Clase 4 - Diagnóstico y Asesoramiento Genético

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1 FISIOPATOLOGIA GENETICA BR. Oriana Castillo 
CLASE 4: Diagnóstico y Asesoramiento Genético 
 
Existen varios métodos diagnósticos para conocer enfermedades genéticas o alteraciones cromosómicas, entre 
ellos está: 
o El bandeado, donde se determinan las bandas de los cromosomas 
o El cariotipo 
o Determinación del corpúsculo de Barr 
o El FISH (Hibridación fluorescente in situ) 
o PCR 
o Secuenciación. 
 
BANDEADO 
 
Es una técnica que permite determinar las distintas bandas de 
los cromosomas, y en base a estas bandas se clasifican los 
cromosomas, dividiéndolos en series de acuerdo a las bandas. 
 
Existen varios tipos bandeos (Q, G, T, R, C) relacionados con 
la tinción que se utilice para detectar distintas bandas: 
(Estudiar el cuadro) 
 
Bandeo C: Se basa en el uso de Giemsa como colorante (lo 
que está señalado en el cuadro) tiñe regiones con 
heterocromatina constitutiva y permite observar los 
centrómeros (Se encuentra localizada principalmente en 
regiones centroméricas en el humano), y es allí donde se fija el 
colorante. 
Bandeo G, R, Q: Son técnicas basadas en el tratamiento enzimático de los cromosomas y luego se tiñe con 
Giemsa en el caso de bandeo G y R, y se tiñe con colorantes fluorescentes como la quinacrina para el bandeo Q. 
Son las bandas más estudiadas en animales y hombres. 
 
CARIOTIPO 
Es la técnica que más se realiza para el estudio de alteraciones 
cromosómicas. Es un patrón cromosómico de una especie expresado a 
través de un código universal que describe las características de sus 
cromosomas. El cariotipo es característico de cada especie. Esta 
tecnica consiste en la realizacion del cariograma 
El cariograma es un esquema, una foto o un dibujo de los cromosomas 
en metafase ordenados de acuerdo a su morfología y tamaño. 
Técnica del Cariotipo: Se realiza a través del bandeo cromosómico, 
que son técnicas citológicas especiales para la tinción de cromosomas, 
que evidencian “bandas” transversales (oscuras y claras) a lo largo de 
los cromosomas, eso es lo que corresponde a los distintos tipos de cromatina. 
 
Los cromosomas se distribuyen en el cariotipo de distintas maneras, y 
podemos determinarlo a través del bandeo. Los cromosomas humanos se 
ordenado en 7 grupos que se designan por letras: 
• Grupo A: Constituido por los pares 1, 2, y 3. Son los cromosomas 
más grandes. El 1 y el 3 son metacéntricos y el 2 es 
submetacéntrico. 
• Grupo B: Pares 4 y 5. Son submetacéntricos 
• Grupo C: Pares del 6 al 12, submetacéntricos y debido a su 
tamaño se incluye en este grupo al cromosoma X (es decir el 
cromosoma X, es del mismo tamaño que los otros cromosomas que 
constituyen el grupo C). 
• Grupo D: Pares 13, 14 y 15. Son cromosomas acrocéntricos. 
• Grupo E: Pares 16, 17, y 18, submetacéntricos, pero el 16 tiene su centrómero un poco más al centro. 
 
 
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 • Grupo F: Constituido por los pares 19 y 20, metacéntricos 
• Grupo G: Pares 21 y 22. Son los más pequeños. El cromosoma Y se incluye en este grupo por su tamaño, 
aunque este no tiene satélites. 
 
CORPUSCULO DE BARR: Es la cromatina sexual inactiva que está presente en células somáticas del sexo 
femenimo. El sexo masculino no posee corpúsculos de Barr. 
 
El FISH 
Es una técnica de hibridacion in situ y fluorescencia. Se utilizan colorantes 
fluorescentes (Fluorocromos) y permite detectar secuencias de aminoacidos, lo 
cuales son utiles para determinar distintos tipos de patologías o hacer 
diagnóstico de enfermedades. 
 
PCR 
Polymerasa Chain Reaction= Reacción de cadena de polimerasa. Es 
una técnica de biología molecular, en la que se realiza la amplificación 
de un fragmento de ADN para mejor estudio. Se puede combinar con 
otras técnicas y se usa ampliamente para el diagnóstico de 
infecciones, sobre todo virales. 
En la PCR se toma un fragmento, es decir, la secuencia de ADN que 
debemos amplificar. Seguidamente, se desnaturaliza el fragmento a 
estudiar, luego se utilizan primers o partidores para mantener 
separada la secuencia de ADN, y una vez fijados los primers a la 
secuencia, se añaden la ADN polimerasa y los nucleótidos, 
generándose la síntesis de ADN para permitir elongación de las 
cadenas, lo que permite amplificar la información que se quiere determinar. 
 
