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Sistemas de cultivo Batch Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 Los tres sistemas de cultivo líquidos clásicos son: El batch El batch alimentado El cultivo continuo Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 Ecuaciones cinéticas Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 Balances de acumulación F, X1, SR X S P F2, S2 , X2 , P2 Flujo de aire ciatransferenVrAFAF dt dAV A +⋅±⋅−⋅= 2211 CteVFF dt dV ==−= 0 21 Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 Ecuaciones de balance F, X1, SR X S P F2, S2 , X2 , P2 Flujo de aire Batch ciatransferenVrAFAF dt dAV A +⋅±⋅−⋅= 2211 CteVFF dt dV ==−= 0 21 ó Vr dt dAV A ⋅±=ciatransferenVrdt dAV A +⋅±= Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 Xr dt dX X ⋅== µ S >> KS µ = Cte = µmax X dt dX ⋅= max µ Biomasa KS Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 X dt dX ⋅= max µ dt X dX ⋅= max µ Integrando t eXX ⋅ ⋅= max 0 µ tLnXLnX ⋅+= max0 µ Biomasa Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 0 1 2 3 4 5 6 0 2 4 6 8 10 12 14 X t Curva de crecimiento exponencial t eXX ⋅ ⋅= max 0 µ Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 Sustrato Vr dt dAV A ⋅±= SS r dt dS Vr dt dSV −=⋅−= S X S XS X Y eX Y X Y r dt dS t X ⋅ ⋅⋅ = ⋅ −=−= max 0maxmax µµµ Multiplicando por dt e integrando ( )1max0 0 −⋅−= ⋅t e Y X SS S X µ Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 Curva de crecimiento exponencial t eXX ⋅ ⋅= max 0 µ ( )1max0 0 −⋅−= ⋅t e Y X SS S X µ Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 ciatransferenr dt dA A +±= O2 ��� �� � ��� ��� � ∗ � �� �� � �� � � µ ��/� � �� � µ ��/� ��� µ� Vamos por el camino matemáticamente estricto ��� �� � ��� � ∗ � �� � µ ��/� ��� µ� Ecuación diferencial que, si consideramos las condiciones iniciales: t = 0, CL=C* , X = X0 Se resuelve como � � �∗ µ��� ��/� �� ��� µ��� �����.� � �µ.� Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 O2 � � �∗ µ��� ��/� �� ��� µ��� �����.� � �µ.� Tal cual está expresada no puede «traducirse» a un comportamiento experimental pero: Si recordamos que µmax no puede ser mayor de 1,5 h-1 y que KLa debe ser mayor que 100 podemos simplifacarla En el denominador del segundo termino tenemos que KLa >> µmax Y dentro del paréntesis tenemos que e a la «menos un numero grande» es mucho menos que e a la «un numero chico». � � �∗ � µ��� ��/� �� ��� �µ.� KLa >> µmax Significa, en la practica, que los cambios físicos son mucho mas rápidos que los cambios biológicos por lo que podemos considerar que la transferencia es siempre la necesaria para satisfacer el consumo por lo que �� � ��� � ∗ � �� Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 ciatransferenr dt dA A +±= O2 ��� �� � ��� ��� � ∗ � �� �� � �� � � µ ��/� � �� � µ ��/� ��� µ� Vamos por el camino conceptual, matemáticamente menos estricto. Si consideramos lo visto recién y aceptamos que Tenemos que: �� � ��� � ∗ � �� ��� �� � ��� ��� � ∗ � �� � 0 ��� � ∗ � �� � µ ��/� ��� µ� � � �∗ � µ��� ��/� �� ��� �µ.� Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 0 2 4 6 8 10 12 14 0 2 4 6 8 10 12 14 t L L e YaK X CC O X ⋅ ⋅ ⋅ ⋅ −= max0max* µµ ( )1max0 0 −⋅−= ⋅t e Y X SS S X µ t eXX ⋅ ⋅= max 0 µ Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 ( )1max0 0 −⋅−= ⋅t e Y X SS S X µ Y el mantenimiento ?????? �� �� � �� �� �� � �� �� �� ´ "�. � ? �# �� � �� �� �� ´ "�. � �# �� � $� �� �� ´ "�. � t eXX ⋅ ⋅= max 0 µ Reemplazamos e integramos Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 ( )1max0 0 −⋅−= ⋅t e Y X SS S X µ Y el mantenimiento ?????? �# �� � $��� %� �� �� ´ "�. ��� %� # � #� � �� �� �� ´ � %� � 1 "�. �� $ �%� � 1 # � #� � 1 �� �� ´ "� $ �� � %� � 1 1 �� �� � 1 �� �� ´ "� $ Como en un cultivo batch el µ es constante, el rendimiento es constante y la curva de consumo de S y la de N tienen la misma forma Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 ( )1max0 0 −⋅−= ⋅t e Y X SS S X µ Y el mantenimiento ?????? �# �� � $��� %� �� �� ´ "�. ��� %� # � #� � �� �� �� ´ � %� � 1 "�. �� $ �%� � 1 # � #� � 1 �� �� ´ "� $ �� � %� � 1 1 �� �� � 1 �� �� ´ "� $ Como en un cultivo batch el µ es constante, el rendimiento es constante y la curva de consumo de S y la de N tienen la misma forma Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 Y el mantenimiento ?????? Independientemente del sistema de cultivo y de que lo veamos o no, el mantenimiento siempre existe. Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 tiempo (h) 0 2 4 6 8 10 12 14 X ( b io m a s a ) g /l 0 1 2 3 4 5 g lu c o s a ( g /l ) 2 4 6 8 10 r O 2 ( m m o l / L x h ) 0 5 10 15 20 25 30 35 X0 X f S0 Sf r o2 max Fase exponencialinóculo 0 2 2 SS CO Y f tot S CO − −= 0 0 SS PP Y f f S P − − −= 0 2 SS O b f tot − = ⋅= dtrCO COtot 22 ⋅= dtrO Otot 22 0 0 SS XX Y f f S X − − −= Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 1 Fase lag o de latencia 2 Fase exponencial: S>>Ks 3 Fase de desaceleración 4 Fase estacionaria 5 Fase de muerte o endógena 1 2 3 4 5 Fases de un cultivo batch Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 1 Fase lag: No hay crecimiento 1 2 3 4 5 Fases de un cultivo batch El microorganismo prepara su maquinaria para crecer en ese medio de cultivo A nivel industrial debe minimizarse todo lo posible ya que representa un gasto inútil (agitación, aireación termostatización) además de un riesgo de contaminación Los cultivos se siembran con un volumen de aproximadamente un 5 a 10 % del volumen final de un inóculo crecido en el mismo medio de cultivo Al usar el mismo medio de cultivo el microorganismo ya está preparado para crecer y acorta esta fase Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 2 Fase exponencial: 1 2 3 4 5 Fases de un cultivo batch El microorganismo tiene en el medio de cultivo exceso de todos los nutrientes que necesita para crecer. S >> KS para todos lo sustratos por lo que µ = µmax Monod y Pirt explican a la perfección el crecimiento y el consumo de sustrato. Muchos microorganismos importantes, E coli y S Cerevisiae entre ellos, presentan en esta fase de crecimiento metabolismo de sobreflujo. Esto es, la generación de productos aun en presencia de O2. Ocurre por una desregulacion entre la fase anaeróbica y aeróbica del catabolismo. El consumo de O2 puede ser un problema si la biomasa es grande.Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 2 Fase de desaceleración 1 2 3 4 5 Fases de un cultivo batch Algún nutriente, el limitante, comienza a agotarse. Primero S KS por lo que µ comienza a disminuir. Luego S 0 y µ 0 Monod y Pirt explican a la perfección el crecimiento y el consumo de sustrato. Esta fase es muy corta. Como Ks es pequeño, para cuando el microorganismo comienza a «sentir» la falta de S, ye termina. Normalmente, los cultivos se terminan luego de esta fase, se cosecha y se recupera el producto deseado. Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 2 Fase estacionaria 1 2 3 4 5 Fases de un cultivo batch El sustrato limitante esta agotado. S = 0 µ = 0 Si µ = 0, Pirt nos dice que rS = mS.X Si no hay sustrato para comer, Pirt nos dice que los microorganismos están muertos. Lo cual no es cierto. Pirt no es aplicable a esta etapa. Debe aplicarse el modelode Herbet µC = µe por lo que µneto es nulo Si el sustrato limitante es la FCE, tenemos que rS = 0 (no hay sustrato que comer). Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 2 Fase de muerte o endógena 1 2 3 4 5 Fases de un cultivo batch El sustrato limitante esta agotado. µ < 0 Ni Monod ni Pirt son aplicable a esta etapa. Debe aplicarse el modelo de Herbet µC < µe por lo que µneto es < 0 El cultivo pierde biomasa en funcion del tiempo pero aun esta activo. Si se le agrega nuevo sustrato, vuelve a crecer Esta fase es muy importante en el tratamiento de efluentes Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 Es el cultivo mas simple Requiere poca aparatología Puede realizarse en cualquier sistema fisico Permite el calculo de parametros estequiometricos en forma muy sencilla Permite comparar distintos medios de cultivo en relativamente poco tiempo Determinación muy sencilla de µmax Ventajas del cultivo batch Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021 Dificultad de controlar el µ, excepto variando la composición del medio o las condiciones de proceso Altas concentraciones de nutrientes pueden inhibir el crecimiento debido al aumento de la presión osmótica del medio o toxicidad de nutrientes Alta demanda de oxígeno puede generar una limitación debido a una insuficiente capacidad del reactor para transferir O2 al medio Inconvenientes para remover calor Tiempos muertos entre procesos disminuye la productividad. Pie de cuba No permite determinar velocidades volumetricas en la fase líquida Dr. Sebastián F. Cavalitto Biorreactores y cambio de escala 2021
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