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366 G E N Ó M I C A , G E N É T I C A Y V I R O L O G Í A pueden multiplicar en gran número de copias en las células bacterianas. Los genes de resistencia a antibióticos en los plásmidos se utilizan para seleccionar las células bacterianas que contienen el plásmido, y se usan sistemas colorimétricos para identificar las colonias que contienen el DNA clonado. La elección de un hospedador de clonación depende de la aplicación que se le vaya a dar. En muchos casos, el hospedador puede ser un procariota, pero en otros es esencial que sea un eucariota. El hospedador debe ser capaz de captar DNA, y hay toda una serie de técnicas para llevarlo a cabo, tanto naturales como artificiales. Muchos genes clonados no se expresan eficazmente en un hospedador foráneo. Se han desarrollado vectores de expresión para hospedadores procariotas y eucariotas que contienen genes o secuencias reguladoras que aumentan la transcripción del gen clonado y controlan el grado de transcripción. También puede haber señales para mejorar la eficiencia de la traducción en el vector de expresión. Para clonar segmentos muy grandes de DNA se han construido vectores de clonación especializados como bacteriófagos, cósmidos y cromosomas artificiales. Los bacteriófagos recombinantes se pueden empaquetar in vitro para ser transferidos eficazmente a una célula huésped. Los cósmidos son vectores plasmídicos que contienen los sitios cos de lambda. Los cromosomas artificiales se usan para clonar fragmentos de DNA de cerca de una megabase. Para conseguir niveles muy altos de expresión de genes eucarióticos en organismos procariotas, es fundamental que los genes expresados no contengan intrones. Esto puede lograrse sintetizando cDNA a partir del mRNA maduro que codifica la proteína de interés o fabricando un gen sintético completo. A menudo se utilizan fusiones de proteínas para estabilizar o solubilizar la proteína clonada. La primera proteína humana producida comercialmente mediante el uso de bacterias modificadas genéticamente fue la insulina. La somatotropina bovina recombinante es muy usada en los Estados Unidos para aumentar la producción de leche en las vacas. La ingeniería genética permite obtener plantas resistentes a enfermedades y mejorar la calidad del producto. El plásmido Ti de la bacteria Agrobacterium tumefaciens puede transferir DNA a células vegetales. Las plantas cuyo genoma se ha modificado utilizando técnicas genéticas in vitro se denominan organismos modificados genéticamente(OMG). Se han producido numerosas vacunas recombinantes, y actualmente se están desarrollando otras, como las vacunas recombinantes vivas, las de vector y las de subunidades. Los genes para productos útiles pueden clonarse directamente a partir de DNA o el RNA de muestras ambientales, sin aislar previamente los organismos que los contienen. La modificación genética de rutas metabólicas consiste en ensamblar genes que codifican las enzimas para desarrollar una ruta metabólica. Estos genes pueden provenir de uno o más organismos, pero la ingeniería genética debe conseguir la regulación de la secuencia coordenada de expresión necesaria en la ruta metabólica. En lugar de modificar o mejorar una ruta metabólica existente la biología sintética se centra en obtener sistemas biológicos nuevos uniendo componentes biológicos conocidos en diferentes combinaciones. Revise lo que sabe y descubra lo que ha aprendido con MasteringMicrobiology. Acceda a material de estudio, revisiones de los capítulos, animaciones y tutoriales de microbiología práctica en el Área de Estudio y asegúrese de que ha asimilado todo el contenido de este capítulo. GLOSARIO DE TÉRMINOS Biblioteca genómica (Biblioteca de DNA): colección de segmentos de DNA clonados y es lo suficientemente grande para contener al menos una copia de cada gen de un organismo concreto. Biotecnología: uso de organismos vivos, que suelen estar modificados genéticamente, para aplicaciones en la industria, la medicina o la agricultura. Casete de DNA: segmento de DNA diseñado artificialmente que normalmente contiene un gen de resistencia a un antibiótico o algún otro marcador de interés y está flanqueado por sitios de restricción convenientes. Clonación al azar: elaboración de una biblioteca génica por clonación al azar de fragmentos de DNA. Clonación molecular: aislamiento e incorporación de un fragmento de DNA en un vector en el que se puede replicar. Cromosoma artificial bacteriano (BAC): cromosoma circular artificial con origen de replicación bacteriano. Cromosoma artificial de levadura (YAC): cromosoma artificial con el https://booksmedicos.org booksmedicos.org Botón1:
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