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MEDIOS DE CULTIVOS Son sustancias que proporcionan a los microorganismos los requerimientos nutricionales necesarios para desarrollarse Son una mezcla de NUTRIENTES: Sustancias orgánicas: azucares ,aminoácidos, ácidos grasos (extracto de carne, peptonas y levaduras) Sustancias inorgánicas: Sales minerales (NaCl) Agar-Agar: como agente solidificante Agua LAB. BACTERIOLOGIA CHET LCDA. YURAIMA ESCAÑONA Tipos de Medios de Cultivos Según: Estado físico: Líquidos Sólidos Semisólidos uso: No selectivos o generales Enriquecidos Selectivos Diferenciales Se denominan los CALDOS, ya que contienen los nutrientes disueltos en agua. Permite obtener suspensiones con un elevado numero de microorganismos. Ejemplos: Caldo tripticasa soya Caldo tioglicolato Caldo hipersalado LIQUIDOS Partiendo de un medio liquido podemos modificar Su consistencia como agar Medios sólidos el agar se utiliza en una concentración de 1.5-2 % Medios semisólidos se utiliza una concentración de 0.7% SOLIDOS Y SEMISOLIDOS Clasificación de los medios según sus uso Permiten el crecimiento de una gran variedad de bacterias Están enriquecidos con elementos como suero, sangre, hidratos de carbono etc. NO SELECTIVOS O GENERALES Agar sangre El medio es útil para aislamiento y cultivo de microorganismos aerobios y anaerobios nutricionalmente exigentes a partir de una gran variedad de muestras, como para la observación de reacciones de hemolisis. SELECTIVOS Son aquellos que permiten el crecimiento de un tipo de microorganismo determinado inhibiendo el desarrollo de los demás Agar Manitol salado Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciación de estafilococos. Agar Mac conkei Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos gramnegativos Agar SS (Agar Salmonella-shigella) y XLD Es utilizado para el aislamiento de especies de Salmonella y shigella a partir de muestras clínicas. LA. BACTERIOLOGIA CHET LCDA. YURAIMA ESCAÑONA MEDIOS DIFERENCIALES Son aquellos en los que se pone de manifiesto propiedades que un determinado microorganismo posee Agar TSI Medio universalmente empleado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de glucosa, lactosa, sacarosa y producción de ácido sulfhídrico. DE ENRIQUECIMIENTO Son aquellos que favorecen el crecimiento de un determinado Tipo de microorganismo sin llegar a inhibir totalmente el Crecimiento de los demás Agar Chocolate (polivitex) Es un medio destinado principalmente al aislamiento de gonoco, meningococo y haemophilus, pero en el que pueden crecer muchos otros microorganismos exigentes. PASOS A SEGUIR PARA LA PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVOS LAB. BACTERIOLOGIA CHET LCDA. YURAIMA ESCAÑONA leer la instrucciones Pesar la cantidad de medio requerida Disolver con agua destilada Ajustar al pH 7,2-7,4 Esterilizar 121ºC por 15 min Servir en cada Placa de petri y/ o tubo Las placas colocar en estufa 35ºC Rotular Digital Analítica 1000 cc 52 gramos 250cc X X = 13 gramos para 250 cc de agua destilada Plancha magnetica disolver Agregar el resto de agua pH Controlar cuando se prepara el medio de cultivo Utilizar el phmetro de superficie o cintas de pH Medir pH cuando el medio este solido y después de esterilizado Rango de 7,2-7,4 Ajustar con soluciones estériles de HCL 0,1 N o NaOH 0,1 N Autoclave 15 minutos a 121ºC Rotular las placas con nombre y con fecha de Preparación Dejar secar por 6 horas en estufa a 35°C Profundidad del agar Controlar cuando se prepara un nuevo lote Estandarizar el volumen del medio Volumen aproximado de 30-32 ml 4 mm Utilizar placas de petri con las mismas características Pasos para la Preparación del Agar-Chocolate casero LAB. BACTERIOLOGIA CHET LCDA. YURAIMA ESCAÑONA CONSERVACION Conservar a 2 a 8 °C Periodo de uso 3 a 4 semanas CONTROL DE CALIDAD Responsabilidad del Bioanalista De cada lote preparado se le debe entregar al Bioanalista una placa Tubo de bioquímica preparado. LAB. BACTERIOLOGIA CHET LCDA. YURAIMA ESCAÑONA Recepción de Muestra Colocar placas y Bioquímica a temperatura ambiente Filtra los colorantes para gram. Realizar las coloraciones Centrifugar Líquidos biológicos (L.C.R, Líquido pleural etc.) Centrifugar y servir los directos de orinas Esterilización del agua destilada para la preparación de los medios de cultivo Medición de ph. del agua Preparación de medios de cultivos en placas Pesar los medios según lo indica el inserto Medir el agua Disolver los medios Autoclavar Servir las placas Rotular las placas con indicación del medio preparado y la fecha de preparación Colocar en estufa de 35 grados centígrados, por cuatro horas Envolver fiolas, vasos precipitados, pipetas, cilindro graduado, tubos de baquelitas, tubos de algodón, asas calibradas, pipetas Pasteur, gasas, hisopos, láminas portaobjetos y paletas para su esterilización Abastece de gasa,guantes, alcohol iodado, alcohol, aceite de inmersión, de acuerdo a los consumos diario ,por lo tanto es responsable de surtir del almacén de jefatura. LA. BACTERIOLOGIA CHET LCDA. YURAIMA ESCAÑONA
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