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VARIACION FENOTIPICA EN PlANTUlAS DE Desmodillnl illtortll1Jl (Mill) URB. PROVENIENTES DE SEMILLA IRRADIADA* Enrique Alarcon, loy V. Crowder R.E. Ande~on 4. 1. INTRODUCCION La variaci6n mendeliana, la hibridaci6n intercspccifica y cl poliploidismo han sido los patroncs por medio de los cuales las plan tas actualmcnte cuItivadas han cvolucionado de sus progenitores. Estas mismas tecnicas han side aplicadas en cI mejoramicnto de plantas can cl objcto de crear variabilidad genetica, como base del exito en los pragramas de seleccion. Los fitomejoradores, en su af[m de abtener nueva variaci6n. han empleado diversos mctodos para inducir mutaciones gcncticas puesto que las llamadas espontancas OCllffcn a lIna rata mtlY baja, lIna par 105 gametos. El uso dc irradiaciones, empleando rayos X ha sido cI metoda mas comunmente utilizado en plantas de divcrsos cllItivas. L1S cspccics forrajcras han side somctidas ;, estc tratamicn to en mCllor eseala y practicamcnte son contados los casas de Jl1utaciones inducidas en · los forrajes tropicalcs. Algunas especics del genera Desmodiu1J1, lcgllminosa tropic]1 comunmente dcnominacla Hamor seeo, pega-p~ga 0 empanaditas", prcscntan un gran poknciai forrajero en los dimas media y dlido . Sin embargo, se ha vi5tO 1<1 neccsidad de mcjor;lrias para abkner plan tas de [{lei I rcprociuccion, mayor rt?ndimiento dc forrajt.' , persistcncia y • Trabajo rcalizado en el DeparlomenlO de Fi tomejoramiento de 10 UnivNsidad d~ Cornell. Ithaca. New York. U.S. A, •• Respectivamenro : Agrost61ogo Asistentc Progfamo Pas lOS y Forrojes I CA. Pro/esof Conscj~ro d .. ' I Autor Principal y Profesor del Departamento de Fitomcjoramiento de ILl Universidad de Corn",U. 345 (ompalibilidad para L'rcccr can las gral1lilll':ls. De l'sla mallcra los.cstudios b£lsicos lie- rncjoralllknto gcn~tico sc haccn nccl'sarios p:lr<l produclr nuevas \' IllL'iores vuriL'dadcs. EI objdo de cst a invcstigaciC)J) luc <:.1 de conoccr a ;li\'cl ' dL' pl[l11lulas, d Cfl'ct~) de la aplicacion de tres dosis. dc r"yos X [I sL'milias lk Dcs11Io(/illl11 illtor/lim Urb. obtcnidas en Colombw. 2. REVISION DE LITERATURA r.tu tacion pliedI.' ser dl'filli<.ia como un cam bio rcpcntino y hcrcclablc en 1:1 cstructura del material gCllctico. GrL'gory (5), afirma que cl IllcjoramiL'nto por lllut41ciones pucdc scr lIsado ell la obtcncibn de nllevas \'arkJmks y que Sli prop6sito L'S inducir un cambio hcreditario descado 10 cual cs distinto de usar la variabilidad actuall1lent~ cxistcntc. EI roentgen (r) es la unidad de mediJa m{\s COmllll p~lra cxprcsar las dosis suministradas a traves del proccso de ionizaci()I1 por medio de radiaciones. Tambicn d "rad" ha sido llsado ctlando SL' lrabaja con rayos X. Un rad equivale 41 1,08 r en agU<l (2). Smith (9), cita vari05 faetores qUl! influycn en 1<1 sensibilidad de un material a la radiaci6n. Entre los mas importantcs sc cuentan el genotipo, edad del tcjido, cstado y nlWH!fO de cromosomas. Asi mismo el seilala que la Illubbilidad de todos los genes <lumenta directmllentc en proporcion COil la dosis de r~\yos X utilizada. Sparrow y GUllckcl citados por Smith (9), cncontraron que una dosis de 30 r tuvo un cfccto dailino entre plantas de lila, mientras que una de 6000 r fue neccsaria par<l prodllcir efectos comparablcs en gladiolos. Adams y Nil:.lll (1), al trabaj<lr con cebada encon traron que una dosis de 700 r par minu to producia un rnan:ado incremcn