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Espectofotometro (1)

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Espectrofotómetro de luz ultravioleta e infrarrojo
E.E: Instrumentación Básica
Profesor: Omar Lagunés Merino
Facultad de Bioanálisis
Universidad Veracruzana
Equipo:
Jezabel Navarro Ruiz
Yahir Rafael 
Melchor Cuacua
Lizzy Jaqueline 
Vega García
Saúl Ramírez Morales
Espectrofotómetro
 Un espectrofotómetro es un aparato que se usa en los laboratorios para determinar cuál es el haz de radiación electromagnética o luz y así identificar, calificar y cuantificar cómo es su energía.
Espectrofotometría
Se refiere a la medida de cantidades relativas de luz absorbida por una muestra, en función de la longitud de onda.
Conceptos
Absorbancia:
Medida y cantidad de luz que es absorbida por el analito en cuestión, es la cantidad de luz que se queda para no pasar a través de la muestra y se relaciona directamente con la concentración.
Transmitancia:
Y al contario de la absorbancia esta se define como la cantidad y medida de luz que atraviesa la muestra según el filtro que estemos utilizando, por lo que va a determinar varios conceptos y aplicar un seguimiento a futuros analitos de la misma muestra.
 Relaciona la absorción de la radiación electromagnética de las especies químicas, con su concentración y la distancia que recorre la luz en las interacciones partícula-fotón. 
La invención del espectrofotómetro se le atribuye a Arnold J. Beckman, en 1940 
Los infrarrojos fueron descubiertos en 1800 por William Herschel. Descubrió que el calor era más fuerte al lado del rojo del espectro y observó que allí no había luz
Los primeros detectores de radiación infrarroja eran bolómetros, instrumentos que captan la radiación por el aumento de temperatura producido en un detector absorbente
Ultravioleta:
Durante los años 1941 y 1976, este instrumento fue producido
Espectrofotometría infrarroja
Infrarrojo cercano (1.65 a 0.5 eV), Infrarrojo medio o fundamental 
(2.5 y 50 micrómetros)(0.5 a 0.025 eV) e Infrarrojo lejano (50 – 1000
 micrómetros)(0.025 a 0.00124 eV).
Espectrofotometría ultravioleta
Ultravioleta lejano (1.24 X 102 a 6.2 eV) y 
Ultravioleta cercano (6.2 a 3.1 eV)
Existen 6 transiciones electrónicas posibles 
dentro de la capa de valencia: orbitales sigma, 
pi y n.
1.- Transiciones sigma a sigma excitado.
2.- Transiciones de sigma a pi excitado
3.- Transiciones de pi a sigma excitado.
4.- Transiciones n a sigma excitado.
5.- Transiciones de pi a pi excitado.
6.- Transiciones de n a pi excitado.
Grupos cromóforos y auxocromos. 
Luz ultravioleta: 
Un monocromador único con doble red.
Los detectores son un tubo fotomultiplicador para la región UV-Vis y un detector de PbS para la región NIR. 
Las fuentes utilizadas son una lámpara de deuterio (190 a 350 nm) y una lámpara halógena (330 a 2700 nm).
-Fuente de energía
-Cubetas
-Un detector fotosensible y un sistema de lectura asociado
Infrarrojo:
Un interferómetro para recoger el interferograma, también conocido como formato de datos/señal en bruto. 
Un prisma o una rejilla para dividir la fuente de radiación infrarroja en frecuencias separadas. 
La fuente de radiación infrarroja: es una fuente de cuerpo negro brillante, y la cantidad de energía emitida es controlado por una abertura.
La muestra
El detector
La computadora
Mantenimiento
Alimentación eléctrica adecuada.
Ambiente limpio y lejos de otros dispositivos que causen vibración.
Mantenimiento rutinario capacitado y certificado. 
Componentes mecánicos están en buenas condiciones.
