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1 UNIVERSIDAD VERACRUZANA FACULTAD DE BIOANÁLISIS “Manual de Prácticas de Parasitología General” M.A.S.S Claudia Arronte Dr. Omar Lagunes Merino Q.C. Francisco Solís Páez M.A.C. Ricardo Vázquez Ballona Xalapa, Ver. 2019 2 MANUAL DE PRÁCTICAS DE PARASITOLOGÍA GENERAL 3 CONTENIDO pág. Introducción……………………………………………………………………………………...4 Objetivo general…………………………………………………………………………...…....5 Objetivos específicos…………………………………………………………………………..5 Reglamento de laboratorio…………………………………………………………………….6 Capítulo I Recolección, manejo y conservación de muestras biológicas……………..………….8 Practica 1 Microscopia y medición de parásitos………………………………………….9 Capitulo II principales clases de protozoarios ……………………..…………….....14 Practica 2 Sarcodina …………………………………………………………………………...16 Practica 3 Mastigophora ……………………………………………….………….…….…..21 Practica 4 Ciliata ……………………………………………………………………………....25 Practica 5 Esporozoa ………………………………………….……………………………..28 Capitulo III Principales clases de Helmintos…………………………………………31 Practica 6 Nematodos parte 1 características morfológicas del verme adulto……………33 Practica 7 Nematodos parte 2 características morfológicas del estadio infectante………36 Practica 8 Tremátodos parte 1 características del verme adulto…………………………...38 Practica 9 Tremátodos parte 2 características morfológicas del estadio infectante……...40 Practica 10 Cestodo parte 1 características morfológicas del verme adulto………………43 Practica 11 Cestodos parte 2 características de estadios larvarios extraintestinales……45 Practica 12 Cestodos parte 3 características morfológicas del estadio infectante. ……...47 Capitulo IV Artrópodos………………….………………………………………..49 Practica 13 Generalidades ………………………………………………………….…..…..51 Practica 14 Tinción y conservación de laminillas …………………………………………….53 Anexos Anexo 1 Preparación de reactivos………………………………………………..………..61 Anexo 2 Glosario ……………………………………………………………………………...67 Anexo 3 Clasificación ………………………………………………………………………...69 Fuentes de consulta……………………………………………………………………...…..70 4 INTRODUCCION La parasitología es la disciplina que se encarga de estudiar el parasitismo producido por protozoarios, helmintos y artrópodos. Se define como parasito a todo ser vivo, vegetal o animal, que pasa toda o parte de su existencia a expensas de otro ser vivo, generalmente más potente que el (hospedero), del cual vive causándole o no daño, que puede ser aparente o inaparente, y con quien tiene una dependencia obligada y unilateral. El parasitismo es la forma de vida más extendida en el mundo, se da entre un organismo llamado parasito y otro denominado hospedero, la asociación implica un intercambio de moléculas y es imprescindibles solo para el parásito, que causa un daño al hospedador. Este tipo de enfermedades parasitarias representan una de las principales causas de enfermedad, ya que se presenta a cualquier edad, aunque con mayor frecuencia en niños, y principalmente está determinado por condiciones sociales y económicas. La Organización Mundial de la Salud (OMS) estableció que, dado a que las parasitosis son patologías con alto componente social, estas podrían ser tratadas, pero difícilmente eliminadas. Ya que las principales medidas de prevención están vinculadas a la modificación de los hábitos, la educación y el bienestar de la población. El diagnóstico de los parásitos se fundamenta principalmente en la observación y el reconocimiento de sus características morfológicas, macroscópicas y microscópicas, de muestras de pacientes con ciertas sintomatologías asociadas a los parásitos. Es necesario contar con muestras biológicas de calidad analítica y realizar un manejo adecuado de la muestra previo al análisis. El presente Manual de Parasitología General ha sido rediseñado con base al existente, con la finalidad de funcionar como guía de trabajo en la experiencia educativa de Parasitología General, la cual se encuentra curricularmente establecida en la retícula del estudiante de la licenciatura de química clínica. Debido a la implementación del Nuevo Modelo Educativo en la Facultad de Bioanalisis, generó la reestructuración en un sistema de créditos, con Experiencias Educativas en 4 áreas de formación, un gran porcentaje de estas Experiencias Educativas incluyen horas paralelas donde los alumnos llevan a cabo prácticas que fortalecen sus conocimientos, habilidades y actitudes, para lo cual es necesario contar con manuales que guíen las actividades de los alumnos dentro de los laboratorios. 5 Mediante el estudio de la experiencia educativa de Parasitología general, se desprende la unidad de competencia: el estudiante identifica los principales organismos que afectan al humano y a animales domésticos a través del estudio de la morfología procedente de muestras biológicas con la finalidad de contribuir en el diagnóstico de las enfermedades parasitarias; con una actitud de conciencia social y respeto a la integridad del individuo. El manual está organizado por 14 prácticas de laboratorio que comprenden los saberes teóricos propuestos en el Programa de la Experiencia Educativa de Parasitología General a saber: manejo, recolección y conservación de muestras, microscopia, identificación de protozoos, identificación de helmintos, tinción y conservación de laminillas. Cada una de las prácticas está conformada por los siguientes puntos: • Número y Nombre de la práctica • Micro unidad de competencia • Introducción • Marco teórico • Material • Procedimiento • Reporte • Autoevaluación • Fuentes de consulta Además, cuenta con un glosario de terminologías usadas en este documento y un cd con imágenes de los principales parásitos que causan daño a los seres humanos OBJETIVO GENERAL Rediseñar y actualizar el manual de laboratorio de la Experiencia Educativa de Parasitología General, el cual será de apoyo contextualizando los saberes teóricos y de las prácticas. OBJETIVOS ESPECIFICOS • Contar con una guía actualizada para que los alumnos cuenten con información reciente y apegada al plan de estudios de la experiencia educativa. • Que este documento contenga información clara y precisa para alumnos y académicos que tengan acceso a ella. 6 REGLAMENTO DE LOS LABORATORIOS El presente Reglamento es aplicable a todos los laboratorios del departamento de laboratorios de la Unidad de Ciencias de la Salud, zona Xalapa de la Universidad Veracruzana. Su observancia es obligatoria para el personal académico, alumnos, personal manual y administrativo. No excluye otro reglamento que resulte aplicable. DISPOSICIONES GENERALES 1.- El responsable de cada práctica es el maestro. 2.- No se permite a los alumnos trabajar en los laboratorios sin la presencia del maestro. 3.- El equipo de protección personal dentro de los laboratorios y en los anexos de los laboratorios será: ALUMNOS: ▪ Bata de algodón 100 %, de manga larga ▪ Lentes de seguridad durante todo el tiempo que dure la práctica. En caso de lentes graduados, que sean de cristal duro inastillable y uso de protectores laterales. ▪ El pelo recogido en las prácticas que se utilice mechero ▪ Guantes en caso de que la práctica lo exija, a criterio del maestro. ▪ Toalla o lienzo de algodón. Profesor: ▪ Bata de algodón 100 %, de manga larga ▪ Lentes de seguridad durante todo el tiempo que dure la práctica. En caso de lentes graduados, que sean de cristal duro inastillable y uso de protectores laterales. ▪ El pelo recogido en las prácticas que se utilice mechero LOS SERVICIOS 4.- El departamento de laboratorios de la unidad de ciencias de la salud prestara los serviciosa usuarios de conformidad a las siguientes normas: Los C.C. catedráticos deberán: ▪ Respetar sus horarios de entrada y salida. ▪ Permanecer dentro del laboratorio mientras haya alumnos trabajando. ▪ Solicitar con anticipación su material de trabajo, por escrito en las hojas especiales que para ello existen, con un mínimo tiempo de 48 hrs. hábiles. Las hojas de pedido se les proporcionaran en los laboratorios. ▪ Enseñar oportunamente a los alumnos el manejo y cuidado del material, reactivos y equipo que utilicen en la práctica. ▪ Informar a los alumnos sobre el manejo de residuos peligrosos biológico infecciosos. 7 Dentro de los laboratorios alumnos, profesores, personal técnico y manual deben usar: • Portar bata blanca de manga larga y zapatos cerrados. En caso de que las condiciones de la práctica lo requieran, deberá también portar guantes, lentes de protección y/o cubre bocas. • Quedará estrictamente prohibido introducir alimentos al laboratorio. • Mantener el orden y la postura correcta durante toda la práctica • Es obligación del alumno y usuarios de los Laboratorios, limpiar su área de trabajo, colocar los materiales de toma de muestras en los depósitos adecuados y tratar los desechos de residuos biológicos infecciosos y químicos de acuerdo con las indicaciones dadas por el maestro en corresponsabilidad con los técnicos académicos asignados a cada laboratorio. • El alumno queda obligado a cuidar los reactivos, el equipo y el material del que haga uso durante la práctica. • Queda estrictamente prohibido el uso de teléfonos celulares, y reproductores de audio y/o video. • Queda prohibido dejar en las mesas de trabajo objetos innecesarios para la práctica (mochilas, bolsas, laptops, etc.) • Todo residuo peligroso y no peligroso deberá eliminarse en el lugar indicado de acuerdo a la tabla de RPBI. (anexo) • No mover, sustraer, manipular o hacer uso indebido del equipo sin autorización. 