Una vez que ocurre la amplificación se puede hacer el PCR con fluorescencia o por electroforesis. El más utilizado 
en la práctica clínica es el de electroforesis. Durante la electroforesis las sustancias a estudiar se colocan en un 
campo donde hay dos polos, la migración de las sustancias que se están determinando es lo que permite su 
identificación. 
 
SECUENCIACIÓN 
Técnica para determinar el orden de los nucleótidos, es decir la secuencia 
de los nucleótidos en un fragmento de ADN que está en estudio. Esta 
técnica tiene mayor dificultad y alto costo, por ello se utiliza en investigación 
y no para la práctica clínica o el diagnóstico de enfermedades. 
En la secuenciación primero se utiliza la técnica de desnaturalización para 
separar las hebras de ADN, y se usan fluorocromos para permitir la 
fluorescencia, esto permite determinar la secuencia de aminoácidos en el 
fragmento de ADN que se estudia. Luego se utiliza la electroforesis y por 
medio de los fluorocromos se observa cada color que corresponde a una 
banda, y cada banda corresponde al dideoxinucleotido 3º terminal de ese 
fragmento. 
La secuenciación permite establecer el código genético. 
INDICACIONES DE ESTUDIO GENÉTICO 
 
o Problemas en el crecimiento y desarrollo 
o Nacidos muertos 
o Muertes neonatales, muertes in utero 
o Infertilidad y abortos 
o Antecedentes familiares de enfermedades genéticas o cromosómicas. 
o Edad Avanzada: Mujeres embarazadas de edad avanzada o con el deseo de embarazare, ya que muchas 
alteraciones cromosómicas están relacionadas con la edad materna, sobre todo en el Síndrome de Down, 
donde hay una relación entre la trisomía 21 con la edad materna, a mayor edad hay mayor riesgo de que 
el feto desarrolle la trisomía 21. 
 
 
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Periodo Prenatal (¿Cuándo hacer un estudio genético?). 
o Edad materna mayor de 35 años 
o Triple screening alterado. El triple screening es lo que comúnmente se conoce como la tripleta. Se realiza 
amniocentesis y se realiza estudio para determinar alteraciones cromosómicas, si este estudio se muestra 
alterado se debe hacer un estudio genético. 
o Oligoamnios y poliamnios, ya que estas alteraciones del líquido amniótico están relacionadas con 
enfermedades genéticas o cromosómicas 
o Retraso del crecimiento intrauterino 
o Sospecha ecográfica de cromosomopatía 
o Antecedentes de cromosopatías, casos de parejas que ya han tenido un hijo con cromosopatía. 
Periodo Neonatal 
o RN (recién nacido) con Malformaciones mayores aisladas, como malformaciones cardiacas o renales. 
o RN con presencia de 3 o más defectos genéticos menores, como alteraciones del pabellón auricular 
o RN con rasgos dismórficos o alterados 
o RN con genitales ambiguos 
o Parto con producto muerto de causa inexplicable 
o Muerte neonatal de causa inexplicada 
Periodo de Lactancia 
o Dificultades de aprendizaje 
o Niños con rasgos dismórficos, o morfología alterada 
o Niños con retraso psicomotor 
Periodo Adolescente 
 
o Varones con ginecomastia 
o Falta de desarrollo puberal, es decir, cuando las características sexuales secundarios no se desarrollan con 
normalidad 
o Amenorrea primaria o secundaria 
o Retraso mental 
o Rasgos dismórficos 
 
Período de Adultez 
 
o Padres de niños con cromosopatías estructurales 
o Madres que tengan abortos a repetición 
o Infertilidad inexplicable, cuando anatómicamente en buenas condiciones, al igual que hormonalmente, perosin causa aparente de infertilidad 
 
o Diagnóstico prenatal (Líquido amniótico durante el embarazo y biopsia de corión cuando el feto nace). Se 
indica el estudio genético para el diagnóstico de cromosomopatías o enfermedades genéticas importantes, 
para el manejo del niño que viene con alguna alteración, o para hacer el consejo genético a padres con 
algún gen anómalo o alguna alteración cromosómica, eso es importante para la descendencia.