to en uberraciones cromosomicas al cstudiar semilla que habia side almaccnada par tres semanas. Gustafsson y Tedin, citados por Briggs y Knowles (2), recomiendan las siguit:ntcs dosis como las m[\s aceptables para ciertos culti\'os: alvcrja 5000 - 10000 r. ccbada 10000 - 15000 r, t rigo 15000 - 20000 r. Varios cstud ios tambien han dernostrado que el con tenido de hUJ11edad afccta favorable 0 desfavorabJemente la rcsistencia de las sernillas u la irradiacion y cstc cfccto varia con la especie (5). . Caldecott (3), al usar la ultura de la plantliia como ind ice de los efectos de irr<ldiacion, encontr6 que los rayos ~X prodllcian tina poblacion altamentc vuriable para estL' carkter. Shapiro y Sagawa (10). afirman que d podcr gcrmin:llivo, porcentaje de gcrrninllci6n y porcentajc de semilla que produce plantas bien dcsarrolladas son caractcristicas quc puecicn Sl'f lls~ldas como criterio de obseT\'aci6n en la primera generacion provcnicn Ie de scm jib irradiada. SC<lney (~), cstudio los cfcctos de los rayos X en semilb~ de Lotus comiculallls L. u tilizando dosis dcsde 50000 ' hasta 100000 r. EI nltmero 346 de pIantulas desarrolladas y In altum fucron los critcrios lIsados. EI cncontrb que el 58 % de la scmilla produjo pluntulas cuando la dosis mas baja fue aplicada mientras que cl 11 % solamcnte para In dosis m{ls alta. La altura de las plfmtulas disminuyo al aumentar Ia dosis de rayos x. Carpen ter (4), al utilizar semi lias de Trifolium sllbtcrrallClIl1l con alto poder de latencia, eneon tr6 que la aplicacion de 60000 a 70000 r permitib fa supervivencia del 50 % de las plantas. Del tota I de mutaciones encontradas, 28 % correspondieron a plantus enanas y el 42 0/0 a mutaciones cIorofilicas. Julen (6), en investigaciones n:aIizadas con Poa pratellsis L. eneon tro un aumento en el porcen taje de plan tas con aberraciones del 2 % para cl con trol hasta 14 % para plantas que proven ian de semilla expuesta a dosis de 20000 a 25000 r. Za mbrano y Rojas (7), estudinron los efectos de In irradiuei6n sobre material vegetativo de pasto elefante en la Estacibn Experimental La Molina , Perll. Cuando In variedad Panama fue irradiada, ellos eneontraron que la dosis de 1250 r fue la mas aconscjable. Los mismos investigadores sclcccionaron ocho clones del material irradiado que mostraron una mayor producci6n de tallos bajo condiciones de campo, que aqucllos no irradiados de In misma variedad. 3. MATERIALES Y l\IETODOS EI experimento fue realizado en Ia Universidad de Cornell e iniciado el 19 de septiembre de 1970. Semillas de Desmodium intorfllm Urb. provenientes de Medellin. Colombia, fucron tratadas con rayos X en el 1 a bora torio de fi tomejoramiento lIs<lndo un aparato "Picker X-ray" operado a 22 KVP y 15 rna., surninistrando 2100 r por minuto a la superficie de la scmilla. Trcs dosis de rayos X eorrespondicron a los tratamien tos: 10000, 20000 Y 40000 r, respectivarncn tc . Asi mismo otro grupo de semillas del mismo lotc no fue tratado y se cscogio como control. Despues de aplicados los tratamicntos, un grupo (Ie semillas fll~ tomado al azar por cada dosis y cl control para ser cscarificadas con cl objcto de obtencr una accptable germinacion. Las semillas sc scmbraron en tres rcpeticiones de 50 ~millas y un total de 150 semillas por tratamiento. Cada rcpeticion consisti6 de lIna rnaccta de 30 x 50 em que contenia suclo con bucna fcrtilidad. EI diseilo utilizado fue d de bloqllcs at azur. La semilla tratada m[ls el control