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Resumen El desarrollo de nuevas tecnologías basadas en el aná- lisis de DNA, ha perm itido identificar varianles genéticas que en los bovinos afectan sus características productivas de gran importancia económica. Con el uso de esta he- rramienta se puede aprovechar la diversidad de Colom- bia en recursos genéticos aptos para la producción de carne bovina de alta calidad, la cual, en los mercados internac¡onales, se determina por parámetros como el grado de marmoreo (grasa intramuscular) evaluado en el músculo dorsal largo y que está asociado con un marca- dor en el ADN de los bovinos. El objetivo de este trabajo es presentar la aplicación de una estrategia de selección asistida por marcadores moleculares, donde se determinó la frecuencia del mar- cador (polimorfismo) del gen de la leptina, relacionado con el grado de marmoreo, mediante la evaluación de 1 12 animales de las razas Romosinuano, Cebú v su cru- ce, para lo cual se tomaron muestrds de sangre y múscu- lo, a panir de las cuales se extrajo ADN, con el sigu iente resultado: en el 30% de los individuos de la raza criolla Romosinuano, se detectó el marcador deseable L-TT en elgen de la lept inayen e l 18% de los que provenían del cruce con Cebú. mientras que en la raza Cebú Brahman Rodrigo Martínez S.r Gloria Patricia Barrera C.2 no se observaron individuos con este genotipo. De acuer- do con los reportes previos que muestran la correlación del marcador T con la mejor calidad de la canal, definida por la distribución de grasa intramuscular (marmoreo), en la raza Romosinuano y su cruce con Cebú es mayor la proporción de individuos con el genotipo deseable para este carácter, comparada con la Cebú Brahman. lntroducción En la actualidad, los laboratorios dedicados al diag- nóstico y asesoramiento genético animal han experimen- tado un incremento en la demanda de orocedimientos para la determinación de marcadores en el ADN que afectan o influyen en los caracteres cuantitativos, como pesos, ganancias a diferentes edades, producción de le. che, rendimiento cárnico, etc. A panir de esta informa- ción se han desarrollado estrategias denominadas .selec- ción asistida por marcadores,, que ofrecen beneficios potencia les cuando se t rata de caracteres de baja heredabilidad, difíciles y costosos de med ir o que se de- ben medir a avanzada edad en el animal. El uso de este tipo de metodologías puede beneficiar al mejorador en la selección de estas característ¡casr res¡stenc¡a a enfer- medades, calidad de la canal, fertil idad, eficiencia pro- ductiva, calidad y cantidad de leche, habilidad materna, crecimiento, además de otras que pueden manifestarse en algunas de las particularidades mencionadas. En los momentos actuales, algunas características de calidad de la canal, como el marmoreo (distribución de grasa intramuscular) y Ia terneza, se han asociado con determinados marcadores de ADN v se hallan disooni- bles en el comercio a través de pruebas de laboratorio. Por ello, es posible proceder a establecer el genotipo para estos caracteres deseables en cualouier bovino mediante el análisis de una muestra de ADN obtenida de su san- gre, su tejido, etc. La información obtenida se puede rzootecnista, M Sc. Candidato Ph D. lnvestigador Programa Recursos Genéticos y Biotecnologia Animal de CORPOICA C L Tibaitatá. E. mar l : rodr igomart inez lg@yahoo com : Bacteróloga M. Sc InvestLgador¿ Programa Recursos Genéticos y Biotecnologia Animal de CORPOICA C I. Tibaitatá. E. maill barreraglor ia2003@yahoo.es 2 5 l I emplear para aumentar la frecuencia d€l marcador que está vinculado de manera oositiva con la característica de interés, gracias a la selección de aquellos reproductores (machos o hembras) porladores de las dos copias del marcador de interés, descartando de la reproducción los animales que no lo posean, proceso que ¡mpl ica e l imi- nar en corto tiempo el marcador indeseable. As¡ m¡smo, hoy en día, los programas más avanzados de sefección combinan la selección cuant¡tat¡va con Ja se. lección as¡stida por marcadores, para escoger como futu- ros reproductores los animales con valores más deseables de DEP (Diferencias Esperadas de Progenie) y los marcada res deseables para los m¡smos u otros caracteres, agrupan- do ambas estrategias dentro de un índice de selección, lo cual potencia el progreso genético que se pueda obtener. Al respecto de la lept¡na, es necesario decir que ésta es una proteína que tiene un papel importante en el mecanig mo regulador de la ingestión del alimento y la deposición de la grasa, entre otros aspectos. Existen pruebas que iden- tifican el genotipo de leptina de un animal, así: L-CC, asociada con el incremento