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Genética Bacteriana El genoma bacteriano es el conjunto total de genes que porta una bacteria tanto en su cromosoma como en sus elementos genéticos extra cromosómicos, en caso de poseer alguno. El cromosoma bacteriano presenta algunas diferencias respecto al cromosoma humano. El cromosoma de una bacteria típica consta de una sola molécula circular bícatenaria de ácido desoxirribonucleico (ADN) contiene aproximadamente 5 millones de pares de bases. Los cromosomas bacterianos más pequeños miden aproximadamente la cuarta parte de dicha longitud. En cambio, el ser humano posee dos copias de 23 cromosomas. El cromosoma bacteriano tienen una orientación definida es decir, los genes siguen una secuencia. Por el orden secuencial del genoma, hay elaboración de mapas del cromosoma bacteriano. Se puede definir ala genoma bacteriano como un conjunto de genes que posee una bacteria tanto en su cromosoma como en sus elementos extra cromosómicos. Las bacterias pueden contener elementos extra cromosómicos como los plásmidos y bacteriófagos, siendo estos independientes del cromosoma bacteriano, y pueden transmitir de una célula a otra. Los genes son secuencias de nucleótidos que poseen una función biológica; como ejemplos pueden citarse los genes estructurales de tipo proteico (los ostrones, que son genes codificadores), los genes del ácido ribonucleico (ARN) ribosómico y los sitios de reconocimiento y de unión de otras moléculas (promotores y operadores). Los promotores y los operadores son secuencias de nucleótidos que controlan la expresión de un gen al determinar las secuencias que se transcribirán en ARN mensajero (ARNm). Los Operones: Son grupos de uno o más genes estructurales que se expresan a partir de un promotor específico y finalizan en el denominado terminador de la transcripción. Por tanto, todos los genes que codifican las enzimas de una ruta específica pueden regularse de una forma coordinada. Se define como una unidad genética funcional formada por un grupo o complejo de genes capaces de ejercer una regulación de su propia expresión por medio de los sustratos con los que interaccionan las proteínas codificadas por sus genes. Este complejo está formado por genes estructurales que codifican para la síntesis de proteínas (generalmente enzimas), que participan en vías metabólicas cuya expresión generalmente está regulada por otros 3 factores de control, llamados: • Factor promotor: zona que controla el inicio de la transcripción del operó, ya que la ARN polimerasa tiene afinidad por ella. Realmente, como un gen es cada unidad de transcripción independiente, y puesto que el operón tiene un único promotor que controla toda su expresión, no hay elementos para decir que se trate de "varios genes" de expresión coordinada; más correcto sería decir que el operó es un único gen que codifica un ARNm policistrónico (es decir, con muchos codones de inicio y término, con lo que a la hora de traducirse dará lugar a varias proteínas independientes). Sin embargo, es común referirse a los "genes" del operón para hacer referencia a las regiones que, una vez transcritas, codificarán proteínas independientes. • Operador: zona de control que permite la activación/desactivación del promotor a modo de "interruptor génico" por medio de su interacción con un compuesto inductor. Esto lo logra porque tiene secuencias reconocibles por proteínas reguladoras. Tras su unión, por plegamientos tridimensionales interacciona con la zona del promotor, donde las proteínas reguladoras que se han unido contactan con la ARN Polimerasa, aumentando o disminuyendo su afinidad por el promotor, y con ello dando lugar a la expresión/represión del resto de los genes estructurales. • Gen regulador: alguno de los genes del operón pueden codificar factores de transcripción que se unan al promotor, regulando así la propia expresión del operón. A toda regulación de la expresión realizada desde dentro del gen u operón se le llama "regulación en cis", pero puede haber también genes muy alejados del operó que codifiquen factores de transcripción para uno o varios otros genes u operones, y en este caso se hablaría de "regulación en trans". Replicadora del ADN El cromosoma bacteriano es un almacén de información que define las características de las células y llevan a término los distintos procesos celulares. Por tanto, es fundamental que esta molécula se replique sin errores. La replicación del cromosoma bacteriano se desencadena por una cascada de sucesos relacionados con la velocidad de crecimiento de la célula. La replicación del ADN bacteriano se inicia en una secuencia específica del cromosoma denominada