8 RECOLECCIÓN, MANEJO Y CONSERVACIÓN DE MUESTRAS BIOLÓGICAS GENERALIDADES En la correcta recolección, manejo y conservación de muestras biológicas es donde radica el éxito o fracaso a diagnósticos confiables de enfermedades parasitarias. Para ello es de gran importancia seguir ciertos lineamientos establecidos para el manejo de estas muestras biológicas. La confiabilidad de los resultados depende del cuidado que se tenga al momento de recolectar la muestra. Por ello se debe tomar en cuenta las siguientes precauciones: 1. Rotular muy bien cada una de las muestras con el nombre del paciente, edad, sexo y fecha de la recolección de la misma. 2. Recolección en cantidad suficiente, para evitar que la muestra se reseque con demasiada rapidez. 3. Uso de un recipiente adecuado para su recolección, estos pueden ser limpio o estériles de boca ancha para facilitar su recolección. 4. Examen de las heces cuando aún están frescas, estas se deben de examinar menos de una hora después de su recolección. RECOLECCION Hay muchas formas de recolectar la muestra, pero la más frecuente es por medio de la expulsión natural y método de raspado con una cucharilla rectal esta última solo es usada en niño. MANEJO Se deben de utilizar frascos limpios de boca ancha, evitar la contaminación de la muestra con orina o agua durante su recolección ya que esto propicia que las muestras sean rechazadas. CONSERVACION Los frascos se guardarán en lugares frescos, pues el calor acelera los fenómenos de fermentación y con frío se pueden destruir los quistes y trofozoítos de protozoos (Goldman y Johnson, 1950; Chang, 1955). Otra forma de conservar muestras de materia fecal es usando químicos esto para conservar más tiempo la muestra y sin correr el riesgo de que las lavar o huevos presentes en las muestras se destruyan. CONSERVADORES Y PRESERVADORES ▪ Solución de formalina* al 10 %. ▪ Solución de formalina al 5%. ▪ Solución de merthiolate-yodo-formaldehído (MIF). ▪ Fijador de fenol alcohol y formol (PAF) 9 PRÁCTICA # 1 MICROSCOPÍA Y MEDICIÓN DE PARÁSITOS Microunidad de competencia: El estudiante identifica las diversas especies parasitarias a través de la morfología microscópica y macroscópica mediante la recolección, observación y conservación de muestras biológicas de manera apropiada en equipos colaborativos. INTRODUCCION: La capacidad del ojo humano es limitada a la hora de estudiar lo pequeño, es por ello que la microscopia es la técnica de producir imágenes visibles de estructuras o detalles pequeños para ser percibidos a simple vista, pero para que esto se logre se debe de tener en cuenta estos tres elementos: ▪ El objeto a estudiar. ▪ Una fuente de iluminación. ▪ Un sistema óptico. Cuando se pretende estudiar alguna célula, órgano o tejido, se deben de definir los aspectos (morfológicos, bioquímicos, fisiológicos, entre otros) que se desean observar, con base a esto se define o elige la técnica de microscopia a seguir junto con la ayuda de instrumentos de medición. MARCO TEORICO La microscopia es el conjunto de técnicas y métodos destinados a ser visibles los objetos de estudio que por su pequeñez están fuera del rango de resolución del ojo normal, el microscopio es el elemento central de la microscopia. Unos de los tipos de microscopia son: • Microscopia de campo oscuro Es una técnica de iluminación especial que se caracteriza en la iluminación oblicua para realzar el contraste en las muestras que no son reflejadas bien bajo condiciones normales de la iluminación del campo claro, observándose partículas que aparecen como puntos brillantes sobre un fondo negro. 10 • Microscopia de contraste de fases se usa principalmente para aumentar el contraste entre las partes claras y oscuras de las células sin colorear. Es ideal para especímenes delgados, o células aisladas. El tipo de iluminación que emplea provoca variaciones en cómo refractan la luz algunos especímenes “invisibles”, haciéndolos visibles, la microscopia de contraste de fases hace posible observar células en estado vivo más fácilmente, ayudando así a evitar la creación de condiciones artificiales tales como las introducidas por la tinción. • Microscopia de fluorescencia Utiliza dispositivos especiales que permiten aprovechar este fenómeno para visualizar estructuras que con otro tipo de microscopio no se puede realizar. • Micrómetro ocular consiste en una placa circular de vidrio que se coloca entre las dos lentes del ocular de Huygens, en el diafragma, que es donde se forma la imagen producida por el objetivo y donde está el foco del ocular. Posee una escala numerada, en este caso del 0 al 10 con 10 divisiones entra cada número. 11 • Micrómetro objetivo tiene forma de portaobjetos, presenta un círculo central con 100 divisiones equidistantes, cada una con un valor de 0,01 mm. Se enfoca como una preparación ordinaria. Material ▪ micrómetro ocular ▪ cámara de Neubauer PROCEDIMIENTO Instructivo para la calibración del microscopio con el micrómetro ocular: a) Descripción de la escala de la cámara de Neubauer: En la cámara de Neubauer hay cuatro secciones marcadas con una L, donde se cuentan los leucocitos y una zona central donde recuentan los eritrocitos. En la figura 1 se señala el tamaño de los diferentes cuadros. El cuadro central de la cámara es la zona de cuenta de eritrocitos, en esta cuadricula mide 1mm (1000 micras como lo indica la figura 1) Figura 1. La cuadricula para cuenta de eritrocitos está dividida en 5 x 5 cuadros y cada una mide 0.2 mm ó 200 micras. A su vez cada cuadro está dividido en 4 x 4 cuadros y cada uno mide 0.05 mm ó 50 micras; a partir de ellos se obtienen los coeficientes micrométricos (C.M). 12 b) Descripción de la escala del micrómetro ocular La escala del micrómetro ocular tiene 10 divisionesgrandes del mismo tamaño, de las cuales de la segunda a la sexta presentan 5 subdivisiones iguales. Para medir una estructura, esta se hará coincidir dentro de la escala, contabilizando las divisiones grandes como cinco y las pequeñas como uno. Mide 100 micrómetros c) Determinación de los coeficientes micrométricos Se deben establecer los coeficientes micrométricos de cada objetivo (10X, 40X, y 100X). Colocar el micrómetro ocular en el orificio izquierdo del microscopio, la cámara de Neubauer en la platina, enfocar con el objetivo de 10X y centrar en el campo la cuadrícula de eritrocitos. Hacer coincidir la escala del micrómetro ocular en la línea media de la cuadricula para hacer cuenta de eritrocitos. Buscar donde una de las divisiones de la escala del micrómetro coincida con el borde de un cuadro de la cámara de Neubauer y establecer los coeficientes micrométricos (C.M) d) Medición de estructuras microscópicas Para determinar el tamaño de una estructura microscópica se deberá hacer coincidir la estructura, en la escala del micrómetro ocular, moviendo la platina. http://images.google.com.mx/imgres?imgurl=http://www.ilustrados.com/publicaciones/multimedia/hu-cre60.gif&imgrefurl=http://www.ilustrados.com/publicaciones/EpZyVkluZEstBSbYoH.php&usg=__OORcqp9528Pn5ZG1SLlzJwpyJ4o=&h=236&w=313&sz=4&hl=es&start=20&um=1&tbnid=hV_4QBnxcHYVmM:&tbnh=88&tbnw=117&prev=/images?q%3Dcamara%2Bde%2Bneubauer%26hl%3Des%26sa%3DN%26um%3D1 13 Una vez que coincida el borde izquierdo de la estructura con una línea, establecer el número de subdivisiones que abarca, contabilizando como 5 las que no tienen subdivisiones y como uno cada uno de las mismas. Calcular la medida de la estructura, en micrómetros, multiplicando el número de subdivisiones por el coeficiente micrométrico del objetivo correspondiente. REPORTE NOMBRE__________________________________________________ Realiza las siguientes actividades • Realiza los cálculos de medición de cada una de las estructuras observadas. • Elabora un esquema a escala de cada una de las estructuras observadas. • Además, realiza la descripción de cada una de estas estructuras. OBSERVACIONES __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ AUTOEVALUACION • Investiga en bibliografía actualizada las características de medición de otras estructuras de los parásitos • Elabora un cuadro comparativo de medidas morfológicas entre diferentes quistes y huevos de parásitos y dibújalas a escala 1:05 Fuentes de consulta • http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/trematodos/ generalidades.php • http://image.slidesharecdn.com/biologa-general-2008-sesin-03-estudio-de- la-biologa-1205964562432550-4/95/biologa-general-2008-sesin-03-estudio- de-la-biologa-22-728.jpg%3Fcb%3D1205939363 • https://es.slideshare.net/yoleida7/partes-del-microscopio-presentation- 647414 http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/trematodos/generalidades.php