comprobacion de fenotipos

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UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO
División de Ciencias Naturales y Exactas
LABORATORIA DE GENÉTICA
PRÁCTICA 1
“COMPROBACIÓN DE FENOTIPOS”
Profesor: Dra. Gloria Angélica González Hernández
Equipo: 
Rafael Durán Gómez
José Adrián Gallardo García
Guadalupe Rivera Méndez
22 de septiembre de 2017
OBJETIVO
Observar y determinar el fenotipo y el genotipo de dos cepas de Saccharomyces cerevisiae utilizando diferentes medios de cultivo.
INTRODUCCIÓN
El genotipo de un ser vivo es la información contenida en los genes con todas las características que definen a cada individuo y que se transmiten de generación en generación a través de la herencia. Mientras que el fenotipo es la expresión visible de estas características durante el desarrollo, tales como el color del pelo o la estatura, color de una flor (Fig1). 
Fig. 1 1
Mendel dedujo que el gen está compuesto por dos partes llamadas alelos, cada uno porta determinada característica genética que puede ser dominante, si se presenta en mayor proporción, o recesiva, si aparece después de varias generaciones. Mendel asignó un código para representar cada alelo y facilitar su estudio:
1. Una letra mayúscula en cursiva para representar una característica dominante, por ejemplo A.
2. La misma letra en minúscula y cursiva para representar una característica recesiva, por ejemplo a.
Cuando los alelos se combinan a partir de dos individuos distintos (progenitores) el resultado es un nuevo individuo que hereda las características de ambos (descendientes). Por ejemplo, cuando un progenitor es completamente dominante (AA) y otro totalmente recesivo (aa) y ambos pasan por la fecundación (proceso celular en donde el material genético de los gametos masculino y femenino se combinan y producen descendientes diferentes), en la primera generación, se presentará un genotipo que contiene la información de ambos progenitores (Aa).
Los fenotipos dependen de los genes que se heredan, sin embargo, su expresión también se ve influenciada por factores ambientales. La influencia del medio ambiente, modifica hasta cierto punto el papel que juegan los genes. En pocas palabras, la expresión de los genes, modificados por factores ambientales, da como resultado un fenotipo.
Anteriormente decíamos que el genotipo determina qué tan susceptible es un organismo a determinada enfermedad, pues en este caso, el fenotipo representaría los aspectos observables de dicha enfermedad. Los síntomas relacionados con esa enfermedad.
En el caso de la variación genotípica entre los cromosomas XX y XY, cuando observamos las diferencias físicas entre un hombre y una mujer; estamos observando sus características fenotípicas.
Para una levadura en presencia de un alelo defectivo de un gen en una ruta metabólica es observable directamente a un nivel fenotípico como un defecto metabólico. Las levaduras silvestres pueden sintetizar su propia fuente de alimento y se les conoce como protótrofo, en cambio para los que no sintetizan su alimento se les llama auxótrofos.
DESARROLLO
Material
a. Cepas de levaduras frescas (48 hrs.) en placa.
b. Medios solidos YDP, los medios mínimos para levaduras sin algún nutriente específico necesario, dependiendo de las características nutricionales de las cepas empleadas en el ensayo, medio Dextrosa – Saboraud y medio mínimo sin aminoácidos para la levadura.
c. Asa de siembra.
d. Microscopio.
e. Porta objeto.
f. Agua destilada estéril.
Procedimiento
1. Se tomó una asada de la cepa de levadura y se sembró por estría en cada uno de los medios.
2. Se repitió la siembra para la otra cepa.
3. Se incubó por 7 días a 28°C.
4. Se tomó nota sobre el crecimiento de las cepas en cada medio, se identificó por morfología a simple vista y mediante microscopio, si se trató de levaduras, micelio o bacterias.
RESULTADOS
A continuación, se muestran las fotografías de algunos de los medios en los que fueron crecidas las dos cepas de S. cereviciae:
 
	
	Crecimiento
	Superficie
	Borde
	Color
	Consistencia
	Genotipo
	Fenotipo
	CEPA Y1
	YPD
	✓
	Lisa
	Ondulado
	Blanco
	
	
	
	MMC
	✓
	Plana
	Entero
	Blanco
	Lisa
	
	
	MMS
	-
	
	
	
	
	
	Auxótrofo
	MM-Ade
	✓
	Lisa
	Entero
	Blanco
	Lisa
	- Ade
	Protótrofa para Adenina 
	MM-His
	-
	
	
	
	
	- His1
	Auxótrofra para Histidina
	MM-Leu
	-
	
	
	
	
	- Leu2
	Auxótrofa para Leucina
	MM-Ura
	-
	
	
	
	
	- Ura3
	Auxótrofa para Uracilo
	CEPA Y7
	YPD
	✓
	Rugoso
	Ondulado
	Rojo
	Seca
	
	
	MMC
	✓
	Rugoso
	Ondulado
	Rojo
	Seca
	
	
	MMS
	-
	
	
	
	
	
	
	MM-Ade
	-
	
	
	