de carne magra y reducida de- posición de grasa; L-TT, relacionada con el aumento de la deposición de grasa y el grado de marmoreo, y L-CT, con las canales intermedias entre los dos genotipos (Buchanan et al., 2OO2). El marmoreo lo denota la cantidad de grasa intramuscular (grasa dentro del músculo) en la zona central del músculo dorsal largo, entre la décima segunda y décima tercera cos- til lasde unacanal refrigerada. En los mercados ¡nternac¡G. nales para poder recibir la clasificación Prime, la canal debe mostrarun grado de marmoreo Moderadamente Abun- dante o Ligeramente Abundante (F¡gura 'l ). Figura L Cop ias reduc¡das de las fo togra f ías de marmoreo oficiales preparadas por el Departamento de Agricultura de los EE.Uu. lzq. l\4armoreo moderadamente abundante, Der. Ligeramente abundante. Fuente: www. 2 IMN¡ Beef N/arbling_pdf.htm El objetivo del presente trabajo es, portanto, presentar la aplicación de una estrategia de selección asistida por marcadores, donde se determina la frecuencia de un mar- cador (T) descrito dentro del gen de la leptina, asociada con la deposición de grasa intramuscular, en animales de la raza Romosinuano, Cebú y su cruce (Figura 2). Para esto se seleccionaron poblaciones de medios hermanos paternos, en el Centro de Investigación Turipaná, de la Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria, CORPOICA, ubicado en el departamento de Córdoba. Las poblaciones escogidas incluyeron animales de fa raza Romosinuano (71), Cebú (27) y Fl de Romo x Cebú ('14). Se tomaron muestras de sangre con anticoagulante a ani- males en pie y muestras de músculo en el frigorífico. La extracción de ADN se efectuó mediante la metodoloeía descrita oor Sambrook et af..' l 998. Figwa 2. Razas de Ganado a) Romosinuano: la raza cf io l la de mayor apt i tud cárn ica y con mejores rendimientos b) Cebú Brahman: la raza de aptitud cárn¡ca de mayor difusión en el pais. (Fuente: CORPOICA Programa Nac¡onal de Recursos Genéticos) Se estimaron las frecuencias genotíp¡cas L-CC, L-TT y L-CT, descritas por Buchanan et. al.,2OO2, mediante la técn¡ca de PCR-RFLP. Para identificar los genotipos se realizó electroforesis en gel de poliacrilamida y tinción con nitrato de plata. Como se registra en la Figura 3, los individuos que presentan sólo la banda superior portan el Iiln0nr/tiún E cffilio lwrilinjil genotípo CC; los individuos únicamente con la banda inferior son genotipo TT y heterocigotos TC aquéllos en los cuales aoarecen las dos bandas. GENOTIPOS LEPTINA TT CC Figura 3. Gel de pol iacri lamida teñido con nrkato de plata Genotipos de Leptina L TT, L-CC y L-TC Resullados y Dist usión Mediante este estudio se determinó el genotipo de 1 1 2 animales de las razas Romosinuano (74) , Cebú (27)y su cruce (14), para un marcador ubicado dentro del gen que codifica para la hormona leptina. En términos generales, en esta población se registró un 24% de ind iv iduos con e l genot¡po L- I I , un 27"k c o n e l g e n o t i p o L - C C y u n 4 9 % d e i n d i v i d u o s heterocigotos L-TC (Figura 4). Al respecto de la raza Romosinuano, se encontró el genot¡po L-TT en el 30% de los individuos y en el 23% el genotipo L-CC, el valor más bajo de los tres grupos, pero el genot¡po heteroc¡goto se manifestó con mayor frecuencia (48%). En la raza Cebú no hubo individuos con el genotipo L-TT,pero si una elevada proporción de heterocigotos (69%) y un valor intermedio de animales L-CC (30%). Los animales cru- zados Romosinuano x Cebú presentaron el número más bajo de animales con genotipo L-TT (18%), la mayor can- tidad de animales con genotipo L-CC (48%) y, a diferen- cia de las otras dos poblaciones analizadas, en ellos se obseruó el menor porcentaje de individuos con el genotipo heteroc¡goto L-CT (35%). Las limitaciones oara el meioramiento de la calidad cárnica a través de las metodologías tradicionales, sugie- ren la aplicación de técnicas moleculares como soporte para la toma de dec¡siones. La estimación de la calidad de la carne postmortem, genera la necesidad de evaluar el animal vivo y a temprana edad, para aplicar los resul- tados en la selección para mejoramiento, cuyo éx¡to de- pende de un manejo apropiado de las familias. Conviene señalar que la leptina es una hormona que ayuda a regular el apetito y el metabolismo energét¡co de los animales, por lo que se ha convertido en uno de los mejores marcadores fisiológicos en el control del peso corporal, el consumo de alimento, el gasto energético (Woodseta/., 1998), lareproducción (Carciaeta/., 2002), el engrazam¡ento (Buchanan et a/-, 2002; Nkrumah et a/., 2005), la producción lechera (Buchanan et a/., 2003) y de ciertas funciones del sistema inmune (Lords e¿ a/., 1998). El marcador