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372 Capítulo 17 Puesto que los éxitos conseguidos en ranas no se podían reproducir con embriones de mamíferos, durante muchos años, numerosos bió- logos del desarrollo concluyeron que alguna característica fundamen- tal de la biología de la reproducción mamífera podría representar una barrera impenetrable para la clonación de mamíferos. Esta percepción cambió marcadamente en 1996 y 1997 con los primeros informes del nacimiento de mamíferos clonados. Un núcleo totipotente contiene todas las instrucciones para el desarrollo En las plantas, algunas células diferenciadas pueden inducirse para que se conviertan en el equivalente a las células embrionarias. Los biólogos utilizan técnicas de cultivo celular para aislar células individuales de cier- tas plantas y permitirles que crezcan en un medio nutritivo. En la década de 1950, F. C. Steward y sus colaboradores en la Uni- versidad Cornell realizaron algunos de los primeros experimentos para investigar la totipotencia celular en las plantas (FIGURA 17-2). Las cé- lulas totipotentes tienen el potencial de dar lugar a todas las partes de un organismo ya que tienen un conjunto completo de las instrucciones genéticas necesarias para dirigir el desarrollo normal de un organismo completo. Steward y sus colaboradores provocaron la división de célu- las de la raíz de una zanahoria en un medio líquido nutritivo, formando grupos de células llamadas cuerpos embrioides (parecidos a embriones). Estos grupos de división de células se transfi rieron entonces a un me- dio con agar, que proporcionó nutrientes y una estructura de soporte sólida para las células de la planta en crecimiento. Algunas de las célu- las de los cuerpos embrioides dieron lugar a raíces, tallos y hojas. Las pequeñas plantas resultantes, llamadas, plantuloides para diferenciar- las de las verdaderas plántulas, se trasplantaron al suelo, donde fi nal- mente se trasformaron en plantas adultas capaces de producir fl ores y semillas viables. Ya que estas plantas se derivan todas de la misma planta progenitora, son genéticamente iguales y por lo tanto constituyen un clon. Como se menciona en el capítulo 15, un clon consiste en organismos individua- les, células, o moléculas de ADN que son genéticamente idénticas a otro individuo, célula, o molécula de ADN, de la que se derivaron. Los méto- dos de cultivos de tejidos de plantas ahora se utilizan ampliamente para producir plantas modifi cadas con ingeniería genética ya que éstas per- miten a los investigadores regenerar plantas completas a partir de célu- las individuales que han incorporado moléculas de ADN recombinante (vea el capítulo 38). En la década de 1950, los investigadores comenzaron a probar si los pasos en el proceso de determinación celular son reversibles en las células animales al trasplantar el núcleo de una célula en una etapa relati- vamente tardía del desarrollo en un óvulo (célula huevo) que había sido enucleada (es decir, su propio núcleo había sido destruido). Robert Briggs y Th omas J. King del Institute of Cancer Research en Pennsylva- nia fueron los pioneros en los experimentos de trasplante de núcleos. Tras- plantaron núcleos de células de rana que se encontraban en diferentes estados de desarrollo en óvulos cuyos núcleos se habían eliminado. Algunos de los trasplantes procedieron de forma normal durante varios estadios del desarrollo, y unos pocos incluso se trasformaron en renacua- jos normales. Como regla, los núcleos trasplantados a partir de células en estadios más tempranos soportaban con mayor probabilidad el desarro- llo hasta el estadio renacuajo. Conforme el destino de las células estaba más determinado, la probabilidad de que el núcleo trasplantado pudiera controlar el desarrollo normal disminuía rápidamente. El biólogo británico John B. Gurdon realizó experimentos de tras- plante nuclear en ranas durante la década de 1960. En unos pocos casos demostró que los núcleos aislados de células epiteliales del intestino de un renacuajo dirigían el desarrollo hasta el estadio de renacuajo (FIGURA 17-3). Este resultado no se presenta con frecuencia (aproximadamente 1.5% de las veces); sin embargo, en este tipo de experimentos el éxito cuenta más que el fracaso. Por lo tanto, pudo concluir con seguridad, que al menos algunos núcleos de células animales diferenciadas eran en realidad totipotentes. E X P E R I M E N TO C L AV E PREGUNTA: ¿Las células somáticas diferenciadas de plantas son totipotentes? HIPÓTESIS: Células individuales de zanahoria se pueden inducir para que desarrollen una planta completa. EXPERIMENTO: F. C. Steward y sus compañeros de trabajo cul- tivaron tejidos de la raíz de zanahoria en un medio nutritivo líquido. Estas células se dividían para formar grupos de células no diferencia- das. Los agregados se transfi rieron a un medio de cultivo sólido. Planta madura 1 2 3 Los tejidos de raíces de za- nahoria se cortan en discos y se cultivan en un medio nutritivo líquido. Las células se dividen, formando una masa de células indiferenciadas. Si se transfieren a un medio sólido, algunos agregados celulares forman pequeños “plantuloides”. Cuando se transfieren a la tierra, los “plantu- loides” crecen hasta formar plantas maduras. RESULTADOS Y CONCLUSIÓN: El desarrollo de una planta de zanahoria completa a partir de células somáticas diferenciadas demostró la totipotencia de estas células. Fuente: Shantz, E. M., y F. C. Steward. “Investigations on Growth and Metabolism of Plant Cells VII: Sources of Nitrogen for Tissue Cultures under Optimal Conditions for Their Growth”. Annals of Botany, Vol. 23, 371-390, 1959. Con permiso de la Oxford University Press. FIGURA 17-2 Experimento de Steward sobre la totipotencia celular en zanahorias 17_Cap_17_SOLOMON.indd 37217_Cap_17_SOLOMON.indd 372 15/12/12 13:2815/12/12 13:28 Parte 3 La continuidad de la vida: Genética 17 Genética del desarrollo 17.1 Diferenciación celular y equivalencia nuclear Un núcleo totipotente contiene todas las instrucciones para el desarrollo
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