Microbiologia Medica (323)

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CAPÍTULO 24 Espiroquetas y otros microorganismos espirilares 325
de amplifi cación de ácido nucleico. Es posible obtener sangre 
para practicar estudios serológicos; el líquido cefalorraquídeo 
(CSF, cerebrospinal fl uid) es útil para practicar el estudio VDRL 
(Venereal Disease Research Laboratory) (véase adelante).
B. Examen en campo oscuro
Se coloca una gota de líquido o exudado hísticos en una lami-
nilla y sobre ella un cubreobjetos para hacer una capa fi na. 
Dentro de los siguientes 20 min después de haber tomado la 
muestra, se explora el preparado con un objetivo de inmersión 
en aceite con iluminación de campo oscuro, para identifi car las 
espiroquetas móviles típicas. Es mejor no realizar microscopia 
de campo oscuro en material de lesiones dentro de la cavidad 
bucal, porque no es posible diferenciar los microorganismos 
patógenos, de las espiroquetas comensales.
Los treponemas desaparecen de las lesiones en término de 
horas después de haber comenzado la antibioticoterapia.
C. Inmunofl uorescencia
El líquido o el exudado hístico se extiende en una laminilla, 
se seca al aire y se envía al laboratorio; en él se fi ja y tiñe con 
un anticuerpo antitreponémico marcado con fl uoresceína, y se 
examina con un microscopio de inmunofl uorescencia en busca 
de las típicas espiroquetas fl uorescentes.
D. Pruebas serológicas para sífi lis
Los métodos en cuestión utilizan antígenos no treponémicos 
o treponémicos.
1. Pruebas no treponémicas. Estas pruebas se utilizan 
generalmente para detección de sífi lis. Se les practica amplia-
mente y pueden ser objeto de automatización para facilitar su 
realización en gran número, y son poco costosas. Además de 
funcionar como método de detección, también se les utiliza 
para vigilar la efi cacia del tratamiento. La desventaja de este 
tipo de pruebas es que no son muy sensibles en la fase prima-
ria de la sífi lis y se tornan positivas sólo después de que han 
transcurrido unas semanas de haber ocurrido la lesión inicial; 
puede haber resultados positivos falsos por otras enfermedades 
y también aparecer un fenómeno de prozona, en particular en 
la sífi lis secundaria (el exceso de anticuerpos produce un resul-
tado negativo en diluciones séricas pequeñas, pero positivo en 
diluciones mayores). Los antígenos en estos métodos contie-
nen cantidades medidas de cardiolipina, colesterol y lecitina 
purifi cada, en cantidades sufi cientes para que surja un grado 
estandarizado de reactividad. Desde el punto de vista histó-
rico, se extraía la cardiolipina del corazón o el hígado de reses, 
y se le agregaban lecitina y colesterol para reforzar la reacción 
con anticuerpos sifi líticos “reagina”; éstos son una muestra de 
anticuerpos de tipo IgM e IgG que reaccionan con el complejo 
de cardiolipina-colesterol-lecitina. Tales métodos se basan en 
el hecho de que las partículas del antígeno lípido permanecen 
dispersas en suero normal, pero fl oculan cuando se combinan 
con IgE. Para la práctica de las pruebas de VDRL y de reagina 
sérica sin calentamiento (USR, unheated serum reagin), se 
necesita el estudio microscópico para detectar fl oculación. En 
el método de reagina plasmática rápida (RPR, rapid plasma 
reagin) y del suero no calentado tratado con rojo de toluidina 
(TRUST, toluidine red unheated serum test), se cuenta con 
partículas de color que quedan atrapadas dentro de la trama 
del complejo de antígeno-anticuerpo y así se pueden interpre-
tar las pruebas sin la amplifi cación microscópica. Los resulta-
dos se obtienen en cuestión de minutos, particularmente si se 
agita la suspensión.
Los métodos no treponémicos generan resultados cuan-
titativos si se utilizan diluciones al doble de manera seriada. 
Es posible estimar la cantidad de reagina presente en el suero 
en forma de título, o de la máxima dilución que genera un 
resultado positivo. Los resultados cuantitativos son útiles para 
corroborar el diagnóstico y valorar el efecto del tratamiento. La 
positividad de los métodos no treponémicos surge después de 
dos a tres semanas en el caso de sífi lis no tratada, y muestran 
un título alto en la sífi lis secundaria. La positividad de estos 
métodos en forma típica cambia a negatividad a menudo en un 
lapso de seis a 18 meses, y por lo común a los tres años después 
del tratamiento efi caz de la sífi lis. La prueba no treponémica 
positiva después de tratar la sífi lis sugiere que el tratamiento no 
fue efi caz, o hubo reinfección.
El método VDRL se ha estandarizado para aplicarlo en 
CSF; el resultado cambia a positivo en la neurosífi lis. Los anti-
cuerpos de reagina por lo común no llegan al CSF desde la circu-
lación sanguínea, sino que probablemente se forman en el sis-
tema nervioso central en respuesta a la infección sifi lítica. El 
diagnóstico serológico de neurosífi lis es complejo.
2. Métodos con anticuerpos treponémicos. Los méto-
dos de esta categoría miden anticuerpos contra antígenos de 
T. pallidum; se utilizan para saber si un resultado positivo obte-
nido de un método no treponémico realmente lo es, o es falso. 
El resultado positivo de un método treponémico en una mues-
tra de suero que también genera positividad con un método no 
treponémico es un signo importante de que existe infección 
por T. pallidum. Los métodos tradicionales treponémicos son 
menos útiles en la detección porque una vez que son positivos 
después de la infección sifi lítica primaria siguen siendo positi-
vos durante toda la vida, independientemente del tratamiento 
antisifi lítico. En los métodos treponémicos no se practican 
diluciones seriadas de suero y los resultados se notifi can como 
reactivos o no reactivos (o a veces no concluyentes). Los méto-
dos de anticuerpos treponémicos tienden a ser más caros que 
los no treponémicos, aspecto importante en la detección en 
grandes grupos de personas (como donantes de sangre).
Quizá el método treponémico más utilizado en Estados 
Unidos sea el de aglutinación de partículas de T. pallidum 
(TP-PA, T. pallidum-particle agglutination), en el cual se 
agregan partículas de gelatina sensibilizadas con antígenos 
de T. pallidum subespecie pallidum a una dilución estándar de 
suero. Cuando los anticuerpos contra T. pallidum (IgG, IgM o 
ambos) reaccionan con las partículas sensibilizadas, se forma 
un conjunto de partículas aglutinadas en el cuenco del equipo 
de microdilución. Las partículas de gelatina que no están sen-
sibilizadas se prueban con suero diluido para descartar agluti-
nación inespecífi ca.
Las pruebas de hemaglutinación de T. pallidum (TPHA, 
T. pallidum hemagglutination) y de microhemaglutinación 
de T. pallidum (MHA-TP, microhemagglutination T. palli-
dum) se basan en los mismos principios que TP-PA, pero 
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