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CARTA AL DI RECTOR 
 
Nuevos m étodos de ext racción de ácidos r ibonucleicos 
( ARN) : herram ientas básicas en la biología m olecular 
 
New m ethods of ext ract ion r ibonucleic acids ( RNA) : Basic 
tools in m olecular biology 
 
 
 
 
 
AL DI RECTOR: 
La ext racción de ácido r ibonucleico (ARN) es una práct ica indispensable en los 
laborator ios de biología molecular, teniendo en cuenta que múlt iples ent idades 
hematológicas requieren, como parte de su diagnóst ico, un estudio molecular al 
inicio de la enfermedad y posteriormente, para evaluar su evolución y respuesta al 
t ratam iento.1-3 
El ARN es uno de los componentes más relevantes del núcleo celular. En los inicios 
de la biología molecular se describieron t res form as de ARN: el m ensajero (ARNm ), 
que cont iene la información con la que viaja al citoplasma para la t raducción y 
síntesis de proteínas; el r ibosomal (ARNr) , que junto a proteínas forman un 
complejo citoplasmát ico que actúa como sit io pr incipal para la t raducción; y el de 
t ransferencia (ARNt) , que facilita la incorporación de los am inoácidos al r ibosoma 
durante la síntesis proteica.1 
En los últ imos t iempos se han descrito nuevas variantes de ARN, que según se 
plantea: son im portantes en la regulación genét ica de la célula eucariota, com o los 
m icroARN conocidos como m iRNA (por sus siglas en inglés) , que no codifican 
proteínas, pero que se unen al ARNm y regulan su velocidad de producción; 
pequeñas m oléculas de ARN denom inadas también por sus siglas en inglés como 
snRNA y snoRNA, involucradas en procesos de empalme y modificaciones quím icas 
de ot ros ácidos nucleicos, respect ivamente; y ot ras form as de ARN no codificante, 
de m ayor tam año, cuya función no está totalmente esclarecida.1,4 
Debido a su est ructura quím ica, el ARN es una molécula frágil y suscept ible a la 
degradación por enzimas como las ARNasas. Este es uno de los tem as 
fundamentales durante el proceso de ext racción y purificación de este ácido 
nucleico. El t ipo de muest ra y la manera en que se toma, ya com ienza a influir en 
las característ icas del ARN ext raído. 
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De cualquier forma, se requerirá inhibir la act ividad de las ARNasas durante todo el 
proceso de obtención y, de igual manera, durante su ut ilización en el estudio 
molecular del cual será objeto. Este es uno de los puntos fundam entales a la hora 
de desarrollar un m étodo con el cual pueda obtenerse ARN no degradado y en 
cant idad suficiente para el estudio que se llevará a cabo.1-3,5 
Diferentes m étodos para la obtención del ARN están actualmente estandarizados en 
los laboratorios de biología m olecular: desde técnicas engorrosas con m arcada 
manipulación de las muest ras y que requieren varios días para la obtención del 
ARN,4,6,7 pasando por nuevos kits comerciales que agilizan el procedim iento de 
m anera dinám ica, con react ivos y m étodos físicos novedosos que aunados, reducen 
los r iesgos de obtener un ARN de m ala calidad; 8-11 hasta la ext racción robot izada de 
ARN, ácido desoxirr ibonucleico (ADN) y proteínas, que se basa en equipos de nueva 
generación que automat izan el proceso de principio a fin. 
Históricamente, el método más empleado en el laboratorio de biología molecular del 
I nst ituto de Hematología e I nmunología ha sido el de ext racción con la m ezcla de 
t iocianato de guanidinio- fenol-cloroformo (modificado) , con el que se obt iene un 
buen rendim iento en la cant idad de ARN con react ivos convencionales. 
No obstante, el procedim iento es engorroso y requiere de m uchas horas, lo que a 
su vez retarda las exploraciones subsiguientes que dependen del ARN ext raído y no 
perm ite un resultado rápido, sobre todo en aquellos casos donde se dependa de 
este estudio para el diagnóst ico inmediato del paciente. Por ot ra parte, esta técnica 
implica el uso de sustancias nocivas y corrosivas que, aunque no influyen en la 
calidad y el rendim iento del ARN, son r iesgosas para la persona que realiza el 
proceso.12 
La int roducción de nuevas tecnologías en el cent ro ha perm it ido modernizar las 
técnicas moleculares y se ponen a punto métodos de ext racción por colum nas y de 
m anera autom at izada, ya sea manualmente mediante kits habilitados al respecto, o 
totalmente autom at izado una vez que se toma la m uest ra al paciente, con el 
innovador QI Acube, de tecnología avanzada. 
I nnegablemente, estos métodos t ienen sus bondades y cont rapartes negat ivas, por 
lo que su adecuación a la práct ica diar ia estará determ inada por las condiciones y 
necesidades específicas de cada cent ro. Los sistem as autom at izados diseñados para 
medianos y grandes laboratorios han crecido en cuanto a demanda en los últ imos 
años. Const ituyen una alternat iva a métodos manuales de t rabajo intensivo y se 
destacan ventajas como la reducción del t iempo y de la mano de obra, aumento en 
la seguridad del t rabajador e incremento en la reproducibilidad y calidad de los 
resultados. La com unidad cient ífica en general apuesta por este t ipo de 
tecnología.13-16 
El conocim iento y la aplicación de esta variedad de procedim ientos de ext racción de 
ARN en los días actuales, cuando la biología molecular se hace cada vez más 
indispensable, perm ite tener herram ientas a la mano para decidir en cada m omento 
qué técnica es la idónea de acuerdo con la naturaleza de la m uest ra, el núm ero de 
alteraciones genét icas a explorar, la urgencia del resultado y demás condiciones 
asociadas. 
Un laboratorio reforzado con esta tecnología de punta y el conocim iento previo de 
técnicas m ás básicas, sin dudas elevará la calidad en el manejo de los pacientes. 
En estos mom entos t rabajam os en la puesta a punto y establecim iento de los 
protocolos de diagnóst ico adaptados a esta nueva tecnología y en breve t iempo se 
podrán ofrecer las apreciaciones sobre sus ventajas y novedades basadas en la 
propia experiencia. 
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Lic. Carm en Díaz Alonso, Dra. Heidys Garrote Santana, Dra C. Ana María Am or 
Vigil, Lic. Yandi Suárez González, Dra. Lesbia Fernández Mart ínez, Lic Vera Ruiz 
Moleón. 
I nst ituto de Hematología e I nmunología. 
 
 
Recibido: m arzo 23, 2015. 
Aceptado: junio 10, 2015. 
 
 
Dra. Heidys Garrote Santana. I nst ituto de Hematología e I nmunología. Apartado 
8070, La Habana, CP 10800, CUBA. 
E-mail: rchematologia@infomed.sld.cu