fucron sernbrndas cn hilcras separadas seis em y postcriormentc cl1bi~rtas con tln~ ligera C~P~I de vermicuJita. Durante cl experimento se trato de proporclL1nar cOIH.lH.:loncs ambicn tales simi lares a las cuales d Dcsmodiu11l creel: en Colom bi~1. LI temperatura se rnantuvo a :WoC durante I:! hor~ls de 11iZ y en la Iloche ~1 170C. EJ slido sc mantuvo bajo condiciones Jlormaks de hUl11edad. Las silfuicn tcs caractcristicas fllnon obSl'rvadas para cada tratamkn to ~' cl contr;I: porccntajc de gcrmin~lcibn 5 Y 10 elias despu0s de la sicrnbra. 347 pon:~'lltak de pl[lIl(ulas (ksarrolladas 35 d ias dc:plIt:S d~ Ia siell\bra, altura d~ cad a lIna de las pl:lIltulas (em). ,hea de la hop terminal (CI11-) a los 25 dias d~' cd:!d. peso seen por pl£lIltuia (g) cllal~do e.st:ls tcnian 2S dia:.y ;1liL'm:1S SC obsL'rvaron las difcrcntl's variaciollcs lellotlplcas ell comparaClO1l COil cl control. EI cxpnilllL'nto sc cOllciuyo a los 35 d ias. para finalmcnlc Sl.'kccionar 15 pl£mtu::ls par cada tratarnicnlo. Estas fueron traspla!~tadus a m:lrdas individuaks para obkncr gcncracioncs avanzadus y contlnuar el cstuliio. La scmilla irradiada se dCllomino So y la primera gcncrucion y succsivas COIllO M I Iwsta Mn. 4. RESULTADOS Y DISCUSION En c;Jlia una de las car;Jctcristicas observadas sc cnCOll tr:lron difcrcncias en rdaci6n can cl control dcbido al decto ,de los t.ratnmicntos. EI pon.:cntajc de germinacion de las scmillas sufrio menos v,lfiacion ya que los valorcs obtenidos en todos los casos son similarcs a los comlmmentc cncontrados para Dcsmodium. En la Tabla I aparccen los porccntajes obtenidos a los 5 y 10 dias, ~lsi como el nllInCrO total de plantulas dcsarrolladas )' bs normales encon tradas al tinal del expcrimcn to. La dosis de 20000 r tllVO lin cfecto benefico en \a germinacion y all nquc produjo c\ mayor nlllllero de pl{lJ1tulas. sin embargo, a los 35 elias prcsento el segundo valor mas bajo para plimtulas norrnales. La dosis de 40000 r tam bien <.lUlllen t6 la germinaci6n pero cl porcen taje de plan tulas fue decreciendo l1<1sta cl punto de producir el mellor nllrnCrO de plantulas· y s610 cl 10 % akallzaron normal desarrollo. La dosis de 10000 r prcscnto valorcs de gcnninaci6n y pl:m tulas desarrolJadas bast • .lI1 te similares al control. TABLA 1, Porcentaje de germinacion (5 y 10 dias) y de. pJ imtulas 35 dias despues de la siembra. Oasis de Germinacion Plimtulas Plimtulas Rayos X (r) 5 dias 10dias Desarro lIad as Normales • Control 53 58 58 58 10000 52 57 59 43 20000 63 71 79 26 40000 59 67 57 10 • Plimtulas con hoja terminal tri(oliada y sin ningun sintoma visible debido a los tratamientos. Cuactcrcs cllantitativos, tales como altura de 1:1 pl{lntula, area de la hoja terminal y produccibn de makria seC<l. fucTon los m{ls afcctados pOT los diferentes tratamientos, Los datos prescil rados en la Tabla 2 muestran los resultados obteniclos para altura, {If(~a de la hoja terminal y peso de materia seca. La cxprcsi6n de cst3S caracteristicas fue disminuvendo a medida que se aumcntb fa dosis de rayos X. Para altura de las pla~tulas se cnconlraron difcrcncias altumcnte significativ(ls entre algunos tratamientos mien tr:ls que para el tamafin de 1a hoja terminul las difc;cncias fueron solo significativas al nivel lIel 5 0/0. 348 TABLA 2. Altura de las pl~lntulas, area de la hoia terminal y produccion de materia seca por plilntula para los diferentes tratamientos". Oasis de Altura Area Hoja Peso de la Rayos X (r) r:m Terminal (cm2) Plantula Control 3,50 3,70 38,43 10000 2,80 2,60 31,79 20000 2,20 1,40 21,17 40000 1,50 0,80 11,69 O.M.S.