Las cubetas deben enjuagarse con agua destilada y con material de limpieza especial
Análisis cuantitativo y cualitativo de soluciones desconocidas en un laboratorio de
Investigación.
Estandarización de colores de diversos materiales, como plásticos y pinturas.
Detección de niveles de contaminación en aire y agua.
Determinación de trazas de impurezas en alimentos y en reactivos.
Procedimiento:
a) Método por medida de transmitancia o absorbancia Se debe utilizar la muestra secada bajo las condiciones descritas en el ensayo Perdida por secado, a no ser que se especifique de otra forma en la monografía. 
 b) Método de reflectancia difusa (DRIFT) Método para sólidos Preparar una mezcla compuesta por la sustancia a analizar y bromuro de potasio o cloruro de potasio finamente pulverizados y secados, con una concentración aproximada al 5 %, a menos que se especifique de otro modo en la monografía individual.
c) Método reflectancia total atenuada (ATR) Método para líquidos, geles, polvos, pastas, sólidos, películas y recubrimientos Colocar la sustancia a ser analizada en estrecho contacto con un elemento de reflectancia interna como diamante, germanio, seleniuro de cinc, bromuro de talioioduro de talio (KRS-5) u otro material apropiado de alto índice de refracción
Resultados:
Identificación por sustancia de referencia Los máximos de absorción en el espectro obtenido con la muestra deben corresponder en posición e intensidad relativa a los obtenidos concomitantemente con la sustancia de referencia. 
Identificación por espectro de referencia Farmacopea MERCOSUR Preparar la muestra en condiciones similares a las indicadas para la obtención del espectro de referencia y registrar el espectro de la sustancia a analizar.
Identificación por máximos de absorción Los máximos de absorción en el espectro obtenido con la muestra deben corresponder en posición a todos los indicados en la monografía individua
Video de Práctica
https://www.youtube.com/watch?v=Od6ZN8aMqrU
Bibliografías
https://www.ecured.cu/Espectrofotometr%C3%ADa
http://www.frlp.utn.edu.ar/materias/qcasis/mostracion2.html
prucommercilre. (2021). ¿Qué es un espectrofotómetro infrarrojo? Recuperado de: https://www.prucommercialre.com/que-es-un-espectrofotometro-infrarrojo/
Facultad de química. (2021). Espectroscopía de Infrarrojo y UV-Visible. Recuperado de https://quimica.unam.mx/investigacion/servicios-para-la-investigacion/usaii/espectroscopia-de-infrarrojo-y-uv-visible/
Universidad de Alicante. (2018). ESPECTROSCOPÍA ULTRAVIOLETA VISIBLE. Recuperado de https://sstti.ua.es/es/instrumentacion-cientifica/unidad-de-rayos-x-de-monocristal-y-espectroscopias-vibracional-y-optica/espectroscopia-ultravioleta-visible.html 
Ecured. (2021). Espectro infrarrojo. Recuperado de https://www.ecured.cu/Espectro_infrarrojo 
http://www.sice.oas.org/trade/mrcsrs/resolutions/res_011_2015_s.pdf
Brunatti, C., & Martín, A. (2010). Introducción a la espectroscopía de absorción molecular ultravioleta, visible e infrarrojo cercano. Recuperado de: http://materias. fi. uba. ar/6305/download/Espectrofotometria. pdf.
MAGDALENA, G. F. M. APUNTES PARA ESPECTROMETRÍA DE RADIACIÓN ULTRAVIOLETA VISIBLE (UV/VIS) MATERIAL DE APOYO PARA ASIGNATURA" TEMAS SELECTOS DE QUÍMICA (ANALITICA)".
https://www.uv.mx/personal/aherrera/files/2014/05/l2.-ley-de-bouguer-lambert-beer-2.pdf
Gabriel Bolívar. (15 de febrero de 2019). Ley de Beer-Lambert: aplicaciones y ejercicios resueltos. Lifeder. Recuperado de https://www.lifeder.com/ley-de-beer-lambert/.

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