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BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO ESCUELA DE POSGRADO UNIDAD DE POSGRADO EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA Etnobotánica y biomoléculas de especies de páramos y bosques nublados de Piura; con potencial aplicación en medicina complementaria y biocomercio TESIS PARA OPTAR EL GRADO ACADÉMICO DE DOCTOR EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA Autor: Ms. Torres Guevara, Fidel Angel Asesor: Dra. Ana Elena Mantilla Rodríguez TRUJILLO – PERÚ 2019 N° de Registro: __________ U N IV E RS ID AD NACIONAL DE T R U JIL L O Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT ii JURADO DICTAMINADOR Dr. Roberto Osmundo Ybañez Julca PRESIDENTE Dr. Mayar Luis Ganoza Yupanqui SECRETARIO Dra. Ana Elena Mantilla Rodríguez ASESORA Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT iii DEDICATORIA A mis indesmayables compañeros del interminable viaje del aprender Linda, Juan y Santiago. A la memoria de Anita y Juan Rómulo Quienes me cultivaron el cariño y orgullo por nuestra tierra. Fidel Torres Guevara Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT iv AGRADECIMIENTO A la Dra. Ana Elena Mantilla Rodríguez por su constante asesoría y apoyo a esta investigación. Al Dr. Mayar Luis Ganoza Yupanqui por su valiosa contribución y orientación en la presente investigación y colega en el trabajo del tema que aborda esta tesis. A la Comunidad Campesina Segunda y Cajas de Huancabamba por el aporte de sus conocimientos. Al Dr. Roberto Ybañez Julca, por sus valiosas sugerencias y recomendaciones. Esta investigación se realizó en el contexto del Proyecto: “Etnobotánica y bioprospección en los páramos y bosques de neblina del norte del Perú para la innovación en la medicina complementaria y el biocomercio”; cofinanciado por el Programa Nacional de Innovación Agraria (PNIA) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT v ÍNDICE Página RESUMEN .................................................................................................................. vi ABSTRACT ................................................................................................................. vii I. Introducción ................................................................................................................... 1 II. Material y método ........................................................................................................ 11 III. Resultados .................................................................................................................. 27 IV. Discusión ..................................................................................................................... 61 V. Conclusiones ............................................................................................................... 87 VI. Referencias Bibliográficas ........................................................................................... 90 Anexos ...................................................................................................................... 106 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT vi RESUMEN La investigación tuvo por objetivo establecer la relación entre los conocimientos etnobotánicos de ocho especies de los páramos y bosques nublados del norte peruano y sus condiciones ambientales de crecimiento con la síntesis de biomoléculas de actividad farmacológica con potencial aplicación en medicina complementaria y el biocomercio. El estudio etnobotánico se realizó por consenso y participación de las organizaciones comunales mediante encuestas, colectas de campo y ideterminación taxonómica de las especies. Los análisis fitoquímicos se realizaron sobre extractos hidroalcohólicos de 96°, 70° y 45° GL, infusión y decocción; los compuestos fenólicos por el método Folin Ciocalteu; la actividad antioxidante y la capacidad antioxidante con DPPH; la abundancia de biomoléculas mediante HPLC y la estructura molecular por cromatografía liquida acoplado a espectrometría de masas. Vaccinium floribundum de los páramos mostró el mayor contenido de polifenoles (58 a 119.8 mg AG/g) y Cuphea cilliata del bosque de neblina (46.7 a 92.6mg AG/g). Por actividad antioxidante, Acaena ovalifolia de los páramos de Huancabamba, expresó los mayores valores en equivalentes de TROLOX, quercetina y ácido ascórbico; con 199.2, 117.89 y 132.0 mg/g respectivamente; mientras que del bosque nublado de Ayabaca y Huancabamaba, Cuphea cilliata tuvo los mayores valores en equivalentes de TROLOX, quercetina y ácido ascórbico con 117.99, 101,3 y 117.4 mg/g. Los perfiles cromatográficos de cada especie con cinco sistemas de extracción han permitido establecer sus huellas digitales. Las estructuras moleculares identificadas fueron: rutina en Muehlenbeckia hastulata; Isorhamnetina 3-0-Glucoside en Cuphea cilliata; Myricetin 3-0 Glucoside en Bejaria resinosa; Acido clorogénico y Quericetin 3-0 Glucoside en Vaccinium floribundum, esta última molécula también identificada en Brachyotum angustifolium. Palabras clave: Páramos, bosques de neblina, sustancias bioactivas, etnobotánica, flavonoides, interculturalidad, biocomercio. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT vii ABSTRACT The research aimed to establish the relationship between ethnobotanical knowledge and environmental conditions with the biological activity of biomolecules that possess eight species of the moors and cloud forests of northern Peru that have potential application in complementary medicine and biocommerce. The ethnobotanical study was carried out by consensus and participation of community organizations through surveys and field collections and taxonomic identification of the species. Species analyzes were performed with extracts hidroalcoholic at ethanol 96°, 70°, 45 ° GL, infusion and decoction;the phenolic compounds were determined by the Folin Ciocalteu method; the antioxidant activity and antioxidant capacity with DPPH, the determination of biomolecules by HPLC and the molecular structure by liquid chromatography coupled to mass spectrometry were evaluated. The Vaccinium floribundum wasteland species showed the highest polyphenol content values (58 to 119.8 mg AG/g) and the Cuphea cilliata mist forest (46.7 to 92.6mg AG/g). Due to its antioxidant activity, the species of the Huancabamba moors, Acaena ovalifolia, expressed the highest equivalent values of TROLOX, quercetin and ascorbic acid; with 199.2, 117.89 and 132.0 mg/g; while from the cloud forest of Ayabaca and Huancabamaba, it was Cuphea cilliata who had the highest equivalent values of TROLOX, quercetin and ascorbic acid with 117.99, 101.3 and 117.4 mg/g. The chromatographic profiles of each species with five extraction systems have allowed to establish their fingerprints. The molecular structures identified were: rutine in Muehlenbeckia hastulata; Isorhamnetine 3-0-Glucoside in Cuphea cilliata; Myricetin 3-0 Glucoside in Bejaria resinosa; Chlorogenic acid and Quericetin 3-0 Glucoside in Vaccinium floribundum, the latter molecule also identified in Brachyotum angustifolium. Keywords: Páramos, moors, mist forests, bioactive substances, ethnobotany, flavonoids, interculturality, biocommerce. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 1 I. INTRODUCCION La alta diversidad y endemismo de las especies vegetales de los páramos y bosques nublados de los andes del norte peruano constituyen una riqueza y oportunidad por los conocimientos tradicionales que de ella poseen las Comunidades agrarias rurales que viven en el territorio de estos ecosistermas. Aprovechar estas ventajas comparativas con el incremento de sus ventajas competitivas por la integración de conocimiento tradicional con el científico, debe posicionar ventajosamente a las organizaciones como eslabón primario de un sistema de innovación basado en la diversidad y orientado a su conservación. Los páramos y bosques de neblina de los andes del norte del Perú ubicados entre los 4°43’48¨ a 5°50´LS y 79°36´a 79°24¨LO; en el rango altitudinal de 1,500 a 3,700 msnsm con una superficie de120, 000 ha (MINAM) distribuida en las regiones de Piura y Cajamarca en la que se registra aproximadamente 715 especies endémicas que representan aproximadamente el 20% del endemismo para todo el país (Sagastegui, A. et al 1999). Además de la riqueza biológica que representan, los páramos y bosques nublados tienen un rol decisivo en el servicio ambiental hídrico que brindan a las llanuras de las cuencas de las que constituyen sus nacientes, por lo que su conservación depende del aprovechamiento económicamente sostenible que se les de mediante el establecimiento de un sistema territorial de innovación orientado a la conservación de estos ecosistemas (Linday, A. 2019; ANA; 2017; Gómez-Peralta, D.2008). Los páramos de Piura constituyen las cimas de este sector de los andes del norte del Perú entre los 3,000 a 3,700 msnm con una superficie de 66,300 ha (More, A. et al 2013), de las aproximadamente 46,184 hectáreas aún están no intervenidas (Recharte, J. y F. Torres. 2015) donde se registran aproximadamente 4,800 especies vegetales (Sánchez, I. 2012; Hoftede et al. 2014). Por su Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 2 composición florística, el páramo se distingue del ecosistema jalca por la presencia de comunidades vegetales caracterizadas por algunas especies como: Hypericum laricifolium, Brachyotum sp. Pernettya prostrata, Calamagrostis, Agrostis, Stipa, Paspalum bonplandianum, Neurolepis aristata; asociadas a pteridofitas como: Huperzia, Lycopodium, Jamesonia, Niphidium y Lophosoria. Angiospermas y dicotiledóneas se hallan presentes como herbáceas y arbustos de tamaño pequeño adaptadas a las condiciones extremas de temperatura, velocidad de viento y radiación UV (Sánchez, I. 2012; Hoftede et al. 2014). La diversidad vegetal visible contiene otra riqueza como banco de biomoléculas demandados por los crecientes mercados del biocomercio y la medicina complementaria (Carhuapoma, M. 2012) que además son motivo de interés del Ministerio del Ambiente peruano como estrategia de emprendimiento de negocios basados en el uso sostenible de la biodiversidad nativa, alineados con los objetivos del Convenio sobre la Diversidad Biológica y la Estrategia Nacional de Diversidad Biológica (Perú, MINAM. 2013). Los bosques de neblina, ubicados en Piura sobre la vertiente occidental de los andes entre los 1,500 y 2,500 msnm, son ecológicamente calificados como selva alta que atrapan la suficiente humedad para sostener su gran densidad vegetal. Es el ecosistema que interpone entre la actividad agraria de las Comunidades campesinas y su proceso de expansión, y los páramos. Este bosque es el ecosistema de vida de especies animales en peligro de extinción como el oso de anteojos y el tapir de altura (Peña, G. 2015; Weigend et al. 2006; Amanzo, J. 2003). La biodiversidad de los bosques de neblina es mayor comparada a la de los bosques de la selva baja, sin embargo, cuentan con estudios incipientes, de tal modo que se sabe relativamente poco de ellos. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 3 Los bosques de neblina de Piura, Cajamarca y de Amazonas por encontrarse en la zona de la Deflexión Huancabamba es que se le reconoce como región de alta diversidad y fuente de diversidad primaria para muchos grupos de plantas. Por su rango altitudinal entre los 1500 msnm en el límite inferior hasta los 3000 msnm en el límite superior las condiciones de temperatura, suelo y humedad varían significativamente generando cambios importantes en la adaptación de las especies (Young, B. et al. 2012). El significado y sentido de bienestar y pertenencia tanto a la naturaleza como al grupo social con el cual se construye y comparten las experiencias emocionales de bienestar o insatisfacción que se transmiten para tomar decisiones representa la cultura de un grupo social y en el caso de las sociedades agrarias, es en base a su relación con las plantas de las cuales depende su alimentación, salud, mitos y leyendas, representa su cultura etnobotánica (Monroe, J y F. Arenas. 2002; Feldman, L. 2018; Castilla del Pino, C. 2003; Pardo de Santayana y Gómez, 2003; Samaja, J. 2000). Para la Comunidades que viven en el entorno de las jalcas y páramos las propiedades de fortaleza, resistencia y belleza que poseen las plantas que crecen en estas condiciones hostiles y difíciles para la vida de otras especies es la que trasmiten a las personas cuando se les utiliza para la salud, vitalidad y reproducción. Esa es la fuerza que reciben del poder de las montañas a través de las plantas que a su vez fueron instaladas por sus antepasados en los inicios de la creación (Walter, D. 2017). La investigación participativa que demanda el aprovechamientode la diversidad para la innovación, implica la integración de los conocimientos tradicionales con los conocimientos científicos,proceso en el que el primero aporta evidencias y experiencias concretas del uso de las plantas silvestres para resolver problemas específicos de la salud, lo que se constituye en fuente de hipótesis para la Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 4 investigación científica que permita verificar y ampliar las propiedades asignadas y estandarizar el conocimiento para poder compartirlo y usarlo para dar valor agregado al producto natural elaborado y a los conocimientos tradicionales de la Comunidad. La situación indeseada a superar es la relación asimétrica e informal establecida entre conocimiento tradicional en cada territorio y las agendas del conocimiento científico correspondiente a intereses extra nacionales que no han beneficiado al país y mucho menos a los propietarios de aquel conocimiento base de la cadena de investigación e innovación (Bussmann R. y D. Sharon. 2015, Hersch-Martínez, P. 2002). Por tanto, el conocimiento tradicional y científico, requieren de una innovación institucional de articulación, un nuevo pacto de negociación entre culturas, que responda a una agenda nacional de innovación científica tecnológica basada en la biodiversidad. En la naciente economía del conocimiento de la naturaleza, la participación de las Comunidades la elaboración de productos naturales que da valor añadido a la vegetación que conocen y usan, incentivará al aprovechamiento de productos y servicios ofrecidos por la biodiversidad: Genes endémicos para la biotecnología; especies protectoras del potencial hídrico y especies indicadoras de cambio climático (Abramovay, R. 2013). Esto demanda de un cambio de roles; que modifica la relación entre investigador científico / investigador(a) tradicional, en la forma actual de autor / informante, a una relación de co-autores y corresponsables de los riesgos y beneficios. El impulso de la innovación basada en la biodiversidad que implica la valorización de los conocimientos tradicionales colectivos sobre la diversidad vegetal que se posee, significa a su vez una inversión que debe tener por finalidad el incremento del bienestar económico de la Comunidad por lo que el foco de atención en proceso de sistematización del conocimiento tradicional local, es el saber colectivo legitimado por la organización comunal. Por tanto, para que la inversión por parte del Estado dirigida a la activación de procesos de innovación basados en la biodiversidad, demanda a su Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 5 vez, de una nueva innovación social u organizacional que convierta a las organizaciones comunales en unidades socio-económicas operativas de este proceso. El enfoque etnobotánico que asume a la comunicación intercultural en la descripción y sistematización de los conocimientos tradicionales como ventaja competitiva local, representa el primer paso en la negociación de apropiación social de la ciencia con las instituciones científicas que aportan el conocimiento científico (bioprospección) para dar valor agregado al primero, contribuyendo a que la organización comunal adquiera un rol paritario en las cadenas de investigación e innovación. La integración del estudio sistemático