Evaluación de tres métodos para hierro sérico

Vista previa del material en texto

E U G E N I A MARÍA Q U I N T A N A 
GUZMÁNi e I L E A N A H O L S T 
S C H U M A C H E R 2 
Departamento de Análisis Clínicos, 
Facultad de Microbiología, Univer-
sidad de Costa Rica. 
Licenciada, Doctorada Profesional 
en Microbiología y Química Clínica 
y Especialidad Académica en He-
matología. 
Licenciada. Doctorado Profesional 
en Microbiología y Química Clínica, 
ACTA 
BIOQUÍMICA 
CLÍNICA 
LATINOAMERICANA 
Voí. XXX, N M , 3 8 1 - 3 8 8 , 1 9 9 6 . 
Incorporada oí Chemicol 
Absirpci Service. 
Código bibliográfico: ABCLDL 
ISSN 0325-2957 
Evaluación de tres 
métodos de laboratorio 
para la cuantificación de 
hierro sérico 
y capacidad total de 
fijación al hierro* 
e s u m e n R 
Se evaluaron tres métodos de laboratorio para la determina-
ción de hierro sérico CFeS) y capacidad total de fijación de hie-
rro sérico (CTFFeS) : el método de Beale (método de referencia) 
y un método comercial tanto con sus reactivos originales como 
con reactivos preparados en el laboratorio, con el fin de susti-
tuir el método utilizado como referencia ya que es muy tedio-
so y consume mucho tiempo. Se realizaron los espectros de ab-
sorción, intervalos analíticos, establKdad de los complejos co-
loreados, precisión en un mismo día y día a día durante 20 dí-
as consecutivos, recuperación, interferentes como hemoglobi-
na, bilirrubina y cobre y un estudio de correlación entre estos 
métodos. Se concluye que a pesar de que el método de Beale no 
posee la mejor aplicabilidad analítica, sí presenta un desem-
peño analítico superior a los otros dos métodos evaluados, por 
lo tanto sigue siendo el método de elección para este medio. 
Palabras clave: H i e r r o sérico * capacidad de fijación de 
hierro * anemia crónica • hemocromatosis * métodos. 
u m m a r y S 
Three laboratory methods for the analysis of serum iron (FeS) 
and iron hindíng capacity (CTFFeS) were evaluated: the Beale's 
method (reference method) and a commercial method using the 
original reagents as well as the reagents prepared in the labora-
tory in order ta substituíe the tedious and consuming time refe-
rence method. The ahsorption spectrum; analytical range; stahi-
lity ofthe colored complex; accuracy day ta day and within day; 
recouery analysis; interferents as hemoglobin, bilirubin and cop-
per; and correlaiion study were realized to these methods. Although 
the Beale's method didn't have the hest practicallty characteris-
tics it has a better analytical reliabilíty than the other two met-
hods. For that reason it is still the best alternatiue for the de-
termination of serum iron and iron binding capacity in our la-
boratoríes. 
Key words: Serum iron * iron binding capacity * chronic 
anaemia * haemnochromatosis * methods. 
381 
Acta Bic ioquímica Clínica Liatinoamericana Yol. XXX, N" 4, 1996 
Introd u c c i o n 
L a s determinaciones de h ierro sérico 
( F e S ) y l a capacidad total de fijación de hie -
rro sérico ( C T F F e S ) se h a n convertido en 
pruebas indispensables p a r a e l diagnósti-
co de desórdenes hematológicos ta les co-
mo def ic iencia de h ierro , s iderosis , hemo-
cromatosis y a n e m i a crónica. También se 
u t i l i z a n en obstetr ic ia , ginecología y pe-
diatría ( i ) (2 ) . 
H a y más de 50 métodos descritos p a r a 
l a cuantificación de F e S (5-5) , pero aún no 
existe u n método de referencia aceptado u m -
versalmente (5). Estos métodos incluyen téc-
n icas sofisticadas como l a dilución de isó-
topos, inmunoprecipitación (7) , inmunoe-
lectroforesis y espectroscopia de absorción 
atómica (8), así como métodos automat i -
zados ( i ) (3) (4) (9-16). Se h a n uti l izado d i -
ferentes agentes reductores o cromógenos 
(9) (17-23). S i n embargo, e l Comité I n t e r -
nac iona l de Estandarización en Hemato -
logía ( I C S H ) h a recomendado e l uso de áci-
do tioglicólico como agente reductor y h a -
to fenantro l ina (24) o f e rroz ina como cro-
mógenos (25). 
