LEUCOCITOS

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LEUCOCITOS
Para evaluar a los leucocitos primero se realiza un conteo mediante métodos electró-nicos o con las pipetas de Thoma.
0.5 1 11
Las pipetas se llenan de sangre hasta la marca de 0.5 y el resto, con la solución de Turk
(a base de ácido acético glacial y violeta de genciana), hasta la marca de 11 para lograr una
dilución de 1:20; se mezcla perfectamente evitando que se salga líquido.
Después de unos minutos, se eliminan tres gotas, y las siguientes son empleadas para
llenar el hemocitómetro. Éste debe tener un cubreobjetos especial y limpio que se coloca
sobre las barras humedecidas con agua (no poner saliva). Hay que dejar unos minutos en
reposo para que sedimenten las células y efectuar la cuenta de manera cómoda (en caso
de tener otras actividades, dejar el hemocitómetro sobre un papel húmedo y bajo una caja
de Petri para evitar que se deshidrate la muestra).
La plataforma de conteo tiene nueve grandes cuadros con diferente número de
divisiones:
0.1 mm entre cubreobjetos
y plataforma
Barra de
soporte Muestra
Plataforma de conteo
Cubreobjetos
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Para la cuenta de leucocitos se toman los cuatro extremos, que tienen
16 cuadros pequeños.
A 40 X lo observamos así:
Un cuadro de la esquina llevado a 100 aumentos:
El conteo se realiza de izquierda a derecha, se debe tener cuidado de no
contar dos veces la misma célula, pues al final se reflejará con una diferen-
cia enorme de lo que tiene en realidad el animal.
El cuadro superior izquierdo a 400 aumentos.
Se requiere contar las células que estén sobre la línea izquierda y la
línea superior ( ) para incluirlas en ese cuadro.
Por el contrario, las células que se encuentren sobre la línea derecha o la
inferior del cuadro no se incluyen en la cuenta ( ) para evitar contarlas dos
veces.
Ya que se tiene la cuenta final (en la cual no debe haber una diferencia
superior de 25% entre cada cuadro de las esquinas), se emplea la siguiente fórmula para la
obtención de leucocitos X 109/L:
Número de células contadas X dilución X distancia entre plataforma y cubreobjetos
Número de cuadros de 1 mm3 X 1000
Por ejemplo, si la cuenta es de 60, entonces:
60 X 20 X 10
 4 X 1000
12 000
4 000
Posteriormente se prepara la confección de extendidos
(frotis) sanguíneos.
Se deben emplear laminillas limpias, no melladas, sin
huellas (porque la grasa hace impermeable la laminilla e im-
pide que se adhiera la película celular a ésta).
1mm2
= 3.0 X 109/L
45°
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Antes de efectuar el extendido, se ensaya el deslizamiento
sin tocar la muestra, para detectar imperfecciones en el lava-
do o en el borde de la laminilla que va a extender, y reempla-
zarla, de ser necesario.
Con un ángulo de 45° se rebasa la muestra completamente.
Posteriormente se desliza el portaobjetos de manera sua-
ve, manteniendo el ángulo hasta terminar el extendido. Éste
debe suspenderse antes del límite de la laminilla.
Se deben notar tres diferentes densidades en el extendido:
1) Zona muy densa, no sirve para evaluar los leucocitos, eritrocitos o plaquetas, pues se
encuentran demasiado encimados o contraídos y no permite su diferenciación.
2) Zona ideal para la evaluación del extendido, las células se encuentran bien extendidas
sin deformaciones, como en la zona 3.
3) Zona muy delgada, se emplea para la búsqueda de microorganismos en eritrocitos
que hayan perdido su hemoglobina, se verifica que no hayan agregados de plaquetas,
microfilarias o grandes células.
Antes de iniciar el diferencial, en un frotis teñido con
Wright, se debe hacer un reconocimiento panorámico (40 X,
esto es, el objetivo de 4X y ocular de 10X) del frotis (para de-
tectar microfilarias o agregados de plaquetas), ver la distribu-
ción y seleccionar el campo para iniciar el diferencial de 100
leucocitos (neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos), observar a 1 000 X
y aceite de inmersión. Empezar desde la parte intermedia (2) hacia la parte más gruesa (1).
