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Simulación, aplicación y adaptación del caso integrado práctico 12, en base al bioreactor para Aspergillus Niger Objetivos ● Aplicar y manejar fundamentos, conceptos y herramientas de balance de masa y energía para solucionar casos de aplicación en operaciones unitarias (Downstream) en biotecnología e Ingeniería aplicando la ecuación de conservación de Lavoisier. ● Analizar, construir y simular con propiedad la modelación matemática de sistemas biotecnológicos de separación y concentración utilizando MS-Excel como herramienta informática y hoja de cálculo para la simulación numérica. ● Aplicar sólidos conocimientos de balance de materia y energía para resolver casos de aplicación integrada en balance de masa y balance de energía. Resumen El estudiar temas en relación a las operaciones unitarias se encuentran en el diseño, la eficiencia de cada etapa del proceso, es un equipo donde se incorporan los materiales, los insumos, las materias primas y la respuesta. Es por ello que para la presente práctica se aplicó una metodología de tipo experimental enfocado a un caso práctico de operaciones unitarias con aplicación biotecnológica. En la metodología se tuvo un reactor biológico cuya producción fue de un caldo de fermentación de ochenta Kg/h (Cp=0,8597 Kcal/Kg.°C) a una temperatura de 47°C que contenía 6,7% de carga fungal y un 5,1% de sólidos disueltos entre los que se encuentra un antibiótico no esteroideo producido por el metabolismo microbiano cultivado en el sistema bioreaccionante. Para eliminar la carga microbiana suspendida se alimentó a una temperatura de 25°C a un filtro que produce una torta con 45% de humedad y un filtrado que retiene un 0,9% de microorganismo generado por el bioreactor. El uso de un ICCC con agua fría a 20°C permitió el enfriamiento del caldo fermentado. La torta húmeda se transporta hacia un secador donde perdía agua y se obtuvo una pasta biológica con 9% de agua. Finalmente, el filtrado se alimentó a un evaporador que concentraba hasta un 60% de sólidos suspendidos y disueltos y género un vapor libre de trazas celulares y sólidos. Posterior a ello, se empleó una modelación del sistema junto con una simulación en MS-Excel en entorno Windows 10. En conclusión, el número de procesos de operaciones de biotecnología es muy elevado, incluso superior a los procesos de biotransformación. Tan solo pensar en todas las situaciones en las que se hace necesario mezclar, airear, separar, calentar. Estos procesos suelen denominarse también operaciones básicas o unitarias y conforman la base de las operaciones que se realizan en biotecnología. Palabras clave: Operaciones unitarias, bioreactor, simulación, modelación, trazas celulares y sólidos. Abstract Studying issues in relation to unit operations are found in the design, the efficiency of each stage of the process, it is a team where materials, supplies, raw materials and the response are incorporated. That is why for the present practice an experimental type methodology was applied focused on a practical case of unit operations with biotechnological application. In the methodology there was a biological reactor whose production was of a fermentation broth of eighty Kg / h (Cp = 0.8597 Kcal / Kg. ° C) at a temperature of 47 ° C that contained 6.7% fungal load and 5.1% dissolved solids, including a non-steroidal