de los conocimientos tradicionales de las plantas utilizadas con fines terapéuticos y el análisis bioquímico de sus moléculas bioactivas, generan nuevos conocimientos para una revaloración del conocimiento tradicional como orientador de la investigación científica y el hallazgo de nuevas líneas de investigación fitoquímica orientadas por la demanda de la salud y el biocomercio basado en la biodiversidad nativa. Esta relación de importancia equivalente y retroalimentación indispensable entre conocimiento tradicional y científico para establecer un proceso competitivo pone en evidencia la necesidad de la interacción intercultural necesaria entre organizaciones comunales y entidades académicas que establezcan acuerdos de intereses comunes a partir de sus propósitos particulares (Horák, M. 2015; Granda L. et al. 2015). La etnobotánica basada en el registro del conocimiento local de manera impersonal, en el que las expertas o expertos locales sólo participan como informantes, inhibe la participación y compromiso de la organización comunal, ante lo cual el enfoque intercultural inclusivo en la generación colectiva de conocimiento orienta este tipo de investigación participativa. Este enfoque para la investigación e innovación, se aleja del que parte del prejuicio de que las sociedades rurales sólo pueden cumplir el rol de proveedores no calificados de materia prima y de conocimientos no equivalentes a los científicos, con lo que se discrimina a las Comunidades del proceso científico. Esta mentalidad de un Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 6 sector de investigadores e instituciones de investigación establece un mecanismo de extracción de recursos y conocimientos que no le interesa la reciprocidad por la naturaleza de sus agendas de investigación e innovación que son ajenas e inclusive antagónicas con los intereses y expectativas de las comunidades y del país (Hersch-Martinez, 2002). La expansión de la demanda de productos naturales y herbales por la medicina complementaria (Villar, 2016; Carhuapoma, M. 2011; Antunez de Mayolo, S. 2011) y la naciente industria de los alimentos funcionales y productos naturales nutracéuticos, cosméticos y gastronómicos en el Perú, ha motivado a la vez una nueva exigencia en la calidad de los productos, lo que pone en cuestionamiento la fortaleza organizativa e institucional de las cadenas de valor de estos productos para la generación de agendas comunes de oferta y demanda por investigación e innovación que den respuesta a los estándares de calidad exigidos e incremento de la competitividad de los agentes de este sistema basado en la biodiversidad. La prospección biológica con fines de investigación básica para generar el conocimiento que requieren las innovaciones permite valorizar tanto al organismo como al conocimiento tradicional que da referencia de él (Pastor S. y M. Sigüeñas. 2008). La generación de conocimiento científico orientado por el conocimiento tradicional, en un marco legal conveniente, beneficiaría al conjunto de los agentes participantes de lo que debe constituirse en un sistema territorial de innovación basado en la biodiversidad. Entre las biomoléculas más demandas por la industria se identifican a los compuestos fenólicos y flavonoides como el foco de atención del biocomercio, asociados a la buena salud por su comprobada actividad antioxidante, antitumoral, antibacterial, antiviral, y como hepatoprotectores e inhibidores de peroxidación lipídica (Isaza, H. 2012; Giusti, M. 2012; Melendez, M. 2011; Avello M. y Suwalsky, M. 2006; Llacunaa, L. y Macha, N. 2012; Tanquina, I et al. 2013; Repo, R y Encina, C. 2008). En losBiblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 7 andes peruanos se han estudiado 27 plantas nativas tradicionalmente consumidas como alimentos y/o por sus aplicaciones medicinales con contenidos de polifenoles. Para el Perú como poseedor de la gran biodiversidad descrita, darle valor agregado a lo que se tiene y se sabe de ella, depende de los nuevos conocimientos científicos que logremos mediante el entendimiento de las secuencias de las reacciones químicas en el metabolismo secundario de las plantas medicinales, diseñando procedimientos como técnicas apropiadas y coherentes con nuestra realidad (Lock, O. 2016; Ganoza, M. 2001). La producción de compuestos fenólicos y los flavonoides, frecuentes en las especies de los páramos como adaptación al estrés abiótico por temperatura, humedad y viento; un factor altamente influyente es la intensidad de los niveles de radiación UV que alcanza niveles máximos por encima de los 3,000 msnm. El cambio climático puede modificar la intensidad de radiación UV en los páramos por la tendencia de ascenso altitudinal de la base nubosa, con la consecuente alteración de la síntesis de estos metabolitos secundarios (Chirinos, R. et al. 2013; Aichele, X. 2006, Saudy, P. 2013; Casasola, S. 2012), lo que alterará su cantidad y calidad. La investigación e innovación basada en la biodiversidad para la medicina complementaria y el biocomercio repercute en el bienestar de la salud y el beneficio económico que garantiza su conservación con la consecuente generación de bienes y servicios para las economías regional y nacional. El principal demandante actual de productos naturales o droga cruda de alta calidad es el Seguro Social de Salud del Perú y especialmente sus Centros de Medicina Complementaria. En 2014, EsSalud adquirió plantas medicinales por un valor de 1 millón 539 mil soles (Villar, M. 2015) y en 2008 el “Petitorio nacional de productos, recursos e insumos terapéuticos afines de uso en medicina Complementaria” con la Dirección General de Medicamentos, Insumos y Drogas (DIGEMID) solo se Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 8 tenían debidamente registrados para su prescripción médica, por los Centros de Salud; 17 productos naturales (productos naturales procesados), 27 recursos naturales (especies vegetales) y 19 plantas medicinales (Mendocilla, 2009). La demanda que se está incrementando como consecuencia de la expansión de los sistemas de medicina complementaria a nivel nacional (Com pers. Dr. L. Fernández, Director del Centro Medicina Complementaria - Trujillo). El balance realizado por La Torre-Cuadros (2006) sobre los trabajos etnobotánicos en los Andes del Perú son mayoritariamente etnomedicinales. Las zonas con mayor información etnobotánica se concentran en: Cuzco, Puno y Arequipa. Balance que no se ha reactualizado. Este tipo de investigación especialmente en el norte del país es promisoria por el activo interés en articular el conocimiento tradicional con el conocimiento científico y relevar su valor a través de sus usos concretos; sea en casos específicos como: funciones nutricionales (Bussman et al, 2009), afecciones o disfunciones(Vigo et al. 2009), uso de plantas medicinales por Comunidades étnicas como las Ashaninkas (Luziatelli et al. 2010), estudios regionales de especies medicinales de Cajamarca(Sánchez, I. 2011), estudios de las sabidurías botánicas tradicionales de maestros y maestras de Cajamarca(Ruiz, C. 2012), riesgos en comercio y biocomercio de plantas medicinales(Seminario, A. 2008) hasta estudios de especies medicinales con potencial agroindustrial (Vasquez, L. et al. 2010) y frutales nativos a nivel del norte peruano (Mostacero,J. et al. 2017). El Inventario Peruano de Plantas Medicinales del Centro Nacional de Salud Intercultural – CENSI, registra un total de 860 Plantas Medicinales, de las cuales: 628 son plantas nativas, 145 introducidas y 87 se encuentran en revisión, pertenecen a 143 familias botánicas (Santivañez y Cabrera. 2012). Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 9 Las tecnologías de fitopreparaciones y estabilización son técnicas probadas a nivel piloto en años anteriores y en otros ámbitos de la Sierra de Piura utilizando prototipos que han demostrado eficiencia suficiente, como plataforma de aprendizaje a superar. Iniciativas de integración de diferentes disciplinas en la generación de conocimiento es el proceso de implementación del Programa Nacional de Ciencia, Tecnología e Innovación en Plantas Medicinales, Nutraceúticas y Afines tiene una metodología de gestión integrada, la cual se caracteriza por la participación de actores de las cadenas de productores de plantas medicinales; se constituyen comités conformados por representantes de los usuarios, coordinadores del sector empresarial y productivo, coordinadores del sector regulador, universidades y otras instituciones, que se orienta a trabajar en función a grupo de productos priorizados, en este proceso el CONCYTEC asumirá la secretaría técnica (Tarazona, J. 2010) . El Programa Nacional de Promoción de Biocomercio – PNPB del Perú tiene como propósito impulsar y apoyar la generación y consolidación de los negocios basados en la biodiversidad nativa, aplicando criterios de sostenibilidad ambiental, social y económica en concordancia con los objetivos del Convenio sobre la Diversidad Biológica y la Estrategia Nacional de Diversidad Biológica. El Biocomercio definido como el conjunto de actividades de recolección, producción, transformación y comercialización de bienes y servicios derivados de la biodiversidad nativa involucra prácticas de conservación y criterios de sostenibilidad ambiental, social y económica. En tal sentido, otorga especial énfasis en: a) el uso sostenible de los recursos biológicos nativos, b) la promoción de estrategias y actividades productivas que apoyen el uso y c) la conservación sostenible en áreas con alto grado de biodiversidad (Perú, Ministerio del Ambiente. 2013). La industria de los productos farmacológicos, cosmecéuticos, nutricosméticos, de perfumes, fragancias, sabores, aromas, alimentos bifuncionales, plantas biocidas, repelentes y de pigmentos naturales representan una Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 10 creciente demanda por productos altamente diferenciados basados en la biodiversidad disponible (Carhuapoma, M. 2011). OBJETIVOS General Establecer la relación de los conocimientos etnobotánicos y las condiciones ambientales con la actividad biológica de las sustancias bioactivas que poseen ocho especies de los páramos y bosques nublados de Ayabaca y Huancabamba que tienen potencial para su aplicación enmedicina complementaria y el biocomercio. Específicos Describir el conocimiento etnobotánico de ocho especies de los páramos y bosques nublados con potencial para la medicina complementaria y el biocomercio que poseen dos organizaciones comunales de Ayabaca y Huancabamba. Analizar los factores ambientales fundamentales que influencian la actividad biológica de las especies de los páramos y bosques de neblina del norte peruano. Analizar la actividad biológica de las sustancias biaoctivas que poseen las especies con potencial para su aplicación en medicina complementaria y el biocomercio. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 11 II. MATERIAL Y METODOS 2.1. Material 2.2.1. Área de estudio Las áreas de colección de especies se encuentran en los páramos y bosques de neblina de las nacientes de los ríos Quiroz y Huancabamba de la Región Piura en los distritos de Pacaipampa, provincia de Ayabaca y Carmen de la Frontera en la provincia de Huancabamba, entre los 2 700 y 3 500 msnm y entre los 4° 58´ 7´´ y 5° 67´ 25¨ LS y 79° 29´ 51¨ y 79° 30´ 55¨ LO (Anexo 1). 2.1.2. Material de estudio Sobre un conjunto de ocho especies conocidas por las Comunidades sobre sus potencialidades terapéuticas y posibilidades de uso, se realizó el estudio etnobotánico a mayor profundidad con la participación de agricultores conocedores de dichas especies y de sus zonas de distribución en los páramos y bosques de neblina de las provincias de Ayabaca y Huancabamba de la Sierra de Piura. Las especies estudiadas se detallan a continuación . Especie Nombre científico LOCALIDADES Prov. Ayabaca Distrito Pacaipampa Prov. Huancabamba Distrito Huancabamba Páramo Bosque Neblina Páramo Bosque Neblina 1 “lanche colorado” Mircyanthes rhopaloides X 2 “lanche chiquito” Mircyanthes mircynoides X 3 “hierba del toro” Cuphea cilliata X X 4 “payana” Bejaria resinosa X X 5 “pega-pega” Acaena aovalifolia X X 6 “ushpa” Vaccinium floribundum X X 7 Zarcilleja Brachyotum sp x x 8 “chupicaure” Muhelembeckia hastulata x x Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 12 2.2. Métodos 2.2.1. Estudio Etnobotánico de especies con potencial económico 2.2.1.1. Consenso de propósitos e institucionalidad para la realización de la investigación Se realizaron reuniones de inicio con la finalidad de establecer, con los actores definitivos de la investigación, la importancia y proyección de los resultados a obtener en el enfoque intercultural de la investigación destinada a reafirmar su identidad y construir nuevas oportunidades a través de la valoración de un recurso estratégico de la Comunidad, enfatizando el aporte y reconocimiento individual y el carácter colectivo de su utilidad. Ello garantizó la participación de determinadas mujeres y varones conocedores de las especies útiles del páramo y su contribución a la Comunidad (Hersch- Martinez & Gonzales.1996) 2.2.1.2. Planificación conjunta de las acciones Se comprobó el compromiso de participación activa en la investigación requiere del compromiso formal de la organización ACOBOSPA e instituciones reconocidas por ellas como las Rondas Campesinas que expresan su interés en los resultados a lograr. 2.2.1.3. Talleres de intercambio sobre las metodologías, experiencias paralelas, conceptos culturales. Significado de la valorización de los páramos y el valor agregado que confiere el conocimiento científico como la Bioprospección al conocimiento tradicional de las plantas. 2.2.1.4. Talleres sobre el carácter intercultural participativo de la investigación. Se realizaron talleres para lograr consenso sobre los propósitos de la investigación con los líderes de la Comunidad y los comuneros expertos representan los eventos de mayor relevancia por constituir Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 13 los momentos de mayor esfuerzo de comunicación intercultural para establecer acuerdos y compromisos que determinaron la ejecución de la investigación. 2.2.1.5. Tipo de participación y tipo de participante Por el carácter participativo de la investigación un componente fundamental de la ejecución de las acciones es el proceso de acuerdos con las organizaciones comunales y su institución de control social La Ronda Campesina acerca de los métodos y propósitos a lograr con la participación de las mujeres y varones poseedores de conocimientos expertos en el uso de las plantas útiles del páramo y de los bosques de neblina. Esto significa un proceso selectivo desde la propia organización, que propone a las personas que gozan de mejor reconocimiento local de sus capacidades como experta o experto (maestro) en el conocimiento, uso y manejo de las plantas del páramo y de bosque nublado. Proceso que además sufre dos selecciones adicionales; una condicionada por la voluntad de participar, y la otra, por sus conocimientos específicos de las especies del páramo, ya que las familias conocen y usan especies tanto de los páramos como de los bosques de neblina, de manera diferenciada por la diferencia de las especies que caracterizan a ambas formaciones vegetales (Vianney, 2014). El registro de los conocimientos etnobotánicos estuvo condicionado a la identificación de expertas y expertos, no por muestras representativas poblacionales, sino el reconocimiento que la Comunidad le otorga y su disposición a expresar sus conocimientos de las especies del páramo. 2.2.1.6. Selección del informante La selección de los informantes para registrar el conocimiento etnobotánico tiene dos momentos definidos: El primero determinado por la anuencia de la Asamblea de la organización comunal que aprueba la realización del estudio en su territorio al cual pertenecen los páramos, como consecuencia Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 14 de ello, la Comunidad asume también responsabilidad compartida en la convocatoria a comuneros expertos y expertas a participar de la investigación. El segundo momento está determinado por la aceptación de las personas expertas a que se registre sus conocimientos, que es un grupo que goza del reconocimiento o legitimidad ente la Comunidad como portadores de este tipo de saberes. Con el criterio de Selección por Conveniencia, se tomará 20 registros (encuestas etnobotánicas) por cada una de las seis especies en cada uno de los dos distritos escogidos. 