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314 SECCIÓN III Bacteriología La positividad de la reacción tuberculínica indica que la persona mostró infección en el pasado; no denota que exista enfermedad activa ni inmunidad al trastorno. Las personas con positividad a la tuberculina están en peligro de presentar la enfermedad, por reactivación de la infección primaria, en tanto que aquellas con negatividad a la tuberculina, que nunca han estado infectadas, no presentan dicho riesgo, aunque se infecten de una fuente externa. D. Análisis con liberación de interferón γ para detectar tuberculosis A veces los resultados de la prueba cutánea de tuberculina son ambivalentes, particularmente en personas que han sido vacunadas con BCG o que viven en áreas en que hay gran pre- valencia de micobacterias NTM en el entorno. En un intento por mejorar la precisión diagnóstica, se han creado a nivel co- mercial análisis con liberación de interferón-γ (IGRA, IFN–γ release assays) en sangre. Estos análisis se basan en respues- tas inmunitarias del hospedador específi cas contra antígenos de M. tuberculosis ESAT-6 (blanco antigénico secretor tem- prano-6), CFP-10 (proteína de fi ltrado de cultivo-10) y TB7.7, que está ausente en la mayor parte de NTM y BCG. La prueba detecta interferón-γ, que es liberado por los linfocitos T CD4 sensibilizados en respuesta a estos antígenos. A la fecha, en Estados Unidos se cuenta con dos análisis comerciales. Uno de ellos es un enzimoinmunoanálisis de adsorción (ELISA) que detecta interferón-γ en sangre. El otro es un análisis de inmunotransferencia (inmunospot) tipo ELISA que utiliza células mononucleares purifi cadas de sangre periférica. Los resultados de los dos estudios son señalados como positivos, negativos o indeterminados; están aún en fase de valoración. Son susceptibles a las variaciones biológicas de la respuesta inmunitaria. Sin embargo, estudios múltiples han indicado que las cuantifi caciones mencionadas son similares a la prueba cutánea de tuberculina para valorar una infección latente, par- ticularmente en personas que han recibido BCG. Sin embargo, es mejor no utilizarlos en hospedadores con inmunodefi cien- cia grave o en niños menores de cinco años de edad. En Estados Unidos, los CDC han publicado guías actualizadas que resu- men las recomendaciones sobre el uso de IGRA (véase Mazu- rek et al., 2010) En el caso de personas en quienes se observó transfor- mación reciente de un resultado negativo a otro positivo en la prueba cutánea o IGRA y en otras que han tenido positividad a la prueba y han cumplido con algunos criterios de mayor riesgo de enfermedad activa si están infectadas, por lo regular se emprende la profi laxia con INH al día durante nueve meses. En fecha reciente, los CDC publicaron nuevas recomendacio- nes para tratar la tuberculosis latente, con acortamiento nota- ble de tratamiento, a 12 semanas. El nuevo régimen comprende la administración de INH y rifapentina una vez por semana, en el llamado tratamiento bajo observación directa. Se ha demos- trado que el nuevo tratamiento equivale al anterior, según datos de tres estudios clínicos con asignación al azar. Manifestaciones clínicas Debido a que el bacilo de la tuberculosis puede afectar cual- quier órgano o sistema, sus manifestaciones clínicas son pro - teiformes. Signos de enfermedad tuberculosa pueden ser fatiga, debilidad, pérdida de peso, fi ebre y sudores nocturnos. La afección de los pulmones origina tos crónica y hemoptisis, que surgen por lo común en el caso de lesiones avanzadas. La meningitis o la afección de las vías urinarias surge a veces sin que se manifi esten otros signos de tuberculosis. La dise- minación por la circulación sanguínea origina tuberculosis miliar, con lesiones en muchos órganos y una elevada cifra de mortalidad. Pruebas diagnósticas de laboratorio Una prueba cutánea de tuberculina positiva no denota la pre- sencia de enfermedad activa por bacilos tuberculosos; la corro- boración se obtiene por el aislamiento de ellos. A. Muestras Las muestras comprenden esputo recién expectorado, solu- ción de lavado gástrico, orina, líquidos pleural, cefalorraquí- deo o sinovial; material de biopsia, sangre u otros productos sospechosos. B. Descontaminación y concentración de las muestras Las muestras de esputo y las obtenidas de otros sitios no esté- riles deben ser licuadas con N-acetil-l-cisteína, descontamina- das con hidróxido de sodio (NaOH) (destruye muchas de las demás bacterias y hongos), neutralizadas con amortiguadores y concentradas por centrifugación. El material obtenido de este procedimiento puede utilizarse para tinción en busca de baci- los acidorresistentes y para cultivo. El material de sitios esté- riles como el líquido cefalorraquídeo no necesita someterse a descontaminación, y puede ser centrifugado, estudiado y culti- vado de manera directa. C. Frotis Esputo, exudado y otros materiales se estudian por medio de tinción en busca de bacilos acidorresistentes. Por lo regular no se recomienda teñir el material de lavado gástrico y la orina, porque pueden estar presentes micobacterias saprofi tas y con ello generar un resultado positivo. La microscopia por fl uores- cencia con auramina-rodamina como colorantes es más sensi- ble que las tinciones tradicionales para acidorresistentes como la de Ziehl-Neelsen y son las técnicas preferidas para teñir el material clínico. Si en una muestra adecuada se identifi can microorganismos acidorresistentes, constituye prueba presun- tiva de una infección por micobacterias. D. Cultivo, identifi cación y pruebas de susceptibilidad Las muestras preparadas obtenidas de sitios no estériles y las centrifugadas provenientes de sitios estériles pueden ser cul- tivadas de manera directa en medios selectivos y no selecti- vos (véase antes). El cultivo selectivo en caldo suele ser el más sensible y genera resultados con gran rapidez. Los medios de agar selectivos (como el de biplaca de Löwenstein-Jensen o de Middlebrook 7H10/7H11 con antibióticos) deben inocularse en paralelo con medios de caldo. La incubación se hará a 35 a 23 Chapter 23_Carroll_4R.indd 31423 Chapter 23_Carroll_4R.indd 314 14/04/16 18:1814/04/16 18:18
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