http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/trematodos/generalidades.php http://image.slidesharecdn.com/biologa-general-2008-sesin-03-estudio-de-la-biologa-1205964562432550-4/95/biologa-general-2008-sesin-03-estudio-de-la-biologa-22-728.jpg%3Fcb%3D1205939363 http://image.slidesharecdn.com/biologa-general-2008-sesin-03-estudio-de-la-biologa-1205964562432550-4/95/biologa-general-2008-sesin-03-estudio-de-la-biologa-22-728.jpg%3Fcb%3D1205939363 http://image.slidesharecdn.com/biologa-general-2008-sesin-03-estudio-de-la-biologa-1205964562432550-4/95/biologa-general-2008-sesin-03-estudio-de-la-biologa-22-728.jpg%3Fcb%3D1205939363 https://es.slideshare.net/yoleida7/partes-del-microscopio-presentation-647414 https://es.slideshare.net/yoleida7/partes-del-microscopio-presentation-647414 14 Capitulo II Principales clases de protozoarios Los protozoarios forman un amplio conjunto de microorganismos constituidos por una sola unidad estructural semejante a una célula, a los cuales los zoólogos sitúan dentro del subreino o Phylum Protozoa, por razones de conveniencia, todos estos organismos se llaman “unicelulares”, aunque muchos Protozoologos prefieren considerarlos como “acelulares”, debido a la unidad de que están formados los protozoarios realizan todas las funciones esenciales para la vida. Manwell (1961) señala que “los protozoarios compiten con cualquiera en el reino animal de manera única. Si pudieran ser aumentados al tamaño de los vertebrados con los que estamos familiarizados, algunos infundirían verdadero terror”. La unidad simple de que están formados la mayoría de los protozoarios varía mucho en dimensiones y forma, lo que depende principalmente del grupo de microorganismo a que pertenecen, si bien es cierto que entre los protozoarios existen diferencias notables en dimensiones y formas, tienen ciertas estructuras fundamentales (organelos) comunes a todo el grupo. La más importante es el núcleo relativamente viscoso, que contiene los cromosomas esenciales para la vida, reproducción y transmisión de los caracteres genéticos del organismo. El Phylum o rama Protozoa se divide en varias clases, cuatro de los cuales incluyen parásitos del hombre. En el cuadro 1.1, que se explica por sí solo, se anotan las características más sobresalientes de estas cuatro clases. En el cuadro 2.2 se presenta la clasificación de los géneros de interés médico. Cuadro 1.1 características diferenciales entre las clases de protozoarios parásitos del hombre. Clase Mastigophora Sarcodina Sporozoa Ciliata organelos de locomoción Flagelos Seudópodos Ausente Cilios Núcleo Único, compacto Único, vesicular Único, o simple Micro y macro núcleo Reproducción División binaria División binaria Esquizogonia Esquizogonia sexuada División binaria conjugación Forma de resistencia A veces quiste Quiste Ooquistes Quiste Especies parasitarias Algunas Algunas Todas Muy pocas 15 Cuadro 1.2 Principales clases y géneros de protozoarios de importancia médica para el hombre. Clase Genero Mastigophora • Tripanosoma • Leishmania • Trichomonas • Giardia Sarcodina • Entamoeba • Endolimax • Iodomoeba • Dientamoeba Sporozoa • Isospora • Toxoplasma • Plasmodium • Sarcocystis Ciliata • Balantidium 16 PRÁCTICA #2 Sarcodina MICROUNIDAD DE COMPETENCIA: El estudiante identifica taxonómicamente los parásitos del Phylum Sarcodina a través de sus características morfológicas utilizando técnicas CPS directo por medio de la observación al microscopio con responsabilidad MARCO TEÓRICO Subphylum Sarcodina; Schmarda,1871. Seudópodos o material protoplásmico locomotor sin seudópodos bien definidos; los flagelos, cuando existen, suelen limitarse a los estadios evolutivos o a otras fases temporales. Este subphylum se caracteriza por incluir microorganismos de una sola célula, a la cual se le observa fácilmente el citoplasma dividido en dos partes, una externa hialina denominada ectoplasma, cuyas prolongaciones forman los seudópodos que permiten el desplazamiento de la amiba. Se reproducen asexualmente por fisión binaria transversa y durante su ciclo de vida (ciclo biológico) pasan por los estadios de quiste y trofozoíto. Trofozoíto: es el estadio trófico, realiza todas las funciones celulares, y produce el daño al hospedero, por tanto, es el estadio clínicamente importante, este estadio suele presentar un tamaño de entre 10 y 60 µm, en fresco presenta movilidad progresiva, el núcleo mide de 3-5 µm de diámetro (no se aprecia sin teñir),la cromatina perinuclear está constituida por finos gránulos, el citoplasma presenta un aspecto granular. 17 Quiste: es el estadio epidemiológicamente importante, porque es la forma infectante del parásito y la encargada de diseminar la infección, cuando los trofozoítos van a transformarse en quistes expulsan todo el material ingerido y se redondean, estas formas prequistica se reconocen por la presencia de un único núcleo redondeado, los quistes tienen pared lisa y uniforme, son esféricos, subesfericos o alargados. Dentro del subphylum Sarcodina se encuentran tres géneros de importancia médica, dicha clasificación se hace con base en la morfología del núcleo. 1- Género Entamoeba Poseen un núcleo más o menos esférico con membrana nuclear clara, definida, revestida con gránulos de cromatina y un cariosoma pequeño situado en el centro o cerca del mismo, del cual se desprenden unas fibrillas acromáticas (no se tiñen), que lo unen a la membrana nuclear. A este género pertenecen cinco especies: a-Entamoeba histolytica b-Entamoeba dispar c-Entamoeba coli d-Entamoeba hartmani http://medicina.udea.edu.co/parasitologia/Sarcodina.html#hd http://medicina.udea.edu.co/parasitologia/Sarcodina.html#hd http://medicina.udea.edu.co/parasitologia/Sarcodina.html#hd http://medicina.udea.edu.co/parasitologia/Sarcodina.html#coli http://medicina.udea.edu.co/parasitologia/Sarcodina.html#hartmani 18 2- Género Endolimax Tiene un núcleo diminuto, esférico o casi esférico, con un cariosoma evidente e irregular y de situación central o excéntrico, del cual se desprenden unas fibrillas acromáticas que lo unen a la membrana nuclear. La especie que parasita al hombre es la Endolimax nana Quiste trofozoíto 3- Género Iodomoeba Posee un núcleo esférico o casi esférico, con un cariosoma grande rico en cromatina, de posición central o ligeramente excéntrico, envuelto por una masa de glóbulos acromáticos, de los cuales se desprende una red bastante tupida de fibrillas acromática que se extienden hasta la membrana nuclear. Quiste trofozoíto MATERIAL: • Portaobjetos • Cubreobjetos • Pipetas Pasteur • Microscopio compuesto • Aplicadores de madera o palillos. • La muestra utilizada es tan pequeña, que es poco representativa http://medicina.udea.edu.co/parasitologia/Sarcodina.html#endolimax http://medicina.udea.edu.co/parasitologia/Sarcodina.html#iodamoeba 19 REACTIVOS: • Sol. Salina fisiológica • agua destilada • yodo cristaloide • yoduro de potasio PROCEDIMIENTO 1. En un portaobjeto se colocan, separadamente, una gota de solución salina y otra de lugol. 2. Con el aplicador de madera, se toma una muestra de 1 a 4 mg de heces y se mezcla con la solución salina. 3. Con el mismo aplicador se retiran las fibras y otros fragmentos gruesos. 4. Se coloca el cubreobjetos. Se efectúa la misma operación en la gota del lugol y se observa REPORTE Nombre:__________________________________________________________ OBSERVACIONES RESULTADOS __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ ____________________________ 20 CONCLUSIONES __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ _____________________ AUTOEVALUACIÓN • Realiza un cuadro comparativo, describiendo las diferencias entre un trofozoíto y un quiste. • Realizar un dibujo a escala de lo observado al microscopio. REFERENCIAS • http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/Amebas%20intestinal es%20no%20patogenas_2011.pdf. • http://www.fcnym.unlp.edu.ar/catedras/parasitologia_general/pdf/Tp2.pdf. • http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/Parasitologia%20%28Farmacia%29 http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/Amebas%20intestinales%20no%20patogenas_2011.pdf http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/Amebas%20intestinales%20no%20patogenas_2011.pdf http://www.fcnym.unlp.edu.ar/catedras/parasitologia_general/pdf/Tp2.pdf http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/Parasitologia%20%28Farmacia%29 21 Practica # 3 Mastigophora Microunidad de competencia El estudiante identifica taxonómicamente los parásitos del Phylum Mastigophora, a través de sus características morfológicas con ayuda del microscopio con responsabilidad y en trabajo colaborativo. MARCO TEORICO Phylum Mastigophora; Diesing, 1866. Trofozoítos que poseen típicamente uno o más flagelos; reproducción asexual básicamente por fisión binaria longitudinal, poseen organelos separadas por membrana y citoesqueleto. Los flagelados que parasitan al hombre pertenecen a la clase Zoomastigophorea, grupo en el que se encuentran los flagelados que no tienen cloroplastos. Dentro de esta clase hay cuatro órdenes de importancia médica. Presenta cuatro formas distintas de involución: amastigota, promastigota, epimastigota y tripomastigota. • Amastigota: esférico u ovalado, es la forma reproductiva en el interior de las células mamíferas (principalmente en células musculares y nerviosas). • Promastigote: con el flagelo anterior al núcleo, libre del cuerpo de la célula. • Epimastigota: alargado y con el Cinetoplasto localizado anteriormente al núcleo, es la forma reproductiva en el tracto digestivo de los invertebrados y en medio de cultivos. • Tripomastigota: también alargado, pero con el Cinetoplasto localizado posteriormente al núcleo. Se encuentra en la sangre de los mamíferos y es la forma infectante de ellos. Esta forma no se divide. 