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UNIVERSIDAD TÉCNICA ESTATAL DE QUEVEDO FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS ESCUELA DE INGENÍERIA AGRONÓMICA TESIS DE GRADO Previo a la obtención del Título de INGENIERO AGRÓNOMO Caracterización organoléptica del cacao (Theobroma cacao L.), para la selección de árboles con perfiles de sabor de interés comercial. AUTOR: Viviana Anabel Sánchez Campuzano DIRECTOR DE TESIS: Ing. Agr. Msc. Alfonso Vasco Medina Quevedo Las Ríos Ecuador 2007 DEDICATORIA A Dios por dame vida, tolerancia y permitirme alcanzar esta meta. A mis Padres por su motivación durante toda mi vida estudiantil e incondicional apoyo para la elaboración de esta investigación. A todos y cada uno de mis hermanos quienes en todo momento me dieron su apoyo y me extendieron su mano para compartir momentos buenos, malos y difíciles durante el desarrollo de esta investigación AGRADECIMIENTO A toda mi familia por su ayuda incondicional y desinteresada para el desarrollo y culminación de este trabajo. A todo el personal de la Escuela de Ingeniería Agronómica de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Técnica Estatal de Quevedo, en especial a los Ings. Alfonso Vasco, Fredy Amores, Pedro Rosero, David Campi, Milciades Fernández, Carlos Alvarado, Santiago Crespo y al Ec. Flavio Ramos quienes me brindaron su amistad y orientación en la elaboración de esta investigación. Un sincero agradecimiento al personal técnico y administrativo de la Estación Experimental Tropical Pichilingue del Instituto Nacional Autónomo de Investigaciones Agropecuarias “INIAP”, Institución que me brindo todo el apoyo para el desarrollo y culminación de esta investigación. Un agradecimiento muy especial al Ing. Freddy Amores Líder del Programa Nacional de Cacao y café del INIAP por darme la oportunidad de realizar mi trabajo de tesis, además de formarme como verdadero profesional. A todo el personal del Programa Nacional de Cacao y Café, en especial a mi gran amiga Diana Barragán y a los Ings. Juan Carlos Jiménez, Geover Peña, James Quiroz, Alfonso Vasco y Ángel Anzules, quienes además de brindarme su amistad y conocimientos, supieron darme valiosos consejos que me ayudaron a crecer como profesional. A los miembros del panel de catación del Laboratorio de Calidad de Cacao y Café de la NESTLEEcuador, de manera especial al señor Vidal Salas. Al Sr. Samuel Bonrute y a la Sra. Ana Basurto miembros del panel de catación de la compañía ORECAO S.A. A TODOS MUCHAS GRACIAS. INDICE DE CONTENIDO CAPITULO PÁGINA I. INTRODUCCION…………………………………………………………..1 A. OBJETIVOS…………………………………………………………3 1. General………..…..……………………………………………...3 2. Específicos………….……………………………………….........3 B. Hipótesis……...………………………………………………………3 II. REVISION DE LITERATURA…………………………………………….4 A. Calidad del cacao..…..………………..……………………………...4 1. Calidad física del grano...…………………………………….5 2. Calidad organoléptica del grano...……………………………7 a. Sabor y aroma...………………………………………8 1.) Sabores básicos....………………………….……..9 2.) Sabores específicos……………………………...10 3.) Sabores adquiridos………………………………10 b. Torrefacción o Tostado...……………………………12 B. Principales factores que afectan la calidad…...………..…..……..13 1. Genética…….……………………………………………......13 2. Ambiente…………………………………………………….15 3. Manejo postcosecha…………………………………….........15 a. Cosecha………………………………………………16 b. Fermentación………………………………………...16 c. Métodos de fermentación………………………........20 d. Secado………………………………………………..22 e. Almacenamiento……………………………………..23 C. Clasificación comercial del grano....……...……………………….24 III. MATERIALES Y METODOS……………………………………………26 A. Localización y condiciones climáticas del área de estudio………26 B. Material genético….………………………………………………..26 C. Factores en estudio…....…………………………………………….28 D. Tratamientos………………………………………………………...28 E. Variables y métodos aplicados en el estudio……………....……...28 1. Variables físicas...…….……………………………………...28 a. Porcentaje de fermentación…...……………………...28 b. Peso de 100 almendras.……………………………...29 c. Número de almendras en 100 g……………………...29 d. Porcentaje de testa…...………………………………30 e. Determinación del pH en la testa y cotiledón..………30 2. Variables organolépticas………….…………..……………...30 a. Básicos………….…………………………………....31 b. Específicos……….…………………………………..31 c. Adquiridos……………………...…………………....32 F. Diseño experimental y análisis estadístico…..………..…………..33 G. Manejo del experimento……………...…………………………....33 1. Cosecha………………………………………………………34 2. Fermentación………………………………………………...34 3. Temperatura de la masa de cacao en fermentación………….35 4. Secado………………………………………………………..35 5. Almacenamiento……………………………………………..35 6. Preparación del licor de cacao………………………….........36 7. Evaluaciones sensoriales…………………………………….38 IV. RESULTADOS…………………………………………………………….39 A. Variables físicas……...….………………………….………………39 1. Porcentaje de fermentación…..……………………………...39 2. Peso de 100 almendras.……………………………………...41 3. Número de almendras en 100 g……………………………...42 4. Porcentaje de testa…...………………………………………43 5. Determinación del pH en la testa y cotiledón….……………43 B. Variables organolépticas…..…….…...…………………………….45 1. Sabores básicos…………………………………………......47 2. Sabores específicos………………………………………….47 3. Sabores adquiridos….……..………………………………...48 V. DISCUSION………………………………………………………………..52 VI. CONCLUCIONES………………………………...……………………….56 VII. RECOMENDACIONES…………………………………………………...57 VIII. RESUMEN……………………………………………………………….....58 SUMMARY……...........……………………………………………………60 IX. LITERATURA CITADA………………………………………………….62 X. APENDICE.………………………………………………………………..70 INDICE DE CUADROS CUADRO PÁGINA 1 Porcentaje de los componentes químicos de almendras secas sin fermentar. 5 2 Requisitos y patrones de calidad física del cacao en grano. 25 3 Identificación de progenies seleccionadas para el estudio. EET – Pichilingue, 2006. 27 4 Porcentaje de fermentación y defectos en almendras provenientes de los árboles de cacao seleccionados con perfiles de interés comercial. EET – Pichilingue, 2006. 40 5 Peso de 100 almendras, numero de almendras en 100 g y porcentaje de testa en almendras provenientes de los árboles de cacao seleccionados con perfiles de interés comercial. EET – Pichilingue, 2006. 42 6 Promedios de pH al inicio de la fermentación, fin fermentación y final del secado en la testa y cotiledón, en muestras de almendras provenientes de los árboles de cacao seleccionados con perfiles de interés comercial. EET Pichilingue, 2006. 44 7 Promedio de las variables organolépticas provenientes de 21 árboles de cacao con perfiles de interés comercial. EET Pichilingue, 2006. 47 INDICE DE FIGURAS FIGURA PÁGINA 1 Proceso para la elaboración de licor de cacao. 37 2 Dendrograma obtenido por el agrupamiento jerárquico de Ward para los 21 genotipos de cacao bajo estudio. 49 3 Análisis de Componentes Principales para las variables organolépticas en función de los diferentes genotipos considerados en el estudio. 50 4 Sabores básicos de los tres grupos de cacao estudiados, INIAP, Pichilingue 2006. 51 5 Sabores específicos de tres grupos de cacao estudiados, INIAP, Pichilingue 2006. 51 INDICE DE APENDICE CUADRO PÁGINA 1 Cuadrados medios del análisis de varianza de las variables asociadas con la fermentación de las almendras provenientes de los árboles con perfiles de interés comercial, EET – Pichilingue, 2006. 71 2 Cuadrados medios del análisis de varianza paralas características físicas de las almendras de cacao provenientes de los árboles con perfiles de interés comercial, EET – Pichilingue, 2006. 72 3 Cuadrados medios del análisis de varianza para el pH al inicio, fin fermentación y final del secado en la testa y cotiledón en muestras de almendras provenientes de los árboles con perfil de interés comercial, EET – Pichilingue, 2006. 73 4 Registro promedio de los datos obtenidos de las variables organolépticas y valores jerárquicos obtenidos en 21 árboles de cacao con perfiles de interés comercial, EET – Pichilingue, 2006. 74 5 Valores obtenidos de los perfiles de sabores básicos, específicos y adquiridos en licores de cacao de la primera repetición de las almendras provenientes de árboles con perfiles de interés comercial, Laboratorio de 75 2 Calidad Integral de Cacao, EETPichilingue, 2006. 6 Valores obtenidos de los perfiles de sabores básicos, específicos y adquiridos en licores de cacao de la segunda repetición de las almendras provenientes de árboles con perfiles de interés comercial, Laboratorio de la NestleEcuador 2006. 76 7 Valores obtenidos de los perfiles de sabores básicos, específicos y adquiridos en los licores de cacao de la tercera repetición de los árboles y clones que participan en el estudio, Compañía ORECAO S.A. 2006. 77 8 Formato utilizado para recopilación de datos pertinentes a los perfiles sensoriales de los 21 genotipos de cacao evaluados. 79 FIGURA PAGINA 1 Distribución de perfiles de sabores en la lengua. 78 2 Promedios diarios de temperatura de la masa de cacao y del ambiente durante el proceso de fermentación de las muestras de almendras provenientes de los árboles seleccionados para el estudio, EET – Pichilingue, 2006. 