OríC. Aparte de otras enzimas, el proceso de replicación exige la participación de una enzima (helicasa) capaz de desenrollar el ADN y exponerlo, otra enzima capaz de sintetizar los cebadores que inician el proceso y una enzima o enzimas que permiten a la enzima confirmar que se ha insertado el nucleótido correcto y corregir así los posibles errores que pudieran cometerse. Durante la fase logarítmica de crecimiento en un medio rico, pueden tener lugar numerosos inicios del proceso de replicación cromosómica antes de que tenga lugar la división celular. Este proceso genera una serie de nidos de burbujas en los cromosomas hijos, cada uno de los cuales contiene su propio par de horquillas de crecimiento para efectuar la síntesis de una nueva molécula de ADN. Puede definirse como cualquier proceso por el cual una cosa puede hacer una copia de sí misma. Las células, en ambientes adecuados, se reproducen por división celular. Durante la división celular, el ADN se replica y puede transmitirse a la descendencia durante la reproducción. Mecanismos de Transferencia de Genes La reproducción más típica de las bacterias es asexual, se multiplican por incisión y biparticipación • Conjugación: Es el proceso de transferencia de material genético entre una célula bacteriana donadora y una receptora mediante el contacto directo o una conexión que las una. La conjugación es un mecanismo de transferencia horizontal de genes como la transformación y la transducción, con la diferencia de que estos últimos no involucran contacto intercelular. La conjugación bacteriana a menudo es considerada el equivalente bacteriano a la reproducción sexual o al apareamiento debido a que implica el intercambio de material génico. Durante la conjugación la célula donadora provee un elemento génico móvil o conjuntivo que generalmente es un plásmido o transposón. • Transformación: Son alteraciones genéticas resultantes de introducir ADN por virus (transducción) o por contactos intercelulares entre bacterias (conjugación). Es la adición al ADN extraño, una bacteria induce fragmentos ADN que hay libres en el medio, la célula donadora emite un apéndice tubular llamado Pili o fimbria que comunica su citoplasma con el de la célula receptora. • Transducción: Como consecuencia de una infección por un fago (bacteriófago o virus bacteriano), el agente emisor es un virus que transporta fragmentos de la última bacteria que ha parasitado. • Recombinación: Es el proceso por el cual una hebra de material genético (usualmente ADN, pero también puede ser ARN) se corta y luego se une a una molécula de material genético diferente. Es una fuente fundamental de variabilidad genética, ya que el intercambio de material genético entre ambos fragmentos puede dar lugar a una información genética nueva y válida. De hecho, la recombinación genética ocurre de forma natural precisamente con ese objetivo. Ingeniería Genética: La ingeniería genética (conocida también como tecnología del ADN recombinante) emplea técnicas y métodos desarrollados por especialistas en genética bacteriana con el objeto de purificar, amplificar, modificar y expresar secuencias genéticas específicas. La utilización de la ingenieríagenética y la clonación ha revolucionado tanto la biología como la medicina. Los componentes básicos con que cuenta la ingeniería genética son los siguientes 1) los vectores de clonación y expresión, que pueden utilizarse para introducir secuencias de ADN en el interior de bacterias receptivas y amplificar la secuencia deseada 2) la secuencia de ADN que se desea amplificar y expresar 3) diversas enzimas, como las enzimas de restricción, que se usan para degradar de forma reproducible la molécula del ADN en unas secuencias determinadas y la ligasa de ADN, la enzima que une los fragmentos al vector de clonación. ¿Cuáles son las principales propiedades de un plásmido?: Los plásmidos son fragmentos extra cromosómicos de ácidos nucleicos (ADN o ARN) que aparecen en el citoplasma de algunos procariotas. Son de tamaño variable aunque menor que el cromosoma principal. Son herramientas muy útiles en ingeniería genética para la transformación génica y la manipulación genética de procariotas y eucariotas. Los plásmidos empleados en ingeniería genética se llaman vectores. Son muy útiles para sintetizar en grandes cantidades proteínas de interés, como la insulina o los antibióticos, mediante un procedimiento conocido como transformación. Aunque los plásmidos no pueden sintetizar una envoltura proteica y se transfieren con dificultad de una célula a otra se ha hipotetizado que podrían ser los precursores de los primeros virus.
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