22 a) b) c) 1. Tripanosoma Las especies de este género presentan las fases de Amastigote, Promastigote, Epimastigote y Tripomastigote durante su ciclo vital. (ejemplo Trypanosoma cruzi) y tiene típicamente huéspedes vertebrados e invertebrados. Tripanosoma cruzi utiliza como transmisor biológico a chinches pertenecientes a la familia Triatomidae. 2. Leishmania Este género fue establecido por Ross, en 1903, las especies de este género tienen un núcleo, un Cinetoplasto y un axonema, y en la fase de Promastigote un solo flagelo sale del axonema sin formar membrana ondulante. El principal vector de infección son los mosquitos de los géneros Phlebotomus (en Eurasia y África) y Lutzomya (en América). 3. Trichomonas Wenyon, 1926 los trofozoítos típicos de este género tienen cuatro flagelos libres y un quinto a lo largo del borde externo de la membrana ondulante y un axostilo bien visible. En el hombre se encuentran tres especies: • Trichomonas tenax • Trichomonas hominis • Trichomonas vaginalis a) Trichomonas vaginalis, b) Trichomonas tenax y c) Trichomonas hominis. https://es.wikipedia.org/wiki/Mosquito https://es.wikipedia.org/wiki/Phlebotomus 23 4. Giardia Giardia lamblia (Stile,1915), habitan en el intestino delgado, la enfermedad que producen es Giardiasis que puede llegar a producir síndrome de mala absorción intestinal. Las formas en que se observa a través de él examen directo son trofozoítos y quistes. Material ▪ Materia Biológico (Heces) ▪ Abatelenguas ▪ Lugol(ver miscelánea de reactivos) ▪ Aplicador de madera ▪ Cubreobjetos ▪ Portaobjetos ▪ Microscopio ▪ laminillas fijas y teñidas de Leishmania, Trichomonas y Toxoplasma. Reactivos ▪ NaCl 0.85 % ▪ Formaldehído al 10 % (ver miscelánea de reactivos) PROCEDIMIENTO 1. En un portaobjeto se colocan, separadamente, una gota de solución salina y otra de lugol. 2. Con el aplicador de madera, se toma una muestra de 1 a 4 mg de heces y se mezcla con la solución salina. 3. Con el mismo aplicador se retiran las fibras y otros fragmentos gruesos. 4. Se coloca el cubreobjetos. 5. Observar al microscopio en 10x y 40x. Para las laminillas fijas 1. observar en 40x cada una de ellas. 2. Cambiar 3. Realizar el reporte de lo observado, anotando los estadios morfológicos observados en las muestras al microscopio junto con su esquema. 24 REPORTE NOMBRE__________________________________________________ OBSERVACIONES RESULTADOS __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ AUTOEVALUACION • Realiza un esquema donde describas el ciclo biológico del tripanosoma cruzi. • Dibuja a escala lo observado al microscopio. • Realiza un cuadro comparativo indicando características importantes de los diferentes géneros de la clase Mastigophora. FUENTES DE CONSULTA ▪ http://farmasil.tripod.com/TEMA14.htm ▪ http://www.fcnym.unlp.edu.ar/catedras/parasitologia_general/pdf/Tp2.pdf ▪ http://repositorio.continental.edu.pe/bitstream/continental/3340/1/DO_FCS_ 508_GL_UC0640_2017.pdf http://farmasil.tripod.com/TEMA14.htm http://www.fcnym.unlp.edu.ar/catedras/parasitologia_general/pdf/Tp2.pdf http://repositorio.continental.edu.pe/bitstream/continental/3340/1/DO_FCS_508_GL_UC0640_2017.pdf http://repositorio.continental.edu.pe/bitstream/continental/3340/1/DO_FCS_508_GL_UC0640_2017.pdf 25 PRÁCTICA # 4 Ciliata Microunidad de competencia El estudiante clasifica e identifica taxonómicamente los parásitos de acuerdo al Phylum Ciliata a través de sus características morfológicas utilizando técnicas CPS directos con responsabilidad y trabajo colaborativo. MARCO TEORICO Los protozoos ciliados constituyen un grupo muy numeroso, aproximadamente 8.000 especies, aunque solo una es patógena para el ser humano Balantidium coli, habita en el intestino grueso, la enfermedad que produce es Balantidiasis, puede llegar a producir un cuadro de disentería. El Balantidium coli presenta dos fases en su ciclo biológico: trofozoíto y quiste. Trofozoíto: su identificación en materia fecal es fácil debido a su gran tamaño (50- 100 µm de longitud y 40- 70 µm de anchura) ovalado o periforme y está rodeado por cilios cortos. Quiste son esféricos, de 4 a 75 µm, la pared quística es doble, gruesa y transparente. Este organismo fácilmente se enquista. MATERIAL ▪ Materia Biológico (Heces) ▪ Abatelenguas ▪ Aplicador de madera ▪ Cubreobjetos ▪ Portaobjetos ▪ Microscopio REACTIVOS ▪ Formaldehído al 10 % (ver miscelánea de reactivos) ▪ Lugol (ver miscelánea de reactivos) ▪ NaCl 0.85 % (ver miscelánea de reactivos) 26 PROCEDIMIENTO Coproparasitoscópico microscópico directo: 1. En un portaobjeto se colocan, separadamente, una gota de solución salina y otra de lugol. 2. Con el aplicador de madera, se toma una muestra de 1 a 4 mg de heces y se mezcla con la solución salina. 3. Con el mismo aplicador se retiran las fibras y otros fragmentos gruesos. 4. Se coloca el cubreobjetos. 5. Observar al microscopio en 10x y 40x. Para las laminillas fijas 1 Observar en 40x cada una de ellas. 2 Cambiar 3 Realizar el reporte de lo observado, anotando los estadios morfológicos observados en las muestras al microscopio junto con su esquema. REPORTE Nombre: ______________________________________________________ OBSERVACIONES RESULTADOS __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ 27 AUTOEVALUCION • Leer dos artículos sobre Balantidium coli y realizar una síntesis. • Esquematiza el mecanismo de infección de Balantidiasis. FUENTES DE CONSULTA ▪ http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/introduccion-a-la-protozologia- clinica-i/contenidos/Unidad%205%20Ciliados.pdf (consultado 6 de abril 2017) ▪ http://catarina.udlap.mx/u_dl_a/tales/documentos/lqf/hinojosa_s_le/capitulo5 .pdf ▪ http://parasitologiajmv-hilda.blogspot.mx/2010/09/protozooarios-parasitos- balantidium.html http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/introduccion-a-la-protozologia-clinica-i/contenidos/Unidad%205%20Ciliados.pdf http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/introduccion-a-la-protozologia-clinica-i/contenidos/Unidad%205%20Ciliados.pdf http://parasitologiajmv-hilda.blogspot.mx/2010/09/protozooarios-parasitos-balantidium.html http://parasitologiajmv-hilda.blogspot.mx/2010/09/protozooarios-parasitos-balantidium.html 28 PRÁCTICA # 5 Esporozoa Microunidad de competencia El estudiante identifica a través de la observación al microscopio el Phylum Sporozoa tomando como base criterios morfológicos ,con responsabilidad. MARCO TEORICO Se caracterizan por tener complejo apical, compuesto por conoide, anillo polar, rhoptrias, micronemas y microporos, cuya función es secretar moléculas indispensables para el reconocimiento, adherencia e invasión de los Esporozoito y merozoitos a la célula blanco. Son parásitos que carecen de estructura locomotora. Se reproducen por división múltiple. Pueden ser parásitos intracelulares, pero también encontrarse fuera de las células. El ciclo vital es complejo. En términos generales, implica generaciones sexuales y asexuales, y a veces dos huéspedes. la mayoría de los protozoos Apicomplexa de importancia patógena para el ser humano pertenecen a la subclase Coccidia, nombre con el que se les conoce comúnmente. Los coccidios que habitan en el intestino son parásitos acido alcohol resistente durante su ciclo de vida producen ooquistes, este estadio es de pared gruesa y resistente, siendo este la forma infectante de parasito. ❖ Isospora: Morfología: Los ooquistes son estructuras ovaladas que poseen una cubierta transparente, y en el interior se observa según en el estado en que se encuentre, uno o dos esporoblastos o la presencia de trofozoítos. Diagnóstico clínico: Mediante el análisis de una muestra de heces fecales y se examina al microscopio 29 ❖ Plasmodium: Morfología: Microscópicamente, el glóbulo rojo parasitado es dos veces mayor que una célula normal, ligeramente rosados con punteados citoplasmáticos. El parásito internalizado tiene una forma irregular, descrito como ameboide. Diagnóstico clínico: se confirma obteniendo dos gotas de sangre del pulpejo de un dedo, tiñéndolas con un colorante y mirándolas al microscopio ❖ Toxoplasma: Morfología: Es un protozoo que mide 4 a 8 µm de largo por 2 a 4 µm de ancho, tiene forma de media luna con un extremo aguzado y el otro romo, durante su ciclo biológico el protozoo adopta esta forma de medialuna, puede tres fases que son de ooquiste, bradizoito y traquizoito. Diagnóstico clínico: La toxoplasmosis puede ser diagnosticada al aislar el parásito por medio de inoculación de animales de laboratorio o cultivo celular o con un perfil serológico MATERIAL ▪ Materia Biológico(Heces) ▪ Abatelenguas ▪ Aplicador de madera ▪ Cubreobjetos ▪ Portaobjetos ▪ Microscopio ▪ Laminillas fijas y teñidas del genero Plasmodium y toxoplasma REACTIVOS ▪ Formaldehído al 10 % (ver miscelánea de reactivos) ▪ Lugol (ver miscelánea de reactivos) ▪ NaCl 0.85 % (ver miscelánea de reactivos) 30 PROCEDIMIENTO Coproparasitoscópico microscópico directo: 1. En un portaobjeto se colocan, separadamente, una gota de solución salina y otra de lugol. 