80 3 Micro fermentación de muestras de almendras provenientes de los árboles con perfiles de interés comercial, EET – Pichilingue, 2006. 81 4 Secado natural de muestras de almendras fermentadas provenientes de los árboles con perfiles de interés comercial, EET – Pichilingue, 2005. 81 5 Licores de cacao para degustaciones 82 6 Degustación de muestras de licor de cacao para construir perfiles sensoriales. 82 3 I. INTRODUCCION El Ecuador se ha caracterizado por producir un cacao fino de aroma. El mercado actual para este tipo de cacao representa un pequeño pero exigente segmento del comercio mundial, el cual enfrenta un nivel de inseguridad e inestabilidad ya que los manufactureros progresivamente usan cacaos de baja calidad para producciones masivas de sus chocolates estandarizados. Los cacaos finos alguna vez representaron el 80 % de la producción mundial, pero hoy son únicamente el 4 %, y son producidos en relativamente pequeñas cantidades en: Ecuador, Venezuela, Papua Nueva Guinea, Jamaica, Granada y Trinidad y Tobago. El 96 % es producido en África, Asia y Latinoamérica y se conocen como cacaos ordinarios o básicos, (REPEC S.A., 2004). La producción de plantas de cacao con perfiles organolépticos especiales es hoy en día, una oportunidad que podrían aprovechar los productores ecuatorianos para diversificar o reorientar sus plantaciones a fin de consolidar nichos de mercado. Desde hace algún tiempo El Programa Nacional de Cacao y Café de la Estación Experimental Tropical Pichilingue del Instituto Nacional Autónomo de Investigaciones Agropecuarias (INIAP), realiza trabajos de mejoramiento orientados a la búsqueda de nuevos cultivares de cacao, con buena productividad, tolerancia a enfermedades y que posean perfiles sensoriales especiales. Las características físicas y organolépticas del cacao son puntos importantes en la selección de nuevos clones de cacao para determinar su utilidad y obtener 4 ganancias genéticas mediante procesos de mejoramientos e identificar cultivares que posean atributos especiales. La comercialización de la almendra de cacao se realiza con base en la calificación física de los granos, la que incluye la prueba de corte, utilizada a nivel mundial para evaluar el grado de fermentación del cacao; Sin embargo, esta prueba se basa en la observación del color interno del grano de cacao, lo que la convierte en un análisis físico cualitativo sumamente subjetivo, (Calderón, 2002), por lo que es importante realizar a mas de la calificación física el análisis sensoriales para determinar las características organolépticas de dicho producto. La evaluación sensorial de licores de cacao permita realizar conclusiones sobre el nivel de fermentación y la calidad organoléptica del producto obtenido. Sus resultados introducen elementos de transparencia en la fase de comercialización del cacao en grano a nivel nacional e internacional ofreciendo referencias para la toma de decisiones. Como resultado de un estudio para explorar la variabilidad genética de una población, compuesta por un grupo de progenies antiguas disponibles en la EET Pichilingue, se seleccionaron 15 árboles de cacao tomando como base sus atributos productivos y sanitarios, (Agama, 2005). Se creó entonces la necesidad de generar información sobre sus características organolépticas para lograr una mejor valoración a estas selecciones, en relación a su utilidad para el desarrollo de nuevos cultivares con potencial comercial, y perfiles organolépticos balanceados (bajos en acidez, amargor y astringencia) que podrían ser de interés para la industria de chocolates. 5 Esta información permitirá avanzar en el desarrollo de nuevas variedades para el sector cacaotero, en un ambiente de mercado presionado por estándares más altos de calidad, entre ellos perfiles específicos de sabor que vayan a fortalecer las estrategias de diferenciación de la industria internacional del chocolate. A. Objetivos 1. General Seleccionar árboles de cacao que combinen atributos productivos, sanitarios y organolépticos para ser incluidos en futuras pruebas de evaluación multilocal en las principales zonas cacaoteras del Ecuador. 2. Específicos ♦ Establecer la variabilidad del comportamiento físico y organoléptico de un grupo de árboles de cacao, caracterizados por su alta productividad. ♦ Identificar aquellos árboles con perfiles organolépticos más balanceados. B. Hipótesis La variabilidad de los perfiles organolépticos de los árboles de cacao cabeza de clon permite la selección de individuos con perfiles sensoriales de interés comercial. 6 II. REVISION DE LITERATURA A. Calidad del cacao El término “calidad” es quizás una de las palabras más utilizadas desde hace algunos años. En efecto, la calidad se ha convertido en un tema de actualidad y forma parte en este momento de las preocupaciones de un número cada vez más elevado de personas, sociedades y organismos diversos (Pons y Sivardiere, 2002). Amores (2004), define la calidad como el conjunto de las propiedades y características de un producto o servicio que le confiere la aptitud para satisfacer necesidades declaradas e implícitas de los usuarios. La calidad puede considerarse una característica compleja de los alimentos que determina su valor o aceptabilidad para los consumidores (FAO, 2000). Armijos (2002), Calderón (2002) y Graziani (2003), coinciden en indicar que la calidad del cacao es uno de los aspectos de mayor importancia en el proceso productivo cacaotero y el nivel que se logre conseguir de la misma, determinará la mayor o menor demanda que tenga en el mercadoel producto final del proceso agrícola, esto es el cacao en grano. La calidad del cacao depende de las exigencias de cada mercado y del fin a que se lo destine (Graziani, 2003), siendo el cacao la materia prima del chocolate, la calidad comprende las características físicas que se refiere al tamaño y presentación 7 de las almendras y las características organolépticas (sabor y aroma) que posea una determinada muestra de cacao, que asegure su fabricación (Cros, et al, 1994). Gutiérrez (2000), menciona que la calidad del cacao, involucra también las características químicas de las almendras fermentadas y secas, en el cuadro 1, se observa la composición química de almendras secas no fermentadas. Cuadro 1. Porcentaje de los componentes químicos de almendras secas sin fermentar. Componentes Porcentaje Agua 3,65 Materia grasa 53,05 Nitrógeno total 2,28 Proteínas 1,50 Teobromina 1,71 Cafeína 0,08 Glucosa 0,30 Mucílago 0,38 Taninos 7,54 Ácido acético libre 0,01 Ácido oxálico 0,29 1. Calidad física del grano La calidad física se basa principalmente en la presentación exterior del grano, que no necesariamente coincide con un buen sabor y aroma a chocolate (Moreira, 1994). Por su parte Enríquez (1995) y Pastorelly (1992), relacionan la calidad del grano con la calificación que dan los países compradores y fabricantes de chocolate a las almendras de cacao por su apariencia, grado de fermentación, humedad, materiales extraños, mohos, insectos, entre otros. 8 Enríquez (1966) y Moreira (1994), indican que para el mercado del cacao es requisito indispensable que las almendras pesen mínimo 1,2 g de cada una de ellas, Quiroz (1990), al referirse al peso de la almendra o índice de semilla, menciona que este es más alto en la época de verano, ya que dicho índice esta influenciado por el ambiente y la conformación genética de los progenitores. Los trabajos realizados por Alvarado y Bullard (1961), López (1984) y Reyes, Vivas y Romero (2004), mencionan que el contenido de testa varía de acuerdo con el genotipo del cacao, desde 6 hasta 16 % y que además guarda una relación inversamente proporcional con su tamaño. Pinto y Álvarez (2001) y Calderón (2002), señalan que el porcentaje de fermentación se lo determina mediante la “prueba de corte” utilizada a nivel mundial para evaluar el grado de fermentación del cacao. Moreno y Sánchez (1989) y Stevenson, Corven y Villanueva (1993), manifiestan que para determinar el grado de fermentación mediante la “prueba de corte” esta debe realizarse no más de treinta días después del secado, para evitar la oxidación de las almendras. Ramos, Ramos y Azócar, (2000) y Jiménez (2003), determinan que el grado de fermentación se clasifica dentro de las siguientes categorías: ♦ Almendras de color marrón o café, poseen una fermentación muy completa, los ácidos han matado al embrión y a las vacuolas de pigmentación, estás almendras son muy hinchadas y se separan fácilmente del cotiledón. La calidad del sabor y aroma del grano es óptimo para elaborar chocolates gourmet. 9 ♦ Almendras marrón o violeta, indican una fermentación parcial, los ácidos no han penetrado y una proporción de vacuolas se encuentran intactas, los cotiledones están poco compactos y la testa algo suelta. La calidad del sabor es regular pero aprovechable para producir chocolate. ♦ Almendras violetas, son el producto de una fermentación incompleta, por ello aparecen ácidos procedentes de la pulpa. Las almendras no están hinchadas y la apariencia interna es compacta, desarrollan un sabor astringente y acido. ♦ Almendras pizarrosas (de color gris), presentan un aspecto compacto de color gris negrusco, lo cual indica ningún efecto de fermentación, por lo que desarrollan sabores amargos y astringentes. 