (Lutzomyia). En el cultivo se adosan y forman una silueta. 
A partir de la biopsia se pueden hacer cultivos, histopatología, pruebas de biología molecular. Las pruebas serológicas no sirven para diagnóstico, solo para Leishmania visceral (esto sabiendo de qué zona viene el paciente, de zonas endémicas donde está circulando el vector y hay circulación de reservorios) En estos pacientes se debe hacer pruebas de 
imágenes diagnósticas y serologías. Pacientes inmunocomprometidos no sirve el diagnostico serológico. 
Para Leishmania cutánea la serología no es válida como prueba de diagnóstico. En el laboratorio se ven diversas muestras de diferentes orígenes. 
Hay que revisar la distribución de Leishmania en Colombia. En Lesihmania, se están tratando de eliminar los reservorios que hay alrededor de los domicilios, por nuevos brotes que se han dado dentro del domicilio. 
Amastigote Leishmania sp: 
Promastigote Leishmania: