Medina Espinoza Tania Magaly

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO 
 
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA 
 
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
TESIS I 
 
Efecto in vitro del extracto del fruto de Bunchosia armeniaca sobre 
Staphylococcus aureus 
AUTORES: 
MEDINA ESPINOZA, Tania Magaly 
VILLANUEVA SEDANO, Lucy Carmen 
 
ASESOR: 
DR. CASTILLO SAAVEDRA, Ericson Felix 
 
 
Trujillo - Perú 
2017 
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Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. 
Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/
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DEDICATORIA 
 
A mi madre Guadalupe 
Por su amor, dedicación, coraje y valentía, por creer 
en mí en todo momento, aconsejándome y 
apoyándome, siendo un ejemplo de vida 
motivándome a crecer cada día más. 
 
A mis abuelitos Rosa y Manuel 
Por el apoyo, cariño y consejos que me brindan y por 
preocuparse siempre por mi señalándome el camino 
del progreso. 
 
A mis hermanos Erick y Alonsso 
Por todo el cariño de amistad y hermandad que 
existen en nosotros, virtudes que nos enseñan a 
trabajar en grupo en los diferentes ámbitos de 
nuestra vida. 
 
Tania 
 
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A mi madre Yolanda 
Por haberme apoyado en todo momento, por sus 
consejos, sus valores por la motivación constante 
que me ha permitido ser una persona de bien, pero 
más que nada, por su amor. 
 
A mi padre Pedro 
Por los ejemplos de perseverancia y constancia que 
lo caracterizan y que me ha infundado siempre, por 
el valor mostrado para salir adelante y por su amor. 
 
 
A mis hermanos Lina y Robert 
Por todo el apoyo y amor que existen en nosotros, 
virtudes que nos enseñan a trabajar en grupo en los 
diferentes ámbitos de nuestra vida. 
 
Lucy 
 
 
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AGRADECIMIENTO 
 
A Dios Por habernos acompañado y guiado a lo lardo 
de nuestra carrera, por ser nuestra fortaleza en los 
momentos de debilidad y brindarnos una vida llena de 
aprendizajes, experiencias y sobre todo felicidad. 
 
Al Dr. Casanova por creer en nosotras, y habernos 
brindado la oportunidad de desarrollar nuestra tesis 
profesional en las instalaciones del Laboratorio de la 
Municipalidad por todo el apoyo y facilidades que nos 
fueron otorgadas; por darnos la oportunidad de crecer 
profesionalmente y aprender cosas nuevas. 
 
A nuestro docente y asesor, Dr Ericson Castillo por ser 
un excelente profesional, por sembrar en nosotros el 
amor a nuestra profesión, por confiar en nuestras 
capacidades y por acompañarnos y guiarnos durante 
todo el proceso de este trabajo de investigación. 
 
Tania y Lucy 
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PRESENTACIÓN 
 Señores Miembros del Jurado Dictaminador 
Dando cumplimiento a lo establecido por el reglamento de grados y títulos de la Facultad 
de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, nos es grato someter 
a vuestra consideración y elevado criterio profesional, el informe de Tesis I titulado 
“Efecto in vitro del extracto del fruto de Bunchosia armeniaca sobre Staphylococcus 
aureus” 
Dejamos a vuestra consideración señores Miembros del Jurado, a respectiva calificación 
del presente informe. 
 
 
Trujillo, junio del 2017 
 
 
 
Medina Espinoza Tania Magaly Villanueva Sedano Lucy Carmen 
 
 
 
 
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JURADO DICTAMINADOR 
 
 
 
Dra. Carmen Marín Tello 
Presidente 
 
 
 
 
Dr. Francisco Abanto Zamora 
Miembro 
 
 
 
 
Dr. Ericson Castillo Saavedra 
Miembro 
 
 
 
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RESUMEN 
La presente investigación tuvo como objetivo evaluar el efecto in vitro del extracto de Bunchosia 
armeniaca sobre cepas de Staphylococcus aureus. La cepa utilizada fue reactivada en caldo BHI 
y se incubó durante 18 horas a 37 °C. Luego se tomó una asada de la bacteria y se ajustó con 
solución fisiológica al patrón de turbidez de Mac Farland N° 0,5 (108UFC/mL); para la 
realización del ensayo se procedió a determinar la concentración mínima bactericida (CMB) y 
la concentración mínima inhibitoria (CMI). Los resultados obtenidos muestran una 
concentración mínima bactericida a una concentración del extracto al 40% en la cual se 
evidenció un halo promedio de 12,3 mm de diámetro y se evidenció un mayor efecto inhibitorio 
a dicha concentración del extracto de Bunchosia armeniaca sobre cepas de Staphylococcus 
aureus, por presentar una menor turbidez del medio que contenía una concentración de 0,25 
mg/mL. 
Palabras clave: Bunchosia armeniaca, Staphylococcus aureus, extracto, efecto, in vitro. 
 
