BioquimicaYBiologiaMolecularParaCienciasDeLaSalud-139

Vista previa del material en texto

diéster une las posiciones 5’ y 3’, por lo que se denomina
enlace fosfodiéster 5’→ 3’. Mientras que los polinucleótidos
naturales están formados generalmente por cadenas polinu-
cleotídicas de gran longitud (hasta millones de nucleótidos),
en el laboratorio es posible sintetizar cadenas polinucleotídi-
cas pequeñas, que se conocen con el nombre de oligonucleó-
tidos u «oligos», y que tienen gran importancia dentro de las
técnicas de análisis de los ácidos nucleicos (véase el Cap. 23
y el Recuadro 8-1).
La estructura química básica de las moléculas de los áci-
dos nucleicos es una cadena polinucleotídica formada por la
repetición de unidades (nucleótidos), unidas por enlaces típi-
cos: enlaces fosfodiéster entre la posición 5’ de un nucleóti-
do y la 3’ del nucleótido adyacente (Fig. 8-5). Así pues, la
cadena polinucleotídica está formada por un esqueleto de
uniones pentosa-fosfato alternantes, comunes a cualquier
molécula de ácido nucleico, y una sucesión de bases nitroge-
nadas unidas a las pentosas por enlaces N-glicosídicos, que
forman la denominada secuencia. El esqueleto de la cadena
polinucleotídica tiene una determinada polaridad, marcada
por la unión de los grupos fosfato a diferentes posiciones de
la pentosa. Se toma como sentido normal de la cadena el 
de 5’ a 3’, por lo que la secuencia de bases a lo largo de la
cadena se suele leer en el sentido 5’→ 3’.
Las moléculas de ADN son relativamente estables, pero
por hidrólisis dan lugar a cuatro bases nitrogenadas (A, G,
C y T), 2-desoxirribosa y fosfato. La composición de bases
nitrogenadas es característica de cada ADN en particular,
existiendo en todos los ADN una proporción determinada
entre las mismas: así, la concentración molar de A es igual
a la de T, mientras que la de G es igual a la de C. Esto
determina que conociendo el porcentaje G+C se pueda
saber el contenido de cada una de las bases. El valor de
G+C varía entre los ADN de especies diferentes, siendo
constante para todas las células de un individuo de una
especie determinada.
Las moléculas de ARN son más inestables que las de
ADN, y por hidrólisis producen bases nitrogenadas (cuatro
bases, fundamentalmente: A, G, C y U, aunque algunos tipos
120 | Estructuras y funciones de las biomoléculas
Figura 8-4. Estructura del esqueleto de una cadena polinu-
cleotídica de ARN.
P
O
OH
O OH
P
O
O CH2O
_
O
O OH
O
O
O OH
O
O CH2
O
O_
Base
3’
Base
Base
5’
Base
Secuencia de bases
 Esqueleto
(azúcar-fosfato)
O
P O CH2
O
O_
P O CH2
O
O_
Recuadro 8-1.
DETECCIÓN Y
CUANTIFICACIÓN DE 
LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
Los ácidos nucleicos son moléculas
incoloras, cuya detección y cuantifica-
ción se puede llevar a cabo de diferentes
maneras. En disoluciones de ácidos
nucleicos purificados, éstos se pueden
cuantificar mediante la medida de la
absorbancia de luz ultravioleta (todas las
bases nitrogenadas absorben radiación
UV, especialmente la de 260 nm). Otros
métodos incluyen la transformación en
compuestos coloreados, que se pueden
cuantificar. El ARN y el ADN se cuanti-
fican así por medio de reactivos especí-
ficos de ribosa (orcinol) o desoxirribosa
(difenilamina). Los ácidos nucleicos
(principalmente, el ADN) intercalan
bromuro de etidio (y otras moléculas
orgánicas planas) entre las bases nitro-
genadas, exaltando la fluorescencia de
dicho compuesto, por lo que los frag-
mentos o moléculas de ADN de diferen-
te tamaño, separados por electroforesis
en geles de agarosa, se pueden detectar
mediante incubación con bromuro de
etidio y exposición a luz UV. Las molé-
culas de ácidos nucleicos pueden mar-
carse también con nucleótidos que con-
tienen un isótopo radiactivo del fósforo
(32P), lo que facilita su detección por
medio de autorradiografías o radiolumi-
niscencia.
08 Capitulo 08 8/4/05 10:00 Página 120