2. Con el aplicador de madera, se toma una muestra de 1 a 4 mg de heces de porcino y se mezcla con la solución salina. 3. Con el mismo aplicador se retiran las fibras y otros fragmentos gruesos. 4. Se coloca el cubreobjetos. 5. Observar al microscopio en 10x y 40x. Para las laminillas fijas 1. observar en 40x cada una de ellas. 2. Cambiar 3. Realizar el reporte de lo observado, anotando los estadios morfológicos observados en las muestras al microscopio junto con su esquema. REPORTE Nombre: ______________________________________________________ OBSERVACIONES RESULTADOS __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ AUTOEVALUACION ▪ Describe el ciclo biológico del Plasmodium y toxoplasma. ▪ Elabora un cuadro comparativo de estos donde expreses: a) La imagen del parasito b) Las fases en las que se encuentra c) Las diferentes especies. FUENTES DE CONSULTA ▪ http://medicina.udea.edu.co/parasitologia/Apicomplexa.html ▪ http://practicasdeparasitos.blogspot.mx/2014/11/practicas-del-laboratorio- de.html ▪ http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/Parasitologia_2017.p df http://medicina.udea.edu.co/parasitologia/Apicomplexa.html http://practicasdeparasitos.blogspot.mx/2014/11/practicas-del-laboratorio-de.html http://practicasdeparasitos.blogspot.mx/2014/11/practicas-del-laboratorio-de.html http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/Parasitologia_2017.pdf http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/Parasitologia_2017.pdf 31 Capitulo III HELMINTOS Principales clases de Helmintos Los helmintos son metazoos planos y cilíndricos, se encuentran en el humano principalmente en el aparato digestivo; son un grupo de gusanos que la única característica que comparten, aparte de ser gusanos y ser invertebrados, es que son parásitos del hombre. Los metazoarios o helmintos son mucho más complejos que los protozoos, sus células se agrupan formando órganos y tejidos; se reproducen sexualmente pudiendo ser hermafroditas o presentar sexos separados. Los helmintos incluyen dos Phylum o clases: 1. Platelmintos: gusanos de cuerpo plano, entre los que se incluyen: ❖ Nematelmintos o Nemátodos: son gusanos cilíndricos, tienen sexos separados. Su cuerpo está recubierto por una cutícula, con cavidad pseudocelómica, tubo digestivo completo que se inicia en la boca y termina en el ano. La boca está rodeada por tres labios, salvo en las uncinarias que presentan una cápsula bucal con elementos cortantes; estas estructuras producen pequeños pero múltiples traumas en la mucosa intestinal que contribuyen a la producción de la anemia macrocítica que suele asociarse a estas parasitosis. Los huevos tienen diferentes características que son útiles para el diagnóstico de las diversas especies. Del huevo se liberará una larva, en el tubo digestivo o en el medio ambiente. Los estadios larvarios son varios y se producen mudas entre estadio y estadio. El hombre se infecta por vía oral, como en el caso de Áscaris lumbricoides, por vía cutánea, como en el caso de las uncinarias o por vía parenteral, como por ejemplo las filarias. Sólo unas pocas especies son parásitos del hombre y existen, a diferencia de los Céstodos y Tremátodos, muchos nematodos de vida libre. 32 ❖ Tremátodos: a excepción del género Schistosoma, también son hermafroditas y su cuerpo es chato pero indiviso. El estadio adulto es parásito de vertebrados, está cubierto por una cutícula resistente y presentan discos suctorios, órganos de fijación, en la cara ventral. Poseen un tubo digestivo incompleto que se inicia en la boca, llamada citostoma. Poseen un poro genital por donde se eliminan los huevos. El ciclo evolutivo es indirecto y cumplen parte de él en el agua. Los huevos, a excepción del género Schistosoma, presentan un opérculo por el que se libera la larva, denominada miracidio. El primer huésped intermediario es un molusco, puede haber un segundo huésped intermediario dependiendo de la especie. ❖ Cestodos: son hermafroditas, tienen el cuerpo plano y segmentado, y cuando parasitan al hombre en su estadio adulto, se ubican en intestino delgado. El órgano de fijación es el escólex, provisto de estructuras especialmente adaptadas para esta función, estas pueden ser ventosas y bótrides o ganchos. Del escólex surge un cuello del que se genera el cuerpo, por brotación, constituido por segmentos, denominados proglótidas. Cada proglótidas es una unidad funcional completa; a medida que se alejan del cuello van madurando, denominándose a los más distantes proglótidas maduros. En ellos el útero ocupa casi su totalidad y se encuentran repletos de huevos, los que se liberarán al romperse los segmentos. Se los conoce como Tenias por ejemplo Taenia saginata, Taenia solium, Echinococcus granulosus. 33 PRÁCTICA # 6 Nematodos parte 1 características morfológicas del verme adulto. MICROUNIDAD DE COMPETENCIA El estudiante realiza de forma responsable la observación a través del estereoscopio las estructuras parasitarias de vermes adultos diferenciando hembra y macho, de los diferentes géneros pertenecientes al este Phylum de los nematodos. MARCO TEORICO Es uno de los Phylum más ricos en especies en la naturaleza, muchos son de vida libre y otros son parásitos de plantas y animales vertebrados, son los metazoos parásitos más significativamente asociados al hombre. Los nematodos son cilíndricos y alargados, con simetría bilateral primitiva, los nematodos no tienen músculos circulares, se mueven mediante cambios sinuosos e sus cuerpos, lenta o rápidamente, a veces con movimientos en forma de 8. Todos los nematodos parásitos del hombre tienen sexo separado, tubo digestivo completo en ano, el macho suele ser más pequeño que la hembra. ❖ Algunos géneros de importancia medica ▪ Uncinarias (Ancylostoma duodenal, Strongyloides estercolaris, Necator americano) ▪ Áscaris lumbricoides ▪ Trichuris trichiura ▪ Enterobius vermicularis ▪ Trichinella spiralis ➢ Uncinarias ▪ Ancylostoma duodenal Es una especie parasitaria del filo de los nematodos causante de una de las parasitosis más prevalentes en el mundo, causante de la anquilostomiasis en el hombre. es un gusano redondo, no mayor a 2 cm de largo. Como el resto de los nematodos son organismos con sexos separados. Carecen de labios pero la boca está provista de una cápsula con cuatro ganchos o dientes cortantes con las que se adhiere a las vellosidades de la mucosa del intestino. Hay dos tipos de larvas: https://es.wikipedia.org/wiki/Gusano https://es.wikipedia.org/wiki/Cent%C3%ADmetro https://es.wikipedia.org/wiki/Nematoda https://es.wikipedia.org/wiki/Ser_vivo https://es.wikipedia.org/wiki/Sexo https://es.wikipedia.org/wiki/Labio https://es.wikipedia.org/wiki/Boca https://es.wikipedia.org/wiki/Diente https://es.wikipedia.org/wiki/Mucosa https://es.wikipedia.org/wiki/Intestino 34 a) Hembra de vida libre b) macho de vida libre c) hembra parasitada ▪ Rabditiforme: De aproximadamente 300 μm x 17 μm. Son redondeadas en el extremo bucal con una abertura que se comunica con un esófago y un bulbo digestivo. ▪ Filariformes: del doble del largo (unos 500 μm). - El esófago cubre 1/3 parte de la extensión del cuerpoy la cola con terminación puntiaguda ▪ Strongyloides stercolaris Es un geohelminto que se localiza en el intestino delgado en el humano, el huésped principal, este parásito facultativo tiene cuerpo filiforme, esófago recto y extremo posterior aguzado. La hembra parásita mide 2 mm de longitud. Las larvas filariformes, formas infectivas, miden alrededor de 600 µm de longitud, tienen esófago recto y extremo posterior ligeramente bifurcado, en tanto que las larvas rabditoides, formas diagnósticas, tienen menor tamaño y bulbo esofágico prominente. Los huevos inmersos en la submucosa del intestino delgado son ovalados y miden alrededor de 50 µm de longitud, la hembra y macho de vida libre presentan bulbo esofágico evidente; la primera mide 1 mm de longitud. ▪ Áscaris lumbricoides Es un nematodo parásito del intestino delgado del hombre, constituye un problema de salud pública en situaciones con condiciones higiénicas inadecuadas del agua y alimentos. Los individuos de Áscaris lumbricoides son cilíndricos con extremos puntiagudos, con una longitud que va desde 15 cm y que pueden alcanzar los 50 cm, su coloración rosado claro-nacarado y poseen tres labios gruesos (uno ventral y dos dorsos laterales) en su extremidad anterior. https://es.wikipedia.org/wiki/Micr%C3%B3metro_(unidad_de_longitud) https://es.wikipedia.org/wiki/Es%C3%B3fago