Urocultivo

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CENTRO UNIVERSITARIO INTERAMERICANO
QUIMICO FARMACOBIOLOGO
ALUMNA: CITLALLI DE LOS ANGELES HERNANDEZ GARCIA
GRUPO: 3342
SECCCION: “B”
PRACTICA # 7: UROCULTIVO
PROFESORA: NORMA MARTINEZ TECUALT
FECHA DE ENTREGA: 16 DE JUNIO DEL 2014
INTRODUCCION
 El urocultivo es el cultivo de orina para diagnosticar infección sintomática del tracto urinario o infección asintomática (bacteriuria asintomática) en pacientes con riesgo de infección. 
 Desde el punto de vista anatómico las infecciones urinarias se clasifican en bajas (IUB) (cistitis, ureritis, prostatitis, epididimitis) o altas (IUA) (pielonefritis aguda, crónica, xantogranulomatosa, enfisematosa; absceso renal y perirrenal; pielonefrosis).
 Bajo condiciones normales el tracto urinario está libre de microorganismos, a excepción de la uretra anterior en el hombre y seguramente la totalidad de la uretra en la mujer. El acceso y la propagación de los gérmenes en el tracto urinario puede ser: vía ascendente (más frecuente), vía hematógena o vía linfática.
AGENTES ETIOLÓGICOS A INVESTIGAR RUTINARIAMENTE 
· Escherichia coli 
· Klebsiella spp. 
· Enterobacter spp. 
· Serratia spp. 
· Enterococus spp. 
· Proteus spp. 
· Pseudomonas spp. 
· Acinetobacter spp. 
· Candida spp. 
· Staphylococus spp. 
· Estreptococo grupo B (imprescindible en embarazadas) 
 El 95% de las infecciones urinarias son monomicrobianas.
 Hay una gran diferencia entre los gérmenes encontrados en individuos con un episodio inicial de infección urinaria (IU) y los que padecen infección urinaria recurrente (IUR).
RECOGIDA DE MUESTRAS 
Para la recogida, transporte y manipulación de muestras podrán tenerse en cuenta los protocolos establecidos por la SEIMC. 
La correcta recogida y conservación de la orina para urocultivos es fundamental para que puedan obtenerse resultados fiables. 
Los puntos clave son: 
· Mujeres: Obtención de la orina después de separar los labios vaginales de manera que el chorro de orina no toque genitales externos. 
· Hombres: Retracción del prepucio de manera que el chorro de orina salga directamente. 
EXAMEN MICROSCÓPICO (recomendado) 
El procedimiento elegido debe permitir:
· Recuento de leucocitos al menos semicuantitativo 
· Detección de células epiteliales (CE): su presencia indica muy probablemente contaminación de la muestra por contacto con genitales externos. Ante un resultado (urocultivo) positivo si se observa presencia de células epiteliales debe pedirse nueva muestra para confirmar. 
OBJETIVO GENERAL 
· Realizar un examen de urocultivo para su posterior sembrado y observación de las bacterias presentes.
OBJETIVOS ESPECIFICOS
· Conocer las principales bacterias aisladas en un urocultivo.
· Tomar forma correcta la muestra de orina.
· Transportar de forma correcta la muestra de orina 
· Observar e identificar las bacterias obtenidas
MATERIAL
	Materiales
	Reactivos 
	Equipo 
	Muestra biológica 
	· 2 probetas de 25ml.
· 3 matraces Erlenmeyer
· 1 vaso de precipitado de 250 ml
· 12 cajas Petri 
· 3 espátulas
· 1 mechero de bunsen
· 1 asa bacteriológica
· Algodón 
· Papel estraza
	· Agar McConkey
· Agar sangre
· Agar sal y manitol
	· Balanza digital
· Incubadora
· Autoclave
	· Orina
DIAGRAMARealizar Asepsia 
Entrada con la vestimenta adecuada
Presentación de seminario
 Salir ordenadamente 
Entrega de vale por material y reactivos
Recolectar la muestra para realizar la practica.
Después realizamos todas las pruebas bioquímicas para desarrollar la identificación.
Preparar material y reactivos (soluciones a ocupar).
Siguiendo con la práctica debemos de incubar las placas por 24 horas.