·· 0,05 0,39 1,87 10,13 0,01 0,56 14,54 Promedio de 20 plantulas en cada replicacion y de tres replicaciones . .. • D.M.S. En base a fa prueba de Tukey. (gl Los resultados obtenidos coinciden con los encontrados por Seaney (8). La dosis de 40000 r produjo cfeetos scveros disrninuyendo el crccimiento y desarrollo de las. plan tulas, El cfccto fue mas drastico para [lrcCl de la hoja terminal. Para el peso seeo de las pJantuias puede aprceiarse como oCllrrio una reduccion casi proporcional a mcdida que Clumen t6 la dosis de rayos X. La dosis de 40000 r produjo cl rcndimiento mas bajo de materia seca, sicndo rntty pobre el desarrollo, en g·cneral. En vista del comportamiento de cada uno de los caractercs con relacion a los tratamicntos siguicndo el mismo patron, sc ·:a/cularon coeficicn tes de correlacion simple cntre ellos (Tabla 3) . . TABLA 3. Coeficientes de correlacibn simple entre altura, ~so por plantula y area de fa hoja terminal. Caracteristica Altura Area hoia terminal Area hoja terminal 0,99 Peso par plimtula 0,99 0,98 Los valorcs de corn:lacion fueron rnuy cercanos a la unidad y altamcnk significativos. AlInquc cstc tipo de correlacion no necesariamentc indica una vcnladera asociacion genctica entre los caractcrcs mcdidos pemlitc conduir como la disminllcion en Ia exprcsi6n de uno de ellos coincide con la del otro. De csta manera, en cstudios posteriores al notar llna disminucion en In aItliru podria espcrarse el mismo hecho para la produccion de materia ~ca, sicndo cJ primero de ellos m:ls facil de obscrvar. Se pllede uprceiar que existi6 una tcndencia lincur en In cxpresion de los tres caructeres cllantitath'os en relaci6n con las dosis de rayos X. D~ csta mancra se caJcuiaron las rcspectiv;ts eCll<lcioncs de rcgrcsion. las cllalcs aparcccn en la Figura l. Los an£Jlisis de \,~lrianza indicaron difcrcncias ul lamen tc sigllificativas para In rcgrcsion. Dc :lL'lh:rdo a I v,IIor oblen ido para eI cocficicnte de variacion, la altura de la pl£1I1tllla prcsent6 ~I menor coefic:icntc mientr<ls que cl [m::a de la hoja terminal ci mayor. La materia 349 :.0 ~ u :"..) til ~ H ~ !-o .-:: z N E u E u 40 30 20 10 ° 3 2 1 0 h J 2 1 0 Y • 37,66-0,68X • • Y E 3,3S-0,07X J • Y .. 3j 37-0,OS): ° 10 20 10 Lo 50 RAYOS X kr FIGUA A I R~reslon lont!Jr entre altura, ar ea de la hojJ terminJl, ptoducci6n de materia seca y dos is d e Rayos X ~spectiva mente . 350 seca ocupo un pucsto intermedio. Una vez m{ls la altura de lu plfmtula ~ manifesto como un caracter altamen te favorable para medir los efcctos de las difcrentcs dosis de ravos X. Aunque no neccsmiiJlllcnte debe cxistir una rclaci6n linear ell Ia respuesta de 1u planta para dosis mayores de 40000 r pero como hasta el momento aSI 10 indican los resultados, se podria prcdccir que dosis de GOOOO r 0 mayores puedcn 110 afectar la germinaci6n. pero si cl vigor inicial de desarrollo 0 cl poder gcrminativo, hasta el pun to de prcsen tarse un cese total del crecimien to y pocas 0 quizas ninguna pl£lI1tula alcanzaria un desarrollo normal. Diferen tes variaciones fenot ipicas fueron en con tradas en las plan tlilas. Con las dosis de 10000 y 20000 r una vez aparccida la primcra hoja verdadera (12 diilS despues de la sicmbra), esta prcsenlo moteados c1oroticos y los bordes deformados. Este fen6meno se acentu6 mas para la segunda dosis mientras que las plantulas