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clase de medios de cultivos

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MEDIOS DE CULTIVOS
Son sustancias que proporcionan a los microorganismos 
los requerimientos nutricionales necesarios para 
desarrollarse
Son una mezcla de NUTRIENTES:
Sustancias orgánicas: azucares ,aminoácidos, ácidos grasos
(extracto de carne, peptonas y levaduras)
Sustancias inorgánicas: Sales minerales
(NaCl)
Agar-Agar: como agente solidificante
Agua LAB. BACTERIOLOGIA CHET
LCDA. YURAIMA ESCAÑONA
Tipos de Medios de Cultivos
Según:
Estado físico:
Líquidos
Sólidos
Semisólidos
uso:
No selectivos o 
generales
Enriquecidos 
Selectivos
Diferenciales
Se denominan los CALDOS, ya que contienen los
nutrientes disueltos en agua. Permite obtener
suspensiones con un elevado numero de
microorganismos.
Ejemplos:
Caldo tripticasa soya
Caldo tioglicolato
Caldo hipersalado
LIQUIDOS
Partiendo de un medio liquido podemos modificar Su consistencia
como agar
Medios sólidos el agar se utiliza en una concentración de 1.5-2 %
Medios semisólidos se utiliza una concentración de 0.7%
SOLIDOS Y SEMISOLIDOS
Clasificación de los medios según sus uso
Permiten el crecimiento de una gran variedad de bacterias
Están enriquecidos con elementos como suero, sangre, hidratos de
carbono etc.
NO SELECTIVOS O GENERALES
Agar sangre
El medio es útil para aislamiento y cultivo de microorganismos
aerobios y anaerobios nutricionalmente exigentes a partir de
una gran variedad de muestras, como para la observación de
reacciones de hemolisis.
SELECTIVOS
Son aquellos que permiten el crecimiento de un tipo de
microorganismo determinado inhibiendo el desarrollo de los
demás
Agar Manitol salado
Medio de cultivo selectivo y diferencial,
utilizado para el aislamiento y diferenciación
de estafilococos.
Agar Mac conkei
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos 
gramnegativos
Agar SS (Agar Salmonella-shigella) y XLD
Es utilizado para el aislamiento de especies de
Salmonella y shigella a partir de muestras
clínicas.
LA. BACTERIOLOGIA CHET
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MEDIOS DIFERENCIALES
Son aquellos en los que se pone de manifiesto propiedades 
que un determinado microorganismo posee
Agar TSI
Medio universalmente empleado para la diferenciación de
enterobacterias, en base a la fermentación de glucosa, lactosa,
sacarosa y producción de ácido sulfhídrico.
DE ENRIQUECIMIENTO
Son aquellos que favorecen el crecimiento de un determinado Tipo
de microorganismo sin llegar a inhibir totalmente el Crecimiento
de los demás
Agar Chocolate (polivitex)
Es un medio destinado principalmente al aislamiento de gonoco,
meningococo y haemophilus, pero en el que pueden crecer muchos
otros microorganismos exigentes.
PASOS A SEGUIR PARA LA 
PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVOS
LAB. BACTERIOLOGIA CHET
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leer la instrucciones
Pesar la cantidad de
medio requerida
Disolver con agua destilada
Ajustar al pH 7,2-7,4 
Esterilizar 121ºC por 15 min
Servir en cada
Placa de petri y/ o tubo
Las placas colocar en estufa 35ºC
Rotular 
Digital Analítica
1000 cc 52 gramos
250cc X
X = 13 gramos para 250 cc de agua destilada 
Plancha magnetica
disolver
Agregar el resto de agua
pH
 Controlar cuando se prepara el medio de cultivo
 Utilizar el phmetro de superficie o cintas de pH
 Medir pH cuando el medio este solido y después de esterilizado
 Rango de 7,2-7,4
 Ajustar con soluciones estériles de HCL 0,1 N o NaOH 0,1 N
Autoclave
15 minutos a 121ºC
Rotular las placas con nombre y 
con fecha de Preparación 
Dejar secar por 6 horas 
en estufa a 35°C
Profundidad del agar
 Controlar cuando se prepara un nuevo lote
 Estandarizar el volumen del medio
 Volumen aproximado de 30-32 ml 
 4 mm
 Utilizar placas de petri con las mismas características
Pasos para la Preparación del
Agar-Chocolate casero
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CONSERVACION
Conservar 
a 2 a 8 °C
Periodo de 
uso 3 a 4 
semanas
CONTROL DE CALIDAD
Responsabilidad del Bioanalista
De cada lote preparado se le debe entregar al Bioanalista una placa
Tubo de bioquímica preparado. 
LAB. BACTERIOLOGIA CHET
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Recepción de Muestra 
Colocar placas y Bioquímica a temperatura ambiente
Filtra los colorantes para gram.
Realizar las coloraciones
Centrifugar Líquidos biológicos (L.C.R, Líquido pleural etc.)
Centrifugar y servir los directos de orinas
Esterilización del agua destilada para la preparación de los medios 
de cultivo
Medición de ph. del agua 
Preparación de medios de cultivos en placas
Pesar los medios según lo indica el inserto
Medir el agua
Disolver los medios
Autoclavar
Servir las placas
Rotular las placas con indicación del medio preparado y la fecha de 
preparación
Colocar en estufa de 35 grados centígrados, por cuatro horas 
Envolver fiolas, vasos precipitados, pipetas, cilindro
graduado, tubos de baquelitas, tubos de algodón, asas
calibradas, pipetas Pasteur, gasas, hisopos, láminas
portaobjetos y paletas para su esterilización
Abastece de gasa,guantes, alcohol iodado, alcohol, aceite
de inmersión, de acuerdo a los consumos diario ,por lo tanto
es responsable de surtir del almacén de jefatura.
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