2.2.1.7. Encuestas etnobotánicas El registro del conocimiento etnobotánico local se realizará a través de encuestas que permite visualizar la amplitud del conocimiento existente de cada una de las seis especies elegidas conocidas y utilizadas por mujeres y varones expertos. 2.2.1.8. Expedicionesde colectas botánicas con expertos locales Las actividades centrales de la investigación etnobotánica fueron las expediciones de colecta para el registro in-situ de los conocimientos etnobotánicos. Fue la organización comunal quien convocó a los expertos y expertas a participar en las expediciones quienes representaron los intereses de la organización en la utilidad de los resultados obtenidos. Las expediciones de colecta se realizaron previa planificación con la identificación del grupo participante, discusión de los procedimientos, requerimientos logísticos y elección de los sitios específicos en los cuales realizar los recorridos de colecta. La selección del grupo participante depende del conocimiento de los sectores del páramo a recorrer y las ventajas logísticas. Para la identificación geográfica de los sitios de colecta se utilizaron las cartas nacionales del Instituto Geográfico Nacional 1/100 000. Utilizando las Cartas Nacionales del IGN se acuerda con los comuneros expertos para coordinar con quienes viven en las cercanías Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 15 de los sitios de interés a fin de garantizar eficiencia de los transeptos de colecta y ubicación de las especies de interés. Las colectas se realizaron bajo la guía de los comuneros expertos en transeptos determinados por ellos de acuerdo a su conocimiento del páramo y del bosque y a la ubicación de las especies de interés según su utilidad y disponibilidad en la época del año. Se seleccionó seis especies con gran potencial desde el conocimiento de los comuneros expertos. Se tomaron 4 a 5 muestras de especies con flores para su correcta determinación taxonómica utilizando prensas botánicas. Las especies colectadas se sometieron a proceso de secado, montaje en cartulinas y etiquetado para su determinación taxonómica en los Herbarios especializados en vegetación de páramos como el Herbario “Isidoro Sánchez” (CPUN), de la Universidad Nacional de Cajamarca. 2.2.1.9. Análisis cuantitativo del registro de los conocimientos etnobotánicos 2.2.1.9.1. Nivel de usos significativo (UST). Índice que expresa los usos medicinales citados con una frecuencia superior o igual al 20%, por las personas conocedoras encuestadas que usan plantas como primer recurso para resolver una afección de salud, lo que puede considerarse como un indicador cultural. Para su evaluación y validación científica, Quintana (2012) propone el UST mediante la siguiente ecuación: UST = Uso Especie (s)/nie * 100 Donde: Uso Especie(s) = número de citaciones para cada especie. nie = número de informantes encuestados. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 16 2.2.1.9.2. Índice o valor de uso (IVUs). Expresa la importancia o valor cultural de una especie determinada para el conjunto de informantes entrevistados. Ello se estima mediante el índice de valor de uso (IVUs) general de cada especie para todos los informantes (Quintana, 2012) IVUs = Σ UMis/nie Donde: UMis = Número de usos mencionados por cada informante (i) para cada especie (s). nie = Número de informantes entrevistados. 2.2.2. Factores ambientales en la influencia de la actividad biológica de las especies 2.2.2.1. Análisis de suelos Se tomó muestras de 1.0 kg de suelo de los 40 cm superficiales de los sitios de crecimiento de cada una de las especies en estudio en los páramos y bosques de neblina Ayabaca y Huancabamba. Se realizaron los análisis de las propiedades físico-químicas, acidez, conductividad eléctrica, materia orgánica, macronutrientes y micronutrientes. Los análisis los realizó el Laboratorio “BIOASTER” TECNOLOGÍA, INDUSTRIAS Y SERVICIO SAC (Anexo 2). 2.2.2.2. Análisis de los factores meteorológicos Se analizó los datos meteorológicos de las zonas del entorno de los páramos y bosques de neblina de Ayabaca y Huancabamba a través de los datos de las estaciones meteorológicas de SENAMHI, ubicadas en el distrito Carmen de la Frontera – Huancabamba a 2974 msnm en las coordenadas 5° 6' 41.5'' LS y 79° 27' 48.56'' LO; el distrito de Ayabaca – Ayabaca a 2634 msnm en las coordenadas 4° 38' 15.92'' LS y 79° 42' 38.76'' LO. Se analizaron los datos de temperatura máxima y mínima, precipitación y velocidad de viento (Anexo 3). 2.2.3. Análisis de la actividad biológica de las especies. Se realizó sobre las hojas de las especies de interés Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 17 2.2.3.1. Actividad Antioxidante En esta actividad se consideró: la determinación de compuestos fenólicos totales de los extractos etanol 96°, etanol 70°, etanol 45°, infuso y decocto de las especies vegetales expresados en equivalentes de ácido gálico, por el método de Folin Ciocalteu; la determinación de la actividad antioxidante mediante concentración inhibitoria media (CI50) por el método de DPPH; la determinación de la actividad antioxidante de los extractos etanol 96°, etanol 70°, etanol 45°, infuso y decocto expresado en equivalentes de trolox; en equivalentes de ácido ascórbico; y equivalentes de quercetina. 2.2.3.1.1. Determinación de compuestos fenólicos totales de los extractos etanol 96%, etanol 70%, etanol 45%, infuso y decocto de las especies expresados en equivalentes de ácido gálico, por el método de Folin-Ciocalteu. El análisis de compuestos fenólicos totales se realizó por el método espectrofotométrico de Folin- Ciocalteu usando el ácido gálico como patrón, expresado en mg de compuestos fenólicos totales por gramo de especie vegetal desecada (Gajardo S. 2016). 2.2.3.1.1.1. Preparación de los extractos El material vegetal seco se trituró en mortero hasta obtener partículas finas, los extractos fueron preparados al 5% P/V usando cinco diferentes sistemas de extracción: tres sistemas hidroalcohólicos (etanol 96°, etanol 70° y etanol 45°) y dos sistemas acuosos (infusión y decocción) (Ganoza, M. et al. 2015). 2.2.3.1.1.1.1. Extractos hidroalcohólicos Al polvo del material vegetal se le adicionó etanol (96°, 70° y 45°), se sonicó por 15 minutos a temperatura ambiente, el extracto madre se filtró a través de papel de filtración media MN751. De la Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 18 solución madre se tomó 100 µL y se completó a un volumen de 1000 µL (dilución-1), luego se tomó 250 µL de la dilución-1 y se completó a un volumen de 1000 µL (dilución-2). 2.2.3.1.1.1.2. Extractos acuosos A una porción de polvo del material vegetal se le adicionó agua caliente y se dejó reposar (infusión) por 10 minutos. A otra porción de polvo del material vegetal se le adicionó agua y se llevó a ebullir (decocción). Obteniéndose losextractos madres (infuso y decocto), los cuales se procedieron a filtrar y se continuo con el procedimiento descrito para los extractos hidroalcohólicos. 2.2.3.1.1.2. Preparación de la curva de calibración para compuestos fenólicos totales. Se preparó una disolución patrón de ácido gálico de 1 mg/mL en etanol de 96°, a partir de esta disolución, se hicieron ocho diluciones de concentraciones estándar desde 0,02; 0,04; 0,06; 0,08; 0,10; 0,12; 0,14 y 0,16 mg/mL. Se tomó 25 µL de cada dilución estándar con 125 µL del reactivo de Folin-Ciocalteu al 10% y se agitó por 20 minutos a 45 °C. Posteriormente se adicionó 100 µL de Na2CO3 al 7% y se dejó reposar por 10 minutos, luego se midió por espectrofotometría a 760 nm. Los ensayos se realizaron por triplicado para cada concentración (Ganoza, M. et al. 2015). 