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Crecimiento microbiano: Aumento en el nº de células-> Aumentan la cantidad y se agrupan en colonias Las poblaciones pueden lograr un crecimiento muy grande en periodos cortos de tiempo-> Conociendo las causas= formas de control de patógenos Requerimientos: Físicos-> Tº, pH y presión osmótica Químicos-> Fuentes de C,N,S,P,O, Oligoelementos y factores de crecimientos orgánicos -Temperatura: Grupos: Sicrófilos (afinidad por el frio) Mesófilos (afinidad a Tº moderadas) Termófilos (afinidad por el calor) Tº mínima de crecimiento-> Tº más baja en la cual crece la sp. Tº optima de crecimiento-> Tº en la cual la sp. Crece mejor-> Cerca de la parte más elevada Tº máxima-> Tº más elevada en la cual crece la sp. Sicrófilas: 1º Sicrófilas estrictas-> Crece a 0ºC Tº optima 15 ºC Profundidades de los océanos y áreas polares 2º Sicrófilas-> Tº optima 20 a 30 ºC y pueden vivir a 0ºC Deterioro de alimentos-> Refrigeradores (< Tº < crecimiento-> deterioro lento) Mesófilos: Tº optima de 25 a 40 º C-> Adaptación patógenos Tº optima de 37ºC Más comunes-> muchos son patógenos generando enfermedades y deterioro de alimentos Termófilos: Tº optima 50 a 60 º C Endospora Hipertermofilas y termófilas extremos -pH: La mayoría crecen mejor en un rango de pH estrecho cercano a la neutralidad -> 6,5 y 7,5 Pocas bacterias crecen en un pH ácido-> Ciertos alimentos son preservados del deterioro por los ácidos producidos por la fermentación bacteriana Bacterias acidófilas: Toleran la acidez (pH:1) Quimioautótrofas La alcalinidad también inhibe el crecimiento microbiano En el laboratorio a menudo producen ácidos que al final interfieren sobre su propio crecimiento: -Se agregan al medio de cultivo sustancias químicas que actúan como tampones o buffets -Peptonas y los aminoácidos actúan como tampones -Medios con sales de fosfato-> proveen fósforo (nutriente esencial) -Presión Osmótica: Cuando un microorganismo se encuentra en una solución que tiene una concentración mayor de solutos que la de la célula (ambiente hipertónico)-> El agua celular atraviesa la membrana plasmática y se difunde hacia una zona de mayor concentración de soluto Plasmólisis o reducción del citoplasma de la célula El agregado de sales (u otros solutos) a una solución y el aumento de la presión osmótica pueden utilizarse para conservar los alimentos Halófilos extremos: concentraciones elevadas de sales que en realidad necesitan para su crecimiento-> Halófilos estrictos Halófilos facultativos: no requieren concentraciones elevadas de sales pero pueden crecer en concentraciones salinas de hasta un 2% (hasta un 15%) La mayoría de los microorganismos deben ser cultivados en un medio constituido casi en su totalidad por agua: Concentración de agar-> Complejo de polisacárido aislado de las algas marinas, usado para solidificar los medios de cultivo microbianos y suele ser de alrededor del 1,5% (evitando el aumento de la presión osmótica) Si la presión osmótica es extremadamente baja (ambiente es hipotónico)-> El agua tiende a ingresar en la célula generando una lisis -Carbono: Uno de los requerimiento mas importante para el crecimiento -> La mitad del peso seco de una célula bacteriana típica es C Quimioheterótrofos: obtienen la mayor parte de su carbono de la fuente de su energía, materiales orgánicos ( Pr, lípidos y HC) Quimioautótrofos y los fotoautótrofos obtienen su carbono del dióxido de carbono -Nitrógeno, azufre y fosforo:-> Síntesis del material celular: Síntesis de Pr=N y S ADN/ARN= N y P ATP=N y P Utilizan el N para formar grupo amino de los aminoácidos, iones de amonio o el N de los nitratos Cianobacterias fotosintéticas utilizan el N atmosférico-> Fijación de nitrógeno S se utiliza para sintetizar aminoácidos y vitaminas F para la síntesis de ácidos nucleicos y fosfolípidos de la membrana celular Otros importantes: Potasio, magnesio y calcio-> Cofactores enzimáticos -Oligoelementos: Los microbios requieren cantidades muy pequeñas de otros elementos mineral ( hierro, cobre, molibdeno y zinc) Casi todos son esenciales para las funciones de ciertas enzimas (cofactores) Aunque en ocasiones estos elementos se agregan al medio de cultivo, se encuentran el agua de la canilla y agua destilada -Oxígeno: Los microbios que utilizan oxígeno molecular aerobios-> Producen más energía a partir de los nutrientes que los que no utilizan oxígeno, denominados anaerobios Aerobios estrictos: Organismos que requieren oxígeno para vivir Desventaja-> O2 es poco soluble en el agua de su ambiente Muchas de las bacterias aerobias han desarrollado