 
 
 
 
 
 
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ABSTRACT 
The present research aimed to evaluate the in vitro effect of Bunchosia armeniaca extract on 
Staphylococcus aureus strains. The strain was reactivated in BHI broth and incubated for 18 
hours at 37 ° C. A loop of the bacteria was then taken and adjusted with the physiological 
solution to the turbidity pattern of Mac Farland No. 0.5 (108UFC/ml); the minimum bactericidal 
concentration (MBC) and the minimum inhibitory concentration (MIC) were determined for the 
test. The results obtained show a minimum bactericidal concentration at a concentration of the 
extract at 40% in which an average halo of 12.3 mm in diameter was evidenced and a greater 
inhibitory effect to that concentration of the extract of Bunchosia armeniaca on strains of 
Staphylococcus aureus, because of a lower turbidity of the medium containing a concentration 
of 0.25 mg / mL 
Key words: Bunchosia armeniaca, Staphylococcus aureus, extract, effect, in vitroBiblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación
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ÍNDICE 
 
RESUMEN ............................................................................................................................ vi 
ABSTRACT ......................................................................................................................... vii 
I. INTRODUCCIÓN .............................................................................................................. 1 
II.- MATERIALES Y MÉTODO ........................................................................................... 8 
III. RESULTADOS .............................................................................................................. 12 
IV. DISCUSIÓN ................................................................................................................... 15 
V. CONCLUSIONES ........................................................................................................... 19 
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ........................................................................... 20 
ANEXOS .............................................................................................................................. 24 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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I. INTRODUCCIÓN 
En los últimos años, las enfermedades infecciosas de etiología bacteriana son una de 
las mayores causas de muerte a nivel mundial. La resistencia a antibióticos, inicialmente 
relacionada a países en vía de desarrollo, hoy en día, se ha convertido en un problema de 
salud pública en muchas partes del mundo. Las consecuencias de estas infecciones son 
alteraciones en la respuesta al tratamiento, períodos más largos de infectividad y rotación a 
drogas de segunda o tercera línea, que son más caras y más tóxicas. Esto genera una difícil 
visualización económica relacionada a los costos con el incremento de morbilidad y 
mortalidad de los pacientes 1,2,3,4. 
Las infecciones cutáneas bacterianas constituyen un amplio grupo de cuadros clínicos 
de diversa etiología, patogenia y pronóstico, localizados en la epidermis, dermis, tejido 
celular subcutáneo, incluyendo entre ellas a los que afectan los distintos anexos cutáneos. 
Son afecciones relativamente frecuentes en la práctica clínica, representan el 17% de todas 
las consultas pediátricas, afectando a pacientes de todas las edades, en especial niños y 
pacientes con factores de riesgo asociados. La severidad de cuadro varía ampliamente desde 
una simple erupción cutánea superficial como el impétigo hasta infecciones profundas y 
necrotizantes que demandan tratamiento quirúrgico. Los clásicos hallazgos de eritema, dolor 
y calor a la palpación, asociados frecuentemente a síntomas sistémicos son claves para el 
diagnóstico clínico, siendo difícil establecer el diagnóstico etiológico 5. 
Staphylococcus aureus es una de las bacterias que con más frecuencia causa 
infecciones en todas las edades. En niños, la tasa de infección por este patógeno es 
aproximadamente de 30 casos por cada 100.000 habitantes. Coloniza la piel y/o fosas nasales 
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de las personas sanas y produce una amplia gama de infecciones, desde las más leves como 
las infecciones superficiales de piel y tejidos blandos, hasta las más graves como neumonía 
o sepsis. S. aureus pertenece al género Staphylococcus, de la familia Micrococcaceae. Es un 
coco gram positivo, no móvil, aerobio y anaerobio facultativo, no formador de esporas y 
generalmente sin cápsula. El nombre del género fue designado por Ognston en 1883 y deriva 
del griego “sthapyle” (racimo de uvas) por la forma que adoptan las bacterias en las tinciones. 
Es característica la pigmentación dorada de las colonias (aureus, en latín -oro), debido a la 
producción de carotenoides durante su crecimiento, crece bien en medios no selectivos. S. 
aureus es un patógeno con gran capacidad de adquirir diferentes mecanismos de resistencia 
a antibióticos, como se ha puesto de manifiesto a lo largo de la historia 6. 
Uno de los principales problemas asociados con estas enfermedades es la aparición de 
resistencia a los antibióticos de uso común, debido a su abuso e inadecuada utilización, 
generando microorganismos multirresistentes causando importantes repercusiones tanto en 
los pacientes como en los sistemas de salud, así como aparición de brotes epidémicos, 
elevación en la morbi-mortalidad y en los costos debido al proceso continuo de la resistencia 
bacteriana, que inició con la resistencia a penicilina por S. aureus 7. 
En los últimos años se ha observado un aumento de la resistencia a múltiples 
antibióticos, siendo el S. aureus resistente a la metilciclina favorecido principalmente por el 
uso indiscriminado de antibióticos. Provoca así la diseminación de cepas de S. aureus en los 
hospitales de todo el mundo, lo que conlleva a uno de los mayores retos terapéuticos en la 
actualidad para la medicina. S. aureus es uno de los microorganismos que se aísla con mayor 
frecuencia en las infecciones hospitalarias y comunitarias, además es uno de los patógenos 
nosocomiales de mayor importancia 7. 
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Este panorama, ha hecho indispensable, la búsqueda de nuevos agentes 
antimicrobianos, y las plantas medicinales, constituye la principal fuente para encontrar estos 
compuestos. Esto debido a que los metabolitos secundarios de las plantas, al ser producto de 
la selección natural a lo largo de la evolución de las especies, presentan novedosas estructuras 
químicas, que difícilmente podrían haber sido el resultado de un razonamiento humano por 
muy creativo que fuere, y sin duda, tienen una gran afinidad por la diana a la cual están 
dirigidos, en contraposición de la menor afinidad que muestran sus contrapartes obtenidos 
por la síntesis química. Sin duda, los metabolitos secundarios de las plantas constituyen gran 
parte del arsenal terapéutico disponible 8,9. 
Existen diversas familias de plantas, dentro de estas se encuentran la familia 
Malpighiaceae. El género Bunchosia contiene alrededor de 75 especies, todas ellas nativas 
de América. En Brasil se encuentra predominantemente en Amazonia, Mata Atlántica y 
Pantanal. Bunchosia armeniaca (B. armeniaca) es una planta nativa de los Andes, conocida 