antibiotic produced by microbial metabolism grown in the bioreactant system. To eliminate the suspended microbial load, a filter was fed at a temperature of 25 ° C that produces a cake with 45% humidity and a filtrate that retains 0.9% of the microorganism generated by the bioreactor. The use of an ICCC with cold water at 20 ° C allowed the fermented broth to cool. The wet cake is transported to a dryer where it lost water and a biological paste with 9% water was obtained. Finally, the filtrate was fed to an evaporator that concentrated up to 60% of suspended and dissolved solids and generated a vapor free of cellular traces and solids. After that, a system modeling was used together with a simulation in MS-Excel in a Windows 10 environment. In conclusion, the number of biotechnology operations processes is very high, even higher than biotransformation processes. Just think of all the situations in which it is necessary to mix, aerate, separate, heat. These processes are usually also called basic or unit operations and form the basis of the operations carried out in biotechnology. Keywords: Unit operations, bioreactor, simulation, modeling, cell traces and solids. Introducción En el presente experimento de laboratorio se trató el tema de operaciones unitarias las cuales se pueden definir como un paso básico en un proceso. Las operaciones unitarias implican un cambio físico o transformación química, como separación, cristalización, evaporación, filtración, polimerización, isomerización y otras reacciones. Para representar estos pasos de una manera correcta y asertiva se elaboró un sistema que consta de varias partes las cuales serán ICCC, FRV, SEC y EV. Para proseguir con la explicación del experimento se tiene que saber conceptos basicos de un sistema de balance de Materia y Energía, al igual que seguir una ley la cual nos hará entender el cómo este sistema funciona esta ley se llama la “Ley de conservación de la masa de Lavoisier”, como esta indica, la masa no de crea ni se destruye se transforma. Por lo que en el paso del siguiente sistema de operaciones unitarias veremos como la corriente principal entrará al sistema y saldrá el producto que nosotros queremos encontrar. Comenzando con el sistema se quiso bajar la temperatura de nuestra corriente 1, para lograr esto es introdujo un ICCC, es un sistema de tubo contracorriente, este nos ayudará a controlar la temperatura de nuestra corriente 1, una corriente 2 entrará al sistema con el único objetivo de bajar la temperatura inicial sin tocar nuestra mezcla, ya que si esto llegara a ocurrir podría a llegar el componente que queremos llegar a conseguir. El procedimiento que se utilizó en el presente sistema es muy similar a un proceso de purificación que utilizará una industria, en el cual se van a utilizar un sistema de purificación, secado y evaporación. Todas estas instancias ocurrirán en el transcurso de nuestra corriente principal. Nuestra corriente principal contendrá una parte microbacteriana la cual será el metabolito buscado en el sistema. Tras que nuestra corriente pasa por el ICCC llega al filtrado que tiene como objetivo separar componentes sólidos y líquidos de una muestra sólido-líquido. Tras nuestra corriente pasó por el filtrado o FRV se va a generar un torta, la cual se define como un componente sólido con cierto porcentaje de humedad, al igual se genera un