fiebre_amarilla_dra_mercedes

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Fiebre AmarillaFiebre AmarillaFiebre AmarillaFiebre Amarilla
Importancia y Uso Racional del Laboratorio en laImportancia y Uso Racional del Laboratorio en la
Vigilancia y Atención de los pacientes con cuadro clínico Vigilancia y Atención de los pacientes con cuadro clínico Vigilancia y Atención de los pacientes con cuadro clínico Vigilancia y Atención de los pacientes con cuadro clínico 
icterohemorrágicosicterohemorrágicos agudosagudos
Dra. MERCEDES CARRILLO
Directora GeneralDirectora General
Laboratorio Central de Salud PúblicaLaboratorio Central de Salud Pública
20082008
Virus de la Fiebre AmarillaVirus de la Fiebre Amarilla
�� El agente etiológico de la Fiebre Amarilla es El agente etiológico de la Fiebre Amarilla es 
un arbovirus del género un arbovirus del género Flavivirus Flavivirus un arbovirus del género un arbovirus del género Flavivirus Flavivirus 
(familia Flaviviridae)(familia Flaviviridae)
Rol del Laboratorio en la Vigilancia y Rol del Laboratorio en la Vigilancia y 
Seguimiento de los Pacientes con cuadro Seguimiento de los Pacientes con cuadro 
clínico icterohemorrágicos agudosclínico icterohemorrágicos agudos
�� Vigilancia Laboratorial de febrilesVigilancia Laboratorial de febriles
�� Investigación de Brotes como componente del Investigación de Brotes como componente del 
Equipo de SaludEquipo de Salud
Estudios Serológicos (IgM)Estudios Serológicos (IgM)�� Estudios Serológicos (IgM)Estudios Serológicos (IgM)
�� Confirmación de circulación del virus en focos Confirmación de circulación del virus en focos 
sospechosossospechosos
�� Diagnóstico diferencialDiagnóstico diferencial
�� Apoyo para el diagnóstico presuntivo y Apoyo para el diagnóstico presuntivo y 
seguimiento clínicoseguimiento clínico
Investigación AplicadaInvestigación Aplicada
�� Ante la aparición de casos sospechosos, el Ante la aparición de casos sospechosos, el LCSPLCSP
conjuntamente con funcionarios del conjuntamente con funcionarios del SENEPASENEPA y y 
los del los del Hospital DistritalHospital Distrital de San Estanislao, se de San Estanislao, se 
realizó una Investigación del Broterealizó una Investigación del Brote
–– Búsqueda activa de febrilesBúsqueda activa de febriles
–– Vectores Vectores 
–– Datos conducentes a dilucidar los casosDatos conducentes a dilucidar los casos
DepartamentoDepartamento
dede
Virología Virología 
Virología Virología 
Diagnóstico Diferencial Diagnóstico Diferencial -- LCSPLCSP
� Las distintas formas clínicas de la fiebre 
amarilla también pueden identificarse en 
otras enfermedades febriles que 
evolucionan con ictericia, manifestaciones evolucionan con ictericia, manifestaciones 
hemorrágicas o ambas.
� Por lo que se deben descartar las siguientes 
patologías:
– Leptospirosis, Malaria grave; Hepatitis A, B y C 
y Fiebre hemorrágica por virus dengue.
Pruebas Realizadas por el LCSP Pruebas Realizadas por el LCSP 
en la Vigilanciaen la Vigilancia
�� Detección de AnticuerposDetección de Anticuerpos
–– MACMAC--ELISA IgMELISA IgM
– Aumento de por lo menos cuatro veces en los niveles de 
anticuerpos de IgG contra el virus de la fiebre amarilla 
(seroconversión), por pruebas de neutralización (seroconversión), por pruebas de neutralización 
�� Detección de virus o ARN viralDetección de virus o ARN viral
-- Aislamiento viral en cultivo celularAislamiento viral en cultivo celular
-- RTRT--PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa)PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa)
Cuando y como tomar las Cuando y como tomar las 
muestras de sangre ?muestras de sangre ?
Cuando y como tomar las Cuando y como tomar las 
muestras de sangre ?muestras de sangre ?
En la etapa Virémica En la etapa Virémica (1, 2 y 3 Días)(1, 2 y 3 Días)
En la etapa Aguda En la etapa Aguda (después del 5º Día)(después del 5º Día)En la etapa Aguda En la etapa Aguda (después del 5º Día)(después del 5º Día)
En la etapa Convaleciente En la etapa Convaleciente (15 a 20 Días)(15 a 20 Días)
Tipo de 
muestra
Nº y 
volumen de 
muestra
Momento de recolección Recipiente Conservación Transporte
Sangre:
Serología
2 muestras 
de suero de 5 
ml. cada una
1ª muestra (Fase aguda) 
después del 5º día del 
inicio de síntomas.