como "cafezinho", "ciruela" o "falso- Guaraná”. En medicina tradicional, esta planta se ha 
utilizado en enfermedades endocrinas, infecciosas, inflamatorias, trastornos nutricionales y 
tratamientos de trastornos metabólicos, así como también algún tipo de tratamiento del 
cáncer 10. 
Bunchosia armeniacaen su gama nativa, se encuentra en altitudes de 0 a 2400 m.s.n.m. 
Se desarrolla a pleno sol en suelos húmedos, fértiles, ricos en materia orgánica con un rango 
de pH de 6-7,6. Tolera la sombra parcial y es bastante tolerante al frío pero tolerante a la 
congelación a -2ºC. La pulpa de fruta es dulce y cremosa, es mayormente consumida en 
fresco y también se utiliza para jaleas, mermeladas, o conservas y bebidas de sabor. La fruta 
se puede refrigerar y la pulpa se puede congelar 11. 
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Esta planta es un arbusto perenne y resistente, llega a medir hasta 5 m de altura, con 
múltiples troncos. Las hojas son simples, opuestas, ovales u oblongas, de hasta 17 cm de 
largo y 10 cm de ancho con margen. Las flores son en su mayoría bisexuales, de 12-15 mm 
de diámetro con 5 pétalos, y el androceo es típicamente con flecos o lacerado. El gineceo 
consiste en un solo compuesto de pistilo de casi siempre 3, carpelos, 3 estilos de distintos y 
un ovario superior con 3 lóbulos, cada uno con un solo óvulo pendular y axilar. Los frutos 
en racimos, son bayas indehiscentes, de 2,5 cm de largo, ovoide, elipsoide u obovada, con 2 
o 3 juntos de una sola semilla incrustadas en la pulpa, esta pulpa de color rojo o rojo 
anaranjado 11,12. 
Aunque la familia Malpighiaceae tiene un gran número de especies, alrededor de 1300, 
sólo el 2% de estos fueron estudiados bajo el aspecto químico. Las especies más estudiadas 
de este género son Malpighiae, Marginata y Malpighia glabra (acerola), que fueron 
identificados como glicósidos de quercetina, y algunos flavonoides a los que se le han 
asignado diversos efectos biológicos. Otras especies Banisteropsis caapi, conocido como 
"cipós da Amazonia", contiene alcaloides β-carbolina que exhiben propiedades alucinógenas 
13. 
El creciente uso indiscriminado de medicamentos antibacterianos se refleja en el 
aumento de la resistencia bacteriana hospitalaria contra los medicamentos tradicionales. Este 
hecho ha llevado a los investigadores a la búsqueda de nuevos compuestos o sustancias con 
propiedades antibacterianas, incluidas los productos de origen natural 12. 
Un estudio realizado por Queiroz en el 2013 ha informado de una excelente actividad 
antibacteriana contra Staphylococcus aureus (S. aureus) y actividad moderada contra 
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Escherichia coli (E. coli ) y Pseudomonas aeruginosa ( P. aeruginosa ) en hojas de B. 
armeniaca. Además, esta planta demostró un efecto antiinflamatorio 13. 
Por otro lado, en la investigación realizada por Ralalage en el 2016 titulado 
“Compuestos Bioactivos y Actividad Antioxidante de Bunchosia armeniaca”, se analizó para 
investigar su disponibilidad fitoquímica utilizando gas espectrofotómetro cromatográfico de 
masas. El análisis reveló la presencia de muchos compuestos fenólicos, alcaloides, 
importantes ácidos grasos y además de algunos componentes biológicamente activos; el 
contenido de fenoles totales ha mostrado su profunda posibilidad de actividad captadora de 
radicales libres. Por lo tanto, a través de análisis in vitro, el fruto de B. armeniaca puede ser 
postulada como una fuente importante de compuestos bioactivos 10. 
El extracto etanólico de B. armeniaca contiene mezclas de flavonoides, que son los 
principales compuestos que están presentes en este extracto, muestra una acción 
antibacteriana contra bacterias gram positivas y negativas. Por otra parte, esta especie 
muestra una importante acción antiinflamatoria mediante la inhibición de los leucocitos. 
Estos resultados confirman el uso tradicional de esta planta y mostraron que la mezcla de 
flavonoides es el principal responsable de los efectos antibacterianos y antiinflamatorios 
atribuidos a Bunchosia armeniaca 13. 
Los estudios muestran que B. armeniaca tiene efectos antibacterianos y 
antiinflamatorios significativos y que este se debe, al menos en parte, a la presencia de rutina, 
isoquercetrina y afzelina en grandes cantidades. Por lo tanto, estos compuestos son 
potenciales para el desarrollo futuro de intervenciones en el tratamiento de pacientes con 
trastornos infecciosos e inflamatorios 13. 
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Cada día se hace más difícil el tratamiento antimicrobiano por la capacidad de dicho 
microrganismo de crear resistencia, tal fenómeno ha sido considerado emergente en todo el 
mundo. Los fármacos disponibles actualmente, tienen una toxicidad importante, producen 
recurrencia o causan resistencia, razón por la cual se está procurando descubrir nuevos 
agentes antimicrobianos más potentes, pero sobre todo seguros 14. 
La actividad antibacteriana puede evaluarse con dos métodos básicos: la difusión del 
disco y la Concentración mínima inhibitoria (CMI). El método por difusión del disco es 
cualitativo y permite observar el diámetro del halo de inhibición de crecimiento de las 
bacterias en estudio sembradas en el agar con diluciones seriadas. Las bacterias no crecen en 
la zona de inhibición del agar, donde difunde el antibiótico o el extracto impregnado en el 
disco de papel. Los antibióticos naturales de Bunchosia armeniaca podrían explicar su 
actividad antibacteriana. Con el segundo método, se puede evaluar el rango de concentración 
para inhibir el crecimiento microbiano que consiste en establecer la menor concentración de 
un antibiótico capaz de inhibir visiblemente el crecimiento de un microorganismo, esto se 
puede realizar mediante varias técnicas, una de ellas es la técnica de dilución de agar 15. 
En la actualidad se observa un considerable aumento de resistencia de los 
microorganismos a múltiples antibióticos, entre ellos el S. aureus es uno de los 
microorganismos que se aísla con mayor frecuencia en las infecciones hospitalarias y 
comunitarias, además es uno de los patógenos nosocomiales de mayor importancia. 
Estos acontecimientos, ha llevado a los profesionales de salud a la búsqueda de nuevos 
agentes antimicrobianos, y las plantas medicinales, constituye la principal fuente para 
encontrar estos compuestos. Dentro de la cuales se encuentran las de la familia 
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Malpighiaceae que predomina en América y dentro de ellas el género Bunchosia de las cuales 
estudios realizados indican la presencia de mezclas de flavonoides, la presencia de rutina, 
isoquercetrina y afzelina en grandes cantidades, a los que se le atribuye sus efectos 
antibacteriano y antiinflamatorio. En base a esto se busca comprobar el efecto in vitro de 
todos estos componentes en un extracto etanólico de Bunchosia armeniaca presente en 
nuestra regiónpor el método de maceración frente al microorganismo, para el desarrollo 
futuro de nuevas formas farmacéuticas que contribuyan en el tratamiento de pacientes con 
trastornos infecciosos. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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II.- MATERIALES Y MÉTODO 
1. MATERIALES 
1.1. Material Biológico: 
 Material vegetal: 1 kg de fruto de Bunchosia armeniaca recolectadas del distrito de 
Simbal. Provincia de Trujillo. Región La Libertad 
 Material microbiológico: cepas de Staphylococcus aureus ATCC 25923 
 
