Western- Blot [Lab Infecciosas]

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WESTERN-BLOT 
Sara Dueñas 
Paula Rodríguez 
Ana Villamil
DEFINICIÓN 
❏ Es un método usado para detectar proteínas específicas capaces de unirse a anticuerpos.
❏ Determinar el tamaño de una proteína. 
❏ Generalmente se usa un segundo anticuerpo marcado con una enzima. 
❏ Blotting: transferencia de macromoléculas biológicas desde un gel hasta una membrana 
y su detección en esta.
❏ … Es considerada una técnica muy utilizada también porque se usa menor reactivo que 
en otros métodos 
FUNDAMENTO
❏ Interacción entre proteínas y sondas (anticuerpos).
❏ Separación mediante electroforesis en gel. 
❏ Proteína de membrana puede detectarse mediante un 
anticuerpo primario marcado y dirigido a un anticuerpo 
secundario. 
❏ El Complejo Antígeno-Anticuerpo, induce la 
fluorescencia
❏ En la detección se necesita un sistema ajustado a cada 
caso.
Confirmar casos de enfermedades como:
USOS 
Virus de 
inmunodeficiencia 
humana (VIH)
Enfermedad de Lyme
Borrelia burgdorferi
Enfermedad de 
Creutzfeldt-Jakob
Borrelia burgdorferi
Toxoplasmosis.
Toxoplasma gondii
1. ELISA 
2. Western-blot [prueba confirmatoria]
Virus de la inmunodeficiencia humana 
[VIH]
Positivo: presencia de 
ciertas bandas
Negativo: ninguna 
banda presenta reacción
Indeterminado: ni 
positivo, ni
negativo.
Enfermedad de Lyme
1. Enzimoinmunoanalisis 
(EIA) o 
Inmunifluorescencia 
(IF)
2. Western- blot 
(confirmatoria)
Borrelia burgdorferi
Enfermedad de Creutzfeldt-jakob
Prion presente en bovinos 
Humanos 
Western-blot, Prion PC
Toxoplasmosis
1. Se detectan proteínas 
marcadoras de infección 
crónica y aguda [Etapa 
infecciosa] 
2. Confirma: IgM antitoxiplasma
BIBLIOGRAFÍA
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http://www.youtube.com/watch?v=GJJGNOdhP8w