https://es.wikipedia.org/wiki/Es%C3%B3fago https://es.wikipedia.org/wiki/Nematodo https://es.wikipedia.org/wiki/Par%C3%A1sito https://es.wikipedia.org/wiki/Intestino_delgado https://es.wikipedia.org/wiki/Homo_sapiens 35 ▪ Trichuris trichiura Es una especie parásita de nematodo del orden Trichurida, agente causal de la parasitosis conocida como tricuriasis. Conocido también como gusano látigo, por su parte anterior muy delgada y su parte posterior más ancha, como el mango. Se trata de gusanos alargados, miden de 3 a 5 cm, con el extremo anterior delgado que ocupa 3/5 del parásito. Presentan un esófago con la porción anterior muscular con una cutícula en la parte superior, en la parte posterior se encuentra la glándula basilar rodeado del esticosoma, conformado de esticocitos con funciones secretoras. Presentan dimorfismo sexual; la hembra tiene el extremo posterior recto, la vulva se encuentra en la intersección del extremo anterior con el posterior; los huevos que pone tienen forma de limón; el macho tiene el extremo posterior en forma de espiral con una espícula copulatriz, testículos, vasos eferentes y glándulas seminales. ▪ Trichinella spiralis Es una especie de Nematoda de la clase Adenophorea que produce una enfermedad conocida como triquinelosis, triquinosis o triquiniasis. El adulto hembra mide de 2.2 a 3.5 mm; y el macho de1.2 a 1.6 mm; las larvas vivíparas miden 100 μm; y los quistes 250-500 μm. MATERIAL • estereoscopio • Aplicadores de madera • Muestra de parásitos adultos • Cajas Petri • Pinzas • Agujas para disección https://es.wikipedia.org/wiki/Especie https://es.wikipedia.org/wiki/Par%C3%A1sita https://es.wikipedia.org/wiki/Nematodo https://es.wikipedia.org/wiki/Orden_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Trichurida https://es.wikipedia.org/wiki/Parasitosis https://es.wikipedia.org/wiki/Tricuriasis https://es.wikipedia.org/wiki/Gusano https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Esticosoma&action=edit&redlink=1 https://es.wikipedia.org/wiki/Dimorfismo_sexual https://es.wikipedia.org/wiki/Esp%C3%ADcula https://es.wikipedia.org/wiki/Especie https://es.wikipedia.org/wiki/Nematoda https://es.wikipedia.org/wiki/Clase_(biolog%C3%ADa) https://es.wikipedia.org/wiki/Adenophorea https://es.wikipedia.org/wiki/Triquinelosis https://es.wikipedia.org/wiki/Micr%C3%B3metro_(unidad_de_longitud) 36 REACTIVOS • Sol. Salina PROCEDIMIENTO Método 1.- Colocar en una caja de Petri el espécimen biológico del verme a observar. 2.- Realizar las mediciones de longitud del diámetro del espécimen 3.- identificar las características de la boca, cola cloaca y órganos reproductores. 4.- Anotar características del color, textura, pigmentación y aquellas que consideres importantes para identificación del espécimen. 5.- Realiza tus esquemas y anotaciones en tu reporte. REPORTE Nombre:__________________________________________________________ OBSERVACIONES RESULTADOS __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ AUTOEVALUACION 37 ▪ Explica el ciclo biológico de los nematodos en general.(mapa conceptual, dibujos etc.) ▪ Realiza un cuadro comparativo con las características principales de los nematodos de importancia medica. • Coloca en el paréntesis el número que corresponda. Referencias ▪ http://www.medigraphic.com/pdfs/gaceta/gm-2011/gm114c.pdf ▪ http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/toxoplasmo sis.html ▪ http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-2008/myl087-8c.pdf 1: abertura bucal; 2: intestino; 3: abertura cloacal; 4: órgano excretor; 5: testículo; 6: anillo nervioso peri faríngeo; 7: cordón nervioso dorsal; 8: cordón nervioso ventral; 9: poro excretor ( ) abertura bucal; ( ); cordón nervioso dorsal ( ): intestino ( )órgano excretor; ( ) testículo; ( ) abertura cloacal ( )peri faríngeo; ( ) anillo nervioso ( ) poro excretor ( )cordón nervioso ventral http://www.medigraphic.com/pdfs/gaceta/gm-2011/gm114c.pdf http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/toxoplasmosis.html http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/toxoplasmosis.html http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-2008/myl087-8c.pdf 38 PRÁCTICA # 7 Nematodos parte 2 características morfológicas del estadio infectante Microunidad de competencia El estudiante por medio de métodos de tinción apropiados, realiza extendidos sanguíneos en trabajo colaborativo, así mismo identificara las diferencias y similitudes de las fases de los protozoos con ayuda del microscopio. MARCO TEORICO El Phylum Nematoda son parásitos de forma cilíndrica de tamaño variable, está constituidos por tres capas, cutícula, hipodermis y muscular. La cutícula es la capa más externa, la cual reviste el estomodeo, son organismos totalmente acuáticos, existen especies de vida libre, marinas, en el suelo. Los nematodos se puede encontrar dos tipos de ciclo de vida: Ciclo directo: cuando los parásitos se encuentran libres en el ambiente, su desarrollo es dentro del huevo o al salir de ellos. Ciclo indirecto: Cuando las larvas infectivas se desarrollan hasta la etapa infectiva en el interior del huésped intermediario; con la intermediación de otros huéspedes siendo en ocasiones él mismo. Material ▪ Materia Biológico (Heces, Viales positivo proporcionados por el catedrático) ▪ Abatelenguas ▪ Aplicador de madera ▪ Cubreobjetos ▪ Portaobjetos ▪ Microscopio ▪ Laminillas permanentes de las diversas especies. REACTIVOS ▪ Formaldehído al 10 % (ver miscelánea de reactivos) ▪ Lugol (ver miscelánea de reactivos) ▪ NaCl 0.85 % (ver miscelánea de reactivos) https://es.wikipedia.org/wiki/Larvas https://es.wikipedia.org/wiki/Hu%C3%A9sped 39 PROCEDIMIENTO 1. En un portaobjeto se colocan, separadamente, una gota de solución salina y otra de lugol. 2. Con el aplicador de madera, se toma una muestra de 1 a 4 mg de heces y se mezcla con la solución salina. 3. Con el mismo aplicador se retiran las fibras y otros fragmentos gruesos.4. Se coloca el cubreobjetos. 5. Observar al microscopio en 10x y 40x. Para las laminillas fijas 1. observar en 40x cada una de ellas. 2. Cambiar 3. Realizar el reporte de lo observado, anotando los estadios morfológicos observados en las muestras al microscopio junto con su esquema. REPORTE Nombre:__________________________________________________________ OBSERVACIONES AUTOEVALUACION ▪ Dibuja un huevo de los nematodo de importancia medica en su estadio infectante y escribe el nombre de cada una de sus partes. Referencias • http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/Parasitologia%20%28Farmacia%29 • De Haro Arteaga I., Salazar Schettino P., Cabrera Bravo M. (1995) “Diagnostico Morfológico de las Parasitosis” Editorial Méndez Editores. Segunda edición • http://www.parasitologia.blogcindario.com/2007/05/00001-parasitologia.html - 63k http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/Parasitologia%20%28Farmacia%29 40 PRÁCTICA # 8 Tremátodos parte 1 características del verme adulto Microunidad de competencia . El estudiante obtiene, maneja y conserva muestras biológicas para su posterior análisis microscópico y/o macroscópico, con seguridad y autorreflexión MARCO TEORICO Los trematodos son gusanos aplanados no segmentados. Son hermafroditas y están provistos de tubo digestivo ramificado, pero no tienen ano, si no que el tubo digestivo termina en varios ciegos. El hombre funciona como huésped definitivo de varios trematodos; los huéspedes intermediarios funcionan como transmisores, en México la más importante es Fasciola hepática MATERIAL ▪ Materia Biológico (Heces, Viales positivo proporcionados por el catedrático) ▪ Abatelenguas ▪ Aplicador de madera ▪ Cubreobjetos ▪ Portaobjetos ▪ Microscopio ▪ Laminillas permanentes de las diversas especies. REACTIVOS ▪ Formaldehído al 10 % (ver miscelánea de reactivos) ▪ Lugol (ver miscelánea de reactivos) ▪ NaCl 0.85 % (ver miscelánea de reactivos) ▪ REPORTE Nombre: __________________________________________________________ 41 OBSERVACIONES RESULTADOS __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ AUTOEVALUACION ▪ Realiza un esquema o dibujo de un trematodo e indica cada una de sus partes. ▪ Describe brevemente su ciclo de vida ▪ ¿Cuáles son las fases en las que se pueden encontrar a los trematodos? FUENTES DE CONSULTA ▪ universidad de salamanca. (2011). introducción a la pro zoología clínica. Consultado 23 de abril 2017, de ocw Sitio web: http://ocw.usal.es/ciencias- biosanitarias/introduccion-a-la-protozoologia-clinica-ii-filos-apicomplexa-y- microsporidia ▪ Departamento de microbiología y parasitología. (2017). parasitología. Consultado el 15 abril 2017, de universidad autónoma de México Sitio web: http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/Parasitologia_2017.p df ▪ Becerril Flores, Romero Cabello (2004). Parasitología médica de las moléculas a la enfermedad. México, DF: McGraw-hill Interamericana 42 PRÁCTICA # 9 Tremátodos parte 2 características morfológicas del estadio infectante Microunidad de competencia El estudiante observa a través del microscopio las