Algoritmo Bacilos gram positivos

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Algoritmo Bacilos gram positivos
1. Hacer un algoritmo del corynebacterium. Identificar 8 especies de
corynebacterium
2. Identificar medio de cultivo agar loeffler, agar Telurito y agar Tinsdale
Agar Loeffler
La base de Medio Suero de Loeffler se utiliza para el cultivo de
corinebacterias. Debido al contenido en suero, este medio se puede usar para la
actividad proteolítica y la hidrólisis enzimática de proteínas. La superficie
gris-blanca es un fondo excepcional para la detección de la pigmentación del
microorganismo.
COMPOSICIÓN
- Dextrosa → 0,71
- Infusión de músculo corazón → 0,72
- Digerido péptico de tejido animal → 0,71
- Cloruro sódico → 0,36
Preparación
Suspender 2,5 gramos en 250 ml de agua destilada a una temperatura de
45 ºC. Mezclar bien. Añadir 750 ml de suero bovino estéril y 7,5 gramos
de huevo en polvo. Mezclar bien y dispensar en tubos. Coagular y
esterilizar por tindalización durante 15 minutos a 80 a 90 ºC o cocer al
vapor a 100 °C durante 10-15 minutos.
Instrucciones de uso
- Inocular e incubar a 35±2 ºC durante 24-48 horas.
- Para el cultivo de Corynebacterium, la incubación debe llevarse a
cabo durante 3-4 días.
Agar Telurito
Composición
- Extracto de carne 8 g/l
- Extracto de levadura 5,5 g/l
- Peptona 9,5 g/l
- Cloruro de sodio 5 g/l
- Glucosa 5 g/l
- Agar 15 g/l
- Suplemento: telurito de potasio (0,8%) : 1ml / 20ml de medio
Preparación del medio: Fundir la base gelosada en el baño maría en
ebullición, y equilibrar a una temperatura de aproximadamente 50°C. Añadir a
cada tubo de 20 ml el contenido de una ampolla de 1 ml de solución de telurito
de potasio al 0,8%. Mezclar y repartir en placas Petri. 5-
Siembra: Sembrar en estrías muy juntas en un medio gelosado, a partir de un
cultivo puro y recién obtenido.
Incubación: Incubar durante 24 a 48 horas a 37°C.
CONSERVACIÓN
- Medio / Suplemento listo para usar: a +2 – 8°C
- La fecha de caducidad y el número de lote se indican en el envase
Agar Tinsdale
La Base de Agar Tinsdale es un medio selectivo para el diagnóstico de
la difteria, una enfermedad del tracto respiratorio superior. La proteosa
peptona Nº 3 proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y
aminoácidos esenciales para el crecimiento. El cloruro de sodio
suministra electrolitos esenciales para el transporte y el equilibrio
osmótico. El tiosulfato de sodio, que proporciona azufre y L-cistina, es
el indicador de la producción de H2S. El suero bovino es una fuente
adicional que proporciona factores de crecimiento para los
microorganismos. El telurito de potasio es un inhibidor de la mayoría de
las bacterias Gram negativas y la mayoría de la flora normal del tracto
respiratorio superior. Debido a la producción de H2S, el telurito de
potasio se reduce, formando un halo que rodea la colonia. Las especies
Haemophilus, Klebsiella, Neisseria, Staphylococcus y Streptococcus
crecen como colonias oscuras y marrones sin halos.
Fórmula en g/L
Agar bacteriológico → 20
L-Cistina → 0,24
Cloruro sódico → 5
Proteosa Peptona Nº3 → 20
Preparación
Suspender 45,0 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar
bien y disolver con calor y agitación frecuente. Hervir durante un
minuto hasta la disolución completa. Distribuir en matraces de 100 ml.
Esterilizar a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 45-50 ºC y agregar el
Suplemento de Enriquecimiento Tinsdale (Cat. 6034) a cada matraz.
Instrucciones de uso
Para diagnóstico clínico, el tipo de muestra es aquella procedente del
tracto respiratorio humano. - Inocular la superficie frotando
directamente la muestra. - Incubar en condiciones aeróbicas a 35±2 ºC
durante 18-48 horas. - Lectura e interpretación de los resultados. -
Observar el crecimiento y la producción de telurito después de 18-48h.