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Espectrofotómetro de luz ultravioleta e infrarrojo Espectrofotómetro Un espectrofotómetro es un aparato que se usa en los laboratorios para determinar cuál es el haz de radiación electromagnética o luz y así identificar, calificar y cuantificar cómo es su energía. Espectrofotometría Se refiere a la medida de cantidades relativas de luz absorbida por una muestra, en función de la longitud de onda. Absorbancia: Medida y cantidad de luz que es absorbida por el analito en cuestión, es la cantidad de luz que se queda para no pasar a través de la muestra y se relaciona directamente con la concentración. Transmitancia: Y al contario de la absorbancia esta se define como la cantidad y medida de luz que atraviesa la muestra según el filtro que estemos utilizando, por lo que va a determinar varios conceptos y aplicar un seguimiento a futuros analitos de la misma muestra. Ley de Lambert Relaciona la absorción de la radiación electromagnética de las especies químicas, con su concentración y la distancia que recorre la luz en las interacciones partícula-fotón. Los infrarrojos fueron descubiertos en 1800 por William Herschel. Descubrió que el calor era más fuerte al lado del rojo del espectro y observó que allí no había luz Fundamento Los infrarrojos fueron descubiertos en 1800 por William Herschel. Descubrió que el calor era más fuerte al lado del rojo del espectro y observó que allí no había luz Espectrofotometría ultravioleta Ultravioleta lejano (1.24 X 102 a 6.2 eV) y Ultravioleta cercano (6.2 a 3.1 eV) Existen 6 transiciones electrónicas posibles dentro de la capa de valencia: orbitales sigma, pi y n. 1.- Transiciones sigma a sigma excitado. 2.- Transiciones de sigma a pi excitado 3.- Transiciones de pi a sigma excitado. 4.- Transiciones n a sigma excitado. 5.- Transiciones de pi a pi excitado. 6.- Transiciones de n a pi excitado. · Luz ultravioleta: Un monocromador único con doble red. Los detectores son un tubo fotomultiplicador para la región UV-Vis y un detector de PbS para la región NIR. Las fuentes utilizadas son una lámpara de deuterio (190 a 350 nm) y una lámpara halógena (330 a 2700 nm). · Infrarrojo: Un interferómetro para recoger el interferograma, también conocido como formato de datos/señal en bruto. Un prisma o una rejilla para dividir la fuente de radiación infrarroja en frecuencias separadas. La fuente de radiación infrarroja: es una fuente de cuerpo negro brillante, y la cantidad de energía emitida es controlado por una abertura. La muestra El detector La computadora APLICACIONES Y USOS · Análisis cuantitativo y cualitativo de soluciones desconocidas en un laboratorio de · Investigación. · Estandarización de colores de diversos materiales, como plásticos y pinturas. · Determinación de trazas de impurezas en alimentos y en reactivos. · Detección de niveles de contaminación en aire y agua Procedimiento: · a) Método por medida de transmitancia o absorbancia Se debe utilizar la muestra secada bajo las condiciones descritas en el ensayo Perdida por secado, a no ser que se especifique de otra forma en la monografía. · b) Método de reflectancia difusa (DRIFT) Método para sólidos Preparar una mezcla compuesta por la sustancia a analizar y bromuro de potasio o cloruro de potasio finamente pulverizados y secados, con una concentración aproximada al 5 %, a menos que se especifique de otro modo en la monografía individual. · c) Método reflectancia total atenuada (ATR) Método para líquidos, geles, polvos, pastas, sólidos, películas y recubrimientos Colocar la sustancia a ser analizada en estrecho contacto con un elemento de reflectancia interna como diamante, germanio, seleniuro de cinc, bromuro de talioioduro de talio (KRS-5) u otro material apropiado de alto índice de refracción Resultados: Identificación por sustancia de referencia Los máximos de absorción en el espectro obtenido con la muestra deben corresponder en posición e intensidad relativa a los obtenidos concomitantemente con la sustancia de referencia. Identificación por espectro de referencia Farmacopea MERCOSUR Preparar la muestra en condiciones similares a las indicadas para la obtención del espectro de referencia y registrar el espectro de la sustancia a analizar. Identificación por máximos de absorción Los máximos de absorción en el espectro obtenido con la muestra deben corresponder en posición a todos los indicados en la monografía individua
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