Separación Reticulocito1 ppt

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AATHI ExpoMedical 2004
Prof. TUHeI. Néstor A. Zani
Secretaria Científica AATHI 
Diagnostico 
Inmunohema-tol
ógico a partir de 
los reticulocitos. 
Interpretación 
de resultados
Qué son los 
reticulocitos?
• Los reticulocitos son la etapa 
anterior a los eritrocitos y se 
localizan en médula osea y 
sangre periferica.
• La cantidad de reticulocitos en 
una muestra permite conocer 
la actividad eritropoyética de la 
medula osea. 
De dónde provienen y qué son los 
reticulocitos? 
ERITROPOYESIS
Célula mieloide pluripotente ML
↓
Célula madre mieloide
↓
BFC-E
↓
CFC-E
↓
Proeritroblastos (↑RNA)
↓
2 Eritroblastos basófilos-1 (Hb)
↓
2 Eritroblastos basófilos-2
↓
2 Eritroblasto policromáticos (↑Hb)
↓
Eritroblasto ortocromático (↑↑Hb)
↓
Reticulocito (no Núcleo).presencia en sangre.(0,5-1,5%)
↓
Hematíe : no núcleo ni orgánulos
ERITROPOYESIS
Tiempo de maduración 5 días.
Renovación: 0,8% diario
Velocidad de renovación: 160 x 106 
eritrocitos/minuto.
REGULACION 
1. EPO : se produce en el riñón en 
respuesta a la hipoxia (células 
intersticiales peritubulares). Otros 
lugares?.
Estimula la maduración de las células 
proeritroides (BFC-E y CFC-E).
2. Otras:
•IL-3
•Andrógenos
•Insulina
•Hormonas tiroideas
3. Factores de la maduración:
 Vit. B12, Ac. Fólico, Vit. B6.
¿Para qué sirven los 
reticulocitos?
• Son hematíes jóvenes que 
al ser teñidos con un 
colorante (Azul brillante de 
cresil) presentan en su 
interior restos semejantes a 
retículos procedentes de la 
eliminación del núcleo 
• Son un índice de 
regeneración de la médula 
ósea. Frente a una pérdida 
de hematíes si el número de 
reticulocitos se eleva indica 
que la médula responde y se 
compensará la pérdida. 
Qué más nos dicen los 
reticulocitos?
• ¿Nos indican 
anemia? No, pero 
deben incluirse en 
el estudio de todo 
proceso que 
implique patología 
eritrocitaria, siendo 
un dato 
imprescindible en 
el estudio de todas 
las anemias. 
 
¿Cuántos són?
• Los valores normales son de 
0.5-2 % para hombres y mujeres 
• El recuento absoluto es una medida 
útil para determinar la respuesta de 
la médula ante una situación de 
anemia. 
• Su valor viene expresado en sobre el 
total de hematíes y varía según la 
edad. 
• En valores absolutos = 25.000- 
100.000/ mm3. 
 Valores de referencia 
Recién nacido: 20 - 60 reticulocitos / 1000 
hematíes (media 150.000 / uL) 
Niños y adultos: 5 -15 reticulocitos / 1000 
hematíes (25000 - 50000 / uL) 
Cómo son, cómo se ven? 
Cómo las vemos en un 
contador hematológico?
ERITROCINÉTICA
Vida eritrocito: 120 días. Envejecimiento 
progresivo de proteínas. Disminución de 
la relación Superficie / volumen. 
Aumento de peso. 
 