desecho, que es algo que no vamos a necesitar en nuestro sistema por lo que pasará al vaporizado para poder desechar lo que no necesitamos. Por último la torta pasará al secado para poder deshacernos del agua y/o porcentaje de humedad de nuestra torta. Luego de que nuestra muestra ya fue secada obtendremos el metabolito puro que queríamos como resultado. Para realizar todo el análisis de este experimento se empleó una hoja de excel en la cual se elaborará una tabla para generar un perfil consistente para que a pesar que se cambie datos en la tabla este varía con ellos y que esté programada para que siempre sirva. Esta tabla se elaboró en una hoja de cálculo de excel. Y se empleó la ley de conservación de la masa de Lavoisier para poder entender y realizar el sistema de la mejor manera posible. Materiales y método Materiales: - Caldo de fermentación - Intercambiador de calor tubular en contracorriente (ICCC) - Equipo de filtro en torta (FRV) - Equipo de evaporación (EV) - Equipo de secado (SEC) - Hoja de cálculo MS-Excel Metodología: El docente de la práctica dispuso un caso integrado de Balance de Materia y Energía, el cual reunió 4 Operaciones Unitarias: Intercambiador de calor tubular en contracorriente (ICCC), equipo de filtro en torta (FRV), equipo de evaporación (EV) y equipode secado (SEC). Para la realización del caso integrado se tuvo en cuenta el modelo gráfico y el modelo conceptual. Modelo conceptual: 1. Un reactor biológico produce un caldo de fermentación de 80 kg/h (Cp=0,8597 Kcal/Kg.°C) a una temperatura de 47°C. 2. Este reactor biológico contiene 6,7% de carga fungal y un 5,1% de sólidos disueltos entre los que se encuentra un antibiótico no esteroideo. Producido por el metabolismo microbiano cultivado en el sistema bioreaccionante. 3. Para eliminar la carga microbiana suspendida se debe alimentar a una temperatura de 25°C a un filtro que produce una torta con 45% de humedad y un filtrado que retiene un 0,9% de microorganismo que es generado por el bioreactor. 4. El uso de un ICCC con agua fría a 20°C permite el enfriamiento del caldo fermentado. 5. Por eso la torta húmeda se transporta hacia un secador donde pierde agua y se obtiene una pasta biológica con 9% de agua. 6. Finalmente, el filtrado se alimenta a un evaporador que concentra hasta un 60% de sólidos suspendidos y disueltos y generan un vapor libre de trazas celulares y sólidos. Posterior a la evaluación del caso integrado, se utilizó una Tabla de Información (TI) y una hoja de cálculo MS-Excel en torno a Windows 10 para simular valores experimentales. Resultados El caso práctico fué resuelto utilizando nuestras ecuaciones de: - Fracciones y porcentaje 𝑥 1 + 𝑥 2 + 𝑥 𝑛 = 1 = 100% = % 1 + % 2 + % 3 - Flujo total por componentes: 𝑥 1 * 𝐹 2 + 𝑥 2 * 𝐹 2 ... + 𝑥 𝑛 * 𝐹 𝑇 = 𝐹 𝑇 = 𝐹 1 + 𝐹 2 + 𝐹 3 = 𝐹 1 𝑜 2 𝑜 3 *100 𝐹 𝑇 - Lavoisier de Calor: ∑(𝑄 𝑆 * 𝐹 𝐸 ) − ∑ (𝑄 𝑆 * 𝐹 𝑆 ) = 0 Nuestro sistema es el siguiente: - Sistema de recuperación de A. Nigger Imagen: Sistema de caso práctico 12 Fuente: Integración de Balance de materia y Energía en Aplicaciones en Biotecnología (Operaciones Unitarias), Roque Rodriguez Francisco Javier Interpretación: Un flujo <1>, con nuestro microorganismo de interés ingresa a un Intercambiador de calor en contracorriente (ICCC), a la vez que un flujo <3> regula la temperatura de salida de <1> para trabajar con él en el sistema, una vez regulada