La dirección en zigzag que debe llevar la evaluación está relacionada con la reparti-
ción de las células en el extendido, ya que ésta no es equilibrada. Los eritrocitos pequeños
y los linfocitos se van a ubicar en el centro del extendido, mientras que sobre los bordes
se van a encontrar grandes eritrocitos, granulocitos y algunos linfocitos, y sobre el borde
final del frotis (3) se van a encontrar los elementos de mayor tamaño (monocitos, agrega-
dos de plaquetas, microfilarias, etc.).
Cuando se detectan eritrocitos nucleados en los extendidos sanguíneos, se debe ha-
cer la corrección del número de leucocitoscorrección del número de leucocitoscorrección del número de leucocitoscorrección del número de leucocitoscorrección del número de leucocitos, ya que estas células se contabilizan como
leucocitos en técnicas, tanto manuales, como electrónicas, porque resisten los hemolisantes
al igual que los leucocitos.
Para realizar esta corrección se aplica la siguiente fórmula:
Núm. de leucocitos corregidos = 100 X núm. células contadas
 100 + eritrocitos nucleados
Ejemplo: Leucocitos 7 X I09/L y 25 eritrocitos nucleados/100 leucocitos.
Núm. de leucocitos corregidos = 100 X 7 = 700 = 5.6 X 109/L
 100 + 25 125
 1 2 3
1 2 3
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En este caso, antes de la corrección, los valores de leucocitos están en los límites
normales, pero después de la corrección, estos valores indican un estado de leucopenia.
Leucograma
Existen cinco variedades leucocitarias: neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y
basófilos.
Un aumento o una disminución en los valores absolutos de alguno de ellos pueden
orientar hacia el diagnóstico. Es un grave error (muy frecuente) interpretar los valores
relativos de los leucocitos, es decir, en porcentajes, ya que inducen a confusión.
La única subvariedad que debe ser evaluada, tanto en valores absolutos, como relati-
vos (porcentaje), son los neutrófilos en banda o no segmentados. Un aumento en cual-
quiera de los dos valores es indicativo de un proceso inflamatorio.
Neutrófilos
Su función primaria es la fagocitosis y la eliminación de diferentes organismos. Es la
primera línea de defensa. Ejercen una actividad citotóxica antiparasitaria y antitumoral, y
pueden causar daño tisular. El incremento de los valores absolutos de los neutrófilos, con
relación a los valores de referencia, se expresa como neutrofilia.
Las principales causas de neutrofilia neutrofilia neutrofilia neutrofilia neutrofilia son:
✦ Estrés
✦ Corticoterapia
✦ Hiperadrenocorticismo
✦ Inflamación
✦ Ejercicio
✦ Leucemia
La disminución de los valores absolutos de los neutrófilos con relación a los valores
de referencia se denomina neutropenia.
Las principales causas de neutropenianeutropenianeutropenianeutropenianeutropenia son:
✦ Inflamación severa
✦ Consumo excesivo
✦ Infecciones por gramnegativos (marginación)
✦ Destrucción excesiva (inmunomediadas)
✦ Mielosupresión (FeLV, PIF, antineoplásicos, antibióticos, estrógenos, etc.)
✦ Hipoplasia mieloide (mielofibrosis, estrógenos, etc.)
Desviación a la izquierda
Es el aumento de los valores absolutos o del porcentaje de neutrófilos inmaduros. Indica
la presencia de una inflamación por un incremento en la demanda de neutrófilos, sin que
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la médula ósea logre cubrirla, lo cual tiene como resultado la liberación de células inmaduras
a la circulación.
Desviación a la derecha
Es el incremento de lobulaciones nucleares en los neutrófilos, según las diferentes espe-
cies. Indica una larga estancia de los neutrófilos en la circulación. La causa más frecuente
es el hiperadrenocorticismo. Los corticosteroides estabilizan las membranas celulares
inhibiendo la migración neutrófila hacia los tejidos. También puede reportarse una des-viación a la derecha en muestras envejecidas o en deficiencias de ácido fólico.