E n general , todos los procedimientos dis-
ponibles p a r a l a determinación de F e S t ie -
nen u n uso clínico l imitado dado s u alto cos-
to, f a l t a de disponibi l idad, grandes volú-
menes de m u e s t r a requeridos (26), son te -
diosos, consumen mucho tiempo y deman-
dan equipo especial de laboratorio (2) (3). 
P a r a l a determinación de l a C T F F e S t a m -
bién se h a n sugerido muchas metodologí-
as ta les como l a determinación química d i -
rec ta , l a utilización de F e radioactivo, l a 
prueba no rad ioac t iva con exceso de F e r e -
movido con adsorbente ( r e s i n a de i n t e r -
cambio iónico o carbonato de magnesio) , l a 
precipitación de l a t r a n s f e r r i n a s a t u r a d a 
con F e y determinación de l a C T F F e S , l a 
espectroscopia de Absorción Atómica, o e l 
uso de principios inmunológicos. No obs-
tante , aún sigue vigente el problema r e l a -
cionado con el establecimiento de u n mé-
todo de re ferenc ia p a r a med i r l a C T F F e S 
(5 ) . Según el I C S H el método que u t i l i z a 
l a adsorción de carbonato de magnesio no 
cumple con e l cr iterio de un método de r e -
ferenc ia debido a s u gran v a r i a b i l i d a d en 
precisión y exac t i tud (24) (27). L a separa -
ción de l a proteína u n i d a a l F e del F e l i -
bre y e l establecimiento con exact i tud del 
grado de saturación h a sido u n problema 
por años (3). Recientemente se h a reco-
mendado el empleo de r e s i n a s de i n t e r -
cambio iónico (28). 
E l método comercial u t i l i z a u n a solución 
amort iguadora de acetato p H 4,5, b idro -
cloruro de b i d r o x i l a m i u a como agente r e -
ductor, f erroz ina como cromógeno, u n úni-
co patrón de h ierro con 5.000 \igfl y se i n -
troduce l a incubación a 37 °C con l a s v e n -
ta jas de que reduce el tiempo de reacción 
y omite l a utilización de carbonato de m a g -
nesio (29). 
E l propósito de este trabajo es preparar 
en el laboratorio los reactivos ut i l izados en 
el método comercial y comparar este mé-
todo con e l método recomendado por l a 
I C S H así como con el método comercial o r i -
g ina l , complejidad, tiempo, exac t i tud , pre -
cisión y correlación. 
Materiales y métodos 
Se ut i l izaron var ias mezclas de suero pro-
venientes de pacientes que acudieron a l a 
donación en u n banco de sangre . P a r a l a s 
pruebas de precisión se usaron t res mez-
clas de suero con concentraciones de h ie -
rro ba jas , normales y a l t a s . P a r a las p rue -
bas de recuperación e in ter f e renc ia se u t i -
lizó u n a mezc la de suero con concentración 
n o r m a l de h ierro . E l estudio de correlación 
entre los tres métodos se realizó con u n to-
t a l de 40 muest ras de suero provenientes 
de estudiantes de se cundar ia . 
L a s mediciones fotométricas se r e a l i z a -
ron en u n espectrofotómetro S b i m a d z u mo-
delo UV-160 con cubetas de plástico dese-
cbables. Toda l a cristalería fue l a v a d a y s u -
mergida en ácido clorhídrico 12 M diluido 
1:2 por 24 horas y luego en juagada es c ru -
pulosamente con agua desionizada. 
PROCEDIMIENTO 
Se realizó e l método descrito por B e a l e 
et al. modificado por L o r i a y Monge (5) co-
mo método de re ferenc ia ; e l método de l a 
casa comercial S i g m a Diagnost i c según e l 
procedimiento número 565 (29), y el mé-
todo comercial pero con reactivos preparados 
en el laboratorio de l a s iguiente m a n e r a : 
Solución de trabajo F e S : hidrocloruro de 
b i d r o x i l a m i n a a l 1,5 % (PA' ' ) en a m o r t i -
guador de acetatos 0,44 m o l / L p H 4,5, 
382 
Cuantificación de hierro sérico. Métodos de laboratorio 
Solución de trabajo C T F F e S : T r i s a m i -
nometano 0,5 m o l / L p H 8 , 1 . 
React ivo de color: f e rroz ina a l 0,85 % 
CP/V) en solución de bidrocloruro de b i -
d r o x i l a m i n a . 
Patrón de h ierro : 5.000 pg/1 de hierro en 
solución de bidrocloruro de b i d r o x i l a m i n a . 