2. MÉTODO 
2.1. Recolección de la muestra 
Se recolectó 1kg de fruto de Bunchosia armeniaca en forma aleatoria del distrito de Simbal 
provincia de Trujillo, departamento de La Libertad, durante el mes de marzo. 
2.2. Identificación taxonómica 
La especie de Bunchosia armeniaca fue llevada al Herbarium Truxillense de la Universidad 
Nacional de Trujillo, donde se identificó taxonómicamente con el código 59027. 
2.3. Preparación del extracto 16,17 
Se obtuvo el extracto por maceración de 7 días usando 200 g de fruto fresco y como solvente 
500 mL de etanol de 70° GL. Pasado el tiempo de maceración el extracto fue filtrado sobre 
papel Whatman N°1 y guardado en un frasco de color ámbar y puesto en refrigeración a 
10°C; el fruto remanente fue triturado y macerado por 12 horas con el mismo menstruo para 
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agotar la extracción, finalmente el extracto fue reunido y completado a volumen constante 
de 500 mL en matraz aforado con el solvente. 
2.4. Determinación de la concentración mínima bactericida (CMB) 4 
Se realizó empleando el método de difusión en discos según Kirby- Bauer 
 Preparación de la muestra 
Se prepararon tres concentraciones del extracto de Bunchosia armeniaca al 20%, 30% y 
40%, se tomaron estas concentraciones en base a previos estudios realizados sobre el mismo 
microorganismo en estudio, pero con extractos etanólicos de otras especies las cuales 
indicaron mayor efecto antimicrobiano a dichas concentraciones18,19. 
 Reactivación de las cepas 
El microorganismo fue reactivado en caldo Müller- Hinton y se incubó durante 18 horas a 
37°C, luego se tomó una asada del microorganismo y se ajustó con solución salina 
fisiológica al patrón de turbidez de Mac Farland N° 0,5 (108 UFC/mL) 
 Sembrado 
Se colocó en placas Petri 20 mL de agar Müller- Hinton, solidificado el agar, se sembró el 
microorganismo en la superficie de este, y se hisopó uniformemente, girando cada placa 30 
grados por 10 veces aproximadamente. Las placas recién sembradas se colocaron en una 
estufa a 37°C de temperatura durante 10 minutos. 
 
