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Histología Preparación del tejido: 1- Obtención: se obtiene el material, puede ser mediante a una biopsia 2- Fijación: se fija con formalina para abolir metabolismo celular, impedir degradación enzimática de células y tejidos, destruir patógenos, endurecer el tejido con formación de enlaces cruzados o desnaturalización de proteínas. Para conservar lípidos neutros se usan cortes por congelación de tejidos fijados con formalina y colorantes se disuelven en las grasas; para conservar estructuras de las membranas se usan fijadores con metales pesados. 3- Inclusión en parafina: la muestra se lava y se deshidrata en soluciones alcohólicas de concentración creciente (hasta 100%). Se aclara con solventes orgánicos (xileno o tolueno). Cuando la parafina se enfría, queda un bloque, “Taco”, se corta con un microtomo y este pedacito se monta en un portaobjetos con medio de montaje. 4- Tinción: se disuelve y extrae la parafina, se rehidrata con alcoholes en forma creciente de concentración hematoxilina en agua (azul/violeta; núcleos), eosina soluble en alcohol (rosa; citoplasma). Se vuelve a deshidratar. Se pasa por xileno o tolueno y se pone en un medio de montaje no acuoso antes de cubrirla con un cubreobjeto. → Colorante acido: eosina, carga neta negativa, reacciona con grupos catiónicos de células y tejidos, particularmente, grupos aminoionizados de las proteínas, reacción de grupos catiónicos, acidófila. → Colorante básico: hematoxilina, carga neta positiva. Va a reaccionar con los componentes aniónicos de las células y de los tejidos. Su capacidad de reaccionar, basófila. Tejido epitelial → Conjunto de células que están unidas entre sí por moléculas de adhesión (cohesión), que tiene funciones como tapizar cavidades, formar glándulas, tapizar superficies. → Tejido avascular. Siempre acompañado a un tejido epitelial hay un conectivo, que lo nutre. → Las células tienen polaridad morfológica y funcional (región apical y región basal) → Región apical: hacia la superficie. Tiene microvellosidades, mira hacia la luz → Región basal: se apoya sobre la membrana basal → Región lateral: permite la cohesión entre los epitelios. → Siempre está dispuesto a la luz. Las células se adhieren a la membrana basal (delimita al tejido epitelial y al conectivo) → Crean barrera selectiva para intercambio de sustancias específicas. Mas que nada el epitelio de revestimiento. Clasificación: Epitelio de revestimiento: → Según la cantidad de extractó: ✓ Simple: una capa celular ✓ Estratificado: dos extractos o mas → Según forma celular ✓ Planas ✓ Cubicas ✓ Cilíndricas → Según especificación de la superficie apical: ✓ Cilios: como pelitos, su función es barrer ✓ Estereocilios ✓ Microvellosidades → Epitelios especiales ✓ Seudoestratificados: no todas las células alcanzan la superficie libre, pero todas llegan a la membrana basal simple. ✓ Urotelial: reviste vías urinarias y calices menores del riñón hasta segmento proximal de uretra, es especializado (se estira) y estratificado. ✓ Endotelio: en vasos sanguíneos y linfáticos, es simple plano. ✓ Mesotelio: tapiza paredes y contenido de las cavidades cerradas de cuerpo, simple plano. → Presencia de queratina o ausencia: casi siempre en epitelios seudoestratificado plano Funciones: ✓ Secreción ✓ Absorción ✓ Transporte ✓ Protección ✓ Función receptora Los epitelios de secreción y absorción suelen ser simples o seudoestratificados. Ubicación y clasificación de los epitelios: Especialización de la región apical: → Microvellosidades: prolongaciones citoplasmática, son proyecciones cortas e irregulares, altas y muy juntas, aumentan la superficie. Se relacionan con la capacidad abortiva, transportan líquidos y absorben metabolitos. Internamente están compuestas por filamentos de actina. Se encuentran en lugares como células intestinales, en células de túbulos renales. → Estereocilios: microvellosidades largas e inmóviles, son sostenidas por filamentos de actina, vinculados por fimbrina. Se encuentran en el epidídimo, segmento proximal del conducto deferente y células sensoriales del oído interno. En las vías espermáticas facilitan la absorción, en el oído interno actúan como mecanorreceptores. → Cilios: prolongaciones de membranas apical, tienen aspectos de pestañas y poseen axonema, que se extienden desde el cuerpo basal, un centro organizador de microtúbulos, ubicado en la región apical. Forman aparato ciliar. Se clasifican en móviles, primarios y nodales. ✓ Móviles: en grandes cantidades. Son capaces de mover líquidos y partículas a lo largo y ancho de las superficies. Se encuentran en tráquea, bronquios y trompas uterinas. ✓ Primarios: prolongaciones solitarias, inmóviles, quimiorreceptoras y mecanorreceptores ✓ Nodales: embrionario Especialización de la región lateral: → Tiene moléculas de adhesión celular → Barras terminales: lugares de adhesión entre células epiteliales → Exhiben repliegues, prominentes en epitelios que participan en transporte de electrolitos y líquido. → El espacio intercelular se dilate durante el transporte. → Componentes forman dispositivos de barrera y adhesión → Uniones ocluyentes: ✓ Las más apicales, sellado focal de membrana plasmática de células contiguas, impermeable, sirve de barrera (barrera de difusión intercelular primaria), impiden migración de lípidos y proteínas, atraen moléculas de señalización y las vinculan con filamento de actina. ✓ Las hebras de zónula occludens son las vibraciones de hieleras de las proteínas transmembrana: ocludina (para mantener barrera entre células contiguas y regiones apical y lateral); claudinas (integrales de cierre de zónula occludens, forman canales acuosos extracelulares para el paso de iones pequeños o moléculas); molécula adhesiva de la unión (se asocian a claudinas, participan en uniones ocluyentes). ✓ Las regiones extracelulares de las proteínas sellan espacio intercelular. → Uniones adherentes: ✓ Proveen adhesiones laterales entre células por proteínas que vinculan citoesqueleto. ✓ Hay dos tipos de adhesiones ✓ Zónula adherens: interacciona con red de filamentos de actina dentro de la célula. Compuesta por cadherina. Adherido por uniones de calcio, si se elimina el calcio se disocia la molécula y se desintegra la unión. ✓ Macula adherens/ desmosomas: interacciona con filamentos intermedios. Provee adhesión puntual entre células epiteliales, es fuerte, provee fijación para filamentos intermedios. Tiene función estructural, participa en morfogénesis y diferenciación de tejidos. ✓ Fascia adherens: unión laminar que estabiliza tejidos no epiteliales, amplias capas de adhesión. ✓ Contacto focales y hemidesmosomas en región basal ✓ Moléculas de adhesión celular (GAM) forman parte esencial ✓ Si ocurre entre diferentes GAM es unión heterotipica, si ocurre en el mismo tipo es homotipica. ✓ Existen 4 familias de GAM 1. Cadherinas: mantienen interacciones homotipica, asociadas a cateninas que vinculan con filamentos de actina. Transmite señales que regulan los mecanismos de crecimiento y diferenciación células. Son dependientes de calcio en zónula adherens. 2. Integrinas: regulan adhesión celular, controlan movimiento y forma celular, participan en crecimiento y diferenciación. Son glucoproteínas. 3. Selectinas: en leucocitos y células endoteliales, median reconocimiento entre neutrófilos y endotelio vascular, unión heterotipica. 4. Superfamilia de IG: median adhesión de células- células homotipica y comprenden moléculas de adhesión intercelular (IGAM), célula -célula (C-CAM), molécula de adhesión células vascular (VGAM), etc. → Uniones comunicantes (gap) ✓ Hendidura o nexo ✓ Permite el paso directo de moléculas de señal entre células ✓ En musculo liso vascular e intestinal, y musculo cardiaco. ✓ Macula communicans es acumulación de poros o canalestransmembrana ✓ Formado por 12 subunidades de proteínas de la familia de conexinas, formados por dos hemicanales. Especialización de región basal: → Membrana basal → Uniones célula- matriz; adhesiones focales y hemidesmosomas. → Repliegues de la membrana basal: extensiones de superficie e interacciones entre células. Membrana basal: → Lugar de adhesión estructural para las células epiteliales y del conjuntivo subyacente. → Lamina basal o lamina densa: laminas + colágeno tipo IV, + proteoglucanos + glucoproteínas. Está compuesta por: * Colágenos: tipo IV, XV, XVIII. El tipo VII forma fibrillas de anclaje que unen lamina basal con lamina reticular subyacente. * Lamininas: glucoproteícas, indispensables para armado de lámina, poseen receptores