2. Calidad organoléptica del grano Un punto dominante en la calificación del cacao de exportación se basa en la características organoléptica (sabor y aroma), tales como el amargor y la astringencia, que están intrínsecas en las almendras de cacao, requisito fundamental para la elaboración de chocolates finos (Armijos, 2002) y (Calderón, 2002). Graziani (2003), expresa que el cacao debe desarrollar el aroma y el característico sabor “arriba”, para que sea calificado como de primera calidad. Estas cualidades se desarrollan solamente cuando las almendras, debidamente fermentadas y secadas son tostadas, (Moreira, 1994). 10 Navarrete (1992), Moreira (1994), y Pérez (1999), coinciden y resumen las cualidades organolépticas que deben reunir los granos de cacao que son deseados por los fabricantes para procesar un producto de buena calidad, siendo estas las siguientes: 1) capacidad para desarrollar un buen chocolate, aroma (a cacao), y 2) libres de sabores secundarios especialmente humo, moho y acidez excesiva. Romero (2004), menciona que los fabricantes de chocolate realizan pruebas complejas para determinar las cualidades organolépticas del grano. En los cacaos finos, tratan de encontrar delicados matices de sabor y en los básicos se preocupan más de que no tengan sabores extraños. Además, describe que los peores defectos que se pueden encontrar en los licores de cacao son el sabor a humo, ocasionado por el secado artificial del cacao y el olor a jamón ahumado ocasionado por una sobre fermentación. Para el fabricante, la evaluación sensorial es la única prueba confiable para determinar si puede utilizar determinado cacao para sus productos. Esta prueba permite medir, analizar e interpretar reacciones de las características de los alimentos, los cuales son percibidos por los sentidos de la vista, olfato y gusto es decir sabor y aroma (Jiménez, 2003). a. Sabor y aroma Voltz (1990), Ramos, Ramos y Azócar (2000) y Jiménez (2003), coinciden que el sabor es una sensación que se percibe en las papilas gustativas de la lengua y en la pared de la boca que son estimuladas por ciertas sustancias solubles y permiten 11 encontrar en cada producto los sabores básicos como son: dulce, salado, astringente, ácido y amargo. Estos mismos autores, manifiestan que los sabores más frecuentes que se pueden encontrar en una degustación en licores de cacao, son los siguientes: 1) Sabores básicos ♦ Acidez, se la describe como un sabor ácido, debido a la presencia de ácidos volátiles y no volátiles y se la percibe a los lados y al centro de la lengua, se lo puede relacionar con las frutas cítricas y vinagre. ♦ Amargor, sabor fuerte, generalmente debido a la falta de fermentación. Se percibe en la parte posterior del paladar o en la garganta, se lo relaciona con el café, cerveza caliente y la toronja. ♦ Astringencia, más que un sabor es una sensación que causa una contracción de la superficie de las mucosas de la boca, dejando una sensación seca y áspera en la lengua, además produce salivación generalmente debido a la falta de fermentación y se percibe en toda la boca, lengua, garganta y hasta en los dientes. La referencia es cacao no fermentado, inicialmente se percibe un sabor floral pero después es amargo, parecido a al sabor de las hojas de plátano. ♦ Dulce, este sabor es percibido en la punta de la lengua. ♦ Salado, se percibe a los lados de la lengua y produce salivación. 12 2) Sabores específicos ♦ Cacao, describe el sabor típico a granos de cacao bien fermentados, tostados y libre de defectos. Referencia barras de chocolate de cacao fermentado ♦ Floral, son aquellos licores consabor y aroma a flores, casi perfumado. Referencia flores de cítricos. ♦ Frutal, caracterizan licores con sabor a fruta madura. Esto describe una nota de aroma a dulce agradable. Referencia cualquier fruta seca o cacao fresco almacenado. ♦ Nuez, se describe como un sabor similar a la nuez, característico de los cacaos tipo Criollos y Trinitarios. 3) Sabores adquiridos ♦ Moho, describe licores con sabor mohoso, generalmente debido a una sobre fermentación de las almendras o a un incorrecto secado. Referencia sabor a pan viejo o musgo. ♦ Crudo/verde, se presenta con aroma desagradable, generalmente debido a la falta de fermentación o falta de tostado. Numerosas investigaciones han determinado la importancia de los compuestos involucrados en la formación del aroma del cacao y por ende el 13 desarrollo de los precursores del sabor a chocolate. En ese sentido; los compuestos volátiles como las pirazinas y los aldehídos representan un sabor básico, los esteres que originan un sabor a fruta. Así mismo el grado de astringencia del chocolate, esta determinado por los compuestos polifenólicos y el amargor por las purinas (cafeína y teobromina), el complejo polipéptidosfenoles y pirazinas, intervienen en el sabor a dulce y nuez (Jeanjean, 1995). Saltos (2005), menciona que el sabor “arriba” del cacao Nacional es muy particular y diferente, se lo describe como sabor floral, fuerte, con matices de astringencia, sabor a leguminosas verdes, flores de cítricos, una sensación de frescura que invade la boca y desaparece rápidamente. La calidad aromática de un chocolate está relacionada con el origen de las almendras, con la fermentación y secado y con el tostado (Cros, 2004 a). El aroma del cacao incluye varias fracciones determinadas en los granos frescos: una fracción constitutiva (presente en la almendra fresca), de una fracción desarrollada durante la fermentación y secado y por ultimo por una fracción formada durante el tostado (Cros, 1997). Según Braudeau (1970), el aroma a chocolate se forma desde el momento en que ocurre la muerte del embrión, al tiempo que se producen la rápida destrucción de las antocianinas, proporcionándole a las almendras de cacao el sabor y aroma característico del chocolate. 14 Es importante señalar que ni las células con pigmentos, ni las células de reserva de los cotiledones de las almendras frescas contienen alguna sustancia que darán el aroma a chocolate, por lo tanto, las almendras no fermentadas son incapaces de producir un aroma tal, incluso después del tostado, lo cual confirma que las sustancias aromáticas del cacao únicamente se crean durante el proceso de fermentación Braudeau (1970). b. Torrefacción o tostado El tostado del cacao se lleva a cabo con el propósito de facilitar la eliminación de la cascarilla y para que los precursores del sabor (azúcares, aminoácidos, y otros que se forman durante la fermentación) se combinen y produzcan los olores y sensaciones típicas del sabor a chocolate y otras notas sensoriales como: sabor floral, frutal y nuez, dependiendo del tipo de cacao (Amores, 2004). El proceso de tostado contribuye a desarrollar el aroma característico del cacao. En esta etapa son importantes, el control del tiempo y de la temperatura de tostado (Álvarez, Pinto y Pérez, 2001). Altas temperaturas y largo tiempo de tostado eliminan las especificidades aromáticas de los cacaos finos de aroma y favorecen primero al desarrollo de un aroma térmico y luego a un sabor a quemado (Cros, 2004 b). El tamaño de las almendras también tienen que ver con el proceso de tostado o torrefacción. A una determinada temperatura y tiempo de fermentación, si las 15 almendras son muy pequeñas usualmente corren el riesgo de sobre tostarse mientras que las almendras grandes se pueden tostar solo parcialmente, esto afectará la calidad del licor y de los chocolates que a partir de ellos se fabriquen (Amores, 2004). B. Principales factores que afectan la calidad 1. Genética La variabilidad genética en cacao tiene gran influencia en las características de las almendras de cacao, el sabor, color, tamaño de la almendra, contenido de manteca y sobretodo, aroma que pueda desprender después de la torrefacción (Braudeau, 1970 y Moreno y Sánchez, 1989). Un cacao de determinado origen genético presenta propiedades organolépticas muy características (Moreira, 1994). Así se pueden identificar dos tipos de granos de cacao: cacao común, proveniente de árboles Amazónicos, ubicados bajo la denominación de Forasteros, y el cacao fino que proviene de árboles Criollos (Calderón, 2002). Los cacaos comunes, Forasteros, son semejantes en cuanto a que poseen un sabor a chocolate muy fuerte. Los árboles son de tipo similar entre sí, pero hay diferencias en la forma en que los productores procesan el grano, lo cual aumenta las diferencias en el sabor y en algunos casos esto es la causa de malos sabores; mientras que, los cacaos finos o del tipo criollo son de varios tipos y cada uno tiene sus propias características de sabor (Liendo, 2003). 