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 Aplicación de los discos 
Sobre la placa sembrada, se colocó en la superficie del agar inoculado los discos de papel 
de filtro (6mm de diámetro) previamente impregnados con 0,1 mL de las concentraciones 
del extracto de Bunchosia armeniaca antes mencionadas y del control negativo (agua 
estéril). También se colocó el disco estándar de antibiótico de referencia para este 
microorganismo en particular (ciprofloxacino 5mg). 
Posteriormente, los medios de cultivos inoculados se incubaron a 37°C durante 24 horas, 
realizándose las lecturas de los halos de inhibición a las 24 horas. Toda la prueba se realizó 
por tres veces; dichos halos se midieron con ayuda de una regla milimetrada. 
2.5. Determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI) 
Método de dilución en caldo Müller Hinton 20 
 Preparación de la muestra 
Se prepararon las soluciones al 20%, 30% y 40% del extracto de Bunchosia armeniaca 
disuelta en solución fisiológica estéril, a partir de estas soluciones se prepararon por cada 
una de ellas por triplicado una batería de tubos de ensayo con soluciones al 0,05mg/mL, 
0,075 mg/mL; 0,1mg/mL; 0,25mg/mL, 0,5 mg/mL, 0,75 mg/mL, 1 mg/mL completando a 
10 mL con solución fisiológica estéril como solvente. 
 
