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INTRODUCCIÓN Vaca superior VENTAJAS DESVENTAJAS Aumenta el factor de multiplicación de la hembra Aumenta progreso genético Disminuye el intervalo generacional Alto costo Personal capacitado Madre de toro genealogía Merito genético Es decir pueden o no estar probadas Asegurarse genética superior • Debido a los mayores costos • Habrá progreso genético solo si la donante es SUPERIOR Fértil Buen desarrollo Buena madre Mucha leche?? Buen estado nutricional Ciclando Sin cría al pie…. Adaptada al ambiente (rustica) No es necesario merito genético Sanidad • Asegurada antes de entrar en el programa. DONANTE RECEPTORA Superovulación Inseminación Lavaje o colecta transferencia Sincronización con la donante Evaluar CL Transferencia Diagnostico de gestación tratamientos Se utilizan hormonas con actividad FSH El tratamiento debe comenzar con el inicio de una onda folicular FSH-p (porcina, ovina, bovina, recombinante) PMSG o eCG (gonadotrofina de la yegua preñada) hCG gonadotrofina menospausica humana FSH-p vida media corta Dosis total: hasta 400 unidades 8 dosis decrecientes cada 12 hs 1º día 40% 2º día 30% 3º día 20% 4º día 10% Vida media larga 1500 a 3000 UI En una sola aplicación Inconvenientes • Debido a la vida media larga es conveniente utilizar anti-PMSG al cuarto día • Como es de otra especie se crean anticuerpos y en los siguientes tratamientos decae la respuesta CON DETECCIÓN DE CELO EN CUALQUIER MOMENTO 10 días después de presentar celo (8-13) Se puede inducir el celo con PGF2a Inserción de dispositivo con P4 Al cuarto día comenzar con el tratamiento superovulatorio (día de emergencia de la onda folicular) Be 2 mg P4 50 mg Disp P4 Día 0 - Disp P4 GnRh Día 15 lavaje IATF 24 hs FSH en dosis decrecientes 4 5 8 6 7 9 PGF2a celo Día 0 superovulación DC + I.A. 12 Y 24 hs Día 10 PGF2a Estado del ovario al inicio del tratamiento Edad de la donante Nutrición • Condición corporal • gosipol Historia reproductiva Tratamientos sucesivos Raza Existe diferencia según el día del ciclo en el que se encuentre Si hay un folículo dominante en crecimiento puede afectar SIEMPRE INICIAR T.S. CON UNA ONDA FOLICULAR Vaquillas menos dosis Vacas dosis media Vacas de mas de 8 años aumentar dosis Buen estado nutricional No debe estar obesa (es el problema mas común) Mejores resultados cuando mejora la C.C. Flashing alimenticio?? Resultados contradictorios, aparentemente no influye en el bovino. Presente en la semilla de algodón Produce • Menor tasa de preñez • Mayores perdidas fetales • Degeneración celular reversible Indicas o sus cruzas menor dosis que las británicas. Las razas indicas producen mayor cantidad de embriones, mayor dificultad para el lavaje, menor diámetro del cérvix. Primavera mayor Otoño un poco menos Inverno y verano muy poco Causas: • Adaptación según raza. • Lluvias mejor nutrición • Stress térmico de las donantes Tener siempre presente que el 17 % no responde a la superovulación 30% no resultan en preñez Seleccionar donantes • Fértiles • Jóvenes • Buen estado nutricional • Ciclando • Mas de 90 días pos-parto Determinar la dosis según • Raza • Edad • Frame Primer lavaje dosis media Corregir según respuesta Si al segundo lavaje no responde descartar del programa ( PMSG o FIV ??) De la donante 12 y 24 hs de detectado el celo o de colocada la GnRh 1º I.A.: dos dosis de semen de buena calidad y fertilidad probada (una dosis en cada cuerno si es posible) 2º I.A.: una dosis I.A. normal (algunos recomiendan 