Neutrófilos tóxicos
Indican la presencia de un proceso inflamatorio, y existen cinco formas de este tipo de
células: basofilia focal (cuerpos de Döhle), basofilia difusa, vacuolación con basofilia di-
fusa (verdadera toxicidad), granulación tóxica y neutrófilos gigantes.
Fórmula de estrés
Se caracteriza por tener una linfopenia que en ocasiones está acompañada de neutrofilia.
Solamente en los perros y en los bovinos puede presentar, además, una monocitosis.
Linfocitos
Constituyen la piedra angular de la respuesta inmune del organismo.
Un incremento de los valores absolutos de los linfocitos con relación a los valores de
referencia, según la especie, se refiere como una linfocitosis.
Las principales causas de linfocitosislinfocitosislinfocitosislinfocitosislinfocitosis son:
✦ Vacunaciones
✦ Forcejeo (principalmente en gatitos)
✦ Animales jóvenes (fisiológica)
✦ Leucemia linfocítica
✦ Linfosarcoma leucémico
Una disminución de los valores absolutos de los linfocitos con relación a los valores
de referencia, según la especie, se refiere como una linfopenia.
Las principales causas de linfopenialinfopenialinfopenialinfopenialinfopenia son:
✦ Estrés
✦ Hiperadrenocorticismo
✦ Corticoterapia
✦ Infecciones virales, como el moquillo canino
✦ Linfangiectasia
✦ Quilotórax
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Linfocitos reactivos
También se conocen como inmunocitos o virocitos, e indican reacciones inmunes.
Linfocitos atípicos
Su presencia indica:
✦ Leucemia linfoide
✦ Linfosarcoma leucémico
Monocitos
Son la segunda línea de defensa del organismo y se transforman en macrófagos en los
tejidos. Tienen una importante función fagocítica de partículas y de destrucción de agen-
tes patógenos que no pueden ser controlados por los polimorfonucleares. Participan en la
exposición de antígenos a los linfocitos T en la respuesta inmune.
Un incremento en los valores absolutos de monocitos con relación a los valores de
referencia de la especie en cuestión se señala como una monocitosis.
Las principales causas de monocitosismonocitosismonocitosismonocitosismonocitosis son:
✦ Inflamaciones crónicas y granulomatosas
✦ Degradación tisular
✦ Corticoterapia en perros
✦ Estrés en perros
✦ Leucemias
Aunque en algunos libros se mencione la monocitopenia, en lo particular no estoy de
acuerdo, ya que en la mayoría de las especies domésticas se inician en cero o con valores
cercanos a cero, por lo tanto, carece de valor clínico, según la experiencia adquirida en
esta línea leucocitaria.
Eosinófilos
Participan en la regulación de reacciones alérgicas, inflamatorias, de control y de elimi-
nación de infestaciones por parásitos, principalmente aquellos que tienen fases
migratorias.
Un incremento de los valores absolutos de los eosinófilos, con relación a los valores
de referencia de las diferentes especies, se califica como una eosinofilia.
Las principales causas de eosinofiliaeosinofiliaeosinofiliaeosinofiliaeosinofilia son:
✦ Parasitosis
✦ Alergia (hipersensibilidad de tipo I)
✦ Degradación tisular
✦ Hipoadrenocorticismo
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✦ Síndrome hipereosinófilo
✦ Leucemia
Una disminución de los valores absolutos de los eosinófilos con relación a los valores
de referencia de las diferentes especies, se califica como una eosinopenia.
Las principales causas de eosinopeniaeosinopeniaeosinopeniaeosinopeniaeosinopenia son:
✦ Estrés
✦ Corticoterapia
✦ Hiperadrenocorticismo
✦ Infecciones agudas
✦ Inexistente en algunos sitios geográficos
Basófilos
La función más importante de los basófilos es iniciar una reacción de hipersensibilidad
inmediata.