formas parasitarias presentes en la muestra biológica y determina a qué género y especie pertenecen. MARCO TEORICO La delineación morfológica de las especies de trematodos (Rudolphi, 1808) es efectiva para reconocer miles de especies. Sin embargo, la distinción intraespecífica, las variaciones interespecífica, la identificación de fases de especímenes en diferentes ciclos de vida, se han visto enriquecidas con los estudios moleculares a partir de los 1980s. (Blasco-Costa et al., 2016). Clase Trematoda son una clase del filo de gusanos platelmintos, son conocidos comúnmente como duelas, el tamaño de los trematodos varía entre unos centímetros, poseen órganos adhesivos (ventosas, ganchos) que lo fijan al hospedador. Los trematodos se caracterizan por tener un cuerpo no segmentado, con frecuencia en forma de hoja, se les conoce como trematodos digenéticos por tener uno o dos huéspedes intermediarios y un definitivo, los trematodos de importancia medica se ubican en la subclase Digenea, entre ellos los géneros Fasciola, Clonorchis (hígado), Schistosoma (intestino, riñon) y Metagonimus (intestino delgado), Paragonimus (pulmones) MATERIAL ▪ Materia Biológico (Heces, Secreciones, Viales positivo proporcionados por el catedrático) ▪ Abatelenguas ▪ Aplicador de madera ▪ Cubreobjetos ▪ Portaobjetos ▪ Microscopio ▪ Laminillas permanentes de las diversas especies. Reactivos ▪ Formaldehído al 10 % (ver miscelánea de reactivos) ▪ Lugol (ver miscelánea de reactivos) ▪ NaCl 0.85 % (ver miscelánea de reactivos) 43 PROCEDIMIENTO 1.En un portaobjeto se colocan, separadamente, una gota de solución salina y otra de lugol. 2. Con el aplicador de madera, se toma una muestra de 1 a 4 mg de heces y se mezcla con la solución salina. 3. Con el mismo aplicador se retiran las fibras y otros fragmentos gruesos. 4. Se coloca el cubreobjetos. 5. Observar al microscopio en 10x y 40x. Para las laminillas fijas 1. observar en 40x cada una de ellas. 2. Cambiar 3. Realizar el reporte de lo observado, anotando los estadios morfológicos observados en las muestras al microscopio junto con su esquema. REPORTE Nombre: __________________________________________________________ OBSERVACIONES RESULTADOS __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ CONCLUSIONES __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ 44 AUTOEVALUCIÓN • Realiza un cuadro donde clasifiques las fuentes de infección por trematodos. • Esquematiza el ciclo biológico de los trematodos • Busca dos artículos sobre Tremátodos y realiza un resumen y 5 preguntas. Referencias • http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/cestodos.ht ml • https://es.slideshare.net/luisdiegoc1/parasitologa-tema-18-2226- tremtodoscstodos-extraintestinalesnemtodos-extraintestinales-42531101 • http://www.higiene.edu.uy/parasito/teo09/genhel.pdf • http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/introduccion-a-la-protozologia- clinica-i/contenidos/ PRÁCTICA # 10 Cestodo parte 1 características morfológicas del verme adulto http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/cestodos.html http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/cestodos.html https://es.slideshare.net/luisdiegoc1/parasitologa-tema-18-2226-tremtodoscstodos-extraintestinalesnemtodos-extraintestinales-42531101 https://es.slideshare.net/luisdiegoc1/parasitologa-tema-18-2226-tremtodoscstodos-extraintestinalesnemtodos-extraintestinales-42531101 http://www.higiene.edu.uy/parasito/teo09/genhel.pdf http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/introduccion-a-la-protozologia-clinica-i/contenidos/ http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/introduccion-a-la-protozologia-clinica-i/contenidos/ 45 Microunidad de competencia El alumno identificará con responsabilidad y cuidado, las característicasmorfológicas de los céstodos adultos reforzando los conocimientos impartidos en clase teóricas. MARCO TEORICO Clase Cestoidea, subclase Eucestoda constituye importante grupo de gusanos planos del Phylum Platyhelmintes que carecen de boca y aparato digestivo, los cestodos son capaces de infectar al ser humano, se conocen como tenias, son animales invertebrados macroscópicos aplanados en forma de listón. Los cestodos presentan cuerpo alargado, adaptado a la forma tubular del intestino el cual está dividido en tres regiones: Escólex: varia en forma y dimensión; es importante para la identificación de la especie, es un elegante órgano de fijación que puede ser armado (con ganchos) o inertes (sin ganchos). Cuello: situado inmediatamente después del escólex, región de tejido indiferenciado la cual da origen a los ploglótides. Estróbilo: o cadena estrobilar es el conjunto de ploglótides que constituyen la mayor parte del cuerpo del parásito Material • Especímenes de cestodos conservados en formol • Preparaciones teñidas de cestodos PROCEDIMIENTO • Observación de las características morfológicas externas de vermes adultos conservados en frascos • Observación en el microscopio esteroscópico las preparaciones y dibujar los órganos presentes en los proglótides, indicando a qué especie pertenece REPORTE Nombre: __________________________________________________________ OBSERVACIONES 46 RESULTADOS __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ AUTOEVALUACION 1.Revisar la bibliografía acerca de los cestodos adultos y dibujar los patógenos del hombre, indicando los órganos que presentan cada uno de ellos 2. Investigar la prevalencia de infección por cestodos en México en los últimos 5 años Referencias ▪ http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/nematodos- generalidades.html ▪ http://www.higiene.edu.uy/parasito/teo09/genhel.pdf ▪ https://es.slideshare.net/luisdiegoc1/parasitologa-tema-18-2226- tremtodoscstodos-extraintestinalesnemtodos-extraintestinales-42531101 http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/nematodos-generalidades.html http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/nematodos-generalidades.html http://www.higiene.edu.uy/parasito/teo09/genhel.pdf https://es.slideshare.net/luisdiegoc1/parasitologa-tema-18-2226-tremtodoscstodos-extraintestinalesnemtodos-extraintestinales-42531101 https://es.slideshare.net/luisdiegoc1/parasitologa-tema-18-2226-tremtodoscstodos-extraintestinalesnemtodos-extraintestinales-42531101 47 PRÁCTICA # 11 Cestodos parte 2 características de estadios larvarios extraintestinales Microunidad de competencia El alumno identifica las características morfológicas de las larvas extraintestinales de los cestodos con interés cognitivo Marco teórico Los estadíos larvarios extraintestinales) se desarrolla a partir del huevo. Presenta 3 pares de ganchos. Las formas larvarias se consideran de importancia médica debido a que pueden alojarse en tejidos de diferentes sistemas corporales y causar enfermedades graves. El metacéstodo de T. solium causa la cisticercosis; los metacestodos de Echinococcus granulosus y E. multilocularis producen la hidatidosis (quiste hidatídico); la esparganosis en el humano se debe a larvas plerocercoides de cestodos de la familia Diphyllobothriidae, el género Spirometra; la infección se adquiere por ingesta de carne cruda o mal cocida de víboras, ranas y agua tratada inadecuadamente. (Liu et al., 2015). La cisticercosis es una parasitosis de humanos y cerdos causada por el metacéstodo de Taenia solium, el cual presenta el escólex del parásito adulto invaginado en una vesícula. (Silva- Álvarez et al., 2015). Material Presentación en power point de las larvas extraintestinales de Céstodos PROCEDIMIENTO Proyectar la presentación de larvas extraintestinales, revisar y repasar el ciclo biológico de los céstodos, indicando en qué hospederos intermediarios se alojan REPORTE Nombre: __________________________________________________________ OBSERVACIONES 48 RESULTADOS __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ AUTOEVALUACIÓN: 1.Dibujar los estadíos larvarios extraintestinales de una tenia saginata e indicar como los adquiere el hombre FUENTES DE CONSULLTA • http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/introduccion-a-la-protozologia- clinica-i/descargar-curso-completo/view • http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/cestodos.ht ml http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/introduccion-a-la-protozologia-clinica-i/descargar-curso-completo/view http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/introduccion-a-la-protozologia-clinica-i/descargar-curso-completo/view 49 PRÁCTICA # 12 Cestodos parte 3 características morfológicas del estado infectante MICROUNIDAD DE COMPETENCIA El alumno identificará las diversas especies a través de la observación al microscopio tomando como base criterios morfológicos para su diagnóstico clínico con interés cognitivo y responsabilidad. MARCO TEÓRICO Los Cestodos son animales invertebrados, aplanados dorso ventralmente, en forma de cinta por lo que se les denomina Tenias. Todos son parásitos que se localizan en el intestino, estructuras adyacentes o ductos accesorios de animales vertebrados, excepto una especie del orden Pseudophyllidea que es de vida libre. La mayoría son hermafroditas, tienen ciclo de vida heteroxeno, excepto, Hymenolepis nana que presenta ambos tipos de ciclos (Monoxeno y heteroxeno). Durante su ciclo de vida pasan por los estadios de huevo, larva y adulto. Material ▪ Materia Biológico (Heces, Viales positivo proporcionados por el catedrático) ▪ Abatelenguas ▪ Aplicador de madera ▪ Cubreobjetos ▪ Portaobjetos ▪ Microscopio ▪ Laminillas permanentes de las diversas especies. Reactivos ▪ Formaldehído al 10 % (ver miscelánea de reactivos) ▪ Lugol (ver miscelánea de reactivos) ▪ NaCl 0.85 % (ver miscelánea de reactivos) PROCEDIMIENTO 1. En un portaobjeto se colocan, separadamente, una gota de solución salina y otra de lugol. 