integrínicas, participan en interacciones célula- matriz extracelulares. * Entactina/ nidógeno: glucoproteína sulfatada, sirve de vínculo entre lamina y red de colágeno tipo IV * Proteoglucanos: centro de proteínas que tiene fijadas cadenas laterales de heparán sulfato, condroitín sulfato o dermatán sulfato. → Lamina lucida: entre lamina basal y células, contiene las regiones extracelulares de las moléculas de adhesión celular (receptores fibronectina y laminina) → Lamina externa: en células NO epiteliales, células musculares adiposas y de sostén en los nervios periféricos. → La estructura molecular del colágeno tipo IV determina su papel en la formación de la supraestructura reticular de la lámina basal → Las fibrillas de anclaje (colágeno tipo VII) efectivizan la adhesión de la lámina basal al tejido conectivo. → Funciones de la lámina basal: * Adhesión estructural: lamina- epitelio, lamina- conectivo * Compartimentalización: aísla el tejido epitelial del conjuntivo * Filtración: movimiento de sustancias * Armazón hística: guía/armazón durante regeneración * Regulación y señalización Uniones célula- matriz extracelular → Uniones adherentes: adhesiones focales y hemidesmosomas * Adhesiones focales: filamentos de actina o membrana basal, enlace entre citoesqueleto de actina y proteína de matriz; tiene funciones importante en cambios, reparación, intervienen integrinas, cinasa, proteínas fijadoras de actina o tirosina cinasa de la adhesión focal; son lugares de importancia para percepción y transducción de señales. * Hemidesmosomas: en epitelios que necesitan adhesión estable y fuerte citoplasmático de la membrana basal, en esta placa hay tres proteínas: plectina, BP 230, erbina. La mayoría de las proteínas transmembrana en el hemidesmosomas pertenece a la clase de receptores de matriz extracelular llamadas integrinas; estas son: integrinas α6β4, colágeno tipo XVII, CD151. Los filamentos de anclaje (lamina 5 + colágeno XVII), fijan membrana basal a células epiteliales. Fibrillas de anclaje (colágeno VII), fijan lamina basal a fibras reticulares subyacentes. Epitelio glandular A diferencia del epitelio de revestimiento reviste hacia la luz, el epitelio glandular se orienta incluido con el tejido conectivo. Clasificación según destino de producto: → Exocrinas: secretan sus productos hacia la luz por tubos o conductos → Endocrinas: secretan productos al tejido conectivo y luego a torrente sanguíneo, carecen de conductos. Sus productos son hormonas. Clasificación según mecanismo de secreción: → Merócrinas: envían productos a superficies apical en vesículas limitadas por membrana = exocitosis. → Apocrinas: el producto es rodeado por capa de citoplasma y envuelto por membrana plasmática, se liberan en la porción apical, se tiene una pérdida del citoplasma. Eje: glándula mamaria, glándulas de la piel, parpado y del conducto auditivo externo. → Holocrinas: acumula el producto en su interior, la célula madura y sufre apoptosis y libera su producto al exterior. Clasificación de glándulas exocrinas por cantidad celular: → Unicelular: células individuales distribuidas. Eje: caliciforme → Multicelular: por dos o más células, con grados de complejidad variables. Clasificación según el tipo de secreción: → Mucosas: espesas y viscosas, se secretan gránulos de mucinógeno, son hidrosolubles. La célula mucosa tiene el núcleo plano contra membrana basal por compresión de secreción en citoplasma. → Serosas: clara y acuosa, células serosas producen secreciones proteicas glucosiladas, el núcleo es redondo u oval. Clasificación de las glándulas exocrinas: → Según del forma del adenómero * Tubulares * Acinosas * Alveolares → Según su conducto * Ramificado (compuesto) * Simple Ejemplos: ✓ Tubular simple: intestino grueso, glándulas del colon ✓ Tubular simple enrollada: en piel, glándulas sudoríparas ✓ Tubular simple ramificada: estomago, glándulas mucosas del píloro ✓ Acinosa simple: uretra, glándulas parauretrales y periuretrales ✓ Acinosa ramificada: estomago, glándulas mucosas del cardias. ✓ Tubular compuesta: duodeno, glándulas de Brunner ✓ Acinosa compuesta: páncreas exocrino ✓ Tuboloacinosa compuesta: glándula salivar submandibular, glándula mamaria, glándula lagrimal
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