• Medidas en los reticulocitos
• Valores normales en adultos.
• Valores normales en ñiños.
• Cantidades típicas en procesos 
regenerativos. 
• Valores mínimos para obtenerlos por 
centrifugación simple.
• Tiempo hasta madurar a hematíe (perdida 
total de restos de núcleo
Para que sirve la separación de 
los neócitos, reticulocitos en 
inmunohematología?
• Sirve para 
diferenciar los 
glóbulos rojos 
del donante de los 
del paciente 
Y para qué sirve para 
diferenciar los glóbulos rojos 
del donante del los de el 
paciente.
• Para saber 
cuales son 
los 
glóbulos 
rojos 
propios de 
los que no 
los son. 
Y en que circunstancias 
es importante buscar esta 
diferenciación?
• Distinguir grupos y fenotipos entre los 
propios o el de unidades transfundidas
• Diferenciar una anemia Hemolítica Auto 
inmune PCD+ de unidades de hematíes 
transfundidas recientemente, 
posiblemente incompatibles con el 
receptor.
• Distinguir el grupo sanguíneo producto 
del prendimiento de la Medula Ósea 
alogéneicamente transplantada.
• Hallar el grupo sanguíneo realmente 
propios de un paciente sometido a 
exanguinotransfusión o tranfusiones 
masivas con unidades compatibles. 
Métodos 
inmunohematológicos de 
obtención y separación de 
los reticulocitos de los otros 
hematíes
• Método de separación 
por Esteres de Ftalatos
• Método de separación 
por Centrifugación 
Simple
Esteres de 
Ftalatos
• Los hematite's salen con un 
punto gravedad de MO. de 
1.07/08.
• Los hematíes Transfundidos 
son relativamente mas viejos 
(mayor punto de gravedad- 
1.1). 
• Poner en juego el punto 
gravedad específico de los 
hematíes de cada paciente. 
Centrifugació
n Simple
• Las mismas consideraciones 
anteriores. Con la diferencia de no 
utilizar ningún medio químico 
para la separación. 
• SOLO SE NECESITAN:
• Capilares de microhematocrito
• Centrifuga de microhematocrito 
Consideraciones del método
• Cada capilar tiene 
7,5 cm.
• 6cm con glóbulos 
rojos 
Como es la técnica de 
centrifugación simple?
• Llenar 10 a 12 capilares 
(pueden ser mas 
considerando las 
determinaciones).
• Centrifugar de 15 a 20 
minutos en 
microcentrifuga.
• Separar la 1/12 parte de 
capilar, porción superior 
(hematíes más livianos)
Consideraciones de la
separación 
centrifugación Simple 
• Dejar transcurrir por lo menos 
tres días de su última 
transfusión
• Considerar en paciente no 
aplásico
• Considerar en paciente 
hipoaplásico (serie roja)
• Importante contar con un 
recuento prévio de reticulocitos. 
• La muestra de hematíes en 
EDTA debe ser procesada el 
mismo día de extracción. 
Interpretación de resultados 
A
• Paciente 1 
• PCD + (población total)
• PCD + (población reticulocitos)
• Paciente 2
• PCD + (población total)
• PCD – (población reticulocitos)
• Paciente 3
• PCD – (población total)PCD + 
(población reticulocitos)
Interpretación de resultados 
B
• Paciente 1 (transfundido)
• PCD + débil Campo Mezcla
• Paciente 2 (trasfundido)
• Grupo A Campo Mezcla
• Paciente 3 (transfundido) 
• Anti D –
• Anti c + Campo mezcla
• Anti C + Campo mezcla
• Anti e + 
• Anti E –
• Resultado confirmatorio 
Interpretación de 
resultados C 
• Paciente 1 Alo transplante No Tx
• Grupo A + Campo Mezcla
• Fenotipo esperable (nuevo patrón 
medular vs. Fenotipo ablaciado por 
quimioterapia?. 
• Paciente 2 Alo transplante Sí Tx 
• Grupo Directa B Campo Mezcla
• Inversa A 
• PCD + 
• Fenotipo esperable vs. Fenotipo 
ablaciado
La Autoabsorción con 
Neocitos
• Es una circunstacia 
inmunohematológica muy 
particular. 
• La premisa que sustenta esta 
posibilidad se desprende de las 
normas, leyes y estandares 
nacionales e internacionales 
(AABB). 
• EL PACIENTE CON ANEMIA 
HEMOLITICA AUTOINMUNE SE 
REALIZA LA COMPATIBILIDAD CON 
EL SUERO PRODUCTO DE LA 
AUTOADSORCION. De no poder 
esperar que cumpla 3 meses de su última 
transfusión de hematíes. Esta opción 
podría ser valida. 
MUCHAS GRACIAS