 
 
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 Preparación de la suspensión del inóculo 
El microorganismo fue reactivado en caldo BHI y se incubó durante 18 horas a 37°C, luego 
se tomó una asada del microorganismo y se ajustó con solución salina fisiológica al patrón 
de turbidez de Mac Farland N° 0,5 (108 UFC/mL) 
 Enfrentamiento con el microorganismo 
Se utilizaron tubos de ensayo, en los cuales se colocaron 1mL del caldo BHI, luego se 
añadió 0,1 mL de cada una de las concentraciones de las diluciones del extracto preparadas 
anteriormente, posterior a esto en cada tubo de ensayo se colocó 0,1 mL de la suspensión 
de la bacteria y se incubó a 37°C por 24 horas. 
Después de 24 horas de incubación, los tubos de ensayo se examinaron visualmente y se 
consideró la concentración mínima inhibitoria a la menor concentración de la dilución del 
extracto a la cual el microorganismo ensayo no presente desarrollo visible. 
Se empleó como patrón al ciprofloxacino y al agua estéril. 
2.1 Análisis estadístico 20 
Los resultados obtenidos se analizaron aplicando la prueba de ANOVA para hallar la 
diferencia significativa de la concentración mínima bactericida a diferentes concentraciones 
del extracto. 
 
 
 
 
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III. RESULTADOS 
 
 
 
 
 
Tabla 1: Análisis de varianza (ANOVA) de la concentración mínima bactericida de 
Bunchosia armeniaca, sobre Staphylococcus aureus (p<0,05) 
 
Origen de las 
variaciones 
Suma de 
cuadrados 
Grados 
de 
libertad 
Promedio de 
los 
cuadrados 
F Probabilidad Valor 
crítico para 
F 
Entre grupos 24.88888889 2 12.44444444 12.44444444 0.007329037 5.14325285 
Dentro de los 
grupos 
6 6 1 
 
Total 30.88888889 8 
 
Fuente: los investigadores 
 
 
 
 
 
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Fuente: datos tomados de la tabla 4 (ANEXOS) 
 
 
 
 
 
0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
35.0
20% 30% 40% Ciprofloxacino Agua esteril
8.3 9.7
12.3
34.0
0
D
ia
m
et
ro(
m
m
)
Gráfico Nº 1: Promedio de los halos de inhibición 
de los extractos de Bunchosia armeniaca 
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Tabla 2: Evaluación de la concentración mínima inhibitoria de Bunchosia armeniaca, 
ciprofloxacino y agua estéril sobre Staphylococcus aureus 
 
Fuente: los investigadores 
Leyenda: +++: mayor turbidez 
++: turbidez intermedia 
+: menor turbidez 
0: sin turbidez 
 