16 El sabor potencial del cacao fino es debido básicamente a la variabilidad genética de los árboles que lo producen; sin embargo, el desarrollo del sabor y aroma a chocolate dependen del correcto proceso de fermentación y secado (Graziani, 2003). Por otra parte, Cubero et al, (1993) y Clapperton citado por Cros (2004 a), concluyen que los cacaos de tipo Forasteros son generalmente menos amargos y menos astringentes que los Trinitarios. Los grupos Nacionales poseen características distintivas que los diferencian de los otros tipos de cacao, como en calidad y aroma, (Hardy, 1961 y Vera Suárez y Moreira, 1993). Según Amores (2004), la variedad Nacional posee en sus cromosomas genes que favorecen al sabor floral. Hay otros que favorecen un buen nivel de sabor a cacao como en la variedad CCN51. Finalmente (Liendo, 2003) indica que la genética del grupo de los cacaos Criollos tiende a producir un bajo sabor a cacao pero favorece un alto nivel de notas de sabor a nuez. En el caso del Ecuador, el material genético natural lo constituyó el cacao llamado Nacional, que desafortunadamente va desapareciendo para dar paso a otros genotipos o variedades con alta productividad y resistentes a enfermedades, pero de un sabor diferente y sin aroma, que es lo que ha caracterizado al cacao Nacional a través de los años y lo que le ha dado la fama entre todos los manufactureros de chocolate especial, finos con aroma (Quiroz, 2004). 17 Sin embargo, una gran cantidad de la producción es una mezcla o híbrido que se formó naturalmente a inicios del siglo XX, (Enríquez, 1985). Por su parte (Quiroz y Soria, 1994), mencionan que estos cacaos híbridos han conservado parcial o totalmente el sabor arriba y el aroma de nuestro cacao Nacional. 2. Ambiente Ciertas características de las almendras de cacao se ven afectadas por el ambiente durante el desarrollo de la mazorca. La deficiencia de agua y nutrientes en el suelo reduce el tamaño de las mazorcas y las almendras (Moreira, 1994). El cacao especialmente tipo Nacional, en época lluviosa es cuando presenta mejor sabor, ya que debido a los grandes volúmenes existentes se puede realizar una mejor fermentación (Chatt citado por Semiglia, 1979). Amores (2004), manifiesta que la variedad Nacional cultivada en el Ecuador tiene diferente comportamientoorganoléptico cuando se cultiva en otros países con ambientes diferentes. Inclusive dentro del Ecuador se discute la hipótesis de que el cacao Nacional creciendo en los suelos a lo largo de los ríos, es más productivo y posiblemente tenga notas de sabor floral más intensa. 3. Manejo postcosecha El manejo postcosecha o beneficio constituye parte fundamental y decisiva para obtener una buena calidad del grano y permitir su correcta comercialización. El precio del producto y la rentabilidad del cultivo se incrementan con un buen 18 beneficio (siempre y cuando haya incentivos para producir calidad), labor que representa entre el 15 y el 20 % de los costos directos de producción. El beneficio adecuado desarrolla en las almendras los principios fundamentales del sabor y aroma inconfundibles del cacao, lo que determina en gran medida su condición de finos y aromáticos, es decir la calidad del producto final (FUNDACITE, 2000). Reyes, Vivas y Romero (2000), definen al beneficio como el conjunto de prácticas interrelacionadas que tienen que ver con la transformación biológica que deben sufrir las almendras una vez cosechadas y que permiten la expresión de su potencial organoléptico. Sólo así serán aceptadas y valoradas por los procesadores de la industria chocolatera. El beneficio comprende: cosecha, fermentación, secado y almacenamiento. a. Cosecha Para la cosecha se debe hacer la identificación de las mazorcas maduras de cacao. Estas se identifican por los cambios de coloración externa, que varia dependiendo del tipo o variedad. La cosecha consiste en la recolección de mazorcas maduras y sanas. Usualmente se realiza con intervalos de 15 días para obtener un producto uniforme (Enríquez, 1995), aunque en periodos con poca producción, la recolección puede ser mensual. b. Fermentación En este proceso, ocurren cambios bioquímicos que permiten en las almendras el desarrollo de los precursores del sabor y aroma. Los factores de calidad, 19 determinados por la fermentación son los más importantes, ya que generalmente el chocolate preparado de cacao sin fermentar no posee el sabor y aroma del verdadero chocolate (Moreno y Sánchez, 1989). Con una buena fermentación las almendras desarrollan el aroma y sabor a chocolate. El cacao mal fermentado aunque sea tipo Nacional jamás podrá desarrollar su propio sabor, llegando a tener una clasificación de baja calidad, (Moreira, 1994 y Cros, 2004 b). En la etapa de fermentación conocida también como “cura” o “preparación”, el cacao obtiene la calidad necesaria para la producción del chocolate (Armijos, 2002). Durante este proceso los azúcares de la pulpa, debido a microorganismos (levaduras y bacterias), y reacciones bioquímicas de oxidación forman ácidos que penetran en el cotiledón, produciéndose la muerte del embrión y la sucesiva formación de precursores del aroma del cacao. Moreno y Sánchez (1989), Reyes, Vivas y Romero (2000), Ramos (2004) y Portillo, Graziani y Cros (2006), coinciden en que la fermentación involucra dos fenómenos distintos pero no independientes: Una fermentación microbiana que contribuye a la eliminación de la pulpa mucilaginosa presente en las almendras; y otra que induce a un conjunto de reacciones bioquímicas internas en los cotiledones, que conducen a la modificación de la composición química de las almendras y en particular a la formación de los precursores del aroma. Estos mismos autores, expresan que estas reacciones son inducidas por elevación de la temperatura de la masa de cacao durante la fermentación y a la 20 migración del acido acético de la pulpa hacia la almendra. Estos dos fenómenos de la misma manera suprimen el poder germinativo del embrión. Por otro lado, Ramos (2004), menciona que la fermentación es la acción combinada y balanceada de temperatura, alcoholes, ácidos, pH y humedad. Este proceso disminuye el sabor amargo por la perdida de teobromina, facilita el secado y la separación de la testa de los cotiledones. Braudeau (1970), menciona que la elevación de temperatura desempeña un papel muy importante en la fermentación. Es responsable en parte de la muerte del embrión de las almendras e inicio de las reacciones enzimáticas en los tejidos de los cotiledones. Ramírez (1988), como resultado de sus investigaciones, encontró que durante la fermentación hay variación de temperatura y que es posible que la masa que se encuentra en la parte superficial sea varios grados más elevada que la masa que se encuentra en el fondo del cajón. Hardy (1961), considera que la temperatura generada en la masa de fermentación esta relacionada con la temperatura ambiente, lo cual es confirmado por Roelfser citado por el IICA (1989) al observar que las bajas temperaturas ambientales, impiden el aumento de la temperatura durante la fermentación. Hernández (1991), indica que la pulpa fresca tiene un pH de 3,4 a 4,6. En la misma etapa el pH de los cotiledones es de 6,6. Debido a que la testa es permeable al acido acético, este pasa al interior del cotiledón y al tercer día mata el 21 embrión y baja el pH a 4,8 durante el resto de la fermentación y secado el pH sube y por lo general es de 5,5 en los granos secos, (Wood, 1982). El pH óptimo para un cacao de calidad debe encontrarse en un rango de de 5,1 a 5,4 cualquier cacao con un pH menor a 5,0 indica presencia de ácidos no volátiles indeseables que dan al producto aromas desagradables, que perjudican a la producción del chocolate, (Armijos, 2002). La masa de almendras se voltea para homogenizar la fermentación. La falta de remoción o su ejecución defectuosa, hace que una gran proporción de la masa de cacao se quede sin fermentar. El volteo debe realizarse a las 24 horas en el caso del cacao Criollo y cada dos días, en el caso de Forasteros y Trinitarios, evitando así la proliferación de mohos y la desecación de las almendras que se encuentran en la superficie. La remoción diaria permite un incremento más rápido de la temperatura; y por lo tanto una fermentación más homogénea y de menor duración (Saltos, Sánchez y Anzules, 2006). Para la Compañía Nacional de Chocolates de Colombia (1988), las mejores condiciones de una buena fermentación se consiguen bajo una aireación y humedad apropiada. El tiempo es un factor principal que determina el buen éxito de este proceso; cuanto más rápido se produzca la muerte de los embriones, más rápidamente tendrán lugar las reacciones enzimáticas capaces de producir las transformaciones bioquímicas que conducen a los precursores del sabor. 