Manejo y preparación del material utilizado en microbiología

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INSTITUTO TECNOLÓGICO DE 
LOS MOCHIS
LICENCIATURA EN BIOLOGÍA
Microbiología
Reporte de práctica de laboratorio #2:
“Manejo y preparación del material utilizado en microbiología”
Soto Luque Carlos Manuel
13440009 – B1M
M.C. Ochoa Hernández María
Los Mochis, Sinaloa a 24 de octubre de 2014.
Introducción
El análisis microbiológico requiere de una adecuada selección de muestras, tanto de su toma como de su aplicación, pero aún más importante es en dónde se colocará dicha muestra. El material de laboratorio para Microbiología es de preciso cuidado al utilizarlo, ya que este debe estar esterilizado y en un ambiente libre de microorganismos que vaguen en el aire. 
Es necesario precisar medidas de prevención de contaminación ante el material para no afectar los resultados de las muestras microbiológicas a analizar. A demás de darles la limpieza adecuada tanto antes como después de su uso. 
Objetivos
· Preparar, esterilizar y manejar adecuadamente el material utilizado en el laboratorio de microbiología.
Material y método
1. Preparación del material para esterilización
· Se colocó un filtro de algodón con ayuda de un clip a cinco pipetas y se envolvió en papel dextrasa cada una. Se marcó el volumen de cada pipeta junto a su fecha de preparación.
· Se taparon cinco tubos de ensayo con un tapón de algodón, a manera que estos pudieran ser retirados con el dedo meñique sin problema.
· Con papel reciclado, se envolvió las cajas Petri colocándolas con la tapa hacia abajo y el papel a manera resistente.
· Se colocó un tapón de algodón a cada matraz y se cubrió con un capuchón o gorro de papel.
2. Manejo de diluciones
· Se utilizó una pipeta con filtro de algodón para agregar 9 ml de agua destilada a un tubo de ensayo tapado con tapón de algodón (este se retiró con el dedo meñique mientras la adición del agua). 
· Con una pipeta de 1 ml se adicionó al primer tubo, 3 gotas de azul de metileno y se realizaron 4 diluciones 1:10, utilizando una pipeta con filtro para cada dilución (añadiendo 1 ml de la solución anterior a la siguiente, sucesivamente).
· Se agitó cada tubo 40 veces en forma de vorágine cuidando de no manchar el tapón de algodón de cada tubo.
3. Manejo de cajas
· Se colocó 10 ml de HCl 0.1 M en una caja de Petri y se añadió dos gotas de fenoftaleína. Esto se tituló con NaOH 0.1M y mientras se agregaba lo anterior, la caja de Petri se agitó cuidadosamente moviendo la muñeca en forma circular hasta que la solución viró completamente a rosado.
Resultados
1. Preparación del material para esterilización
Los tapones de algodón quedaron a una distancia media entre la boca del tubo y/o matraz, así como del cuello. 
Los forros de papel en las pipetas quedan adecuados al cuerpo de estas cortando la parte de la boquilla de la pipeta, en la cual se le colocó una etiqueta con el volumen de esta. 
El capuchón de papel, queda al ras de la boca del matraz pudiendo ser retirado junto con el tapón de algodón. 
2. Manejo de diluciones
3. Manejo de cajas
La caja de Petri con la titulación finalizada, quedó totalmente virada al rosa (fig. 3). Se ocupó aprox. 6 ml de NaOH 0.1 M para el proceso.
Discusión
Conclusión
Cumpliendo con el objetivo de la práctica, se nota la importancia del manejo del material de laboratorio de Microbiología, teniendo extremo cuidado ya que un mal uso de este contaminaría la muestra que puede ser colocada en el para un estudio microbiológico. Además, la elaboración de herramientas caseras, como los tapones de algodón, envolturas de papel, etc., permite trabajar en ambientes que no estén completamente asépticos, para evitar la contaminación del trabajo.
Cuestionario
1. Describe de manera breve cual es el objetivo de cada apartado.
· Preparación del material para la esterilización: Mantener el material a utilizar “sellado” ante el medio ambiente para cuando se retire de la autoclave o del proceso de esterilización, al igual que, mantenerlo esterilizado durante un cierto tiempo.
· Manejo de diluciones: Realizar disminuciones de una muestra distribuyendo de manera proporcional 1:10.
· Manejo de cajas: La titulación, esta determinará la concentración de una solución ácida o básica desconocida. 
2. Describa la forma correcta de utilizar la pipeta en el área de siembra microbiológica.
3. ¿Qué utilidad tiene las diluciones en microbiología? De un ejemplo.
Cuando se sospecha que en una muestra existe una gran cantidad de microorganismos UFC, esta se diluye para minimizar las UFC y poder realizar un conteo más rápido y certero en un medio menos colonizado pero con UFC proporcionales a las demás muestras.
4. ¿Qué observó al hacer el ejercicio de diluciones? ¿En cuál dilución ya no se detecta el colorante? ¿Por qué?
Se observa la reducción de la intensidad del color del colorante proporcionalmente entre los cinco tubos de ensayo.
En la dilución #5. Porque el colorante se redujo 50 veces en una solución de 9 ml de agua. Su intensidad ya no era visible.
5. ¿Cómo lo relaciones en el trabajo de aislamiento de microorganismos?
Principalmente 
Bibliografía