se le llamará flujo <2>, el <3> al cumplir con la regulación saldrá del ICCC como flujo <4>. El flujo <2> entrará a un Filtro de Rotación al Vapor (FRV), para generar dos flujos <5> y <6>, denominados Torta y Filtrado respectivamente. <5> se dirigirá a un Secador para generar un flujo de torta seca (<8>) y agua (<7>). <6> se dirigirá a un evaporador para generar concentrado (<10>) y vapor (<9>). Resultados: Aplicando los respectivos balances obtenemos las siguiente tabla: - Tabla resolución del caso práctico: Características 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Flujo másico, Kg/h 80 80 40 40 9.6577 70.3423 3.5596 6.0982 63.8578 6.4845 Denominación Caldo Entr Caldo Alim Agua Refrig Agua Sald Torta Filtrado Adsorbi do Deshidra tado Vapor Concent rado Temperatura, °C 47 25 20 57.8268 25 25 60 60 25 25 Presión, atm 1 1 1 1 1 1 1 1 0.4 0.4 MSS (A. niger) Fracció n, x 0.067 0.067 0 0 0.55 0.0007 0 0.8710 0 0.0074 Porcent , % 6.7 6.7 0 0 55 0.0686 0 87.1044 0 0.7439 MSD (Ac, G, SA) Fracció n, x 0.051 0.051 0 0 0.0246 0.0546 0 0.0390 0 0.5926 Porcent , % 5.1 5.1 0 0 2.4598 5.4625 0 3.8956 0 59.2561 Agua Fracció n, x 0.882 0.882 1 1 0.4254 0.9447 1 0.09 1 0.4 Porcent , % 88.2 88.2 100 100 42.5402 94.4689 100 9 100 40 Flujo, kg/h 80 80 40 40 9.6577 70.3423 3.5596 6.0982 63.8578 6.4845 MSS (A Niger) 5.36 5.36 0 0 5.3118 0.0482 0 5.3118 0 0.0482 MSD (Ac, G, SA) 4.08 4.08 0 0 0.2376 3.8424 0 0.2376 0 3.8424 Agua 70.56 70.56 40 40 4.1084 66.4516 3.5596 0.5488 63.8578 2.5938 Agua+SD 74.64 74.64 40 40 4.3460 70.2940 3.5596 0.7864 63.8578 6.4362 Tabla: Resolución del sistema del caso práctico 12 Fuente: Elaboración propia Interpretación: Obtendremos dadas nuestras condiciones iniciales aproximadamente 5.36 kg/h de A. niger, 5.3118 kg /h por deshidratación y 0.0482 kg/h por evaporación por una alimentación de 80 kg/h. Este será nuestro referente con nuestras nuevas condiciones. Tenemos nuestro sistema completamente automatizado, por lo que podemos simular un caso, y estos son: ● ¿Si la humedad del Deshidratado (Flujo 8), fuese 0%, y el filtrado (Flujo 6) retenga 2%? - Tabla Primera Simulación del caso práctico: Características 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Flujo másico, Kg/h 80 80 40 40 9.5505 70.4495 4.0628 5.4877 63.8623 6.5871 Denominación Caldo Entr Caldo Alim Agua Refrig Agua Sald Torta Filtrado Adsorbi do Deshidra tado Vapor Concent rado Temperatura, °C 47 25 20 57.8268 25 25 60 60 25 25 Presión, atm 1 1 1 1 1 1 1 1 0.4 0.4 MSS (A. niger) Fracció n, x 0.067 0.067 0 0 0.55 0.0015 0 0.9572 0 0.0163 Porcent , % 6.7 6.7 0 0 55 0.1522 0 95.7191 0 1.6274 MSD (Ac, G, SA) Fracció n, x 0.051 0.051 0 0 0.0246 0.0546 0 0.0428 0 0.5837 Porcent , % 5.1 5.1 0 0 2.4598 5.4579 0 4.2809 0 58.3726 Agua Fracció n, x 0.882 0.882 1 1 0.4254 0.9439 1 0 1 0.4 Porcent , % 88.2 88.2 100 100 42.5402 94.3899 100 0 100 40 Flujo, kg/h 80 80 40 40 9.5505 70.4495 4.0628 5.4877 63.8623 6.5871 MSS (A Niger) 5.36 5.36 0 0 5.2528 0.1072 0 5.2528 0 0.1072 MSD (Ac, G, SA) 4.08 4.08 0 0 0.2349 3.8451 0 0.2349 0 3.8451 Agua 70.56 70.56 40 40 4.0628 66.4972 4.0628 0.0000 63.8623 2.6349 Agua+SD 74.64 74.64 40 40 4.2977 70.3423 4.0628 0.2349 63.8623 6.4799 Tabla: Resolución de adaptación 1° del sistema del caso práctico 12 Fuente: Elaboración propia Interpretación: Obtendremos dadas nuestras condiciones iniciales aproximadamente 5.36 kg/h de