22 El tiempo de fermentación que se debe dar a las almendras tiene relación con el grupo genético al que pertenece el cacao, la variedad genética superior (Criollos) necesita menos tiempo para fermentar que los Forasteros; porque el mayor contenido de azúcar en el mucílago del Criollo acelera el proceso. Por esta razón el cacao Criollo, se fermenta generalmente en tres días (Compañía Nacional de Chocolates de Colombia, 1988). Los llamados comúnmente Forasteros, se fermentan de cuatro a cinco días; mientras que, los Trinitarios necesitan seis días o más (Moreno y Sánchez, 1989). Navarrete (1992), recomienda que para fermentar cacao de ascendencia Nacional se necesitan 3 días. Coello citado por Pastorelly (1992), indica que en el Ecuador el 64 % de los agricultores efectúan la fermentación de 1 a 3 días, el 3 % lo hace de 4 a 5 días, mientras quelos restantes no realizan dicha práctica. c. Métodos de fermentación Existen un sinnúmero de formas y recipientes para fermentar una masa de cacao. Rohan (1960) y Enríquez (1995), indican que, el método más utilizado por los pequeños agricultores es el de “montón” y consiste en amontonar las almendras de cacao sobre una mesa de madera o sobre hojas de plátano o bijao de manera que el jugo que sale del mucílago pueda escurrirse fácilmente. Luego el montón se cubre con hojas de plátano para que produzcan calor. (Rincón, 1999), informa que los montones se voltean periódicamente, con una frecuencia que depende en parte, del tamaño del montón y de la variedad de cacao sometida al proceso de fermentación. 23 Otro método utilizado por los agricultores es el de “sacos”. El agricultor llena los sacos con el cacao fresco y los cuelga para que se escurra y se fermenten las almendras. También acostumbran a dejar los sacos amontonados en el piso para iniciar el proceso de fermentación (Moreno y Sánchez, 1989). En cambio Liendo (2004) y Santizo y Orellana (1989), aseguran que el método en “cajas” es el más ventajoso cuando se dispone de grandes cantidades de cacao. Este método consiste en colocar las almendras de cacao recién extraídas de las mazorcas en cajas de madera y luego taparlas con hojas de plátano o sacos de yute para elevar la temperatura de la masa y ocurra el proceso de fermentación (Braudeau, 1970). El tamaño de la caja depende de la cantidad de cacao que puede obtener el agricultor. Generalmente las cajas son de madera y deben tener orificios o ranuras para permitir el drenaje de los jugos (Saltos, 2005). Otro sistema de fermentación dirigido especialmente a pruebas de clones en proceso de investigación es el de “microfermentaciones”. Consiste en recolectar una muestra de 1,5 a 4,0 kg de almendras de cacao y luego colocarlas en pequeños sacos. Las almendras deben estar regadas en todo el saco para que se produzca la transformación de los azúcares y también facilitar las remociones. Los pequeños sacos se ubican en la tercera parte del cajón de una masa considerable, ya que es allí donde se acumula la mayor parte de temperatura (Jiménez, 2003). El cacao que se utiliza como masa es recomendable que sea del mismo tipo genético para que no exista interferencias al realizar las remociones y no pueda influenciar con el aroma cuando se produzcan las reacciones y 24 transformaciones de los azúcares y ácidos que se desarrollan durante la fermentación (Braudeau, 1970). d. Secado El objetivo primordial del secado es que el cacao termine de desarrollar el sabor a chocolate que inició durante la fermentación (Enríquez, 1993). Si el secado no se hace en forma adecuada, de nada sirve que se haya realizado una fermentación, ya que la muestra no llegará a tener el sabor deseado (Rincón, 1999). Según Rincón (1999), el secado tiene por objeto eliminar el exceso de humedad y acidez de las almendras recién fermentadas de aproximadamente 55 % al 7 %, como garantía para su posterior almacenaje y comercialización. El proceso de secado debe hacerse en forma lenta y gradual, empezando por pocas horas de exposición al sol durante los primeros días y aumentar progresivamente hasta la plena exposición en los últimos días (Jiménez, 2000). Con el secado violento, no se logra un secado uniforme y se interrumpe la hidrólisis enzimática de las antocianinas generando almendras púrpuras que le confieren un sabor astringente, a la vez se endurece rápidamente la testa o cascarilla la cual una vez seca impide la salida o difusión de los ácidos volátiles que se concentran en la almendra generando almendras ácidas (Ramos, 2004). Este mismo autor considera también que durante el secado ciertas reacciones de formación del aroma de chocolate finalizan y otras reacciones prosiguen para así 25 condicionar la calidad final del producto. De igual manera Enríquez (1995), argumenta que durante este proceso cambian los colores de las almendras, apareciendo el color marrón o pardo, típico del cacao fermentado y secado correctamente. Braudeau (1970), expresa que el secado puede realizarse en forma natural aprovechando el calor producido por los rayos solares y requiere de 8 a 10 días según las condiciones climáticas. Ramos, Ramos y Azócar (2000), indican que este sistema es el más recomendable porque al secar lentamente las almendras, estas desarrollan satisfactoriamente los cambios para lograr un buen sabor. Generalmente se utilizan tendales para este método, siendo los más comunes los de madera y los de bambú, aunque hay también de cemento y otros materiales (Rincón, 1999). e. Almacenamiento Es indispensable antes de cualquier almacenamiento asegurarse de que el cacao esté totalmente seco y que retenga una humedad inferior al 8 % (Moreno y Sánchez, 1989). Los mencionados autores consideran que las almendras deben conservarse en lugares ventilados, libres de humedad y sin ningún tipo de contaminación. Además deben tener una temperatura y humedad adecuadas, para que el material no adquiera humedad durante su almacenaje. Los sacos con almendras de cacao deben ser almacenadas en compartimientos o estantes que estén por encima del suelo con un mínimo de 10 cm. de circulación del aire entre ellos y al granel, en silos adecuados, para una mayor garantía de la 26 calidad del producto (Ramos, 2004). Si estos requisitos no son bien controlados, las almendras de cacao pueden adquirir olores indeseables y contaminarse con materiales extraños. Además, pueden adquirir humedad que también deteriorará rápidamente la calidad del cacao (Rincón, 1999). Urquhart (1963), manifiesta que el cacao absorbe fácilmente sabores y aromas. Para lo cual durante su almacenamiento, debe mantenerse separado de otros productos cuyo sabor podría absorber fácilmente. Si el piso donde se va a almacenar el cacao es de concreto, debe usarse una tarima de madera de 6 pies de espesor para aislarlo del piso. C. Clasificación comercial del grano El cacao, como producto de alto valor alimenticio y de otros usos para la humanidad, debe reunir algunos requisitos especiales para su consumo. Existen varios mercados para el cacao, con precios diferentes, según su origen y la presentación del producto. (Moreno y Sánchez, 1989). Existen dos tipos de cacao en el mercado calificándolos como: I) cacao corriente u ordinario que representa el 95 % de la producción anual. La mayor producción de este tipo de cacao viene del África y Brasil; este cacao se destina en gran parte para la producción de manteca y II) cacaos finos que tienen sabores y aromas distintivos representan el 5 % de la producción mundial. Se utilizan en la elaboración de chocolates negros o chocolates tipo gourmet porque le confieren a los productos características de aroma y sabor especiales. Los genotipos Nacional del 27 Ecuador, Criollos de Venezuela y Trinitarios de Trinidad y Tobago, son representativos de los cacaos finos (Calderón, 2002, Graziani, 2003 y Amores, 2004). Rincón (1999) y Moreira (1994), indican que a nivel mundial existen normas de comercialización del cacao. Según la FAO (2000), los requisitos o cualidades relacionadas con algunas características físicas que deberán reunir los granos de cacao se presentan en el cuadro 2. Cuadro 2. Requisitos y patrones de calidad física del cacao en granoRequisitos Unidad ASSPS* ASSS* ASS* ASNS* ASN* ASES* ASE** Peso de 100 almendras g 135140 130135 120115 120125 110115 120125 105110 Buena fermentación % 75 65 60 50 42 35 20 Mediana fermentación % 10 10 5 10 10 15 15 Total fermentación % 85 75 65 60 52 50 35 Violeta máximo % 10 15 20 25 25 30 25 Pizarra % 5 9 12 13 18 18 30 Defectos insectos moho % 0 1 3 2 5 2 10 Los porcentajes indicados son aproximados *ASSPS = Arriba Superior Summer Plantación Selecta. *ASSS = Arriba Superior Summer Selecto. *ASS = Arriba Superior Selecto *ASNS = Arriba Selección Navidad Selecto *ASN = Arriba Selección Navidad *ASES = Arriba Superior Época Selecta *ASE = Arriba Superior Época ** La granza, se le permite para el tipo ASE, el porcentaje máximo será de 2% 28 III. MATERIALES Y METODOS A. Localización y condiciones climáticas del área de estudio La presente investigación se realizó desde enero del 2004 hasta abril del 2006 en el "Laboratorio de Calidad Integral de Cacao" de la Estación Experimental Tropical Pichilingue (EET Pichilingue) del Instituto Nacional Autónomo de Investigaciones Agropecuarias (INIAP), localizada en el km 5 de la vía Quevedo El Empalme, provincia de Los Ríos. Situada geográficamente a 79°21’ de Longitud Occidental y 01°06’ de Latitud Sur, a 120 msnm; la cual se caracteriza por tener una temperatura promedio de 24,04 ºC; heliofanía de 898,2 horas/año; Humedad relativa de 83,3 % mensual y una precipitación de 2100 mm/año 1 B. Material genético Se evaluaron 15 árboles de cacao, provenientes de progenies obtenidas a través de cruces entre Nacional x Trinitario y Forastero Amazónico. Los árboles se seleccionaron por su productividad y estado sanitario a partir de una población de progenies existentes en el Lote “2A” de la EETPichilingue. A esta investigación se incluyeron como testigos seis genotipos de cacao, seleccionados por sus características físicas y organolépticas, los mismos que se describen en el cuadro 3. 