correspondien tes a 1<1 dosis de 40000 r ' solo presen taron cotiledoncs. Asi mismo P:U<l estJ dosis se encontro cl mayor nllI1H:ro de plfmtulas cloroticas. A los 25 d ias lkspucs de la siembra. todos los tratamien tos excepto cl con trol con tinuaron mostrando plantulas cioroticas, enanas, tallos grucsos. cotilcduncs fUgosos, y hojas con mosaico,"chimcras" y dcformadas (Tabla 4). Las Figuras 2 y 3 muestran los difcrentcs tipos de plfmtulas de aClIcrdo a la dosis y las variacioncs en la forma de la haja terminal en corllparacion con t.'I control. TABLA 4. Caracteristicas fenotipicas observadas en las plantulas 25 dias despues de la siembra . Promedio de tres repeticiones. Oosis de Cloroticas Enanas Mosaico "Chimera" Rayos X • •• ... ." ... Control 0 0 0 0 10000 0 0 22 15 20000 0 15 37 20 40000 9 24 31 6 • Solamen te plan tulas con cotiledones . • ' Plantulas enanas, algunas con mosaico. Plantulas con mosaico, algunas enanas y con hOj05 rugosas . • ••• Borde de la hoja terminal deformado. No presentan mosaico. hojas rugosas y enanismo. I Los totales pueden ser mayores puesto que algunas plantul as mostraron mas de una caracteristical. AI final del experimcnto. para la dosis de 10000 r, la variacion m{lS notoria rue la prcscnciJ de mosaico y algunas hojas tcrminales con IJ caracteristica denominada "chimera". El resto de Caractcres morfol6gicos para 10 misl11adosis IlO variaron en relacion con 1:1 control. La oosis dt: 10000 r fll~ It.! que pcrmitib que c-I mayor nlll11t:ro de pl[lI1tulas alcanzaran un desJlTollo ~asi normal con t:XC~pciOIl del crccimien to q lie se vi6 rcduddo. Tambi~n al final del ('studio 1<1 rnayoria de /as pElI1tulas de Ia dosis de 40000 r p~rmam.·cieron con cotikdoncs 0 en el rncjor de los casos l'nanas y solarncntc cinco pl{lIltulas alcanzaron lin tlCSJITol/o similar al dd control. Si Sl' tielll: en clienia que todasI:J" sl'millas slifricron igual tratamicnto en bs r~specti\'as t/osis, aqllcllas pl1ntulas gUt' akanzaron 351 L ~ ~ -~ :. .. "'- ( "\ ... "'. ;: ) - ... - . T t "-r~ -(f' ~ (' '.J) .". -- ...... 1 y . IT .~. \ ~ ! ' 1 • • _ . ' ;.." . . "" r- p:~ ~-- 1 • .../ "" \)~ rr-I FIGURA 2. Notese 1<1 variacion (cnoHpica de las plfmtulas debido a los Rayos X, algunas severamente arectadas (esquina inferior izquierdal en comparacion con una pl1mtula normal (esquina superior derechal. FIGURA 3. Las hojas de las plantulas presentan los cambios m~s noterios debidos a la irradiaciOn. Oe izquierda a derecha hojas del tratamiento con 40.000 r hasta una hoja normal de una plantula proveniente de semilla no irradiada . desarrollo normal posiblcmcntc acarrcan 111tltacioncs (micromutacioncs) que no son posibles de dctcrminar en MI. Estas plantulas. puesto que constituyen matcrial promisorio, han sido cultivadas con el objeto de obsen'arlas en cstados avanzados de madurcz y obtener semillas para cstableccr lIna segunda generacion. Elltn: las caracteristicas que sc esperan obscn'ar dctenidamentl:! para ver si hay cambios hereditarios debidos a mutacioncs l,!St[111 la floracion y su rcspuesta al. fotoperiodo, valor nutritivo (digestibilidad) y produccion de materia sec:!: 352 5. CONCLUSIONES Todos los caractcres obscrvados tanto fcnotipicos como euantita tivos sufrieron variacion en relacion con el control debido a las dosis' de rayos X. I. EI poreen taje de germinaeion no sc afect6 par accibn de los rayos X e inicialmente 311mcnto. Sin embargo, el poder germinativo de la scmilla fuc sevcramentc reducido cllando se emplearon dosis altas. 