evaluado en este estudio consiste en una va- riación dentro de la secuencia del gen, que ha sido asocia- do con el incremento en el marmoreo o distribución de la grasa intramuscular (Buchanan et al., 2002). En este trabajo se estableció que la población de la raza Romosinuano posee la menor proporción de indivi- duos con genotipo indeseable CC, un valor intermedio de individuos con una sola copia del marcador deseable (49'l") y la mayor proporción de individuos con dos co- pias del genotipo deseable (30%), al contrario de la raza Cebú, en la cual no se detectó ningún individuo con dos ( opi¿5 del m¿rc¿dor dese¿ble, en asoc io con mejores ca- racterísticas de marmoreo de la carne. Desde el punto de vista práctico, con la determinación del genotipo para estas poblaciones es posible seleccionar los toros que porten dos copias del gen leptina-T para ser util¡zados en ICC TTC 'TT Cebu ROMO Figura 4. Proporciones genotipicas en las razas Romos¡nuano, Cebú y para un polimo¡f¡smo en el gen de Leptina su cruce. x (","*. una Doblación a fin de aumentar la frecuencia de indivi- duos con el genotipo deseable, que, debido a su asocia- ción con la calidad de la canal. permita la existencia de una mayor cant¡dad de individuos con mejor condición de distribución de lagrasa intramusculary, porende,de mayor calidad y precio del producto. Para el caso de la raza Cebú, debido a la bajafrecuencia del marcador L-T en la ooblación de donde se obtuvo la muestra, es necesario establecer los genot¡pos a una mayor cantidad de individuos, con el objeto de identificar un toro con dos copias del marcador de interés, que se pueda utili- zaren una población donde se desee mejorar este carácter. El Laboratorio de Recursos Genéticos Animales de CORPOICA dispone de un banco de ADN de una pobla- ción de medios hermanos paternos de la raza Romosinuano y su cruce con Cebú, que será impoftante para ef anális¡s de la segregación de este carácter, teniendo en cuenta que esta población registra un comportamiento productivo para crecimiento y será utilizada en la evaluación de la canal, lo cual resu ltará útil para validar estas pruebas en animales en pastoreo bajo condiciones del trópico. El mismo labe ratorio está en condiciones de prestar la asesoría para el examen genético de los bovinos dirigido a la selección de reproductores, con el propósito de incrementar lafrecuen- c¡a de éste y otros marcadores relacionados con caracterís- t¡cas de importancia económica de su empleo actual y potencial, para iniciar, de esta manera, la aplicación de estrategias de selección asistida por marcadores en benefi- cio del mejoramiento genético de la ganadería nacional, Referonc¡as Bibliográf icas Buchanan, F. C.; Fitzsimmons, c. J.; van Kessel, A. G.; YVinkelman, D. C.; Schmutz, S. . 2002. Association of a missense mutation in the bov¡ne leptin gene $/ith carcass fat content and leDtin mRNAlevels. Genet. Sel. Evol.34: 105-116 Buchanan, F. C.; Van Kessel, A, G.; Waldner, C.; Christense, D, A.; Laarveld, B.; Schmutz, S. M.. 2003. Hof Iopic; an association between a leptin single nucleotide polyrnophism and milkand protein yield. J. Dairy Sci.86:3164- 3166 Garcia, M. R.; Amshlden, M.; Williams, S. W.; Stanko, R. L.; Morriion, C.0., Keisler, D. H.;. Nizielski,S. E.;Williams, G, L.2002. Serum leptin and its adipose gene expression during pubertaldevelopment, he estrous cycle, and different seasons in catüe. J. Anim. Sci.. 80:21Ífl-2167 JuszczuK-Kubiak, E,; Sakowski, T.; Flisikowski, K.; Wicinska. K.; Opr¿adek, J.; Rosochacki, S. 2004. Bovine U-calpain (CAPN1) genet new SNP w¡th¡n inbon 14. J. Appl. Genet4S:457460 Lord, G, M.; Matarese, G.; Howard, J. K.; Baker, R.J.; Bloom, S. R.; Lechler, R.l. 1998.llept¡n modulates the T- cell immune resDonse and reverses starvation-induced immunosuooression. Nature.27: 897-901. Nkrumah, J. D.; Li C., Yu J.; Hansen, C.; Keisler, D. H.; tiloore, S. S. 2004. Polymorphisms in the bovine leptin promoter associated wih senim leptin concentralion, gro$,h, feed intake, feeding behaviot and measures ofcarcass merit. J. Anim. Sci. 83.20-28. Sambrook J., Fribch E. F.; Maniat¡s, T. 1989. Molecular cloning; a laboratory manual, Second Edilion. Cold Spring Harbor Laboratory Press. p 917. Schenkel, F,S.; Miller, S.P.; Jiang, Z.; Mandell, LB.;Ye X., L¡ H.; Wilton, W 2006. Association of a single nucleotide polymorphism in the calpaslatin gene with carcass and meat quality traits of beef cattle. J.Anim. Sc¡.84: 291-299. Woods, S. C.; Seeley, R. J.; Porte, D.; Schwartz, W. 1998, Signals that regulate food intake and energy homeostasis. Science. 280:1 378-1383. Resultados y discusion. Referencias bibliograficas
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