	
	- Ade
	Auxótrofa para Adenina
	MM-His
	✓
	Rugoso
	Ondulado
	Rojo
	Seca
	- His1
	Protótrofa para Histidina
	MM-Leu
	✓
	Rugoso
	Ondulado
	Rojo
	Seca
	- Leu2
	Protótrofa para Leucina
	MM-Ura
	✓
	Rugoso
	Entero
	Rojo
	Seca
	- Ura3
	Protótrofa para Uracilo
OBSERVACIONES
La morfología colonial de ambas cepas fue muy similar, aunque la cepa Y7 presentó un color rojizo, respecto de Y1 la cual era de color blanco.
Al observar el crecimiento en el medio YPD, se comprobó que las cepas sembradas en cada uno de los medios eran viables.
El crecimiento nulo en el medio MMS, indica que las cepas son auxótrofas para alguno de los componentes que no está presentes en dicho medio, puesto que en el medio MMC si hubo crecimiento de colonias de ambas cepas.
CONCLUSIONES
Con base en los resultados obtenidos se concluye que las dos cepas estudiadas, Y1 y Y7, presentan distintos fenotipos respecto al color, blanco y rojizo, respectivamente. Con respecto al crecimiento de las dos cepas en los medios carentes de algún aminoácido o base nitrogenada, Y1 es auxótrofa para Histidina, Leucina y Uracilo (al no crecer en dichos medios), pero protótrofa para Adenina, caso contrario a la cepa Y7, la cual es auxótrofa para esta última base nitrogenada y protótrofa para los demás componentes.
Ejemplos en la industria en las cuales sea importante el fenotipo de un microorganismo.
Gluconobacter oxydans 
Es útil para una serie de aplicaciones biotecnológicas. La producción de vitamina C, sorbitol, xilitol, y el vinagre son ayudados con la adición de G. oxydans. Los biosensores utilizando G. oxydans se pueden utilizar para medir la concentración de sustrato como un biosensor. Con la adición de G. oxydans en biosensores microbianos los resultados de la respuesta biosensor es más rápido debido a la localización periplásmica de las enzimas dependientes de PQQ. Etanol en el aire, el glicerol en medios de fermentación, y la glucosa en los seres humanos son sólo algunas de las aplicaciones interesantes actualmente en fase de investigación.
Brevibacterium linens
Este organismo es una bacteria que se utiliza principalmente en la maduración de quesos tales como limburger. Este queso al principio no tiene una textura muy diferente a la mayoría de los quesos. Al incorporar este organismo a la parte externa del mismo y dejándolo en reposo a condiciones favorables después de un tiempo (aproximadamente 6 meses) el queso tendrá un olor característico muy parecido al olor corporal del cuerpo y pies.
CUESTIONARIO 
1. ¿Las características morfológicas de las células y de las colonias son parte del fenotipo?
Sí.
¿Por qué?
Porque es un carácter que viene dado por los genes.
2. ¿Qué estrategia seguirías para aislar una bacteria capaz de utilizar como fuente de carbono un sustrato recalcitrante considerado contaminante? Especifica el sustrato al definir la estrategia que seguirías.
Primero, se elegiría la fuente (sustrato) de dónde aislar al microorganismo, por ejemplo, de una mezcla de hidrocarburos como el petróleo. Luego, se inocularía una gota del sustrato en un medio cuyas fuentes de carbono fueran algunos de los hidrocarburos presentes en el petróleo.
Después, dependiendo del número de colonias que crecieran en el medio, se tomaría una azada y se llevaría a cabo una siembra por estría cruzada en el mismo medio para obtener una colonia aislada.
3. Del microorganismo de la pregunta anterior, ¿qué característica de la cepa aislada sería una característica distintiva de su fenotipo?
Su auxotrofía al petróleo.
4. ¿Cómodemostrarías que la cepa aislada tiene este fenotipo y no lo tienen otros microorganismos que podrían crecer junto a ella?
Creciendo la cepa en un medio sin el hidrocarburo y a los otros microorganismos en el medio con el hidrocarburo, pero sin la presencia de dicha cepa.
5. ¿Cómo explicas el crecimiento de los microorganismos que crecieron junto con él, pero carecen de este fenotipo? 
Posiblemente dicha bacteria les proporcionaba algún nutriente a los demás microorganismos, por lo que éstos podían crecer en el medio.
REFERENCIAS
Jaroslav Katrlik, Igor Vostiar, Jana Sefcovicoa, Jan Tkac, Vladimir Mastihuba, Milán Valach, Vladimir Stefuca, y Peter Gemeiner. 'Una novela biosensor microbiano basado en células de Gluconobacter oxydans para la determinación selectiva de 1,3-propanodiol en presencia de glicerol y su aplicación a la vigilancia de bioprocesos'. Analítica y Química bioanalíticos, Springer-Verlag 2007.
Medina Fernández-Regatillo, M, 1990: “Principios Básicos para la Fabricación de Quesos” Hojas Divulgadoras del Ministerio de Agricultura, Pesca y Almentación, Rivadeneyra S.A. Madrid. 
Veisseyre, R.(1990). “Lactología Técnica”, 3oEdición. Editorial Acribia. España.