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640 E C O L O G Í A M I C R O B I A N A Y M I C R O B I O L O G Í A A M B I E N T A L de masas para asignar péptidos a las secuencias de aminoácidos codificadas por genes concretos. Metatranscriptómica: medición de la expresión génica de toda una comunidad usando la secuenciación de RNA. Microautorradiograf ía (MAR): medición de la captación de sustratos radiactivos mediante la observación visual de las células en una emulsión fotográfica expuesta. Microsensor: pequeño sensor o electrodo de vidrio para medir el pH o compuestos específicos como oxígeno, sulfuro de hidrógeno o nitrato introduciéndolo en un hábitat microbiano a intervalos en una escala micrométrica. Naranja de acridina: colorante fluorescente inespecífico que se usa para teñir el DNA de las células microbianas en una muestra natural. Nicho efectivo: variedad de entornos naturales que sustentan una especie cuando el organismo se enfrenta a factores como el límite de los recursos, la depredación y la competencia con otras especies. Nicho fundamental: variedad de ambientes en los que una especie puede subsistir cuando no tiene los recursos limitados, como puede resultar de la competencia con otras especies. Pinzas de láser: dispositivo para obtener cultivos axénicos atrapando ópticamente una célula individual con un haz de láser y separándola de las células circundantes hacia un medio de crecimiento estéril. Proteína fluorescente: cualquiera de un gran grupo de proteínas que emiten fluorescencia de diferentes colores, incluida la proteína fluorescente verde, para rastrear organismos modificados genéticamente y determinar las condiciones que inducen la expresión de genes específicos. Sesgo de enriquecimiento: problema de los cultivos de enriquecimiento en el que las especies no deseables tienden a dominar el enriquecimiento, a menudo con la consiguiente exclusión de los organismos más abundantes o ecológicamente significativos del inóculo. Sonda de ácido nucleico: oligonucleótido, normalmente de entre diez y veinte pares de bases de longitud de secuencia complementaria con la secuencia de un ácido nucleico en un gen o un RNA diana. Sondeo con isótopos estables (SIP): método de caracterización de un organismo que incorpora un sustrato concreto que consiste en suministrarle el sustrato marcado con 13C o 15N y aislar el DNA enriquecido con el isótopo pesado para analizar los genes. Técnica del número más probable (NMP): dilución en serie de una muestra natural para determinar la mayor dilución que permite el crecimiento. 1. ¿Cuál es la base de la técnica del cultivo de enriquecimiento? ¿Por qué un medio de enriquecimiento suele ser adecuado para el enriquecimiento de solo un grupo determinado de organismos? (Sección 18.1) 2. Explique el principio de la columna de Winogradsky y qué tipos de organismos se pueden enriquecer con ella. ¿Cómo se puede usar una columna de Winogradsky para enriquecer organismos presentes en un ambiente extremo, como un tapete microbiano de una fuente termal? (Sección 18.1) 3. Describa el principio del NMP para contar bacterias de una muestra natural. (Sección 18.2) 4. ¿Por qué las pinzas de láser son un método mejor que la dilución y el enriquecimiento en líquido para obtener un organismo presente en una muestra en baja concentración? (Sección 18.2) 5. ¿Qué es una GFP? ¿En qué se diferencia una célula fluorescente verde de una célula fluorescente por tinción filogenética, por ejemplo? (Secciones 18.3 y 18.4) 6. Compare el uso del FISH con el de los filochips para contar células microbianas en un medio natural. ¿Qué ventajas y limitaciones tiene cada uno de estos métodos? (Secciones 18.3 y 18.6) 7. En ecología microbiana, ¿pueden las sondas de ácidos nucleicos ser tan sensibles como los métodos de cultivo? ¿Qué ventajas tienen los métodos con ácidos nucleicos respecto de los métodos de cultivo? ¿Y qué desventajas? (Secciones 18.4 y 18.6) 8. ¿Cómo se puede obtener un retrato filogenético de una comunidad microbiana sin cultivar a sus habitantes? (Sección 18.5) 9. Después de la amplificación por PCR del DNA de toda una comunidad usando un conjunto de cebadores específicos, ¿por qué es necesario clonar o correr una DGGE de los productos antes de secuenciarlos? (Sección 18.5) 10. ¿Por qué una micromatriz no es adecuada para caracterizar la transcripción de toda una comunidad? (Secciones 18.6 y 18.7) 11. Dé un ejemplo del descubrimiento de un metabolismo conocido en un organismo nuevo gracias a la genómica ambiental. (Sección 18.7) 12. ¿Por qué la proteómica ambiental está limitada por la abundancia natural de las poblaciones microbianas, mientras que la genómica ambiental y la metatranscriptómica no lo están? (Sección 18.7) 13. ¿Cuáles son las ventajas principales de los métodos radioisotópicos en el estudio de la ecología microbiana? ¿Qué tipo de controles (discútanse al menos dos) se deberían incluir en un ensayo radioisotópico para demostrar la incorporación de 14CO 2 por parte de las bacterias fotótrofas, o la reducción de 35SO 4 2− por las bacterias reductoras de sulfato? (Sección 18.8) 14. Los organismos autótrofos ¿contendrán más o menos 12C en sus compuestos orgánicos que el que había en el CO 2 del que se alimentan? (Sección 18.9) 15. ¿Qué información puede darnos la MAR-FISH que la FISH por sí sola no nos da? (Sección 18.10) 16. ¿Cuál es la ventaja de tener varios detectores en un instrumento de NanoSIMS? (Sección 18.10) 17. ¿Cómo podemos combinar el SIP y la NanoSIMS para identificar un nuevo tipo de células consumidoras de metano en una comunidad natural? (Secciones 18.10 y 18.11) PREGUNTAS DE REPASO https://booksmedicos.org booksmedicos.org Botón1:
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