1 Datos tomados del INAMHI, localizada en la EETPichilingue, registro promedio desde el 2004 hasta el 2006. 29 Cuadro 3. Identificación de progenies seleccionadas para el estudio. EET – Pichilingue, 2006. Tratamiento Mater ial Progenies Genotipo 1 2076 EET – 192 x EET – 237 (N)x(V.M) 2 2078 EET – 192 x EET – 237 (N)x(V.M) 3 2126 EET – 48 x EET – 195 (N)x(N) 4 2184 EET – 238 x EET – 110 (N x V.A)x(N x V.A) 5 2248 EET – 156 x EET – 166 (N x V.M)x(N x V.A) 6 2361 EET – 166 x H – 89 (N x V.A) 7 2506 EET – 313 x EET – 110 (Tr.M x Cr.V) 8 2507 EET – 313 x EET – 110 (Tr.M x Cr.M) 9 2607 EET – 252 x EET – 174 (Tr.M)x(V.M) 10 2634 EET – 1 x EET – 11 (Tr.M)x(V.M) 11 2717 EET – 1 x EET – 11 (N x V.A)x(For.A) 12 2735 EET – 280 x EET – 274 (Tr.M)x(V.M) 13 2744 EET – 280 x EET – 274 (Tr.M)x(V.M) 14 2748 Desconocido Desconocido 15 2787 Desconocido Desconocido 16 CCN – 51* (ICS 95x IMC 67) x (Canelo) (Tr. x For)x(For.) 17 EET – 103* (N x V.A) 18 EET 95* (N x V.A) 19 EET 96* (N x V.A) 20 IMC – 67* For. 21 Finca Las Brisas** Complejo N x Tr. * Testigos ** Mezcla de híbridos Simbología CCN = Colección Castro Naranjal Cr.M = Criollo Morado Cr.V = Criollo Venezolano EET = Estación Experimental Tropical Pichilingue For. = Forastero Amazonico For. A = Forastero H = No identificado ICS = Imperial College Selections IMC = Iquitos Mixed Calabacillo N = Nacional Tr. = Trinitario Tr. M = Trinitario Morado V.A. = Venezolano Amarillo V.M. = Venezolano Morado 30 C. Factores en estudio Se analizaron las características físicas y organolépticas de las almendras de cacao, en árboles productivos, previamente seleccionados por el Programa Nacional de Cacao y Café de la EETPichilingue. D. Tratamientos Se estudiaron 21 árboles de cacao indicados en el cuadro 3, provenientes de 15 cruces entre cacao Nacional x Trinitario, y Nacional x Forastero Amazónico; incluyendo cinco clones comerciales usados como testigos y un híbrido Nacional plantado en la finca "Las Brisas". E. Variables y métodos aplicados en el estudio 1. Variables físicas a. Porcentaje de fermentación El porcentaje de fermentación se determinó en almendras secas, utilizando la "prueba de corte", propuesta por Moreno y Sánchez (1989) y Stevenson, Corven y Villanueva (1993), la cual consiste en partir longitudinalmente 100 almendras tomadas al azar por cada muestra; que se colocaron sobre una base de color blanco, calificándolas de acuerdo a las características internas mencionadas a continuación: 31 ü Almendras bien fermentadas. Cuyos cotiledones presentaron una coloración marrón o marrón rojiza. ü Almendras medianamente fermentadas. Se identificaron aquellas, cuyos cotiledones presentaron una coloración medianamente marrón. ü Almendras violetas. Estuvo definido por el porcentaje de granos cuyos cotiledones presentaron una coloración violeta intenso. ü Almendras pizarras. Se consideraron aquellas, cuyos cotiledones presentaron un color gris negruzco y de aspecto compacto. ü Total fermentación. el porcentaje de fermentación total se obtuvo sumando los porcentajes de almendras bien fermentadas y medianamente fermentadas. b. Peso de 100 almendras Esta variable se determinó en base al peso de 100 almendras fermentadas y secas, tomadas al azar y expresado en gramos, para lo cual se utilizó una balanza de precisión marca “THOMAS SCIENTIFIC”. c. Número de almendras en 100 gramos Para el registro del número de almendras en 100 g, se tomó al azar un grupo de almendras fermentadas y secas; las mismas que fueron pesadas en una balanza de precisión para registrar esta variable. 32 d. Porcentaje de testa El porcentaje de testa, se obtuvo en base al peso de un grupo de 10 almendras fermentadas y secas, obteniendo su porcentaje mediante la utilización de la siguiente formula: (Peso de la testa) x (100) % de testa = Peso de 10 almendras e. Determinación del pH en la testa y cotiledón El valor del pH de la testa y del cotiledón se registró en 10 almendras de cacao. Primero se separó la testa del cotiledón; posteriormente el cotiledón como la testa, individualmente fueron triturados usando una licuadora, conteniendo 100 ml de agua destilada por un lapso de 2 a 3 minutos y con la ayuda de un potenciómetro se procedió a realizar la lectura del pH. Esta variable se registró al inicio y al final de la fermentación y después del secado. 2. Variables organolépticas Para determinar las variables organolépticas, se realizaron tres evaluaciones sensoriales, que consistieron en degustar cada una de las muestras, utilizando los sentidos del olfato y el gusto. 33 Las tres evaluaciones sensoriales fueron realizadas de la siguiente manera: La primera fue realizada por un panel de catadores, en el Laboratorio de Calidad Integral de Cacao de la EETPichilingue. La segunda fue realizada por un panel de catadores de la compañía NESTLEEcuador y la tercera fue realizada en ORECAO S.A. A continuación se describe la identificación de los sabores básicos, específicos y adquiridos, utilizados en esta investigación: a. Sabores básicos Los sabores básicos estuvieron conformados por: ♦ Acidez. Se consideraron aquellas muestras que presentaban un sabor ácido persistente; percibido a los lados y en el centro de la lengua. ♦ Amargo. Aquellas muestras que presentabanun sabor fuerte y amargo, se detectó en la parte posterior de la lengua y la garganta. ♦ Astringencia. Muestras que dejaban una sensación fuerte de sequedad en la boca; se detectó en toda la boca, lengua, garganta y hasta en los dientes. ♦ Dulce. Sabor agradable que percibió en la punta de la lengua, parecido al agua de azucarada. b. Sabores específicos Los sabores específicos se clasificaron en: 34 ♦ Cacao. Aquellas muestras que presentaban un sabor típico a chocolate. ♦ Floral. Muestras que presentaban un sabor agradable, similar al olor de las flores. ♦ Frutal. Muestras identificadas por un sabor a fruta madura, muy agradable. ♦ Nuez. Consideradas aquellas muestras que presentaban un sabor a almendra o a nuez. c. Sabores adquiridos Se identificaron sabores con defectos como: ♦ Crudo/verde. Muestras con sabor manchosocrudo. ♦ Otros. Esta variable permitió hacer notar sabores extraños que se detectaron en las muestras. En todos estos tres perfiles de sabores (básicos, específicos y adquiridos), individualmente se calificó la degustación del licor de cacao usando una escala internacional de 0 a 10 puntos, siguiendo la metodología de Braudeau (1970), donde: Escala Criterio 0 = Ausente 1 a 2 = Intensidad baja 3 a 5 = Intensidad media 6 a 8 = Intensidad alta 9 a 10 = Intensidad muy alta o fuerte 35 F. Diseño experimental y análisis estadístico Para las variables físicas realizadas en condiciones de laboratorio, se utilizó el Diseño de bloques completamente al azar (BCA), con 21 tratamientos y tres repeticiones. Las comparaciones entre medias de tratamientos fueron realizadas mediante la prueba de Tukey al 5 % de probabilidad. El esquema del ADEVA utilizado para estas variables es el siguiente: Fuente de var iación Grados de liber tad Tratamientos (t – 1) 20 Repeticiones (r – 1) 2 Error (t – 1)(r 1) 40 Total T x r – 1 62 Se realizó un análisis multivariado, asociando las variables organolépticas (sabores básicos, específicos y adquiridos), de acuerdo con la técnica de Friedman, para establecer categorías jerárquicas a través de la siguiente formula: X + 0.48 S, aplicada en la estadística no paramétrica. Además, se realizó el análisis de componentes principales (ACP) para graficar su respuesta en un Cluster (dendrograma), según (Franco e Hidalgo, 2003). G. Manejo del experimento Para la caracterización física y organoléptica de los materiales en estudio se realizaron las siguientes actividades: 36 1. Cosecha Se realizaron seis cosechas, dos de las cuales correspondieron a una repetición diferente. La recolección de las mazorcas se realizó cada 15 días, considerándose solamente frutos maduros y sanos. Cuando no se obtuvo la cantidad esperada, se completo la muestra con la siguiente cosecha. 