Concentración 
de extracto 
Bunchosia 
armeniaca 
SERIE 5% 7,50% 10% 25% 50% 75% 100% 
20% 
Serie Nº 1 ++ ++ +++ + 0 0 0 
Serie Nº 2 +++ ++ + + 0 0 0 
Serie Nº 3 +++ +++ ++ ++ + 0 0 
30% 
Serie Nº 1 +++ +++ ++ + 0 0 0 
Serie Nº 2 +++ +++ ++ ++ + 0 0 
Serie Nº 3 +++ +++ ++ + 0 0 0 
40% 
Serie Nº 1 ++ ++ + 0 0 0 0 
Serie Nº 2 + + - 0 0 0 0 
Serie Nº 3 ++ + + 0 0 0 0 
Ciprofloxacino 
5 mg 
Serie Nº 1 0 0 0 0 0 0 0 
Agua estéril Serie Nº 1 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ 
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IV. DISCUSIÓN 
Para determinar el efecto antimicrobiano in vitro de la especie en estudio, se empleó el método 
de difusión en agar con discos impregnados, basado en el trabajo de Kirby Bauer, el cual es uno 
de los métodos que el Comité Nacional de Estándares para Laboratorios Clínicos de los Estados 
Unidos de Norteamérica (NCCLS) recomienda para determinar la sensibilidad antimicrobiana. 
El método se basa en la relación entre la concentración de la sustancia necesaria para inhibir una 
cepa bacteriana y el halo de inhibición de crecimiento en la superficie de una placa de agar con 
un medio de cultivo adecuado y sembrado homogéneamente con la bacteria a ensayar, sobre la 
cual se ha depositado un disco de papel filtro de 6 mm de diámetro impregnado con una cantidad 
conocida de la sustancia 20. 
En la tabla 1 se muestra el análisis estadístico de ANOVA de las mediciones de los halos de 
inhibición del extracto de Bunchosia armeniaca sobre Staphylococcus aureus, en el que se 
determinó un valor critico de 5,1432 y una variación entre los tres grupos de 12,44, lo que nos 
permite analizar que en el resultado de nuestra prueba existe una diferencia significativa, es 
decir, que las diferentes concentraciones del extracto han generado diferentes halos de 
inhibición promedio (p<0,05). 
En el Gráfico 1 se observa que la concentración al 40% del extracto es más eficiente en relación 
a las concentraciones de 30% y 20%, esto debido a la mayor presencia de metabolitos como los 
compuestos flavonoides, rutina, isoquercetina y afzelina presentes en el fruto, al que se les 
atribuye esta acción antibacteriana 13. 
Los flavonoides son estructuras fenólicas que contienen un solo grupo carbonilo, tiene la 
capacidad de generar complejos con proteínas extracelulares y proteínas solubles, así como una 
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actividad sobre la pared celular, actuando posiblemente sobre las adhesinas expuestas en la 
superficie de las bacterias, sobre los polipéptidos de la pared celular y sobre enzimas unidas a 
las membranas, esto explicaría el mecanismo de acción de varios de sus efectos farmacológicos. 
Otros estudios previos muestran que la actividad antibacterial de los flavonoides es 
principalmente debido al daño del DNA causado en la bacteria. Este efecto se ve que ocurren 
por diferentes vías de mecanismos de acción como: complejo con la células de la pared de la 
bacteria y la disminución con el crecimiento del microbio, inhibiendo la actividad de DNA 
topoisomerasa II (DNA girasa), e inhibiendo la proteína FtsZ, la tubulina análoga bacterial, la 
cual interviene en la división celular de la bacteria 21,22,23,24,25. 
En la gráfica se puede apreciar que existe mayor inhibición bacteriana conforme aumenta la 
concentración, lo cual se evidenció también en el trabajo realizado por Mayta y Sacsaquispe 
donde reportaron que el extracto etanólico de propóleo al 30% tuvo una mayor actividad 
antimicrobiana in vitro que el EEP (extracto etanólico de propóleo) al 10% frente al S. aureus 
(ATCC 25923) 18. 
Al determinar la concentración mínima inhibitoria con el método de dilución en caldo, se 
observa en la tabla 2 que el extracto de Bunchosia armeniaca presenta mayor efecto inhibitorio 
sobre Staphylococcus aureus a la concentración de 0,25mg/mL en el extracto al 40% por no 
presentar turbidez del medio que contenía la cepa de Staphylococcus aureus, mientras que 
respecto a las concentraciones del 20% y 30% presentaron el mayor efecto inhibitorio a la 
concentración de 0,5 mg/mL. La CMI en tubo (dilución en caldo, se considera como el 
parámetro fundamental para comprobar la sensibilidad de una bacteria frente a un 
antibacteriano), es la técnica más confiable para determinar las propiedades antimicrobianas de 
una sustancia. Al someter las tres concentraciones del extracto se pudo establecer que todos 
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presentaron actividad frente a S. aureus. De acuerdo con lo escrito por Avellaneda, una cepa 
bacteriana es muy sensible cuando la sustancia evaluada presenta una CMI inferior a 12,5 
mg/mL, de mediana sensibilidad entre 12,5 y 50 mg/mL y de baja sensibilidad cuando la CMI 
está entre 50 a 100 mg/mL 26,27. 
Según esta escala Staphylococcus aureus exhibió alta sensibilidad frente al extracto de 
Bunchosia armeniaca, los resultados presentan semejanza con el trabajo realizado por Cruz y 
Rodríguez, en el que informaron que S. aureus presentó mayor sensibilidad frente a los extractos 
etanólicos de Bidens pilosa y Lantana cámara, mientras que ante Schinus molle y Silybum 
marianum, sensibilidad intermedia 28. 
En un estudio realizado con otras especies vegetales, se determinó que en la técnica de CMI en 
tubo, el S. aureus fue inhibido por los extractos alcohólicos de las hojas de Austroeupatorium 
inulaefolium, 50mg/mL y Ludwigia polygonoides, 25mg/mL 29. 
De acuerdo a los resultados, también se podría decir que se evidenció un mayor efecto 
inhibitorio cuando se aumentó la concentración del extracto en las diluciones, esto nos hace 
inferir que si aumentáramos el volumen del extracto podría ser mejor la acción, a su vez este 
efecto antibacteriano se le atribuye exclusivamente a los metabolitos presentes en el extracto 
etanólico de Bunchosia armeniaca preparado, respaldado por el trabajo “Actividad 
antibacteriana in vitro del extracto etanólico de propóleo sobre una cepa clínica de 
Staphylococcus aureus” realizado por Barrios y col, en el cual se prepararon extractos al 20% 
y 40% de propóleo utilizando como solvente etanol al 96% y empleando este mismo como 
control negativo, evidenciándose la actividad antibacteriana con losextracto etanólico de 
propóleo mientras que en los discos solo con etanol al 96% no mostró efecto alguno 30. 
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Sin embargo; el solvente etanol utilizado también presenta efecto bactericida, debido a que los 
alcoholes son bactericidas de potencia intermedia y dentro de su espectro se encuentra el 
Staphylococcus aureus y cuyo mecanismo de acción es la destrucción de la membrana celular y 
desnaturalización de las proteínas. Su eficacia está basada en la presencia de agua, ello se debe 
a que estos compuestos acuosos penetran mejor en las células y bacterias permitiendo así daño 
a la membrana y rápida desnaturalización de las proteínas, con la consiguiente interferencia con 
el metabolismo y lisis celular.31 No obstante; las concentraciones más efectivas son las que 
oscilan entre el 60% y 80% en agua destilada, siendo la preparación más efectiva al 70% y 
concentraciones por debajo del 50% no causan ningún efecto 32. 
Teniendo en cuenta esto nos muestra que el efecto bactericida del extracto etanólico de 
Bunchosia armeniaca sobre Staphylococcus aureus sería atribuido netamente a los metabolitos 
presentes en el fruto de la planta, pues las concentraciones empleadas fueron menores a dichos 
rangos antes mencionados. 
 