A los t res métodos en investigación se 
les aplicó el protocolo de evaluación de mé-
todos recomendado por T ie tz (30)y l a I F C C 
(31) que inc luye el espectro de absorción, 
el intervalo anaHtico, l a estabil idad del com-
plejo coloreado, pruebas de precisión en u n 
mismo día y día a día, pruebas de recupe-
ración, pruebas de interferencia, coeficiente 
de correlación, ecuación de regresión l i n e -
a l y error estándar. 
Resultados 
ESPEQRO DE ABSORCION DEL PRODÜQO 
FINAL COLOREADO 
Se l l e v a r o n a cabo los espectros de ab-
sorción p a r a cada método con suero y con. 
solución patrón. P a r a el método de B e a l e 
se obtuvo u n pico máximo de absorción en -
tre los 530 y 540 n m . Con e l método co-
merc ia l , tanto con los react ivos or iginales 
como con los react ivos preparados en e l l a -
boratorio, se obtuvo u n pico máximo de ab-
sorción a 560 n m . 
INTERVALO ANALÍTICO 
A l a n a l i z a r el intervalo analítico obte-
nido con cada método se observó que en to-
dos ellos, aún a una concentración de hie-
rro de 8.000 pg/1, se mantuvo l a linealídad. 
ESTABIUDAD DEL PRODUaO FINAL 
COLOREADO 
L a estabi l idad del complejo coloreado se 
realizó con suero y con solución patrón p a -
r a cada método, tanto p a r a F e S como p a r a 
C T F F e S . Con e l método de B e a l e p a r a F e S 
e l patrón se estabilizó entre los 15 y los 55 
minutos , tiempo a p a r t i r del cua l comenzó 
a aumentar su absorbancia. E l suero se es-
tabilizó entre los 35 y 45 minutos aumen-
tando también s u absorbancia después de 
IMPRECISIÓN DE LOS ANÁLISIS DE FéS Y CTFFeS EN UN MISMO DÍA. 
. .Mezcla dé suéfoícoiv. -
conccfiiración dé FeS 
Mezcla, dé suero 
•con.CTFFeS 
:Xprmdl-:-'C XX aÍta.: f.XX :fC''normal:XX:-. 
• Método'de Beale \ 
i: X, 20 . . : ' . ••̂ .•••/:20' .20 
390 :L400.:,: 7:--. 2.530.. .••/̂ "̂- "3A9d 
ÍX:cmx$:Í(^fXmXe:mM 32 Ó4 ~ 
X-m^-l^X0 
Método Coiiiercia: i 5̂f>/'á:'í:̂ -̂ (!-̂ '̂̂ ':̂ -':̂ 'vX.'X.'-C--f-.-j 
^ hMXi}í:XXXXÍ&^' 
U:Qcfti^hóx0S?x^^^ XiXridmx ^^yX>0:í0AtéÓÍXxX X 
40 
^c cMím^-'Xf'i'-': [f-C-X-^yfX.ér'XXT xrx^sX;;:. --^:xf^rxfxMAxxf 
•Métódqs,xbn(rea¿^^^ 
'iXmXfWxbxXXX % XiXXXSiMMXXÉ-. 
xxxxxMQ'''^'mx XXr'Wm^AidwAX. 
XX^fX0'XXX(M fX-sáx::. ' : :t : -44' -XX 
^'<MM0iX(X0xX:F:--mií XfxSMXXAffX 
rO.E,. =:désHacróñ!&BÍándárj;X::='proriiédi^ 
3 8 3 
Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana Yol. XXX, NU, 1996 
TABLA II. 
IMPRECISIÓN DE LOS ANÁLISIS DE FeS Y CTFFeS DIA A DIA. 
Mezclare::suero con concentrqciómdc F.eS. ..,y¿y,yy^ 
'XXmmUgXf;Tpj?e^ 
•• baja-:.: -.XXXormal •••f 7- ^ ' normal'-'X 
Método de Beale 
n ' • 20 :.V; '7 " 20 . 2 0 . . 20 . 
:X(ng/]) 360 ./ . • 1.340 . . • • 2,610 .. 3.280 
U . E . (pgñ) • •70 87 • 83 '•'•'•'•''-.: 181 •: 
a v . C%) .: . . "19,4 • 6,5. 5,5 
Método Comercial 
n •- " 2d/-; XX.y. •2Q-'U-'y. ;'.'2o -;• • 20 ••: 
x c g g / l ) 310 " • •:i;o40 2.450 3.700 
D.E.(}Jgfi) . . -43- • 45 • 47 40 • 
a v . (%) . . .. 13,9.: 4,3 : : 1.9 . . 1,1 
Método con: 
reactivos preparados. 
n -.^20.-"i V ; : . : 2 0 •y:.y • /":-:.y . : 20 
:X:Cpgd) "-X-y'-.-C- 280. 950 2.410 .. 3.480 
D . E . Cpgd) ' •: 3 i c . . : „ „ - ". 13 •" 98. 138 
a v . i%) • l l . l • • • 1,4 . 4,0 • 4,0 
P . E . = desviación estándar; X = proínedio; ,G,y. = coeficiente de variación; n = número de análisis. ; 
este lapso. L a C T F F e S en el suero se esta -
bilizó desde el inicio de l a reacción. 