A. niger, 5.2528 kg /h por deshidratación y 0.1072 kg/h por evaporación por una alimentación de 80 kg/h. Este será nuestro referente con nuestras nuevas condiciones. Este crecimiento por parte del deshidratado puede deberse a la retención de <6> mayor que el original, por lo que hay mayor disponibilidad de A. Niger para concentrar en <10>. ● ¿Si el Caldo de entrada (Flujo 1) fuese de 48 kg/h, y la masa del sólido suspendidos fuese de 13%? - Tabla Segunda Simulación del caso práctico: Características 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Flujo másico, Kg/h 48 48 40 40 11.2433 36.7567 4.1220 7.1214 33.0774 3.6793 Denominación Caldo Entr Caldo Alim Agua Refrig Agua Sald Torta Filtrado Adsorbi do Deshidra tado Vapor Concent rado Temperatura, °C 47 25 20 42.6960 25 25 60 60 25 25 Presión, atm 1 1 1 1 1 1 1 1 0.4 0.4 MSS (A. niger) Fracció n, x 0.13 0.13 0 0 0.55 0.0015 0 0.8684 0 0.0153 Porcent , % 13 13 0 0 55 0.1528 0 86.8352 0 1.5264 MSD (Ac, G, SA) Fracció n, x 0.051 0.051 0 0 0.0264 0.0585 0 0.0416 0 0.5847 Porcent , % 5.1 5.1 0 0 2.6379 5.8531 0 4.1648 0 58.4736 Agua Fracció n, x 0.819 0.819 1 1 0.4236 0.9399 1 0.09 1 0.4 Porcent , % 81.9 81.9 100 100 42.3621 93.9941 100 9 100 40 Flujo, kg/h 48 48 40 40 11.2433 36.7567 4.1220 7.1214 33.0774 3.6793 MSS (A Niger) 6.24 6.24 0 0 6.1838 0.0562 0 6.1838 0 0.0562 MSD (Ac, G, SA) 2.448 2.448 0 0 0.2966 2.1514 0 0.2966 0 2.1514 Agua 39.312 39.312 40 40 4.7629 34.5491 4.1220 0.6409 33.0774 1.4717 Agua+SD 41.76 41.76 40 40 5.0595 36.7005 4.1220 0.9375 33.0774 3.6231 Tabla: Resolución de adaptación 2° del sistema del caso práctico 12 Fuente: Elaboración propia Interpretación: Obtendremos dadas nuestras condiciones iniciales aproximadamente 6.24 kg/h de A. niger, 6.1838 kg /h por deshidratación y 0.0562 kg/h por evaporación por una alimentación de 48 kg/h. El incremento de obtención de masa está en el incremento porcentual de A. Niger en la alimentación es de 6.3% mayor que en el caso original, aunque el flujo general sea menor, la obtención es mayor. ● ¿Si el Caldo de entrada (Flujo 1) fuese de 43 kg/h, y su temperatura es de 93%, y la humedad de la Torta (Flujo <5> fuese de 21%)? - Tabla Tercera Simulación del caso práctico: Características 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Flujo másico, Kg/h 43 43 40 40 3.6140 39.3860 0.4310 3.1830 35.7569 3.6291 Denominación Caldo Entr Caldo Alim Agua Refrig Agua Sald Torta Filtrado Adsorbi do Deshidra tado Vapor Concent rado Temperatura,°C 93 25 20 82.8440 25 25 60 60 25 25 Presión, atm 1 1 1 1 1 1 1 1 0.4 0.4 MSS (A. niger) Fracció n, x 0.067 0.067 0 0 0.79 0.0007 0 0.8970 0 0.0071 Porcent , % 6.7 6.7 0 0 79 0.0658 0 89.6967 0 0.7145 MSD (Ac, G, SA) Fracció n, x 0.051 0.051 0 0 0.0115 0.0546 0 0.0130 0 0.5929 Porcent , % 5.1 5.1 0 0 1.1479 5.4626 0 1.3033 0 59.2855 Agua Fracció n, x 0.882 0.882 1 1 0.1985 0.9447 1 0.09 1 0.4 Porcent , % 88.2 88.2 100 100 19.8521 94.4715 100 9 100 40 Flujo, kg/h 43 43 40 40 3.6140 39.3860 0.4310 3.1830 35.7569 3.6291 MSS (A Niger) 2.881 2.881 0 0 2.8551 0.0259 0 2.8551 0 0.0259 MSD (Ac, G, SA) 2.193 2.193 0 0 0.0415 2.1515 0 0.0415 0 2.1515 Agua 37.926 37.926 40 40 0.7175 37.2085 0.4310 0.2865 35.7569 1.4516 Agua+SD 40.119 40.119 40 40 0.7589 39.3601 0.4310 0.3280 35.7569 3.6031 Tabla: Resolución de adaptación 2° del sistema del caso práctico 12 Fuente: Elaboración propia Interpretación: Obtendremos dadas nuestras condiciones iniciales aproximadamente 2.881 kg/h de A. niger, 2.8551 kg /h por deshidratación y 0.0259 kg/h por evaporación por una alimentación de 43 kg/h. La obtención menor de A. niger es debido al escaso flujo de administración, podemos notar que la temperatura de salida del refrigerante (agua) <4>, es mayor a causa del incremento de temperatura en el ingreso. Podemos notar el deshidratado (<8>) es por mucho mayor que el adsorbido (<7>), debido al decremento de la humedad de la torta (<5>) por 24% Discusión Se aplicaron los fundamentos y conceptos para interpretar el sistema de la A. Niger, donde a su vez se emplearon las ecuaciones de fracciones y porcentajes, flujo total de compuestos y la Ley Lavoisier de calor, que mide los cambios de calor durante una reacción química, la cual nos ayudó a completar las tablas de acuerdo a cada flujo, en la primera tabla las condiciones iniciales aproximadamente 5.36 kg/h de A. niger, 5.3118 kg /h por deshidratación y 0.0482 kg/h por evaporación por una alimentación de 80 kg/h, en la segunda tabla las condiciones iniciales aproximadamente 5.36 kg/h de A. niger, 5.2528 kg /h por deshidratación y 0.1072 kg/h por evaporación por una alimentación de 80 kg/h. en comparación con la primera se notó un crecimiento por parte del deshidratado, las tablas 3 y 4 también presentaron incremento en la temperatura, debido al proceso del intercambio de contracorriente. Conclusiones - Se aplicaron los conocimientos aprendidos de balance de materia y energía para lograr resolver casos de aplicación integrada en el balance de energía y el balance de masa. - Se manejó de una manera correcta la aplicación de los fundamentos, conceptos y herramientas de balance de masa y energía para lograr solucionar casos de aplicación en operaciones unitarias (Downstream) en la biotecnología e Ingeniería con la aplicación de la ecuación de conservación de Lavoisier. - Se analizó y simuló con propiedad la modelación matemática de sistemas biotecnológicos de separación y concentración con el uso del MS-Excel como herramienta informática y hoja de cálculo para la respectiva simulación numérica. Referencias bibliográficas [1] Córdova Mendoza P, Barrios Mendoza TO, Córdova Barrios IC, Navarrete Velarde RA. Tratamiento de aguas residuales domésticas mediante reactor anaerobio para la reutilización del efluente en cultivos agrícolas. revistaalfa [Internet]. 4 de mayo de 2021 [citado 29 de noviembre de 2021];5(14):250-61. Disponible en: https://www.revistaalfa.revistahorizontes.org/index.php/revistaalfa/article/view/121 [2] Carrillo Analuisa, Karen Del Rocío. (2017). Rediseño del sistema de tratamiento de aguas residuales del Centro de Faenamiento de la ciudad de Guaranda. Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Riobamba. Disponible en: http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/8569 [3] Cedeño Sares, Luis; Llerena Ramírez, Carmen; Palacios Ponce, Sócrates. (2018) Balance de Materia y energía en procesos térmicos. Machala : Universidad Técnica de Machala. Disponible en: http://repositorio.utmachala.edu.ec/handle/48000/14374 https://www.revistaalfa.revistahorizontes.org/index.php/revistaalfa/article/view/121 http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/8569 http://repositorio.utmachala.edu.ec/handle/48000/14374
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