 
 
 
 
 
 
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V. CONCLUSIONES 
 
 
1. El extracto del fruto de Bunchosia armeniaca. tiene efecto in vitro sobre Staphylococcus 
aureus 
2. Se determinó que la concentración mínima bactericida del extracto fruto de Bunchosia 
armeniaca sobre Staphylococcus aureus fue al 40% 
3. Se determinó que la concentración mínima inhibitoria del extracto fruto de Bunchosia 
armeniaca sobre Staphylococcus aureus es de 0,25mg/mL. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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ANEXOS 
Tabla 3: Análisis de varianza de un solo factor 
Fuente: los investigadores 
 
Tabla 4: Promedio de los halos de inhibición 
Placa 20% 30% 40% 
Ciprofloxacino 
(5 mg) 
Agua estéril 
Placa Nº 1 8.0 10.0 14.0 34.0 0 
Placa Nº 2 8.0 9.0 11.0 
Placa Nº 3 9.0 10.0 12.0 
Promedio 8.3 9.7 12.3 34.0 0 
Fuente: los investigadores 
 
 
 
 
 
Grupos Cuenta Suma Promedio Varianza 
0.2 3 25 8.333333333 0.333333333 
0.3 3 29 9.666666667 0.333333333 
0.4 3 37 12.33333333 2.333333333 
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Identificación Taxonómica en el Herbarium truxillense 
 
 
 
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Preparación del Extracto 
 
 
 
 
 P 
Fruto de Bunchosia 
armeniaca 
Extracción de la pulpa del 
fruto 
Maceración del Fruto de 
Bunchosia armeniaca 
Filtración del extacto de 
Bunchosia armeniaca 
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Preparación del Tubo de Mc Farland 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Cepas de Staphylococcus 
aureus 25923 
Preparación del material 
Dilución de las cepas 
Staphylococcus aureus 
Tubo Mc Farland 0.5 
(108 UFC/mL) 
Comparación de 
turbidez 
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Concentración Mínima Bactericida (CMB) 
 
 
Preparación del Agar 
Müller Hinton 
Preparación de las placas con el agar 
Siembra de las placas con las 
cepas de Staphylococcus 
aureus 
Inserción de las láminas 
de celulosa impregnadas 
con el extracto 
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Efecto bactericida a la concentración 
de 20 % 
Efecto bactericida a la concentración 
de 40 % 
Efecto bactericida a la concentración de 
30 % 
Efecto bactericida de Ciprofloxacino 
de 5 mg 
Placas Petri listas para 
llevar a estufa 
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Concentración Mínima Inhibitoria 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Preparación del caldo BHI y del 
material a esterilizar 
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Tubos listos para llevar 
a estufa 
Análisis de los tubos de ensayo a las diferentes 
concentraciones del extracto de Bunchosia armeniaca 
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