Con el método comercial p a r a F e S el pa -
trón se estabilizó entre 6 y 30 minutos , d is -
minuyendo luego s u absorbancia . E l suero 
se estabilizó b a s t a los 45 minutos y luego 
de 1 bora y media disminuyó su absorbancia. 
E l producto final coloreado p a r a C T F F e S 
se estabilizó entre los 10 y 60 minutos . 
Con el método comercial con reactivos 
preparados p a r a F e S el suero se es tab i l i -
zó entre los 10 y 30 minutos y con patrón 
entre los 7 y 30 minutos . L a intens idad del 
color p a r a l a C T F F e S fue constante entre 
los 12 y 60 minutos . 
IMPRECISIÓN DE LOS MÉTODOS 
L a s tab las I y I I m u e s t r a n los r e s u l t a -
dos de l a precisión r e a l i z a d a a los tres mé-
todos en u n mismo día; y día a día respec-
t ivamente . 
RECUPERACIÓN 
E n l a tab la I I I se encuentran los va lo -
res obtenidos de recuperación para cada mé-
todo. 
ESPECIFICIDAD ANALÍTICA 
E n l a tab la I V se m u e s t r a el efecto pro-
ducido por l a in ter ferenc ia de s u s t a n c i a s 
como b i l i r r u b i n a , hemoglobina y cobre en 
los tres métodos bajo estudio. 
ESTUDIO COMPARATIVO 
E l estudio de correlación se llevó a ca -
bo obteniéndose l a ecuación de regresión 
l ineal , coeficiente de correlación ( r ) y el error 
estándar ( S y / x ) entre el método de B e a l e 
y e l método con react ivos preparados , en -
t re el método comercial y el método con r e -
activos preparados y entre e l método de B e -
ale y el comercial , tanto p a r a F e S como p a -
r a C T F F e S . 
E n t r e e l método de B e a l e y e l método 
con reactivos preparados se obtuvo para F e S 
u n r = 0,976, una ecuación de regresión l i -
nea l de y = - 1 2 1 , 0 1 + 1,050 X y u n S y / x = 
180 \Lgf\. 
384 
Cuantificación de hierro sérico. Métodos de laboratorio 
TABLA I I I . 
R E C U P E R A C I Ó N D E H I E R R O A G R E G A D O A L S U E R Q . 
'•\XXX.-:.yy^yXX.Í: v::-:;í;:.-.-í'7V:¿¿̂ ^̂ ^ (yUX:-yXXyX.XX 
Caniidadde- • \ —-— •. -y '[ 'X ; •'- " " " : ';• ' '. - I - ; — ; — ' '. "/ Xí 
'.hierro agregado -MétodáBeale-X '.-yirXXMétó •. . 'Método. cóh'reactlX 
vos : '^XXXX'XUXy' 'XX'XXXXXXXUXAf{ ''^'-'XtxXX yXXX'XyXXX'XX^XX:'y;X 
;"i:.500 yXXX^:Xrí ̂ •ux:.xx:xxx2UxXixX: 7#ri : ;|^^ XXlXXXyXQSUym 
•l.OQÚ "• ••••^ •̂ v•:̂ :••9̂ •̂?•.•":.•••:-y, "yyyxi2y.Xy 
•2.000 . 98 • ."\ l y i o ? . • •. ;• ; 9 9 : • 
U.ÓO0 yUXXy. XyXX.UXXa5-X'yX:X:U X.XUiogUX--X-'XX. X-./''-:-'XXXyX'lOS'Xy 
XXXX:i 'XX'XX X-UiXXXñbXXX:XFXX-. XX-''XXX'X95X:.X-XXyXXX UX-XUXlXX)¿.XX:''Xy 
X=;Prbiiiéaio;-: • -••yalór.obteiÚdp-Wlfú'basaH^^^^^^ • •'. X 
:'y.:.CX:y'yXi> R é c i i p e r a d ó ñ : : ^ " . ' . 'O /.':' ' • " i r ix 100 
..•v; .'iiantidad agregada 'y'.'y'yyy 
P a r a l a C T F F e S el r fue de 0,729, l a e c u a -
ción, de regresión l i n e a l y ~ 766 ,59 + 0,387 
X y e l S y / x = 766 \igf\. 