2. EI nllmero de plantulas normalcs, la altura, el area de Ia hoja tcrminal y el peso seco por pi{mtula disminuyeron al aumen tarse la dosis de rayos X. 3. LLI disminucion en la exprcsion de los earactercs presento llna relacion linear con pcndicnte negativa con respecto a la dosis. 4. La al tura de In plun tula cs lin car{lcter sllsceptible a los tratam iell tos pero su exprcsion en la redllcci6n fue constantc y llni forme com 0 para ser utilizado como medida de Ia acci6n de los rayos X. Asi mismo esta caraeteristica estuvo correiacionada cn forma altamente Sif:,'11ificativ,1 con el peso seco y area de In hoja terminal. S. La dosis de 10000 r produjo lin elcvado ntmlero de pl£mtulas COil cambios poco notorios mientras que la dosis de 40000 r se pllcde considerar bastantc dafiina para cl desarrollo de las plantulas. Esta misma dosis pcrmitio obsl!rvar cl mayor nllmero de mutacioncs que varian el fcnotipo de la primcra gl!ncracion y de cscaso valor agronomico. 6. AI final de cste expcrimcnto sc obtuvieron dos tipos de pl£lIltulas. Uno que prescn ta maeromutacioncs fiicilmcn tc observablcs como c1orosis. enanismo y hojas "chimeras". EI segundo lipo incluye pl[lIltulas de aparicncia normal. crccimiento iigcramcn tc rcducido y que posiblemcn tr conllev,m micromutacioncs. 7. En cstudios posteriorcs, dosis de 10000 a 30000 r sedan las <lconsejablcs can el objcto de producir lllutaciOlles dcscablcs. 8. EI cmplco de rayos X pnra producir l11utacioncs en Dcsmodiul11 ;Il{ortliln no es una panacea para resolver los problemas del I11cjoramiento genctico en esta cspccic. Sin embargo. se conclllYc que cs una tecnica aceptablc con la ellal se obtiene nucva variabilidad y par cnde uugur:-t exitos en d proccso de seleccion dc plan tas promisorias. 353 6. RESUMEN EI Dcsmodillm illtortllm Urb . cs una kguminosa forrajera bien adapta~a a los dimas medio y dlido dc Colombia. Sc ha observado que esta e~p:cle <ld)e SL'r Illciorada rcncticarncntc con n:spccto i.I algunas caractensticas tales como t:acilidad de reproduccion , pt!fsistencia y compatibilidad para crect:r con las gramlnc:ls. En cstudios basicos de mcjoramicnto e~ cmplco dc tecnicas para cr(!ar vnriabilidud. distintas a aqllcIlas por mcdlO de las cll~dcs han evolueionndo las plantas actualmcntc cutUvadas. es importante para c! proccso de sclrccion. Entre estas tecnicas, el cmpleo de rayos X ha producido mutacioncs favorabJcs en otros cultivos. Hasta eI momenta no sc conoce que los ruyos X hayan sido aplicados at Desmodillm con el objdO de producir mutacioncs. El objcto de cste cxpcrimcnto rue el de conoccr a nivel de phlntula cl efecto de tres dosis de :ayos X (l0000, 20000 y 40000 r) aplicados a semilla de Desmodillm intortum provcnicntcs de Medellin. Colombia. EI cstudio sc rcaliz6 en el Departamento de Fitomejoramicn to de la Univcrsidad de Cornell. en septicmbre de 1970. La semilla tratada m[ls cI control se scmbraron en el itlvcrnadero utilizando el diseno de bloqu~s al azar con tres repeticiones. Las caractcristicas obscrvadas por plantula fueron: porcentaje de gcrminacion, poder germinativo, altura, area d~ la hoja terminal, peso seco y variaciones fcnotipicas en distintas epocus del expcrirncn to. Al final se scI cccionaron vatias plan tas de cada tra tamien to para cstudios mas de tallados en gcneraciones avanzadas (M 1 hasta Mn). Todos los caractcres obscrvados tanto fenotipicos como cuantitativos, prcsentaron diferencias