2. Con el aplicador de madera, se toma una muestra de 1 a 4 mg de heces y se mezcla con la solución salina. 3. Con el mismo aplicador se retiran las fibras y otros fragmentos gruesos. 4. Se coloca el cubreobjetos. 6. Observar al microscopio en 10x y 40x. Para las laminillas fijas 1. observar en 40x cada una de ellas. 50 2. Cambiar 3. Realizar el reporte de lo observado, anotando los estadios morfológicos observados en las muestras al microscopio junto con su esquema. REPORTE Nombre: __________________________________________________________ OBSERVACIONES RESULTADOS __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ AUTOEVALUCION • Realiza un mapa conceptual donde describas las características y clasificación del cestodo. • Buscar y leer un artículo sobre cisticercosis, así como realizar un resumes con preguntas. FUENTES DE CONSULTA • http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/introduccion-a-la-protozologia-clinica-i/descargar-curso-completo/view • http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/trematodos. html. http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/introduccion-a-la-protozologia-clinica-i/descargar-curso-completo/view http://ocw.usal.es/ciencias-biosanitarias/introduccion-a-la-protozologia-clinica-i/descargar-curso-completo/view http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/trematodos.html http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/trematodos.html 51 Capitulo IV Artrópodos. La importancia medica de los artrópodos se deriva, en primer lugar, de que transmiten diversas enfermedades parasitarias entre las características generales de los artrópodos se pueden mencionar que están provistos de patas articuladas y frecuentemente de alas. Los artrópodos presentan sexos separados, tubo digestivo completo y distintos tipos de aparatos bucales, ya que unos están adaptados para picar, otros para lamer o succionar. Su sistema nervioso es bastante desarrollado y consta de una serie de ganglios nerviosos y un sistema de nervios periféricos. Los artrópodos sufren metamorfosis conforme se desarrollan, y pasan por diversos estadios que van desde le huevo hasta el adulto a través de: a. Varias ninfas b. Larvas y ninfas c. Larvas o crisálidas Según la metamorfosis se divide en 4 grupos: 1) Ametabolos: el individuo que sale del huevo es semejante en su forma externa al adulto excepto en su tamaño. 2) Paurometabolos: el individuo que sale del huevo se diferencia del adulto entre otras cosas porque este último tiene alas. 3) Hemimetábolos: el individuo que sale del huevo es totalmente diferente del adulto, pero no hay estadios pupales. 4) Holometábolos: metamorfosis completa e incluye el estado pupal al menos por un estadio. Tipos de artrópodos • Mosquitos Son dípteros de la familia Culicidae tienen alas en forma de raqueta y escamas que se distribuyen en las alas y en el cuerpo. Hay 6 géneros de culícidos, pero para la medicina, los importantes son: ➢ Culex ➢ Anopheles ➢ Aedes ➢ Haemagoggus 52 • Moscas Son dípteros que tienen antenas cortas, de tres segmentos. Cuentan con una gran familia: una de ellas es la Muscidae, que incluye a la mosca doméstica, otra incluye las moscas tsé-tsé del genero Glossina, que transmite el “el mal del sueño” • Triatomas Dentro de este orden de hemípteros solo la subfamilia Triatomidae tiene importancia medica e incluye varios géneros: triatoma, transmiten Trypanosoma cruzi. • Piojos Desde el punto de vista médico, nos interesan dos especies: Ptirus pubis, que se encuentran por lo general en la región púbica y ocasionalmente en axilas o abdomen, y Pediculus humanus alojado en el cabello 53 PRÁCTICA #13 Artrópodos MICROUNIDAD DE COMPETENCIA: El estudiante relaciona las diversas especies parasitarias patógenas al hombre e identifica los vectores a través de la morfología microscópica y macroscópica mediante la recolección, observación y conservación de insectos de manera apropiada en equipos colaborativos. MARCO TEORICO Los miembros del Phylum Artrópoda constituyen el grupo más numeroso de especies en el reino animal; y fuera del hombre, la fuente más importante de enfermedad. La importancia médica del grupo de los artrópodos no se debe tanto al número de especies de parásitos que pueden transmitir, sino a la gran morbilidad y mortalidad producidas por estas enfermedades y a su amplia distribución geográfica. Estas afecciones, desde que se tiene noticia, han sido la causa de enormes pérdidas económicas y muertes en la población humana y han alcanzado en ocasiones proporciones de tipo pandémico. MATERIAL • Estereoscopio • Portaobjetos • Cubreobjetos • Formol al 10% PROCEDIMIENTO 1. Se procede a colocar el insecto en el portaobjetos tapando con el cubreobjetos. 2. Observar en el microscopio estereoscópico, dibujar y describirlo Salto de página REPORTE NOMBRE__________________________________________________ 54 Realiza las siguientes actividades • Realiza los dibujos de cada una de las estructuras observadas. • Investiga a qué clase pertenecen los artrópodos observados • Además, realiza la descripción de cada uno de ellos OBSERVACIONES __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ AUTOEVALUACION • Investiga en bibliografía actualizada las características de los artrópodos observados • Elabora una lista de los artrópodos y los parásitos de los cuales son vectores, indicando si es biológico o fómite FUENTES DE CONSULTA · Chester B.P. et al (1992) Barcelona, 2° ed. Edit Salvat. p.p. 601-775 55 PRACTICA # 14 Tinción y conservación de laminillas preparadas con parásitos MICROUNIDAD DE COMPETENCIA Que el alumno se relacione y aplique las diferentes técnicas de tinción y conservación de laminillas preparadas con diferentes especies de parásitos. INTRODUCCION Las preparaciones teñidas son de utilidad para el diagnóstico de infecciones por protozoos y helmintos, facilitando la búsqueda de los diferentes estadios de protozoo y permitiendo hacer una buena diferenciación de la morfología en helmintos, así también como facilitar la observación de sus estructuras que permiten la identificación morfológica de cada uno, de igual manera a través de las tinciones se puede apreciar parásitos o comensales pequeños, que pasan desapercibidos en otras preparaciones. La tinción se puede realizar de dos formas: • Progresivas: son aquellas en las que se coloca colorante diluido durante un tiempo necesario para lograr una buena tinción hasta la intensidad deseada para poder observar al parasito en sus diferentes fases. • Regresivas: son tinciones en la que se utiliza colorante concentrado hasta lograr una tinción concentrada y posteriormente se hace una decoloración hasta una intensidad adecuada para observar al parasito en sus diferentes fases de vida. PROCEDIMIENTO ❖ Preparaciones efímeras. Son fáciles rápidas y útiles para poder observar, discriminar y diagnosticar estructuras parasitarias después de realizar los métodos Coproparasitoscópico (CPS): directo en fresco, de concentración/flotación (Faust, Ferreira) o concentración sedimentación (Ritchie). La solución de lugol es de uso generalizado. Lugol Técnica: a) El procedimiento consiste en colocar la muestra de materia fecal sobre un portaobjetos limpio y desengrasado b) Emulsionarla con una gota de lugol, cubrirla con cubreobjetos evitando la formación de burbujas d aire 56 c) Observar al microscopio con los objetivos de 10x confirmando la observación con el objetivo 40x. d) Anotar resultados de la observación. ❖ Preparaciones permanentes Para fijar trofozoítos flagelados (Trichomonas vaginalis, Giardia lamblia). Técnica: 1. En una caja Petri colocar un triángulo de la varilla de vidrio, y adicione unos cristales de yodo metálico 2. Con la ayuda de una pipeta deposite el material biológico (secreción vaginal, sedimento urinario) sobre un portaobjetos sin extenderlo introducir esta porta en la caja Petri con la gota resuspendida hacia abajo con la finalidad que los vapores de yodo fijen a los protozoarios dejar actuar de 5 a 10 segundos, hasta obtener una mezcla de color ámbar homogénea. 3. Sacar inmediatamente la preparación de la caja Petri (cuidando de los vapores del yodo ya que fijan la retina del ojo). 4. Inmediatamente después, adicionar una gota de sangre con EDTA y realizar posteriormente un extendido sanguíneo
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