E n l a comparación e n t r e e l método co-
m e r c i a l y e l método con r e a c t i v o s p r e p a -
r a d o s p a r a F e S se obtuvo u n r = 0 , 9 5 1 , u n a 
ecuación de regresión l i n e a l y - 67,4 + 0,835 
X y u n S y / x = 104 u g / I . 
P a r a l a C T F F e S e l r = 0 ,568 , l a e c u a -
ción de regresión l i n e a l y = 1.060 + 0 ,8312 
X y e l S y / x = 747 pg/1 . 
E n t r e e l método de B e a l e y e l c o m e r c i a l 
p a r a F e S e l r = 0 ,929, l a ecuación de r e -
gresión l i n e a l y = - 9 3 + 0 ,914 X y e l S y / x 
= 44 ia.g/1. P a r a l a C T F F e S r = 0,342, l a e c u a -
ción de regresión l i n e a l y = 2 .193 + 0 ,289 
X y e l S y / x = 552 pg/1 . 
Discusión y conclusiones 
Según los espectros de absorción obteni -
dos con c a d a método, las longitudes de onda 
u t i l i z a d a s en c a d a uno de ellos son l a s más 
a p r o p i a d a s , a s a b e r 535 n m p a r a e l método 
de B e a l e y 560 n m tanto p a r a el método co-
m e r c i a l como p a r a e l método en estudio . 
Todos los métodos p r e s e n t a r o n u n i n -
t e r v a l o analítico l i n e a l a u n h a s t a u n a c o n -
centración de 8.000 pgA de h i e r r o . 
TABLA IV. 
E S P E C I F I C I D A D A N A L Í T I C A . 
Af6médídM\íñtéf^^ 
:'Vpgy:.yl'X:y.. 
dnterfErente: Método BeóJe . "Método .Córíier.cidl -. 
Método cpn reacti-f, 
'y.' preparados •.' 
, Hémogiobina' (mg/l);: 
•:Bilirr ubmá,;{m g/i) fX: 
? Cobré C Í Í ^ K ; 
-0 ,006 
'-b^oox 
:0,G02^ 
-0,0 TI-: 
•0,0,8?. 
0,005. 
^^•b;i62: 
..íValor bbtéüíao.^/ xriOOjiri poo:,: 
In terferéncia .¿í.. 
Valor basál . 
; ca nti.dad.agregada 
385 
Acta Bi ioquímica Clínica Latinoamericana Yol XXX, NU, 1996 
E n c u a n t o a los datos obtenidos sobre l a 
e s t a b i l i d a d de l compuesto coloreado se p u e -
de g e n e r a b z a r que los t i e m p o s de i n c u b a -
ción i nd i c a d o s e n c a d a método s o n los óp-
t i m o s . P a r a e l método de B e a l e y según l a s 
modifícaciones que se le b a n r e a l i z a d o (5) 
s e debe i n c u b a r e l F e S y l a C T F F e S a l m e -
n a s 40 m i n u t o s . E l p l a z o máximo p a r a a m -
b a s d e t e r m i n a c i o n e s no deberá s e r m a y o r 
a u n a b o r a . L o s datos obtenidos con el mé-
todo c o m e r c i a l i n d i c a n que n e c e s a r i a m e n -
te se debe obtener l a l e c t u r a p a r a F e y C T F -
F e S a l t i e m p o exacto de 10 m i n u t o s d e s -
pués de agregado e l cromógeno, tanto p a -
r a l a m u e s t r a como p a r a e l patrón. L a m i s -
m a situación se p r e s e n t a p a r a e l método 
con r e a c t i v o s p r e p a r a d o s , e l c u a l debe s e r 
i n c u b a d o por 10 m i n u t o s exactos . E n caso 
de e x c e d e r s e e l t i e m p o de l e c t u r a los v a l o -
r e s de F e S y C T F F e S darán más a l tos de 
lo e s p e r a d o . 