2 dosis incluso una tercera I.A.) SINCRONIZACIÓN DONANTE RECEPTORA PGF2a Detectar celo FSH FSH FSH + PGF2a DC+I.A LAVAJE PGF2a PGF2a Detectar celo. TRANSFERENCIA Be 2 mg P4 50 mg Disp P4 Día 0 - Disp P4 GnRh Día 15 lavaje IATF 24 hs FSH en dosis decrecientes 4 5 8 6 7 9 PGF2a Be 2 mg Disp P4 -Disp P4 +PGF2a +cipionato 1mg 4 5 8 6 7 9 Día 15 transferencia instrumental Medio de lavaje 500 ml por cuerno aprox. Medios comerciales • Dulbeco`s • Ringer lactato PBSS Evaluar las receptoras • Separar las que tienen CL • Anotar en que ovario se encuentra el CL • Mejor si se marca el anca del lado del CL Embretar la donante • Tranquilizante • Sacar bosta y evaluar respuesta superovulatoria (CL en cada ovario) • Epidural baja sin sacar el brazo para que no se embalone el recto Lavar la zona peri-anal (cepillar bien) Introducir la sonda Foley con estilete Atravesar el cérvix Ingresar en uno de los cuernos lo mas craneal posible Retirar 5 cm aprox el estilete Empujar nuevamente Inflar el balón (con jeringa sin intermediario de goma) Comprobar que quedo bien sujeto Retirar el estilete Conectar tubo en Y Dejar pasar liquido al interior del útero hasta sentir la distención del mismo Masajear Abrir el clamp hacia el filtro o tubo colector Controlar volumen recolectado Una vez que pasaron unos 500 ml cambiar de cuerno Desinflar el balón Sacar la sonda y armar de nuevo Colocar ídem anterior pero en el otro cuerno y repetir el lavado. IMPORTANTE: el ayudante debe controlar que el filtro tenga siempre liquido SISTEMA ABIERTO SISTEMA CERRADO Jeringa 60 ml Mejor control de la cantidad de liquido que se coloca y se extrae Posible contaminación El ayudante es el que ingresa el liquido Tubo en Y No hay contaminación ?? Menor control del liquido recuperado Mas practico un solo operador Es el mas usado. De los embriones Lupa con platina térmica Platina térmica de mesa Lugar Estadio Día Ovario Celo 0 Ovulación 1 Oviducto 2 cel 2 8 cel 3 16 cel 4 Cuerno uterino Mt 5 Mc 6 Bt 7 B 7 Be 8 Bp 9 Óvulos sin fertilizar Embriones de 8 células Mórula Compacta Bt Mc Ovulo sin fertilizar Mc Bt O sf Be IETS (SOCIEDAD INTERNACIONAL DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES CRITERIO Grado I, II, III, IV EXCELENTE BUENO REGULAR MALO (no transferible) Forma Simetría Apariencia Tonalidad Uniformidad Proporcionalidad Zona pelucida Usar pajuelas de 0,25 ml irradiadas Cargar PBSS 4cm Burbuja Embrión 1cm Burbuja PBSS 4cm Comprobar la presencia del embrión bajo la lupa Las burbujas son para que no se desplace el embrión hacia los extremos La primer columna cargada para que lo empuje fuera de la vaina. Colocar la pajuela unida al intermediario de la vaina Introducir la pajuela en el pistolete Desplazar la vaina hacia caudal Ajustarla con el anillo plástico Colocar dentro de la camisa sanitaria Dejar siempre en posición horizontal. Punta roma con los orificios laterales pajuela Pistolete Estilete Embretar la receptora Vaciar el recto Con el brazo adentro epidural baja Introducir pistolete con camisa sanitaria Al llegar a la entrada del cérvix el ayudante retira la camisa sanitaria Enhebrar Introducir en el cuerno ipsilateral al CL DEPOSITAR LO MAS CRANEAL POSIBLE LENTAMENTE. ESTADIO EMBRIONES TRANSFERIDOS Preñez Mt 586 359 61% Mc 1178 792 67% B 600 402 67% Be 139 99 71% total 2503 1652 66% Schneider y col. 1980 transferencia Receptoras Preñez n n % 1º 183 102 56% 2º 108 50 46% 3º 40 15 37% Liebriech 1991 con embriones FIV
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