Diagnóstico

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Diagnóstico conceptos
• Diagnóstico
• Diagnóstico de rutina
• Detección
• Identificación
• Protocolos
Diagnóstico de rutina
-Diagnóstico abreviado que considera suficiente
sumar a la observación de síntomas y signos los 
resultados de algunas técnicas rutinarias para 
detectar agentes causales conocidos.
-El operador tiene experiencia en la 
enfermedad en cuestión.
Detección ej.: Phytophthora- hojas de 
Rododendro (trampa)
http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2007-
09342017000801867
http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2007-09342017000801867
Etapas del diagnóstico
-A campo
-En laboratorio:
• Síntomas y signos
• Determinación del carácter de la enfermedad
• Conservación del inóculo
• Observación microscópica
• Postulados de koch
• identificación
Diagnóstico: Síntomas y signos
Comparación síntomas
• Oomycotas
• Hongos
• Bacterias
• Virus
• Nutricionales 
• Toxicidades 
Postulados de Koch pasos
Postulados de Koch
Aislamiento métodos, medios de cultivo
en hongos con capacidad saprofítica
en hongos parásitos obligados
en bacterias cultivables
en bacterias fastidiosas
en bacterias no cultivables
en virus
Aislamiento en bacterias
Pruebas de patogenicidad:
inoculación
• En hongos
• En bacterias clásicas
• En bacterias vasculares
• En bacterias con vectores
• En virus
Senasa protocolos
https://www.argentina.gob.ar/sites/default/files/sena048_link_detalle_-_forestales-1.pdf
• Los métodos de ensayos aplicados en el Departamento de Fitopatología se 
basan en protocolos validados por Organizaciones Fitosanitarias 
regionales e internacionales: 
ISTA (International Seed Testing Association): International Rules for Seed
testing. Edition 2012. Annex to Chapter 7. Seed Health Testing Methods.
• International Plant Protection Convention: ISPM (NIMF) DP 4
• EPPO (European Plant Protection Organization) Standards: Diagnostic
Protocols PM 7
• CABI (Centre for Agriculture and Biosciences International), IMI 
(Instituto Micológico Internacional). Descriptions of Pathogenic Fungi and 
Bacteria
• COSAVE: Comité de Sanidad Vegetal del Cono Sur. Fichas de 
Procedimientos y Métodos Analíticos
• NAPPO: North American Plant Protection Organization
https://www.argentina.gob.ar/sites/default/files/sena048_link_detalle_-_forestales-1.pdf
Identificación: Hongos y 
Pseudohongos
• Claves basadas en morfología de hifas y de 
estructuras reproductivas
• Técnicas moleculares
• Serología 
Detección e Identificación de Hongos 
Fitopatógenos- Senasa
• Inspección visual de síntomas y signos bajo 
microscopio estereoscópico (40x o 50x) 
• Método de detección por Blotter para semillas
• Método de Lavado-Washing Test para semillas
• Método de Cámara húmeda para la detección en 
estacas, plantines y frutos
• Siembra en medios de cultivo semi-selectivo para 
Diaporthe phaseolorum var. caulivora, Phomopsis
longicolla, Fusarium sacchari, Phoma macdonaldii, 
Phoma medicaginis.
• Tinción: patógenos que persisten en el embrión y/o 
pericarpio (mildews)
Detección e Identificación de Hongos 
Fitopatógenos- Senasa
• Test de crecimiento de plántulas: para patógenos que 
sobreviven en el embrión de la semilla y que se manifiestan en 
estadíos iniciales: Plasmopara halstedii, Peronosclespora sorghi, 
Peronosclespora maydis. 
• Identificación por características morfo-métricas. CABI (Centre 
for Agriculture and Biosciences International) IMI. Descriptions
of Pathogenic Fungi and Bacteria por microscopía óptica (40x y 
100x).
• Captura y Registro de las imágenes de los caracteres morfo-
métricos estudiados 
• PCR tiempo real 
Identificación virus
--Reunir una serie de datos acerca del virus en sí y de la 
enfermedad
Características de la partícula
Citopatología
Hospedantes
Síntomas 
Transmisión
Serología
Datos moleculares
--Comparar con datos de descripciones
Protocolo Detección e Identificación 
de Virus Senasa
• Técnicas serológicas: ELISA
• Técnicas Moleculares: 
PCR convencional
PCR en Tiempo Real
Secuenciación
Identificación bacterias
• Morfología de las bacterias
• Morfología de las colonias
• Fisiología 
• Pruebas de patogenicidad
• Serología
• ME
• Omicas
Detección e Identificación de Bacterias 
Fitopatógenas Senasa
• Inspección visual de síntomas
• Técnicas serológicas: Inmunofluorescencia Indirecta o 
ELISA 
• Siembra y Aislamiento sobre medio de cultivos semi-
selectivos
• Estudio de las características morfo-fisiológicas
• Estudios de las propiedades bioquímicas por Sistema de 
Identificación de bacilos Gram negativos no 
enterobacterias API NE y de Enterobacterias API 20 E
• Test de hipersensibilidad en hojas de tabaco 
• Test de Patogenicidad
• PCR Convencional 
Algunas técnicas modernas
de uso en todos los grupos
• ME
• ISEM
• Serología
• Omicas:
Genómica, metagenómica, trasncriptómica, 
protéomicas, metabolómicas
MOSAICO ENANIZANTE DEL MAÍZ Y DEL SORGO 
(MAIZE DWARF MOSAIC VIRUS – MDMV)
Flia. Potyviridae – Gén. Potyvirus
Part. Flexuosas – 750 nm ARN +S
Vectores: áfidos Ropalosiphun padii,
R. maydis, Myzus persicae
Forma: No persistente
Hospedantes: 
Maíz, sorgo, sorgo de Alepo
Frecuentemente forma un complejo en maíz con otros 
virus
POTYVIRUS
 El grupo más numeroso de virus de plantas 
 Un virus es miembro definitivo de este grupo si:
- Tiene partículas tubulares, RNAss+, 680 a 900 nm.
- Tiene transmisión no persistente por pulgones;
- Induce inclusiones características en molinete
- Es distinguible serológicamente de otros virus 
morfológicamente similares
ALGUNOS POTYVRUS
Mosaico severo de la papa PVY
Mosaico común del poroto BCMV
Mosaico amarillo del poroto BYMV 
Mosaico de la soja SMV 
Mosaico en papa PVA 
Mosaico enanizante del maíz MDMV
Sharka del ciruelo PPV
ME Cortes ultrafinos: inclusiones 
tubulares, laminares y en molinetes
https://www.sciencedirect.com
Inclusiones y gráfico de su estructura
https://apsjournals.apsnet.org/ 
ZYMV SÍNTOMAS EN ZAPALLO
HTTPS://PLANTPATH.IFAS.UFL.EDU 
MDMV síntomas
https://cropprotectionnetwork.org 
https://ohioline.osu.edu/factsheet/plpath-cer-09
Patogénesis
https://ohioline.osu.edu/factsheet/plpath-cer-09
MANEJO
Utilización de híbridos tolerantes
Control del sorgo de Alepo
Escape