Biologia-celula-23

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CAPÍTULO 1: ESTUDIO GENERAL DE LA CÉLULA 9
se hasta 1 nm con el microscopio electrónico de trans-
misión. Esto se debe a que no se utilizan cortes, sino ex-
tensiones del material tal como éste se encuentra (sin
cortar). El material biológico (bacterias, virus, orgánulos
celulares, macromoléculas, etc.) se rodea con ácido fos-
fotúngstico que no permite el paso de electrones, los
cuales atraviesan fácilmente el material biológico sin te-
ñir. En las imágenes se observa el ácido fosfotúngstico,
muy oscuro, rodeando el material, el cual queda sin teñir,
con el aspecto de un negativo fotográfico (Figs. 1.16.F 
y 5.5).
Sombreado metálico
Se evaporan, con un determinado ángulo, átomos me-
tálicos sobre una superficie que presente un relieve, 
como material filamentoso, bacterias, virus, superficies
fracturadas de la membrana plasmática, etc. (Fig. 1.3).
Quedan así unas sombras y un contraste que permiten
una apreciación tridimensional.
Los metales se evaporan mediante un filamento in-
candescente de tungsteno en una campana en la que
se ha hecho el vacío. Los átomos del metal son bombe-
ados sobre la muestra, que se ha colocado en un ángu-
lo determinado. El ángulo de incidencia permite medir
la altura de las partículas (Fig. 1.4). Una variante utiliza-
da para revelar moléculas largas y finas como los áci-
dos nucleicos es el sombreado mientras la muestra va
girando.
Criofractura-réplica (freeze-etching) 
Esta técnica es muy útil para el estudio de las superficies
fracturadas de la membrana plasmática y orgánulos celu-
lares (Fig. 1.3). El proceso comprende tres pasos (Fig. 1.5):
1. Congelación de la muestra (muy rápida para que
no se formen cristales de hielo).
2. Fractura de la muestra con una cuchilla, en una
campana de gran vacío y a muy baja temperatura
(a unos –115 °C). No hay corte, sino fractura por
las líneas de mínima resistencia. A continuación,
se produce la sublimación del hielo a vapor de
agua (a –100 °C).
3. Réplica por sombreado metálico, seguida de eva-
poración de carbono sobre la muestra. El material
biológico se disuelve con detergentes y sólo que-
da la réplica para ser observada con el microsco-
pio electrónico.
Microanálisis de energía dispersiva de rayos X
(MEDX)
Los electrones que chocan con la muestra no sólo su-
fren la dispersión mencionada anteriormente y que per-
mite formar imágenes; también generan rayos X. Un
electrón que incida en las capas de electrones de un
átomo puede causar un desplazamiento de un electrón
orbital interno hacia una órbita más alta. El electrón pri-
Figura 1.2. Microscopía de barrido. A: Ciegos pilóricos de estrella de mar (Marthasterias glacialis). X20. (Cortesía de A. Martí-
nez. Departamento de Histología, Universidad de Navarra). B: Ojo de insecto (Drosophila melanogaster). X48.
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