2. Fermentación El método de fermentación utilizado fue el sistema de micro fermentación, utilizando la cantidad de cacao fresco que se cosechó de cada árbol. Esta masa fue puesta en sacos de nylon de 45 cm de largo x 25 cm de ancho. Los 21 sacos se colocaron dentro de una masa de 150 kg de almendras frescas proveniente del mismo lote de progenies a las que pertenecen los árboles estudiados. Para la fermentación se utilizó un cajón de madera de laurel (Cordia macrantha), de las siguientes medidas: 60 cm x 60 cm x 60 cm y con perforaciones en el fondo de 1 cm de diámetro, separadas 10 cm entre ellas, para facilitar el drenaje de las exudaciones de la parte mucilaginosa de las almendras frescas de cacao. El tiempo de fermentación fue de 96 horas con una remoción manual a las 48 horas de iniciado el proceso de fermentación. Los sacos de nylon fueron removidos con el fin de homogenizar la fermentación. La remoción y volteo de la masa del cajón se realizó utilizando una pala de madera colocando la masa que se encontraba en la parte superior al fondo y viceversa. 37 3. Temperatura de la masa de cacao en fermentación Para determinar las variaciones de temperatura de la masa en fermentación, esta se registró tres veces al día (08h00; 12h00 y 16h00), muestreando a 10 cm; 20 cm; y 30 cm de profundidad, utilizando para el efecto un termómetro de mercurio marca “Fisher” de cuello largo. Paralelamente, se registró la temperatura del ambiente. 4. Secado Concluido el tiempo de fermentación, se procedió al secado de las almendras en tendales de madera, con exposiciones graduales al ambiente. El primer día se colocó una capa de 3 cm aproximadamente por dos horas, el segundo día por cuatro horas y desde el tercer día durante ocho horas hasta obtener una humedad de 6 a 7 %. Las almendras fueron removidas cada hora para facilitar el secado. 5. Almacenamiento Cuando las almendras alcanzaron de 6 a 7 % de humedad, lo que se comprobó con un determinador de humedad marca “KPM Aqua – Boy”, estas fueron colocadas en sacos de tela suave, y almacenados en la bodega del Laboratorio de Calidad Integral de Cacao, hasta el momento de realizar las pruebas de corte y preparación del licor de cacao para las evaluaciones sensoriales. 38 6. Preparación del licor de cacao Se pesaron 500 g de cacao beneficiado de cada muestra, las cuales fueron sometidas a torrefacción o tostado en una estufa con circulación de aire forzado marca “MEMMERT” equilibrada para homogenizar la temperatura en el interior. Las combinaciones de temperatura y tiempo de tostado se manejaron con base a un estudio de calibración de estufa usando información proporcionada entre el Laboratorio de Calidad Integral de Cacao y la Guittard Chocolate Co. de los EE.UU. Los regímenes utilizados fueron: 115 ºC x 20 minutos para los 15 árboles seleccionados, 121 ºC x 18 minutos para los clones EET 95; EET 96; EET 103 y las muestras provenientes de la finca Las Brisas. Para el IMC – 67 y CCN – 51 se aplicó el régimen de 145 ºC x 30 minutos. Luego del tostado se separó la testa del cotiledón, para después triturar el cotiledón en un molino manual. El material obtenido de la molienda se licuó en intervalos de tiempo de 1 a 2 minutos. Durante el proceso se removió la masa de las paredes del vaso de la licuadora con la ayuda de una paleta plástica, para facilitar uniformidad del licor obtenido. El licor obtenido se colocó en un recipiente de plástico; se identificó la muestra, colocando en la etiqueta: fecha de elaboración, tipo de cacao, código de la muestra, temperatura y tiempo de tostado. Se dejó enfriar y luego se almacenó en una nevera, hasta el momento de las evaluaciones sensoriales. La figura 1 ilustra el proceso seguido para la elaboración del licor de cacao. 39 Molienda y licuado de la almendra Figura 1. Proceso para la elaboración de licor de cacao Muestra de Cacao en grano Limpieza y eliminación de cáscara Tostado Descascarillado y triturado Licor de cacao Conservación Degustación 40 7. Evaluaciones sensoriales Durante la evaluación, los licores se llevaron a una temperatura de 40 a 45 ºC. Cada catador tomó una cantidad pequeña de licor de cacao en el extremo de una paleta plástica pequeña y la colocó uniformemente sobre su lengua. El catador mantuvo la muestra en su boca por espacio de 15 a 20 segundos, determinando los atributos de cada una de ellas y registrando los resultados en un formato diseñado para el efecto (Cuadro 9 del apéndice). Las degustaciones se realizaron en forma individual y antes de continuar conla siguiente muestra, los catadores esperaron unos minutos para que se pierdan los sabores remanentes de la muestra anterior tomando agua o consumiendo galletas. Se realizó una sesión por día, evaluando en cada sesión un máximo de 5 muestras de licor de cacao. 41 IV. RESULTADOS A. Variables físicas 1. Porcentaje de fermentación La prueba de separación de medias para el porcentaje de fermentación y defectos en las diferentes muestras, permitió detectar diferencias estadísticamente significativas, (Cuadro 4). Las muestras del árbol 2634 presentó el mayor porcentaje de fermentación buena con un 53 %, diferenciándose estadísticamente del árbol 2748 que obtuvo el valor más bajo (19 %); mientras que los demás genotipos se comportaron estadísticamente iguales. En el análisis de varianza (Cuadro 1 del apéndice) para el porcentaje de fermentación media se detectó diferencias estadísticas para tratamientos al nivel del 5 %. El árbol 2748 alcanzó el nivel más alto para esta variable con un 77 %, mientras que las muestras provenientes de la Finca Las Brisas y del árbol 2184 presentaron valores más bajos con un 27 y 29 %, respectivamente. En el análisis de varianza (Cuadro 1 del apéndice) para el porcentaje de fermentación total se encontró diferencias estadísticas entre tratamientos. El promedio general de fermentación total fue de 85,10 %, con un coeficiente de variación de 11,18 por ciento. 42 Los mayores porcentajes de fermentación total correspondieron al clon IMC 67 (97 %), seguido de los árboles 2748 (96 %) y 2787 (95 %), mientras que los valores más bajos correspondieron a los árboles 2126, 2507 y 2076 con porcentajes menores al 75 por cierto. Cuadro 4. Porcentaje de fermentación y defectos en almendras provenientes de los árboles de cacao seleccionados con perfiles de interés comercial. EET – Pichilingue, 2006. Mater ial Fermentación Defectos Buena Mediana Total 1/ Violetas 1/ Pizarra Otros 2076 38 ab * 36 bc 74 ab 17 abc 0 ns 9 a 2078 32 ab 43 bc 75 ab 25 abc 0 0 b 2126 26 ab 44 bc 70 b 30 a 0 0 b 2184 50 ab 29 c 79 ab 21 abc 0 0 b 2248 33 ab 44 bc 77 ab 23 abc 0 0 b 2361 51 ab 38 bc 89 ab 10 abc 0 1 b 2506 28 ab 58 ab 86 ab 14 abc 0 0 b 2507 25 ab 48 bc 73 b 27 ab 0 0 b 2607 28 ab 49 abc 77 ab 21 abc 0 2 b 2634 53 a 40 bc 93 ab 7 abc 0 0 b 2717 30 ab 60 ab 90 ab 6 abc 0 4 ab 2735 48 ab 43 bc 91 ab 8 abc 0 1 b 2744 41 ab 49 abc 90 ab 9 abc 0 1 b 2748 19 b 77 a 96 ab 3 c 0 1 b 2787 42 ab 53 abc 95 ab 5 bc 0 0 b CCN 51 2/ 39 ab 49 abc 88 ab 12 abc 0 0 b EET 103 2/ 40 ab 50 abc 90 ab 10 abc 0 0 b EET 95 2/ 37 ab 52 abc 89 ab 11 abc 0 0 b EET 96 2/ 27 ab 62 ab 89 ab 11 abc 0 0 b IMC 67 2/ 45 ab 52 abc 97 a 3 c 0 0 b Finca Las Brisas 2/ 52 ab 27 c 79 ab 20 abc 0 1 b Promedio 37,00 47,90 85,1 14,02 0 0,33 V. Máximo 53,00 77,00 0,00 30,00 0 9,00 V. Mínimo 19,00 27,00 0,00 3,00 0 0,00 Tukey (0,05) 33,25 28,89 29,52 29,20 0 3,31 C.V. (% ) 28,69 19,35 11,18 65,96 0 639,87 S 10,84 8,53 5,50 5,44 0 1,87 * Letras iguales en la misma columna no representa diferencias estadísticas significativas, entre si según la prueba de Tukey al 5 % de probabilidad. 1/ Datos originales transformados a arco seno √x+1. 2/ Testigos 43 El análisis de varianza para el porcentaje de defectos violetas presentó diferencias estadísticas significativas. El mayor porcentaje de almendras violetas se registró en las muestras provenientes de los árboles 2126 (30 %), 2507 (27 %) y 2078 (25 %). La presencia de almendras pizarras fue nula para todos los tratamientos (Cuadro 4). Además se registraron defectos que se clasificaron como otros; donde el árbol 2076 obtuvo el valor más alto con un 9 %, seguido del árbol 2717 (4 %) y 2607 (2 %). Las muestras de los árboles 2361, 2735, 2744 y las muestras de la finca Las Brisas presentaron el 1 %, mientras que los genotipos restantes obtuvieron el 0 % para esta variable (Cuadro 4). 2. Peso de 100 almendras En el análisis de varianza (Cuadro 2 del apéndice) para esta variable, se detectó diferencias estadísticas altamente significativas (Cuadro 5). El promedio general del peso de 100 almendras fue de 110,30 g con un coeficiente de variación de 7,01 por ciento. El peso de las muestras de los 15 árboles en estudio no superaron a los clones CCN 51 (139, 59 g) y EET 95 (138,33 g), considerados como testigos quienes presentaron mayor peso de almendras. El menor peso se registraron en las muestras de los árboles 2717 (83,35 g), 2507 (88,21 g) y 2787 (90,09 g), quienes obtuvieron la menor significancia estadística. 