Sembrar por estria cruzada los medios en placas ( Agar sangre y agar MacConkey) en estriado masivo.
Leer morfología colonial y pruebas bioquímicas realizadas. 
Anotar las observaciones y establecer el género y especie.
Por ultimo comprobar resultados con tablas e identificar las pruebas bioquímicas .
Lavar materiales y realizar asepsia 
	PROCEDIMIENTO	
1. suspender la cantidad necesaria de polvo para preparar en agar específico en la cantidad de agua que se desee:
· Agar MacConkey. Se necesitan 50 gr para un litro de agua destilada.
1. Pesar 5 gr de agar MacConkey
2. Medir 100 ml de agua destilada
3. Añadir los 2.5 gr de agar MacConkey en los 100 ml de agua, agitar y calentar hasta disolver completamente.
· Agar sangre. Se necesitan 40 gr para un litro de agua destilada.
1. Pesar 4 gr de agar sangre
2. Medir 100 ml de agua destilada
3. Añadir los 2 gr de agar sangre en los 100 ml de agua, agitar y calentar hasta disolver completamente.
· Agar sal y manitol. Se necesitan 111 gr para un litro de agua destilada
1. Pesar 11.1 gr de agar sal y manitol
2. Medir 100 ml de agua
3. Añadir los dos gramos de agar sal y manitol en los 100 ml de agua, agitar y calentar hasta disolver completamente.
IDENTIFICACION
1. Recolectar la muestra ( dar al paciente el frasco estéril a utilizar instrucciones de recolección de muestra).
2. Preparar los medios a utilizar.
Agar McConkey, Agar Sangre, Citrato, TSI, LIA, MIO, MR-VP, SIM, Urea.
3. Sembrar por estría cruzada los medios en placa (Agar sangre, Agar MacConkey) en estriado masivo.
4. Incubar por 24 hrs a 37°C.
5. Leer morfología colonial.
6. Leer Pruebas Bioquímicas.
7. Comparar resultados.
OBSERVACIONES Y RESULTADOS 
· Las colonias que crecieron en agar MacConkey se observaron de color rosa-rojo, aunque también se observaron unas colonias incoloras.
· En agar sal y manitol las colonias se observaron de color blanco-amarillo y el medio cambio de color de naranja a amarillo, además se observó un mayor crecimiento que en agar MacConkey.
El agar sal y manitol es un medio altamente selectivo debido a su alta concentración salina. Los estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio, es por ello que el medio cambió su color de naranja a amarillo con el crecimiento de colonias.
En agar MacConkey las colonias que crecieron fueron de color rosa debido a que fermentan lactosa esto se debe a que este medio tiene un indicador de pH que es rojo neutro, y si el microorganismo fermenta lactosa la colonia se torna rosa-rojo.
CONCLUSION
El crecimiento en agar sal y manitol y en agar MacConkey, y al observar el cambio de color en ambos, especialmente en agar sal y manitol que es un medio selectivo para estafilococos podría sospecharse una infección en vías urinarias del paciente, aunque podría ser de flora normal, para ello se tendría que hacer un estudio más profundo como pruebas bioquímicas para la identificación del microorganismo así como el conteo de Unidades Formadoras de Colonias y posteriormente un antibiograma para determinar la sensibilidad y/o resistencia del microorganismo.
La conclusión de esta práctica no fue muy satisfactoria ya que no se cumplió del todo el objetivo de la práctica ya que no se pudo identificar ningún microorganismo presente en la orina puesto que no se realizaron las pruebas bioquímica para poder identificar la especie y el migroorganismo.
	BIBLIOGRAFIA 
· Feduchi, Blasco, Romero, Yañez, Bioquímica conceptos esenciales, editorial panamericana, 2010, México. 
· Wein, J. A., Novick, A, C, Kavoussi, L. R., (2008), “urología” 9ª edición, Argentina, editorial Medica Panamericana, pp. 256-258
· King, S., Schaub, L., (2008), “Análisis de orina y los líquidos corporales”, 5ª edición, Buenos Aires, Argentina, editorial Medica Panamericana, pp 73-74
· García, M. P., Fernández, M. T., Paredes, S. F., (1993), Microbiología clínica práctica, 2da edición, Universidad de Cádiz.