A n a l i z a n d o los datos de precisión p a r a 
F e S y C T F F e S ( t a b l a s I y I I ) se o b s e r v a có-
mo los coef ic ientes de variación ( C V ) de los 
t r e s métodos e v a l u a d o s son más altos c u a n -
do se r e a l i z a n l a s p r u e b a s día a día que 
c u a n d o se h a c e n e n u n m i s m o día. E s t e b e -
cbo es de e s p e r a r s e , y a que l a s v a r i a b l e s 
i n v o l u c r a d a s e n e l análisis de l a s m u e s t r a s 
e n d i f e r e n t e s días son m a y o r e s (voltaje , bo -
r a de análisis, equipo , p e r s o n a l de l a b o r a -
t o r i o , e tc . ) . C a b e d e s t a c a r que los C V de 
los t r e s métodos e n e s t u d i o s o n s i m i l a r e s 
a c o n c e n t r a c i o n e s b a j a s , n o r m a l e s y a l t a s 
de F e S , t a n t o e n u n m i s m o día como día a 
día. F u e a concentraciones b a j a s de F e S don-
de se o b t u v i e r o n los C V más altos e n los 
t r e s métodos y l a s m e j o r e s p r e c i s i o n e s se 
o b t u v i e r o n a c o n c e n t r a c i o n e s a l t a s de F e S . 
C o n r e s p e c t o a l a s p r u e b a s de e x a c t i t u d 
( T a b l a I I I ) e l método de B e a l e presentó e l 
mejor promedio de recuperación (101 % ) . S i n 
e m b a r g o , los t r e s métodos e v a l u a d o s pose-
e n u n a b u e n a e x a c t i t u d , y a que lo e s p e r a -
do es que el p r o m e d i o de los p o r c e n t a j e s de 
recuperación no s e a m e n o r de l 95 % n i m a -
y o r de l 105 % (30) . 
E n c u a n t o a l a s p r u e b a s de i n t e r f e r e n -
c i a ( t a b l a I V ) , c o n el método de B e a l e se 
obtuvo u n a i n t e r f e r e n c i a n e g a t i v a p a r a l a s 
t r e s s u s t a n c i a s e v a l u a d a s . C a d a mg/1 de H b 
d i s m i n u y e e n u n 0 ,006 % e l v a l o r de F e S 
obtenido , así como c a d a mg/1 de b i l i r r u b i -
n a lo d i s m i n u y e e n u n 0 ,025 % y c a d a j i g / I 
de cobre lo d i s m i n u y e e n u n 0 ,003 %. E n 
el método c o m e r c i a l se o b s e r v a cómo l a H b 
y e l cobre p r o d u c e n i n t e r f e r e n c i a p o s i t i v a 
m i e n t r a s que l a b i l i r r u b i n a p r o d u c e i n t e r -
f e r e n c i a n e g a t i v a . C a d a mg/1 de H b a u m e n t a 
e n u n 0 ,002 % e l v a l o r de F e S obtenido , c a -
d a mgA de b i l i r r u b i n a d i s m i n u y e e n u n 
0 , 0 7 1 % este v a l o r y c a d a pg/1 de cobre lo 
a u m e n t a en 0 ,087 %. E l método con r e a c -
t ivos p r e p a r a d o s presentó u n c o m p o r t a -
m i e n t o m u y s e m e j a n t e a l c o m e r c i a l e n 
cuanto a i n t e r f e r e n t e s . C a d a mg/1 de H b a u -
m e n t a e n u n 0 ,005 % el v a l o r d e l F e S , c a -
d a mg/1 de b i l i r r u b i n a p r o d u c e u n a d i s m i -
nución de 0 , 0 6 1 % y c a d a p g / l de cobre lo 
a u m e n t a en 0 ,162 %. P o r lo tanto e l cobre 
es u n i n t e r f e r e n t e m u y i m p o r t a n t e e n l a 
determinación de F e S c u a n d o s e u t i l i z a fe-
r r o z i n a como a g e n t e cromógeno. 
E l e s t u d i o de correlación e n t r e métodos 
señala coef ic ientes de correlación c e r c a n o s 
a 1,0 lo que i n d i c a u n a b u e n a correlación 
e n t r e estos métodos p a r a F e S . C o n t r a r i o a 
esto, los coef ic ientes de correlación p a r a l a 
C T F F e S s o n b a j o s : 0 ,342 , 0 ,568 y 0 ,729 . 
A n a l i z a n d o e l conjunto de datos anteriores 
se puede c o n c l u i r que a p e s a r de que el mé-
todo de B e a l e no posee l a m e j o r a p l i c a b i l i -
d a d analítica desde e l punto de v i s t a de s e r 
u n método tedioso, que r e q u i e r e de m u c b a 
m u e s t r a y l a r g o s períodos de incubación, sí 
p r e s e n t a e l mejor desempeño analítico e n -
t r e los métodos e v a l u a d o s e n cuanto a e x a c -
t i t u d y e s p e c i f i c i d a d analítica. 