Un incremento de los valores absolutos de los basófilos, con relación a los valores de
referencia de las diferentes especies, se califica como una basofilia.
Las principales causas de basofilia son:
✦ Hipersensibilidad de tipo I
✦· Dirofilariasis
✦ Mastocitemia
Inflamación
Existen dos curvas de inflamación o de conducta leucocitaria, la primera se relaciona con
inflamaciones, sobre todo sistémicas, donde los neutrófilos salen (PMN) a los tejidos en
forma masiva, y quedan bajas cantidades de ellos en circulación; con frecuencia está pre-
sente un incremento en formas inmaduras (NNS) y de neutrófilos tóxicos (PMN tóxicos) y
la imagen se completa por un estado de estrés
con disminución de linfocitos (L) y
eosinófilos (E). El momento más importante
es durante el acmé de la inflamación, cuan-
do los neutrófilos inmaduros y tóxicos se
encuentran presentes y los neutrófilos ma-
duros, en pequeña cantidad o ausentes; si
esta situación se mantiene por más de 36
horas, por lo general los animales no sobre-
viven, a excepción de los bovinos, que no
tienen una reserva en los lechos capilares para
reemplazar a los que han salido a los tejidos
o se encuentran en marginación, pavimen-
tación o diapedesis. Ejemplos de esto son:
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una vaca con mastitis por coliformes, perros
con parvovirosis o caballos con salmonelosis,
entre otros.
Pasando el acmé, viene la fase de recu-
peración, convalecencia o cronicidad con la
recuperación de los linfocitos, eosinófilos e
incremento de los monocitos. Estos últimos
inician el menaje o limpieza en los tejidos
del material necrótico.
La segunda curva de inflamación o de
conducta leucocitaria ocurre cuando la in-
flamación es más bien localizada, como en
abscesos, piómetra o en anemia hemolítica
inmunomediada (AHIM), donde los neutrófilos no pueden salir en la misma porción que
se ha estimulado a la médula ósea, porque solamente disponen de algunos vasos sanguí-
neos o capilares para salir a los tejidos, o como en el caso de la AHIM, no tienen necesidad
de migrar a los tejidos puesto que la inflamación es intravascular, por lo tanto, existe un
incremento de PMN, NNS, PMN tóxicos y de monocitos, con disminución de los linfocitos
y eosinófilos. Después del acmé pasa a la etapa de convalecencia o cronicidad y se pre-
senta con la disminución de las formas inmaduras y tóxicas y se recuperan los linfocitos y
eosinófilos.
Se hablará de inflamación cuando se observe en los resultados uno o varios de los
siguientes cambios en la sangre:
✦ Neutrofilia (sin linfopenia)
✦ Neutropenia
✦ Desviación a la izquierda
✦ Neutrófilos tóxicos
✦ Monocitosis (otra causa de estrés)
✦ Hiperglobulinemia
✦ Hiperfibrinogenemia
En casos de inflamación agudainflamación agudainflamación agudainflamación agudainflamación aguda se puede observar uno o varios de los siguientes
cambios en el leucograma:
✦ Neutrofilia
✦ Neutropenia
✦ Neutrófilos tóxicos
✦ Desviación a la izquierda
En casos de inflamación crónicainflamación crónicainflamación crónicainflamación crónicainflamación crónica, en el hemograma se puede presentar una monocitosis
que no sea por estrés, corticoterapia o hiperadrenocorticismo. Indican convalecencia o
cronicidad de varios días a varias semanas.
Cuando la monocitosis se acompaña de anemia, indica una cronicidad de varias se-
manas a varios meses.
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Cuando en el hemograma se observa una neutropenia en forma persistente, la pre-
sencia de neutrófilos tóxicos o una desviación a la izquierda, la inflamación no ha sido
controlada. Cuando en el hemograma se observa una recuperación del número de
polimorfonucleares, la desaparición de la desviación a la izquierda, la desaparición de
neutrófilos tóxicos y una recuperación en el número de linfocitos y de eosinófilos, se
puede considerar que la inflamación ha sido controlada.