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Msc. Antonella Antonucci F Diagnóstico según evolución Microscopía Aps fluorescentes Aglutinación detección de antígenos febriles Aglutinación: Rosa de Bengala Hemocultivo Mielocultivo Tejido Órganos Bacterémica Localizada Diagnóstico Bacteriológico se practica en fase febril Procesos agudos Aislamiento 90-95% de los casos En casos de fracaso terapéutico o reinfección 60%. Diagnóstico Bacteriológico El aislamiento de Brucella sp. → Método diagnóstico definitivo CULTIVO Muestra Sangre: hemocultivo Muestra médula ósea: Mielocultivo Menos frecuente cultivo de los líquidos: LCR, líquido articular, exudado purulento. Diagnóstico Directo ➢ El cultivo Ruiz Castañeda (medio que contiene fase líquida y fase sólida). Tiempo de cultivo: En la mayoría de los casos 2-4 días (pequeñas colonias en forma de lágrimas de cera). Una pequeña proporción de casos presenta el crecimiento entre 5-15 días De forma excepcional se observa crecimiento pasados 30-45 días. GRAM → Dx PRESUNTIVO Coloración de Gram Dx PRESUNTIVO MORFOLOGIA COLONIAL Diagnóstico Indirecto PROTOCOLO ✓ Prueba del ROSA DE BENGALA como screening (IgM). ✓ Seroaglutinación Wright en caso de positividad. ✓Prueba de Coombs (IgG) en caso de títulos bajos o negativos. ✓ELISA para el estudio de Inmunoglobulinas específicas Diagnóstico Diagnóstico indirecto (seroaglutinación y Rosa de Bengala) Muestra: Suero ✓Demostración de anticuerpos frente a antígenos de la pared bacteriana. ✓Entre 2da y 3era semana aparecen anticuerpos aglutinantes dirigidos frente al lipopolisacárido. Rosa de Bengala Diagnóstico Indirecto ✓El reactivo de la prueba contiene antigenos microbianos conocidos. ✓La prueba es positiva si los antigenos del reactivo aglutinan con los anticuerpos del suero del paciente ✓La persona probablemente ha sido infectada por el microorganismo eb cuestión, ya sea recientemente o en el pasado. Diagnóstico Rosa de Bengala. Aglutinación en placa, diagnóstico inicial de la brucelosis y como prueba de cribaje (rápida y de bajo costo). Sus falsos negativos: enfermedad de pocos días de evolución Enfermedad de curso muy prolongado (crónica). Diagnóstico Aglutinación en tubo o placa con pocillos Es la más utilizada sensible y específica. No existe título definitivo indicativo de infección. Un título de 1:160 o mayor es POSITIVO en zonas endémicas SE REQUIERE DETERMINAR TÍTULOS Y 15 - 120 DÍAS POSTERIORES Diagnóstico Coombs antibrucela. Detecta anticuerpos con poca capacidad aglutinante, fundamentalmente IgG. Enzimo-inmunoensayo (ELISA). Cuantifica anticuerpos específicos de tipo IgM, IgG e IgA con actividad anti-LPS. Sensibilidad superior a la seroaglutinación. Diagnóstico Dipstick. Identifica las Ig M la sensibilidad similar a la aglutinación reporte en cruces. Brucellacapt. Prueba de inmunocaptura-aglutinación detecta anticuerpos totales contra Brucella. Titulos de 1/320 Epidemiología BRUCELOSIS De 10 a 100 microorganismos por inhalación son suficientes para producir la enfermedad. Elevado potencial infectivo, Utilizan el bioterrorismo, está incluido en la lista de agentes potenciales de bioterrorismo Supervivencia ambiental ✓Más de dos meses en agua a 20ºC ✓Dos meses en el suelo y pasto fresco en un ambiente húmedo Supervivencia ambiental • Hasta 8 meses en desechos relacionados con animales • Meses en sustratos secos. A temperatura de congelación Trabajadores de Mataderos Veterinarios Bioanalista Distribución en zonas ganaderas Personal propenso a adquirir infección POR AUSENCIA DE BIOSEGURIDAD
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