can respecto al control debido al efecto de los tratamientos. Se encontraron diferencias altamcnte significativas para altura y peso seeo por plantula. El porcentajc de germinaci6n no vari6 significativamcn te aunque la dosis de 20000 r produjo el valor mas alto. La cxprcsion de las dcm:ls caraeteristicas decrccieron en forma linear, <11 aumentar In dosis de rayos X. La altura de la plantulu y el peso seco mostraron ser los mcjores indices como enterios para mcdir los efectos de Ja rJdiaeion, aunque el primero de ellos result6 superior. Para los distintos tratamientos fue po sible observar gran variacion fcnotipica en relaci6n con el control. Macromutaciones tales como ciorosis, mosaico, hoja "chimera" y enanismo se manifestaron principalmcnte .en la dosis mas alta. La dosis de 4000~ r pro?ujo los danos mas scvcros en las plfmtulas, hasta el punt"o de reduelr e1 numl'ro dc las normalmen te desarrolladas <.II 10 % al final del expenmcnto, 35 dfas despues de la sicmbra. Este estudio permitio conduir que para trabajos posteriorcs dosis de 10000 a 30000 r puedcn ser cmpleadas para obtcner rnutaciones deseablcs y sin danos apreciables en bs pHlI1tulas. Igualmentc dosis mayores dc 40000 r puedcn climinar completamcn tc las plfm tulas. 354 7. SUl\IMARY Dcsmodl:1l11l illtOl:t1l111 Urb . is a forage legume wcll adapted to the \Varm and hot clImates of Colombia. Improvements are needed in respect to casy of sced. pr?duc~ion, longevity of plants and genera) capability to grow harmonIOuSlY wIth grasses. Plant variability whether n<Jtural or induced, is basic for selection of superior genotypes. One scheme of incrcasin~ variability is the lise of X-rays to induce mutations. This <Jpproach has not been utilized with Desmodilllll . This study was conducted to examine the effect of three X-rays dosis (10000, 20000 and 40000 r) given to seeds of D. ill tortwl! obtained from Medellin, Colombia. Seeds were treated and observations made in the Department of Plant Breeding at Cornell University in september and october, 1970. Treated seeds and a control were sown in fla ts placed in the greenhollse, using a randomized block design. Seedling characte ristics observed included pcrcen tage germina tion, seed viability, height, area of the krminal leaflet, dry weight, and phenotypic variations. Various plants were selected for additional studies of progenies. In comparison with the control, seedling height and dry weight were significantly reduced. A linear relationship existed for increase in dosage. Seed germination and viability were not adversely affected . In fact, 20000 r increased percentage germination. Alteration of seedling height could be llsed as an index of damage due to dosage effect. A highly significant correlation existed between height and dry weight of seedlings,being inversely rela ted to dosage. A notable phenotypic variation was observed with obvious macromutations of chlorosis, mosaic leaf patterns, chimeras dwarfing, thickened and rugose stems and leaflets. Thcse were (leeen tuatetl with increased dosage. The 40000 r level severely damaged seedlings and only 10 % dcvelop beyond the cotyledonary stage at 35 d;! ys . One could conclude tha t dosag.:s bctwe..:n 1000D <!JH.l 30000 r would produce mUlalions without excessive seedling damage. ~, ios t s'.:cdlings would not survive levds beyond 40000 r. 8. BlBLlOGl~AF!A 1. ADAMS. J . D. and R. A. N I LAN . 1958. 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