T a n t o el método c o m e r c i a l como e l m é -
todo con react ivos preparados p r e s e n t a n u n a 
a p l i c a b i l i d a d analítica s u p e r i o r a l método 
de B e a l e pero no así e n c u a n t o a d e s e m -
peño analítico p r i n c i p a l m e n t e desde e l p u n -
to de v i s t a de i n t e r f e r e n t e s y de l a e x a c t i -
t u d a l no c o r r e l a c i o n a r l a C T P P e S de e s -
tos métodos con e l de r e f e r e n c i a . 
P o r lo t a n t o e l método de B e a l e s i g u e 
s i e n d o el método de elección p a r a r e a l i z a r 
e l análisis de F e S y C T F F e S e n n u e s t r a m e -
dio. 
CORRESPONDENCIA 
L i c . E u g e n i a Quintana y/o L i c . I l e a n a 
Holst 
Facultad de Microbiología 
Departamento de Análisis Clínicos 
Universidad de Costa R i c a 
S a n José, Costa R i c a 
F a x : (506) 225-2374 
386 
Cuantificación de hierro sérico. Métodos de laboratorio 
Refí erencias bib loqrancas áfi( 
1. F R I E D M A N , H . and C H E E K , C , "Simultaneous 
and completely automated methods for se-
r u m iron and iron-binding capacity deter-
mination" , Clin. Chim. Acta, 31 , 315-327, 
1971. 
2. W I L L I A M S , H . ; A N D E R S O N , P . ; C O N R A D , M . and 
C H O S B Y , W , , " A r a p i d m e t h o d o f n i o a B u r í n e 
the iron concentration in serum or plasma" , 
J . Lab. Clin. Med., 63, 703-707, 1961. 
3. V A L C O U R , A . ; K R Z Y M O W S K I , G . ; O N O R O S K J , M . ; 
BoWERS, G . and M C C O M B , R . , "Proposed re-
ference method for ¡ron i n serum used to eva-
lúate two automated ¡ron methods". Clin. 
Chem., 36, 1.789-1.792, 1990. 
4. B R O Z D V I C , B . and PuRCELL, Y . , " A n automa-
ted micromethod for measuríng ¡ron con-
centration i n serum using thioglycollic acid 
and bathophenantroline sulphonate", J . Clin. 
Path., 27, 222-225, 1974. 
5. S Á E N Z , G . ; C H A V E S , M . ; A R R O Y O , G . ; V A L E N -
C I A N O , E . ; J I M É N E Z , J . ; M O N T E R O , A , y Q U I N -
T A N A , E . , "Hierro sérico y transferrina fun-
cional (capacidad total de fijación de hierro). 
Preconización de una metodología", Rev. 
Cost. Cieñe. Med., 8, 51-64, 1985. 
6. M A R T I N E K , R . , "Review of methods for de-
termining iron and iron-binding capacity in 
biológica materials " , J . Am. Med. TechnoL, 
32, 582-589, 1970. 
7. H U E B E R S , H . ; E N G , M . ; J O S E P H S O H , B , ; E K -
P O O M , N . ; R E T T M E R , R . ; L A B B É , R . ; P O O T R A -
K U L , P. and F I N C H , C , " P l a s m a iron and 
transferrin iron-binding capacity evaluated 
by colorimetric and immunoprecipitation 
methods", Clin. Chem., 33 , 273-277, 1987. 
8. Z E T T N E R , A . ; S Y L V I A , L . and C A P A C H O , L . , "The 
determination of serum iron and iron-bin-
ding capacity by atomic absortion-spectros-
copy", Am. J . Clin. Path., 45 , 533-540,1966. 
9. Y E E , H . and ZiN, A , , " A n Autoanalyzer pro-
cedure for serum ¡ron and total iron-binding 
capacity, with use of ferrozina", Clin. Chem., 
17, 950-953, 1971. 
10. W E R K M A N , H . ; T R I J B E LS , J . ; V A N M U N S T E R , P . ; 
ScHRETTEN, E . and M O E R K E R K , C , "Auto-
mated determination of serum and ferrio-
xamine i n uriñe", Clin. Chim. Acta, 31 , 395-
401, 1971. 
J J . W H I T E , J . and F L A S H K A , H . , " A n automated 
procedure with use of ferrozine for assay of 
serum iron and total iron-binding capacity", 
Cfin . Cíiem., 19, 526-528, 1973. 
12. S C H O L O S N A G L E , D . ; H U T T O N , P . and C O N N , R . , 
"Ferrozine assay of serum iron and total iron-
binding capacity adapted to the C O B A S B I O 
centrífuga] analyzer to the Edi tor " , Clin. 