o conservado la capacidad de continuar creciendo en ausencia de oxígeno Anaerobios facultativos: Utilizan el oxígeno cuando está presente pero pueden continuar creciendo mediante de la fermentación o respiración anaeróbica (menor eficiencia) Escherichia coli No pueden utilizar el oxígeno molecular en las reacciones que producen energía El género Clostridium (tétanos y botulismo)-> Utilizan átomos de oxígeno presentes en los materiales celulares; los átomos suelen obtenerse del agua. Formas tóxicas del O2: 1-Oxígeno monoatómico 2-Radicales libre superóxido-> Tóxico Superóxido dismutasa 3-Peróxido de hidrogeno-> Tóxico Catalasa y peroxidasa 4-Ozono 5-Radical hidroxilo Estas formas tóxicas son componentes esenciales para las defensas-> Fagocitosis Los anaerobios aerotolerantes -> No pueden utilizar oxígeno para su crecimiento pero lo toleran Sobre la superficie de un medio sólido crecen sin el empleo de las técnicas especiales Fermentan los HC para formar ácido láctico, que cuando se acumula inhibe el crecimiento de los competidores aerobios y establece un nicho ecológico favorable para los productores de ácido láctico Lactobacilos utilizados en la producción de varios alimentos ácidos fermentados, como los pickles y los quesos Microaerófilas: Aerobios que requieren oxígeno Crecen sólo en concentraciones de oxígeno menores que las presentes en el aire En un tubo de ensayo con un medio nutritivo sólido crecen sólo a una profundidad en la que una pequeña cantidad de oxígeno se ha difundido al medio Tolerancia limitada-> sensibilidad a los radicales libres superóxidos y peróxidos -Factores de crecimiento orgánicos: Son aquellos compuestos orgánicos esenciales que no pueden ser sintetizados por los organismos Pueden obtenerse directamente del ambiente Las vitaminas -> seres humanos La mayoría de ellas actúan como coenzimas Muchas bacterias pueden sintetizar la totalidad de sus propias vitaminas y no dependen de fuentes externas Algunas carecen de las enzimas necesarias para la síntesis de ciertas vitaminas y para ellas esas vitaminas constituyen factores de crecimiento orgánicos Otros son los aminoácidos, las purinas y las pirimidinas Nutrición Bacteriana: Proceso por el que los seres vivos toman del medio donde habitan las sustancias químicas que necesitan para crecer Los productos químicos exteriores a partir de los cuales se construye una célula se denominan nutrientes y se requieren para los dos objetivos que comprende el metabolismo: -Obtención de energía o catabolismo -Biosíntesis de moléculas o anabolismo Todos los organismos se pueden clasificar desde el punto de vista metabólico según su patrón nutricional (según sus fuentes de energía y carbono) Los organismos fotótrofos utilizan la luz como fuente de energía principal mientras que los quimiótrofos dependen de reacciones de oxidación y reducción de compuestos inorgánicos u orgánicos para obtener energía Los organismos autótrofos utilizan dióxido de carbono como fuente principal de carbono y los heterótrofos requieren una fuente de carbono orgánica Combinación de las fuertes de E y de C: La aplicación práctica de la nutrición bacteriana-> El diseño de medios de cultivo para cultivar los microorganismos en el laboratorio Factores de crecimiento: Son los compuesto orgánico que un organismo requiere como precursoro como constituyente de su material orgánico celular, pero que no puede sintetizar a partir de fuentes de carbono más sencillas, debe ser administrado como nutriente Son moléculas orgánicas específicas que, en muy pequeña cantidad, son necesarias para el crecimiento No tienen función biosintética ni sirven como fuente de energía Suelen ser coenzimas o sus precursores, vitaminas, que determinadas bacterias no pueden fabricar El conocimiento de la nutrición microbiana permite el cultivo de los microorganismos en el laboratorio Un medio de cultivo es una solución acuosa en la que están presentes todas las sustancias necesarias para el crecimiento de microorganismos ( diversos en propiedades fisiológicas) Proporcionar una mezcla equilibrada de los nutrientes requeridos-> En concentraciones que permitan un buen crecimiento Muchos nutrientes se hacen inhibidores del crecimiento, o resultan tóxicos al elevar su concentración Las actividades metabólicas-> Cambios en la naturaleza del medio-> efectos negativos = reducción o muerte Generados por cambios en el pH, acumulación de compuestos tóxicos, agotamiento del O2 Cantidades limitantes de nutrientes!!!!!! 