44 Cuadro 5. Peso de 100 almendras, numero de almendras en 100 g y porcentaje de testa en almendras provenientes de los árboles de cacao seleccionados con perfiles de interés comercial. EET – Pichilingue, 2006. Mater ial Peso de 100 almendras (g) # de almendras en 100 g Testa (% ) 2076 98,44 fghi * 97,33 Bcdefg 21,26 a 2078 112,21 cdefgh 84,67 Fghi 15,86 cdefgh 2126 114,55 abcdefg 92,67 Defgh 18,44 abcd 2184 99,16 fghi 108,33 Abcdef 17,39 bcdef 2248 97,50 ghi 110,00 Abcdef 17,98 abcde 2361 109,61 cdefgh 92,00 Defghi 16,13 bcdefgh 2506 105,73 defghi 112,33 Abcde 19,07 abc 2507 88,21 hi 120,00 Abc 15,73 cdefghi 2607 94,85 ghi 117,00 Abad 15,46 defghi 2634 116,45 abcdefg 89,67 Efghi 21,26 a 2717 83,35 i 121,33 Ab 18,71 abcd 2735 108,65 defgh 95,00 Cdefgh 18,14 abcd 2744 110,89 cdefgh 93,00 Defgh 18,83 abcd 2748 100,52 efghi 106,33 Abcdef 14,4 efghi 2787 90,09 hi 130,67 A 19,58 ab CCN – 51 1/ 139,59 a 69,67 Hi 12,55 hi EET 103 1/ 129,18 abcd 79,00 Ghi 12,25 i EET 95 1/ 138,33 ab 71,67 Hi 13,03 ghi EET 96 1/ 122,37 abcdef 66,33 I 14,08 fghi IMC 67 1/ 133,05 abc 76,00 Ghi 16,19 bcdefg Finca Las Brisas 1/ 123,47 abcde 85,33 Fghi 13,81 fghi Promedio 110,30 96,11 16,67 V. Máximo 139,59 130,67 21,26 V. Mínimo 83,35 66,33 12,25 Tukey 24,08 26,03 3,58 C.V. (% ) 7,01 8,69 6,90 S 15,90 17,94 2,64 1/ Testigos * Letras iguales en la misma columna no representa diferencias estadísticas significativas, entre si según la prueba de Tukey al 5 % de probabilidad. 3. Número de almendras en 100 g En el cuadro 5, se observa que existen diferencias estadísticas altamente significativas entre los genotipos de cacao estudiados para esta variable. Se aprecia que el promedio general fue de 96,11 almendras con un coeficiente de variación de 8,69 por ciento. 45 Los árboles 2787 (130,67 almendras); 2717 (121,33 almendras) y 2507 (120,00 almendras), registraron el mayor número de almendras en 100 g mientras que, las muestras de los clones EET – 96 y CCN – 51 obtuvieron el menor número de almendras en los 100 g con un número de 66,33 y 69,67 almendras, respectivamente. 4. Porcentaje de testa En el cuadro 5, se observa que existen diferencias estadísticas altamente significativas entre los genotipos de cacao estudiados para esta variable. Se aprecia que el promedio general fue de 96,11 almendras con un coeficiente de variación de 6,90 por ciento. El árbol 2787 con (130,67 almendras); presentó el mayor número de almendras, estadísticamente igual a los árboles 2717; 2507; 2607; 2184; 2248; 2506; y 2748, que alcanzaron promedios entre 108,33 y 121,33 almendras en 100 g superiorestadísticamente a las muestras restantes, que alcanzaron 66,33 y 106,33 almendras en 100 g; siendo las de menor número los clones EET – 96 (66,33) y CCN – 51 (69,67). 5. Determinación del pH en la testa y cotiledón El análisis de varianza (Cuadro 3 del apéndice) para el pH en la testa y el cotiledón; al inicio y al final de la fermentación así como al final del secado, presentó diferencias estadísticas entre tratamientos (Cuadro 6). El promedio general del pH 46 de la testa al inicio de la fermentación fue de 4,41 con un coeficiente de variación del 5,80 por ciento. Cuadro 6. Promedios de pH al inicio de la fermentación, fin fermentación y final del secado en la testa y cotiledón, en muestras de almendras provenientes de los árboles de cacao seleccionados con perfiles de interés comercial. EET Pichilingue, 2006. Material Inicio fermentación Fin fermentación Seco Testa Cotiledón Testa Cotiledón Testa Cotiledón 2076 4,01 Ab* 6,54 c 4,58 b 4,66 c 6,02 Ab 5,49 abc 2078 4,71 Ab 6,89 abc 4,53 b 4,70 abc 5,15 C 4,72 bcd 2126 4,31 Ab 6,77 abc 4,48 b 4,90 abc 5,68 Abc 5,22 abcd 2184 4,51 Ab 6,84 abc 4,43 b 4,72 abc 5,57 Abc 5,05 abcd 2248 4,56 Ab 6,84 abc 4,50 b 4,92 abc 5,82 Abc 5,54 abc 2361 4,51 Ab 6,91 abc 4,47 b 4,66 c 5,62 Abc 5,60 abc 2506 3,99 Ab 6,83 abc 4,41 b 5,12 ab 5,80 Abc 5,74 ab 2507 4,20 Ab 6,99 ab 4,60 b 4,73 abc 5,67 Abc 5,35 abcd 2607 4,47 Ab 6,64 abc 4,40 b 4,56 c 5,86 Abc 5,08 abcd 2634 4,64 Ab 6,78 abc 4,54 b 4,68 bc 6,02 ab 5,47 abc 2717 3,96 B 6,86 abc 4,56 b 4,95 abc 5,63 abc 5,28 abcd 2735 4,39 Ab 6,84 abc 4,43 b 4,92 abc 5,86 abc 5,45 abcd 2744 4,53 Ab 6,88 abc 4,54 b 4,85 abc 5,37 bc 5,51 abc 2748 4,62 Ab 6,71 abc 4,53 b 4,71 abc 6,38 a 5,49 abc 2787 4,81 A 6,87 abc 4,44 b 4,64 c 5,93 abc 5,64 abc CCN – 51 1/ 4,34 Ab 6,97 abc 4,32 b 4,76 abc 5,59 abc 4,43 d EET – 103 1/ 4,53 Ab 6,85 abc 4,53 b 4,70 abc 5,94 abc 5,64 abc EET – 95 1/ 4,49 Ab 6,87 abc 4,65 b 4,87 abc 6,23 a 6,07 a EET – 96 1/ 4,26 Ab 6,71 abc 5,50 a 4,88 abc 6,26 a 5,68 abc IMC 67 1/ 4,59 Ab 7,03 a 4,81 ab 5,13 a 5,62 abc 5,38 abcd Finca Las Brisas 1/ 4,10 Ab 6,76 abc 4,50 b 4,71 abc 5,58 abc 5,42 abcd Promedio 4,41 6,83 4,56 4,80 5,79 5,39 V. Máximo 4,81 7,03 5,50 5,13 6,38 6,07 V. Mínimo 3,96 6,54 4,32 4,56 5,15 4,43 Tukey 0,82 0,44 0,82 0,44 0,82 1,03 C.V. % 5,80 2,14 5,78 3,05 4,56 6,04 S 0,24 0,11 0,23 0,15 0,29 0,35 1/ Testigos * Letras iguales en la misma columna no representa diferencias estadísticamente significativas, según la prueba de Tukey al 5 % de probabilidad. 47 Las muestras del árbol 2787 al inicio de la fermentación en la testa fue menos acida, presentando un valor de 4,81; obteniendo el mayor valor de significancia estadística, mientras que el árbol 2717 (3,96) obtuvo el valor mas bajo, los demás genotipos se comportaron estadísticamente iguales. Para el cotiledón este valor fluctuó entre 6,54 para el árbol 2076 y 7,03 para el clon IMC – 67. Al final de la fermentación todos los genotipos evaluados fueron estadísticamente iguales, excepto el clon EET – 96, quien presentó el valor máximo de pH en la testa con un valor de 5,50. El valor mínimo en el cotiledón se obtuvo en el árbol 2607 con un pH de 4,56 y el máximo en el clon testigo IMC 67 con pH de 5,13 (Cuadro 6). Después del secado ocurrió un aumento del pH tanto en la testa como en el cotiledón. En el primer caso el valor mínimo (5,15) correspondió al árbol 2078 y el máximo (6,38) al árbol 2748. Para el pH del cotiledón, el valor mínimo (4,43) correspondió al clon testigo CCN – 51 y el máximo (6,07) al clon EET – 95, (Cuadro 6). B. Variables organolépticas En el cuadro 7, se muestran los perfiles de sabores básicos, específicos y adquiridos para los diferentes genotipos, analizados mediante la técnica de Friedman. Esta técnica permitió agrupar genotipos con características similares, y se observa que las muestras de los árboles 2361, 2248, 2126, 2634, 2184 el clon EET – 96 y las muestras de la finca Las Brisas obtuvieron el valor mas alto por tanto el primer nivel 48 de significación, mientras que los árboles 2076, 2744, 2735, 2607, 2787 y el clon EET – 103 obtuvieron el nivel mas bajo, los demás genotipos se encuentran entre estos valores. Además, se detectó un sabor a chocolate fino en las muestras del árbol 2634. 49 Cuadro 7. Promedio de las variables organolépticas provenientes de 21 árboles de cacao con perfiles de interés comercial. EET Pichilingue, 2006. Material Var iables organolépticas 1/ ∑Rj 2/ Grupos 3/ Calificación Sabores básicos Sabores específicos Sabores adquiridos Amargor Astringencia Acidez Dulce Cacao Floral Frutal Nuez Crudo/verde 2076 3,25 4,56 3,42 0,00 2,19 1,28 1,69 0,28 2,56 80,50 c REGULAR 2078 3,06 3,67 4,11 0,00 3,31 0,86 1,75 0,36 1,44 105,50 b BUENO 2126 3,44 3,44 3,53 0,58 3,06 2,97 2,33 0,11 1,39 137,00 a MUY BUENO 2184 4,19 3,61 4,61 0,00 3,58 3,44 2,61 0,67 1,28 121,50 a MUY BUENO 2248 2,97 3,06 4,00 0,92 4,14 1,69 2,11 0,19 0,81 148,00 a MUY BUENO 2361 3,75 3,67 3,83 0,22 3,75 2,83 3,03 0,58 0,83 154,00 a MUY BUENO 2506 2,94 3,50 4,00 0,00 3,03 0,39 2,11 0,22 1,50 105,00 b BUENO 2507 3,83 4,39 3,92 0,00 2,56 0,61 1,11 0,11 2,53 53,50 c REGULAR 2607 4,11 3,97 4,39 0,00 2,86 0,69 1,47 0,36 2,69 63,00 c REGULAR 2634 3,72 3,83 4,17 0,50 3,47 2,56 2,86 0,31 1,44 124,50 a MUY BUENO 2717 3,72 4,11 3,33 0,00 2,56 0,72 1,83 0,22 0,89 96,50 b BUENO 2735 4,36 4,31 4,03 0,00 3,44 0,97 1,58 0,08 2,28 60,50 c REGULAR 2744 4,50 4,31 4,33 0,00 2,58 1,61 1,72 0,33 2,28 62,00 c REGULAR 2748 4,58 4,25 3,97 0,00 3,69 2,25 2,56 0,56 1,78 103,50 b BUENO 2787 4,00 4,11 4,00 0,00 2,11 1,11 1,44 0,00 2,11 57,50 c REGULAR CCN 51 3,67 3,58 4,14 0,00 3,89 0,44 2,19 0,33 1,47 107,00 b BUENO EET 103 4,11 4,58 4,11 0,00 2,83 2,28 1,03 0,19 1,72 62,50 c REGULAR EET 95 4,33 4,06 4,06 0,00 3,14 2,47 2,42 0,17 1,00 97,00 b BUENO EET 96 3,44 3,50 3,72 0,22 3,47 2,14 1,08 0,17 0,81 124,00 a MUY BUENO IMC 67 3,28 4,00 4,39 0,00 3,86 0,28 1,97 0,44 1,72 94,50 b BUENO Finca Las Brisas 2,97 3,56 3,50 0,00 3,00 2,72 2,97 0,00 1,58 121,50 a MUY BUENO Valor máximo 4,58 4,58 4,61 0,92 4,14 3,44 3,03 0,67 2,69 154,00 Valor mínimo 2,94 3,06 3,33 0,00 2,11 0,28 1,03 0,00 0,81 53,50 Promedio 3,72 3,91 3,98 0,12 3,17 1,63 1,99 0,27 1,62 99,00 S 30,79 Friedman 54,73 1/ Promedios obtenidos mediante degustación en licores de cacao 2/ ∑Rj = Suma de rangos, según Friedman 3/ Grupos o categorias, aplicando X + 0,48 S 47 1. Sabores básicos La mayor intensidad de amargo se detectó en las muestras de los árboles 2748 y 2744 con un valor de 4,58 y 4,50 respectivamente. Los valores de astringencia fluctuaron entre 3,06 y 4,58; siendo el valor más alto para el clon testigo EET 103 y el más bajo para las muestras del árbol 2248. En las muestras del árbol 2184 (4,61) se detectó una mayor acidez, mientras que las muestras del árbol 2717 (3,33) fue menos ácida (Cuadro 7). Las muestras de los árboles 2248 (0,92); 2126 (0,58); 2634 (0,50); 2361 (0,22) y el clon EET96 (0,22); presentaron notas leves de sabor dulce, esta variable de sabor fue nula para
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