TAREA N2 - FASE III

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MICROBIOLOGÍA
1. HACER UN FLUJOGRAMA PARA IDENTIFICAR LOS COCOS GRAMPOSITIVOS
CATALASA NEGATIVO: STREPTOCOCCUS CON SUS ESPECIES.
2. MEDIOS CULTIVO: MEDIOS KF
El Agar Estreptocócico KF es un medio selectivo para el aislamiento y la
enumeración de enterococos fecales en agua, alimentos y otros materiales, según la
fórmula desarrollada por Kenner, Clark y Kabler.
Este medio se utiliza para el recuento en placa de enterococos en muestras de agua y
para determinar la presencia de Enterococcus faecalis en la leche y sus derivados, así
como en otros alimentos.
El aislamiento y la enumeración de enterococos fecales se realiza según APHA para
el examen de aguas y productos alimenticios. La mezcla de peptona proporciona
nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El
extracto de levadura es una fuente de vitaminas, particularmente del grupo B. La
maltosa y la lactosa son los carbohidratos fermentables que proporcionan carbono y
energía. El glicerofosfato de sodio es un agente tamponador. La azida sódica es un
agente selectivo que inhibe las bacterias Gram negativas. El cloruro de sodio
suministra electrolitos esenciales para el transporte y el equilibrio osmótico. El agar
bacteriológico es el agente solidificante. La adición del Suplemento TTC al 1%
(cloruro de 2,3,5-trifeniltetrazolio) permite que los enterococos fecales desarrollen un
color rojo como resultado de la reducción del tetrazolio a formazán, un pigmento rojo
insoluble, al crecer activamente las células microbianas.
MEDIOS MITIS
Agar Salivarius Mitis Agar mitis salivarius se utiliza para diferenciar entre especies de
Streptococcus y al género muy cerca Enterococcus (anteriormente en el género
Streptococcus) que son flora de la boca.
Estos organismos son muy comunes en la boca, y se han asociado con la caries dental,
así como agentes de endocarditis. Los azúcares en este medio son saccharose y
glucosa, así como los colorantes de azul de tripano y violeta cristal. Azul de tripano es
absorbida por las colonias bacterianas, haciendo que se vuelvan azules.El cristal
violeta, junto con el telurito 1% añadido a este medio, inhibe bacterias gram - así
como muchos otros gram + bacterias. Algunas colonias también pueden tener una
gota de líquido sobre su superficie. Los Streptococcus mutans aparecen en el agar azul
como pequeñas colonias azules de diámetro < 1 mm, mientras que los Lactobacilos
crecen en el agar transparente como colonias blancas. La comparación con las
imágenes correspondientes de la modelo chart permite evaluar el riesgo de caries,
siendo de relevancia clínica la diferenciación de “riesgo de caries alto o bajo”. Un
hallazgo superior a 105 UFC de Streptococcus mutans o de Lactobacilos por ml de
saliva remite a un elevado riesgo. La observación de pruebas de placa incubadas
proporciona la información de Streptococcus mutans “si/no”. Manteniendo el soporte
del agar inclinado sobre una lámpara facilita la evaluación. También el uso de una
lupa puede ser útil. Este consiste en la modificación de "agar mitis-salivarius",
añadiéndole 0,2 U/ml. de bacitracina y aumentando la concentración de sacarosa en
un 20%. A estas concentraciones los agentes selectivos permiten el crecimiento de S.
mutans con una máxima inhibición de la restante flora estreptocócica.