1er-> Preparación de medios-> Base mineral que proporcione todos los nutrientes que pueden suministrarse a cualquier organismo en forma inorgánica Luego puede suplementarse: -Una fuente de carbono -Una fuente de energía -Una fuente de nitrógeno -Algún factor de crecimiento requerido Estos suplementos variarán de acuerdo con las propiedades nutricionales del microorganismo a cultiva! Reproducción bacteriana: El crecimiento de una célula individual continúa hasta que se divide en dos células nuevas Fisión binaria -Algunas especies-> Brotación: formación de protuberancia inicial, crece y se separan -Bacterias filamentosas -> Formación de cadenas de conidiosporas situadas externamente en los extremos de los filamentos -Otras se fragmentan y estos fragmentos inician el crecimiento de células nuevas Fisión Binaria-> Las células se alargan (doble de longitud de una célula) Se desarrolla un tabique transversal (separa a la célula en dos células hijas) Septo: Resultado del crecimiento hacia dentro de la membrana citoplasmática y la pared c celular Durante el ciclo de crecimiento-> Los constituyentes celulares incrementan en número de tal manera que cada célula hija recibe un cromosoma completo y copias suficientes de todas las otras macromoléculas, monómeros e iones inorgánicos que le permitirán vivir como célula independiente La partición del ADN replicado depende de que el ADN quede unido a puntos específicos de la membrana durante la división y la segregación real de las dos copias es realizada por la separación física que representa el septo celular TIEMPO DE GENERACION: Es el tiempo necesario para que una célula se divida Genética bacteriana: Variabilidad genética-> Adaptación Puede ser: 1)Mutaciones-> Cambios heredables del ADN (sustitución, deleciones, adicciones) 2)Recombinación-> Transferencia de fragmentos de ADN (cromosoma bacteriano o plásmido) R. Homologa: Segmento de ADN similar y se intercambia por ruptura, entrecruzamiento y unión Puede ser: Transformación (penetración del ADN desnudo) Transducción (Bacteriófago-> C. Lisogénico) Conjugación (Plásmidos) Existen transposones/ integrones-> Fragmentos genéticos transferibles Puede ser: Sin cambio del fenotipo (M. Silenciosas) Con cambio del fenotipo Pueden modificar: Virulencia (Cambios en los antígenos) Ventajas selectivas en el medio Resistencia Curva de crecimiento bacteriano: 1)Fase de latencia o retraso: No ocurre crecimiento inmediatamente: Fase de latencia Si un cultivo en crecimiento exponencial se inocula exactamente en el mismo medio, no se observa la fase de latencia, sino que sigue creciendo exponencialmente Si el inóculo se toma a partir de un cultivo viejo-> Fase de adaptación: -Carecen de determinados componentes esenciales y tiene que transcurrir un cierto tiempo para que se proceda a su síntesis -Células han sido dañadas mediante tratamientos por calor, tóxicos, etc., porque se requiere tiempo para reparar los daños sufrido -Se transfieren células de un medio rico a uno más pobre-> Es preciso que se sinteticen enzimas que permitan metabolizar los compuestos presentes en el nuevo medio 2)Fase exponencial: Cada bacteria es capaz de duplicar su masa y dividirse a intervalos regulares, dando lugar al crecimiento exponencial de la población. La fase de crecimiento exponencial representa la etapa en la que la velocidad de crecimiento es constante y máxima para esas condiciones de cultivo Modificaciones-> Cambios en la composición del medio de cultivo y/o las condiciones de incubación 3)Fase estacionaria: El crecimiento bacteriano en un cultivo cerrado, en el que no hay aporte de nuevos nutrientes ni remoción de los productos del metabolismo Autolimitado Luego de varias generaciones-> Hacen que la multiplicación bacteriana cese o que su velocidad de crecimiento disminuya a niveles que se equilibran con la velocidad de muerte No hay incremento neto (o disminución) del número de células-> Ocurren muchas funciones celulares, incluyendo el metabolismo energético y algunos procesos biosintéticos. En algunos organismos puede incluso tener lugar crecimiento lento 4)Fase de muerte: Representa la pérdida de su capacidad de multiplicación, aunque no significa necesariamente pérdida absoluta e inmediata de todas las funciones celulares. El único criterio válido de muerte bacteriana es la pérdida irreversible de la capacidad de reproducirse en cualquier medio adecuado para ello Según la viabilidad pueden ser: a) las bacterias viables (o vivas) que son aquéllas que conservan su capacidad reproductora b) las bacterias no viables (o muertas) que son las que han perdido esa capacidad de reproducirse
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