2.2.3.1.1.3. Determinación de compuestos fenólicos totales Se tomó 25 µL de cada extracto (dilución-2) con 125 µL del reactivo de Folin- Ciocalteu al 10% y se agitó por 20 minutos a 45 °C. Posteriormente se adicionó 100 µL de Na2CO3 al 7% y se dejó reposar por 10 minutos, luego se midió por espectrofotometría a 760 nm, basándose en una reacción colorimétrica de óxido-reducción. Los ensayos se realizaron por triplicado para cada extracto (Ganoza, M. et al. 2015). Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 19 2.2.3.1.1.4. Determinación de la actividad antioxidante de los extractos etanol 96°, etanol 70°, etanol 45°, infuso y decocto de las especies vegetales mediante concentración inhibitoria media (CI50) por el método de DPPH. El método de 2,2-difenil-1-picrilhidracilo (DPPH) para evaluar la actividad antioxidante, se realizó mediante la determinación de la concentración inhibitoria media (CI50), expresada en mg de compuestos fenólicos totales por mililitro de extracto de especie vegetal, capaz de reducir el 50% del radical libre DPPH (Ganoza M. et al.2015; Alam et al. 2013). 2.2.3.1.1.4.1. Preparación de la curva de calibración para DPPH Se preparó una disolución patrón de DPPH de 0,2 mM (78,8 µg/mL en etanol de 96%), a partir de esta disolución, se hicieron 5 diluciones de concentraciones estándar de 100%, 80%, 60%, 40% y 20%. Se midió por espectrofotometría a 517 nm. 2.2.3.1.1.4.2. Determinación de la actividad antioxidante con DPPH A partir de los extractos madres, se hicieron cinco diluciones para obtener concentraciones de compuestos fenólicos de 0,200; 0,150; 0,100; 0,050 y 0,025 mg/mL (tomando como base los resultados obtenidos en el ensayo de determinación de compuestos fenólicos totales). Se tomó 10 µL de cada dilución y se agregó 250 µL del reactivo de DPPH 0,2 mM. Se agitó por 10 minutos y se midió por espectrofotometría a 517 nm (Alarcón-Aguilar et al 2018). 2.2.3.1.1.4.3. Determinación de la concentración inhibitoria media (CI50). Se graficó el porcentaje de captura de DPPH vs concentración de compuestos fenólicos de los extractos de las especies vegetales obtenidos por el método de Folin-Ciocalteu. Se utilizó la pendiente (m) y el intercepto (b) de la recta de regresión lineal, calculándose el valor de IC50. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 20 Dónde: CI50: Concentración necesaria del antioxidante para reducir en un 50% la concentración inicial del radical DPPH. m: Pendiente de la recta. b: Intercepto de la recta (igual a cero) 50: Concentración media 2.2.3.1.1.5. Determinación de la actividad antioxidante de los extractos etanol 96°, etanol 70°, etanol 45°, infuso y decocto de las especies expresado en equivalentes de trolox. La capacidad antioxidante equivalente de Trolox (TEAC, del inglés Trolox equivalent antioxidant capacity), se evaluó mediante el método de 2,2-difenil-1-picrilhidracilo (DPPH), utilizando como patrón el ácido 6-hidroxi-2,5,7,8- tetrametilcroman-2-carboxílico (Trolox), expresado en mg de Trolox por gramo de muestra de especie vegetal desecada. 2.2.3.1.1.5.1. Preparación de la curva de calibración para Trolox Se preparó una disolución patrón de Trolox de 1 mg/mL en etanol de 96°, a partir de esta disolución, se hicieron seis diluciones de concentraciones estándar de 0,05; 0,10; 0,20; 0,30; 0,40 y 0,50 mg/mL. Se tomó 10 µL de cada dilución y se agregó 250 µL del reactivo de DPPH 0,2 mM. SE agitó por 10 minutos y se midió por espectrofotometría a 517 nm. Las determinaciones se realizaron por triplicado para cada uno de las concentraciones. Posteriormente se enfrentó las concentraciones de Trolox versus sus respectivas absorbancias para obtener la ecuación de la curva de calibración para Trolox. 2.2.3.1.1.5.2. Determinación de la actividad antioxidante de las muestras Para el análisis de las muestras se preparó soluciones de 0,1 mg de compuestos fenólicos totales (equivalentes de ácido gálico, EAG) por mililitro para cada muestra. Se tomó 10 μL y se adicionó a 250 μL del DPPH 0,2 mM, se agitó durante 10 minutos, luego se realizaron las lecturas de las Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 21 absorbancias en el espectrofotómetro a 517 nm, los valores se expresaron en equivalentes de Trolox por gramo de muestra de especie vegetal desecada, las determinaciones se realizaron por triplicado para cada uno de los extractos. 2.2.3.1.1.6. Determinación de la actividad antioxidante de los extractos etanol 96°, etanol 70°, etanol 45°, infuso y decocto de especies expresado en equivalentes de ácido ascórbico. La capacidad antioxidante equivalente de ácido ascórbico, se evaluó mediante el método de 2,2- difenil-1-picrilhidracilo (DPPH), utilizando como patrón el ácido ascórbico (vitamina C), expresado en mg de ácido ascórbico por gramo de muestra de especie vegetal desecada. 2.2.3.1.1.6.1. Preparación de la curva de calibración para ácido ascórbico Se preparó una disolución patrón de ácido ascórbico de 1 mg/mL en agua destilada, a partir de esta disolución, se hicieron nueve diluciones de concentraciones estándar de 0,06; 0,08; 0,10; 0,12; 0,14; 0,16; 0,18; 0,20 y 0,22 mg/mL. Se tomó 10 µL de cada dilución y se agregó 250 µL del reactivo de DPPH 0,2 mM. Se agitó por 10 minutos y se midió por espectrofotometría a 517 nm. Las determinaciones se realizaron por triplicado para cada uno de las concentraciones. Posteriormente se enfrentó las concentraciones de ácido ascórbico versus sus respectivas absorbancias para obtener la ecuación de la curva de calibración para ácido ascórbico. 2.2.3.1.1.6.2. Determinación de la actividad antioxidante de las muestras Para el análisis de las muestras se preparó soluciones de 0,1 mg de compuestos fenólicos totales (equivalentes de ácido gálico, EAG) por mililitro para cada muestra. Se tomó 10 μL y se adicionó a 250 μL del DPPH 0,2 mM, se agitó durante 10 minutos, luego se realizaron las lecturas de las Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajolamisma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 22 absorbancias en el espectrofotómetro a 517 nm, los valores se expresaron en equivalentes de ácido ascórbico por gramo de muestra de especie vegetal desecada, las determinaciones se realizaron por triplicado para cada uno de los extractos. 2.2.3.1.1.7. Determinación de la actividad antioxidante de los extractos etanol 96°, etanol 70°, etanol 45°, infuso y decocto de las especies expresado en equivalentes de quercetina La capacidad antioxidante equivalente de quercetina, se evaluó mediante el método de 2,2-difenil-1- picrilhidracilo (DPPH), utilizando como patrón a la quercetina, expresado en mg de quercetina por gramo de muestra de especie vegetal desecada. 2.2.3.1.1.7.1. Preparación de la curva de calibración para quercetina Se preparó una disolución patrón de quercetina de 1 mg/mL en etanol 96%, a partir de esta disolución, se hicieron nueve diluciones de concentraciones estándar de 0,06; 0,08; 0,10; 0,12; 0,14; 0,16; 0,18; 0,20 y 0,22 mg/mL. Se tomó 10 µL de cada dilución y se agregó 250 μL del reactivo de DPPH 0,2 mM. Se agitó por 10 minutos y se midió por espectrofotometría a 517 nm. Las determinaciones se realizaron por triplicado para cada uno de las concentraciones. Posteriormente se enfrentó las concentraciones de quercetina versus sus respectivas absorbancias para obtener la ecuación de la curva de calibración para quercetina. 2.2.3.1.1.7.2. Determinación de la actividad antioxidante de las muestras. Para el análisis de las muestras se preparó soluciones de 0,1 mg de compuestos fenólicos totales (equivalentes de ácido gálico, EAG) por mililitro para cada muestra. Se tomó 10 μL y se adicionó a 250 μL del DPPH 0,2 mM, se agitó durante 10 minutos, luego se realizaron las lecturas de las absorbancias en el espectrofotómetro a 517 nm, los valores se expresaron en equivalentes de Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 23 quercetina por gramo de muestra de especie vegetal desecada, las determinaciones se realizaron por triplicado para cada uno de los extractos. 