Chem., 28, 1.730-1.732, 1 9 8 2 . 
13. F R A Z E R , G , , "Problems in the determination 
of serum total iron-binding capacity. Let ter 
to the Edi tor " , J . Clin. Paíh., 26, 457-458, 
1973. 
14. K L E I N , B . ; K L E I N M A N , N . and S E A V A Y , R . , "Ap-
plication of Fe+2-5-pyridyl Benzodiazepm-2-
ones to the automated determination of se-
rum iron and iron-bindine cB.pn.aity", Clin. 
Chem., 16, 495-499, 1970. 
15. Z A K , B , and E P S T E I N , E . , "Automated deter-
mination of serum iron", Clin. Chem., 11, 641-
644, 1965. 
16. K U N E S H , J . and S M A L L , L . , ".ádaptation ofthe 
Zak-Epste in automated micromethod for se-
rum iron to determine íron-faínding capacity 
and urínary iron" , Clin. Chem., 16 ,148-149, 
1970. 
17. P E R S I J N , J . ; V A N D E R S L I K , W . and R I E T H O R S T , 
A., "Determination of serum iron and latent 
iron-binding capacity ( L I B O " , Clin. Chim. 
Acta, 35, 91-98, 1971. 
18. HORAK, E . ; H O H N A D E L , D , and S U K D E R M A N , 
W . , "Modified method for analysis of serum 
i r o n " , A n n . Clin. Lab. Se, 5, 303-307, 1975. 
19. N E S S , A. and DiCKERSON, H . , "The determi-
nation of serum ¡ron by nitroso-R-salt wit -
hout deproteinization", Clin. Chim. Acta, 
12, 579-588, 1965. 
20. F O R M A N , D . , "Determination of iron in serum 
using solventextract¡on",Am. J . Clin. Path., 
42, 103-108, 1964. 
21. N O G U E R A , J . y S Á E N Z , G . , "Hierro sérico y 
capacidad libre de fijación a l suero en adul -
tos normales" , Eev. Med. Hosp. Nal. Niños, 
2 1 , 23-24, 1967. 
22. P E T E R S , T . ; G I O V A N N I E L L O , T . ; A P T , L . and 
ROSS, J . , " A s i m p l e improved method for the 
determination of serum iron I I " , J . Lab. 
Clin. Med., 48, 280-288, 1956. 
23. G O O D W I N , J . ; M U R P H Y , B . and G U I L L E M B T T E , 
M., "Direct measurement of serum iron and 
binding capacity", Clin. Chem., 12, 47-57, 
1966. 
24. I N T E R N A T I O N A L C O M M I T T E E F O R S T A N D A R I Z A -
T I O N I N H A E M A T O L O G Y , " T h e measurement of 
ttal and unsaturated iron-binding capacity 
in serum", Brit. J . Haem., 38, 281-290,1978. 
25. I N T E R N A T I O N A L C O M M I T T E E F O R S T A N D A R I Z A -
TiON I N H A E M A T O L O G Y , "Recommendations 
for measurement of serum iron in human blo-
od", Brit. J . Haem., 38, 291-295, 1978. 
26. W I L L I A M S , H . and G O N R A D , M . , " A one-tube 
method for measuríng the serum iron con-
centration and unsaturated iron-binding ca-
pacity" , J. Lab. Clin. Med., 67, 171-176, 
1966. 
387 
Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 
27. L E G G A T E , J . and C R O O K S , A . , "Problema i n 
quality control in determinations of serum 
total iron-binding capacity by the magnesium 
carbonate method", J. Clin. Path., 25, 905-
906, 1972. 
28. C H A R A M Z A , O. , " T h e serum iron-binding c a -
pacity and some accuracy-conditions of its 
determination", Acia Univ. Paolo, 42, 181-
188, 1966. 
29. Sigma Diagnostics, Iron and total iron-bin-
YolXXX^N-' 4,1996 
ding capacity. (Colorimetric endpoínt met-
hod). Procedure N " 565, 
30. T I E T Z , N . W . , Textbook ofClinícal Chcmistry. 
W . B . Saunders Company, Philadelphia, 1986. 
32. B U T N E R , J . ; B O R T H , R . ; B O U T W E L L , J . H . and 
B R O G H T O N , P . M . G . , "Approved Recommen-
dation on Quality Control in Cl inica l C h e -
mistry. P a r t 2. Assessment of Analyt ica l 
Methods for Routine Use " , Clin. Chim. Ac-
ta, 98, F 145-F 162, 1979a. 
388