26 Conf 26 Análisis Químico HPLC III (1)

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Tipos de Cromatografía según mecanismo de retención
- Cromatografía en Fase Normal
 Cromatografía en Fase Inversa
 Cromatografía en Fase Inversa con Supresión Iónica
 Cromatografía en Fase Inversa con Par Iónico
 Cromatografía de Intercambio Iónico
 Cromatografía de Exclusión por Tamaño
Cromatografía de Afinidad
Análisis Químico
Cromatografía de Líquidos de Alta Eficacia (HPLC) (Parte 3)
Cromatografía en Fase Normal
fase estacionaria
polar que el disolvente
más
Retención
interacciones polares
Elución
Según polaridad creciente del disolvente 
dipolo – dipolo inducido
dipolo – dipolo
enlace de hidrógeno
Cromatografía en Fase Inversa
fase estacionaria
polar que el disolvente
menos
Retención
interacciones hidrofóbicas
Elución
Según polaridad decreciente del disolvente 
fuerzas de dispersión
Disolventes más utilizados como fases móviles
Fase Normal
De baja polaridad
Fase Inversa
Polares
Agua
Metanol
Acetonitrilo
Tetrahidrofurano
Modificadores
orgánicos
Rellenos y modos de interacción
Fase sólida
Estructura
Octadecil (C-18)
Octil (C-8)
Etil (C-2)
Ciclohexil
Fenil
Ciano (CN)
Amino (NH2)
Diol (COHCOH)
Gel de sílice
Alúmina
Fase inversa
-(CH2)17CH3
-(CH2)7CH3
-CH2-CH3
-CH2CH2-ciclohexil
-CH2CH2CH2-fenil
Fase normal
-(CH2)3CN
-(CH2)3NH2
-(CH2)3OCH2CH(OH)CH2(OH)
-SiOH
Al2O3
Cromatografía en Fase Inversa con Supresión Iónica
Adición de disoluciones reguladoras de pH (buffers)
Al suprimir los iones se mejora la retención en RP
HA 
H+
+
A- 
B 
H+
+
HB+ 
Cromatografía en Fase Inversa con Par Iónico
Modelos fundamentales:
1
Ion(ac) 
+
CIon(ac) 
+
Ion(ac) 
CIon(F.E.) 
(F.E.) 
Ion , CIon
2
(F.E.) 
Ion , CIon
Ion(ac) 
CIon(ac) 
+
(ac) 
Ion , CIon
Cromatografía de Intercambio Iónico
Cromatografía de Exclusión por Tamaño
Cromatografía de Afinidad
Conclusiones