2.2.4. Purificación y cuantificación de compuestos fenólicos para determinación de abundancia de moléculas por sus picos caracterísiticos 2.2.4.1. Purificación de compuestos fenólicos de extractos de especies vegetales mediante Amberlite XAD7HP. Se purificaron de compuestos fenólicos de los extractos etanol 96°, etanol 70°, etanol 45°, infuso y decocto de especies vegetales mediante Ambertile XAD7HP. 2.2.4.1.1. Preparación de los extractos El material vegetal seco se trituró en mortero hasta obtener partículas finas, los extractos fueron preparados al 5% P/V usando cinco diferentes sistemas de extracción: tres sistemas hidroalcohólicos (etanol 96°, etanol 70° y etanol 45°) y dos sistemas acuosos (infusión y decocción). 2.2.4.1.1.1. Obtención de los extractos hidroalcohólicos Al polvo del material vegetal se le adicionó etanol (96°, 70° y 45°), se sonicó por 15 minutos a temperatura ambiente, el extracto se filtró a través de papel de filtración media MN751 y en un rotaevaporador se concentró hasta sequedad a 40 °C con presión reducida. Luego se resuspendió con agua destilada, obteniéndose los extractos que fueron empleados en la purificación de los compuestos fenólicos. 2.2.4.1.1.2. Obtención de los extractos acuosos A una porción de polvo del material vegetal se le adicionó agua caliente y se dejó reposar por 10 minutos (infusión). A otra porción de polvo del material vegetal se le adicionó agua y se llevó a ebullir Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 24 por 10 minutos (decocción), luego se procedieron a filtrar, obteniéndose los extractos (infuso y decocto), que fueron empleados en la purificación de los compuestos fenólicos. 2.2.4.1.2. Activación de Amberlite XAD7HP Por cada 1000 g de Amberlite XAD7HP, se adicionó 2000 mL de HCl 0,1 N, se agitó, se filtró al vacío y se lavó con agua destilada hasta pH neutro. Luego se adicionó 2000 mL de NaOH 0,1 N, se agitó, se filtró al vacío y se lavó con agua destilada hasta pH neutro. Se adicionó un sistema etanol/agua (1:1), se agitó y se filtró al vacío, luego se adicionó metanol, se agitó y se filtró; quedando activada para ser usada. 2.2.4.1.3. Obtención de los purificados de compuestos fenólicos Los extractos fueron centrifugados a 5000 rpm por 5 minutos, el sobrenadante se filtró y se colocó en un vaso de precipitación. Luego se agregó Amberlite XAD7HP activada y se mezcló. Posteriormente se filtró y se lavó con agua destilada. Finalmente se adicionó metanol, se agitó vigorosamente para desorber los compuestos fenólicos y se filtró. 2.2.4.2. Cuantificación de compuestos fenólicos purificados de extractos de especies vegetales por el método gravimétrico En esta actividad se considera la cuantificación de compuestos fenólicos purificados de extractos de etanol 96°, etanol 70°, etanol 45°, infuso y decocto de las especies vegetales por el método gravimétrico. Se pesó un balón de vidrio fondo redondo de 100 mL en una balanza analítica de 0,0001 g de sensibilidad, luego se le adicionó el metanol con los compuestos fenólicos purificados, se concentró a sequedad a 40 °C con presión reducida, luego se volvió a pesar el balón y por diferencia de peso se obtuvo el porcentaje de rendimiento. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 25 2.2.5. Determinación de compuestos fenólicos por HPLC 2.2.5.1. Perfil cromatográfico de los compuestos fenólicos purificados de extractos de especies vegetales por el método de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) A cada extracto seco con los compuestos fenólicos purificados con Amberlite XAD7HP obtenidos de los extractos de etanol 96° etanol 70°, etanol 45°, infuso y decocto de las especies vegetales se le adicionó 1 mL de metanol y se transfirió a un tubo de polipropileno de 2 mL, se tomó un volumen necesario para obtener una disolución de 1 mg/mL, se filtró mediante filtro jeringa de celulosa regenerada de 2,5 cm x 0,45 μm, se colocó en un vial ámbar de 1,5 mL y se analizó en un cromatógrafo líquido de alta resolución con detector de arreglo de diodos (HPLC-DAD Hitachi Elite Lachrom), se utilizó una columna C18 (250 mm de longitud x 4,6 mm de diámetro interno y 5 μm de tamaño de partícula), como fase móvil se empleó ácido fórmico 0,1% agua (A) y acetonitrilo (B); de 0 a 20 minutos: A (de 97% a 70%) y B (de 3% a 30%); de 20 a 30 minutos: A (de 70% a 50%) y B (30% a 50%); de 30 a 35 minutos: A (de 50% a 10%) y B (de 50% a 90%); de 35 a 40 minutos: A (10%) y B (90%); y de 40 a 45 minutos: A (de 10% a 97%) y B (90% a 3%); con velocidad de flujo de 1 mL/min, 10 μL de volumen de inyección, a longitud de onda de 254 nm, a 25 °C. 2.2.5.2. Identificación de compuestos fenólicos de los extractospurificados, por el método de cromatografía liquida acoplado a espectrometría de masas Se identificó un compuesto fenólico característico de cada especie en los extractos purificados con Amberlite XAD7HP, obtenidos del extracto de etanol 70°, de las especies vegetales, mediante cromatografía líquida de ultra resolución acoplado a espectrometría de masas/masas (UPLC-MS/MS). Se preparó una solución de 0,5 mg/mL, se filtró mediante filtro jeringa de celulosa regenerada de 2,5 cm x 0,45 μm, se colocó en un vial ámbar de 1,5 mL y se analizó en un cromatógrafo líquido de ultra resolución con detector de masas/masas, se utilizó una columna ZORBAX Eclipse Plus C18 (2,1 x 150 mm) 5-μm, como fase móvil se empleó ácido fórmico al 0,1% (A) y acetonitrilo (B); de 0 a 4,7 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 26 minutos: A (de 97% a 70%) y B (de 3% a 30%); de 4,7 a 7,8 minutos: A (de 70% a 50%) y B (de 30% a 50%); de 7,8 a 11 minutos: A (de 50% a 10%) y B (de 50% a 90%); de 11 a 12,5 minutos: A (10%) y B (90%); de 12,5 a 14 minutos: A (de 10% a 97%) y B (de 90% a 3%) ; con velocidad de flujo de 0,4 mL/min, 2 μL de volumen de inyección, a 254 nm de longitud de onda y con detector de masas/masas. El análisis estadístico de la información para la comparación del nivel de significación entre los sistemas de extracción, y las especie sometidas a los procesos de evaluación de contenido de polifenoles, concentración inhibitoria media y los tres procedimientos de actividad antioxidante; se realizó mediante análisis de variancia de los tratamientos y determinar la significación estadística con el test de Tuckey con probabilidad de 0.01; estableciendo los valores HSD para determinar la diferencia significativa entre los registros entre tratamientos. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 27 III. RESULTADOS Tabla 1. Descripción etnobotánica de especies del páramo y bosque nublado de la Sierra de Piura priorizadas por los expertos locales. Nombre local de la planta Nombre Científico Ti p o d e p la n ta ec o si st em a A b u n d an ci a N ° es p ec ie s co n ig u al n o m b re N ° n o m b re s p ar a u n a es p ec ie C u lt iv ab le P ar te u sa d a Ed ad d e la P la n ta C an ti d ad a u ti liz ar ( g) Fo rm a d e p re p ar ac ió n ti em p o d e p re p ar ad o D o si s N° usos medicin ales conocid os USOS MEDICINALES DE LA ESPECIE H b b a A ya b “hierba del toro” Cuphea cilliata hierba BN Alta 1 2 SI Planta entera adulta 10 g/l decocción 3 a 5 min Agua de tiempo 2 4 Fortificante, Resfríos y reactivador, desinflamación de matriz post-parto, control de infecciones, regulariza la menstruación, dolores. “ushpa” Vaccinium floribundum Kunth arbusto P Alta 5 2 NO fruto adulta Crudo y macerado Directo. 15 días NO aplica Medio vaso 2 1 Resfríos y males respiratorios, antirreumático, nutricional. “zarcilleja” Brachyotum sp hierba P Alta 3 3 NO Planta entera en floración 10 g/l jugo crudo o infusión 30 min infusión Una taza 50 ml al día 6 1 Control infecciones venéreas, desinflama intestinos, dolores estomacales, riñones, próstata, descensos femeninos, dolores de la matriz, depura sangre de mujeres, paludismo. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 28 “pega-pega” Acaena ovalifolia Ruiz & Pav hierba P Medi a 1 2 SI hojas en floración 30 g polvo seco en agua caliente 10 min Media taza de 50 ml. 2 veces al día. 0 1 Ctrol hemorragia de menstruación, antibiótico P: páramo; BN: bosque nublado Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 29 Nombre local de la planta Nombre Científico Ti p o d e p la n ta ec o si st em a A b u n d an ci a N ° es p ec ie s co n m is m o n o m b re N ° n o m b re s p ar a u n a es p ec ie C u lt iv ab le P ar te u sa d a Ed ad d e la P la n ta C an ti d ad a u ti liz ar ( g) Fo rm a d e p re p ar ac ió n ti em p o d e p re p ar ad o D o si s N° usos medici nales conoci dos N° usos medicinales conocidos H b b a A ya b “payana” Bejaria resinosa arbusto P Alta 4 3 NO hojas adulta 20 g/l infusión 15 min Media taza de 50 ml. Dos veces al día. 6 4 Infecciones vaginales, inflamación de vías urinarias, purifica la sangre, infecciones venéreas, Infección de la matriz, desinflamante, regulariza la menstruación, protege el hígado y estómago, “lanche colorado” Myrcianthes rhopalloides árbol BN Baja 4 2 NO hojas adulta 100 g/l infusión 20 min 1 taza 50 ml /d 1 1 Resfríos, “lanche chiquito” Myrcianthes myrsinoides árbol BN Medi a 4 2 NO Hojas adulta 100 g/l infusión 15 min Agua de tiempo 4 2 Eleva la presión arterial, antigripal, digestivo, control de infecciones, digestivo. “chupicaure" Muehlenbeck ia hastulata hierba BN Medi a 2 3 SI Planta entera en floración 100 g loción 20 min NO aplica 6 4 Infecciones de hígado, ovarios, cura nervios en niños, antibiótico, ctrol infecciones de matriz, desinflamante y desinfecta heridas, regula menstruación, ctrol infección del riñón, purifica sangre, infecciones de piel. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 30 Especies de los páramos y bosques de neblina “lanche chiquito” Myrcianthes myrsinoides MYRTACEAE “hierba del toro” Cuphea ciliata LITRACEAE “lanche colorado” Myrcianthes rohpaloides MYRTACEAE “chupicaure” Muehlembeckia hastulata POLYGALACEAE Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 31 “ushpa” Vaccinium floribundum ERICACEAE “pega-pega” Acaena ovalifolia ROSACEAE “zarcilleja” Brachyotum angustifolium MELASTOMATACEAE “payana” Bejaria resinosa ERICACEAE Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licenciaCreative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 32 Tabla 2. Nivel de usos significativo (UST) y Valor de uso (IVS) Huancabamba UST (%) IVU Bejaria resinosa “payana” 24.0 4.0 Muehlenbeckia hastulata “chupicaure” 21.0 3.5 Myrcianthes myrsinoides “lanche” 30.0 3.3 Brachyotum angustifolium “zarcilleja” 15.0 2.5 Vaccinium floribundum “ushpa” 27.0 1.5 Cuphea ciliata “hierba del toro 12.0 0.7 Acaena ovalifolia “pega-pega” 12.0 0.3 Ayabaca UST (%) IVU Bejaria resinosa “payana” 27.0 3.0 Muehlenbeckia hastulata “chupicaure” 21.0 2.3 Myrcianthes myrsinoides “lanche” 33.0 1.8 Cuphea ciliata “hierba del toro 28.8 1.6 Vaccinium floribundum “ushpa” 30.0 0.8 Brachyotum angustifolium “zarcilleja” 15.0 0.4 Acaena ovalifolia “pega-pega” 12.0 0.3 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 33 Tabla 3. Análisis físico-químico de los suelos de crecimiento de las especies en los páramos y bosques de neblina. ESPECIES Provincia Altitud Arena % Limo % Arcilla % Clase textural pH C.E. dS/m Carbonatos % CaCO3 M.O.T % Humedad % Chupicaure Ayabaca 3100 69.09 18.26 12.65 FArn 4.22 0.26 0.40 61.90 45.38 Hierba del toro Ayabaca 2750 42.44 39.30 18.26 F 4.37 0.11 0.41 28.95 24.67 Lanche Ayabaca 2800 54.06 23.72 22.22 FAA 4.34 0.13 0.17 30.64 20.41 Zarcilleja, Ushpa, Payana Ayabaca 3200 67.98 20.65 11.37 FArn 4.80 0.21 0.45 65.34 55.14 Hierba del toro Huancabamba 2700 33.76 26.16 40.08 Arc 5.23 0.49 0.14 13.92 10.07 Zarcilleja Huancabamba 3750 57.38 28.01 14.61 FArn 4.27 0.13 0.48 37.13 47.35 Chupicaure Huancabamba 3750 59.36 22.15 18.49 FArn 4.20 0.15 0.52 36.32 46.35 Payana Huancabamba 3650 39.14 28.86 32.00 FArc 4.05 0.05 0.12 4.34 20.61 Ushpa Huancabamba 3750 50.97 30.06 18.97 F 4.20 0.13 0.10 8.53 23.18 FArn: franco-arenoso; F: franco; FAA: franco arcillo arenoso; Arc: arcilloso M.O.T: Materia Orgánica Total C.E.: Conductividad eléctrica (Anexo 2: niveles críticos) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 34 Tabla 4. Bases intercambiables de los suelos de crecimiento de las especies en los páramos y bosques de neblina. P.S.I: Porcentaje de Sodio Intercambiable C.I.C.E: Capacidad de Intercambio Catiónico Efectivo (Anexo 2: niveles crìtcos) Especies Provincia Ca mEq/100g Mg mEq/100g Na mEq/100g K mEq/100g C.I.C.E mEq/100g P:S:J (%) ReElac pH/C.E Aluminio intercambio mEq/100g (Al+H) Chupicaure Ayabaca 0.07 0.19 0.04 0.23 0.53 8.39 1:2.5 1.75 Hierba del toro Ayabaca 0.33 0.11 0.02 0.14 0.6 3.3 1:2.5 4.84 Lanche Ayabaca 0.12 0.12 0.02 0.20 0.47 4.52 1:2.5 7.24 Zarcilleja, Ushpa, Payana Ayabaca 0.19 0.16 0.08 0.20 0.62 13.16 1:2.5 10.24 Hierba del toro Huancabamba 17.69 5.52 0.05 1.44 24.69 0.2 1:1 2.63 Zarcilleja Huancabamba 0.09 0.14 0.03 0.11 0.36 7.62 1:2.5 4.05 Chupicaure Huancabamba 0.09 0.12 0.03 0.13 0.37 8.41 1:2.5 6.50 Payana Huancabamba 0.00 0.01 0.02 0.03 0.06 28.23 1:1 6.72 Ushpa Huancabamba 0.04 0.05 0.02 0.06 0.17 14.07 1:1 13.97 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 35 Tabla 5. Micronutrientes y macronutrientes de los sitios de crecimiento de las especies en los páramos y bosques de neblina. Especies Provincia Altitud msnm Micronutrientes Bases de cambio Macronutrientes M.O.O % Cu mg/Kg F mg/Kg Mg mg/Kg Znc mg/Kg Ca mg/Kg Mg mg/Kg Na mg/Kg K mg/Kg P mg/Kg N mg/Kg Chupicaure Ayabca 3100 0.23 568.54 1.14 0.36 25.75 28.11 15.62 149.14 6.74 24042.6 41.45 Hierba del toro Ayabca 2750 0.39 143.54 0.97 0.1 102.85 24.75 8.54 94.26 4.27 8609.58 14.84 Lanche Ayabca 2800 1.65 195.18 1.96 0.12 42.28 22.82 8.69 129.54 2.11 9346.03 16.11 Zarcilleja, Ushpa, Payana Ayabca 3200 0.51 359.15 0.42 0.33 47.1 21.61 23.94 115.74 2.88 21875.7 37.71 Hierba del toro Huancabamba 2700 2.59 131.03 15.92 3.77 4025.2 729.97 17.29 639.93 6.11 1689.16 2.91 Zarcilleja Huancabamba 3750 0.17 752.56 0.58 0.37 30.27 20.85 11.24 70.79 50.05 7974.3 13.75 Chupicaure Huancabamba 3750 0.52 572.13 0.45 0.88 21.1 18.65 13.17 86.81 38.89 9279.72 16 Payana Huancabamba 3650 0.12 357.70 0.3 0.19 6.99 1.94 6.25 16.14 14.98 658.39 1.14 Ushpa Huancabamba 3750 0.20 32.46 12.31 0.23 9.94 7.99 6.98 36.32 2.22 822.79 1.42 M.O.O.: Materia Orgánica Oxidable (Anexo 2: niveles críticos) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 36 0.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 en e fe b . m ar . ab r. m ay . ju n . ju l. ag o . se t. o ct . n o v. d ic . T °C Ayabaca Huancab Ayabaca Huancab M M áx Mí n Mí n 0.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 en e fe b . m ar . ab r. m ay . ju n . ju l. ag o . se t. o ct . n o v. d ic . T °C Ayabaca Huancab Ayabaca 0.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 en e fe b . m ar . ab r. m ay . ju n . ju l. ag o . se t. o ct . n o v. d ic . T °C Ayabaca Huancab Ayabaca Huancab 0.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 en e fe b . m ar . ab r. m ay . ju n . ju l. ag o . se t. o ct . n o v. d ic . T° C Ayabaca Huancab Ayabaca Huancab Figura 1. Temperaturas (°C) máx/mín Ayabaca (2633 msnm) y Huancabamba (2974 msnm). Año 2015. Fuente: SENAMHI Figura 2. Temperaturas (°C) máx/mín Ayabaca (2633 msnm) y Huancabamba (2974 msnm). Año 2016. Fuente: SENAMHI Figura 3. Temperaturas (°C) máx/mín Ayabaca (2633 msnm) y Huancabamba (2974 msnm). Año 2017. Fuente: SENAMHI Figura4. Temperaturas (°C) máx/mín Ayabaca (2633 msnm) y Huancabamba (2974 msnm), Año 2018. Fuente: SENAMHI Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E PO SG RA DO - U NT 37 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 jul. ago. set. oct. nov. dic. V el o ci d ad d e vi en to ( m /s ) Ayabaca Huancab 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 en e fe b . m ar . ab r. m ay . ju n . ju l. ag o . se t. o ct . n o v. d ic . V el o ci d ad d e vi en to ( m /s ) Ayabaca Huancab 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 en e fe b . m ar . ab r. m ay . ju n . ju l. ag o . se t. o ct . n o v. d ic . V el o ci d ad
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