2ª muestra (Fase 
convaleciente) a partir de 
decimocuarto día del 
inicio de los síntomas
Tubo estéril, seco, 
herméticamente 
cerrado y rotulado.
No usar 
anticoagulantes
En heladera y remitir 
antes de 24 hs al 
LCSP.
Caja térmica c/ 
hielo 
Sangre:
Aislamiento
Viral
Una muestra 
de 5 ml. de 
suero 
En la fase aguda, hasta el 
3º día del inicio de los 
síntomas
Tubo estéril, seco, 
herméticamente 
cerrado y rotulado.
Remitir
inmediatamente al
LCSP en forma
Caja térmica c/ 
hielo seco o 
Termo para suero síntomas cerrado y rotulado.
No usar 
anticoagulantes
LCSP en forma
refrigerada. Congelar
a menos 70o C o en
Nitrógeno líquido.
Termo para 
Nitrógeno 
líquido
Órganos o
tejidos:
Aislamiento
Viral
Fragmentos Hasta 8 horas post-mortem Frasco con medio de 
transporte viral, 
herméticamente 
cerrado y rotulado
Llevar
inmediatamente al
LCSP o congelar a
menos 70o C o en
Nitrógeno líquido.
Caja térmica c/ 
hielo seco o 
Termo para 
Nitrógeno 
líquido
Órganos o
tejidos:
Inmuno-
histoquímica
Fragmentos Hasta 8 horas post-mortem Frasco estéril c/ 
solución de formol al 
10%
Temperatura
ambiente
Temperatura 
ambiente
�� Hemograma (leucocitos, plaquetas, hematócrito)Hemograma (leucocitos, plaquetas, hematócrito)
�� AlbúminaAlbúmina
Pruebas de laboratorio Pruebas de laboratorio 
Clínico para Fiebre AmarillaClínico para Fiebre Amarilla
AlbúminaAlbúmina
�� Pruebas de la función hepáticaPruebas de la función hepática
�� Urea, creatinina, TP, gasometría, electrolitosUrea, creatinina, TP, gasometría, electrolitos
�� Bilirrubina, Glicemia Crasis Sanguínea y Tipificación Bilirrubina, Glicemia Crasis Sanguínea y Tipificación 
�� OrinaOrina--verificar si hay hematuria microscópicaverificar si hay hematuria microscópica
Muestra para el aislamiento Muestra para el aislamiento 
viral y PCRviral y PCR
�� Deben ser colectadas en los Deben ser colectadas en los 3 primeros días3 primeros días de iniciado el de iniciado el 
estado febril (fase virémica).estado febril (fase virémica).
�� Para asegurar las optimas condiciones durante el Para asegurar las optimas condiciones durante el 
aislamiento, la separación del suero del coagulo se aislamiento, la separación del suero del coagulo se aislamiento, la separación del suero del coagulo se aislamiento, la separación del suero del coagulo se 
realizará el mismo día de la toma de muestra y realizará el mismo día de la toma de muestra y 
asépticamente.asépticamente.
�� Los tubos con suero se congelaran y se almacenaran en el Los tubos con suero se congelaran y se almacenaran en el 
freezer, en caso de no enviar inmediatamente. (Lo ideal es freezer, en caso de no enviar inmediatamente. (Lo ideal es 
congelar a congelar a --20º C)20º C)
�� El suero debe enviarse lo antes posible al laboratorio El suero debe enviarse lo antes posible al laboratorio 
realizando el transporte en congelación.realizando el transporte en congelación.
TECNICAS DE EXTARCCION Y PREPARACION DE LAS SANGRE
AISLAMIENTO VIRAL Y PCR DEL DENGUE
1- Usar Yodo-Alcohol con algodón para limpiar la zon a de 
extracción. Luego desinfectar en forma de espiral c on una 
gasa con alcohol
2- Esperar hasta que se seque el área 
desinfectada
(sin soplar)(sin soplar)
3- Extraer 10 ml. de sangre con 
jeringa desechable
TECNICAS DE EXTARCCION Y PREPARACION DE LAS SANGRE
AISLAMIENTO VIRAL Y PCR DEL DENGUE
4- Cargar la sangre en los tubos estériles 
correctamente, identificarlos con nombre, 
flamear la boca de los mismos y taparlos 
rápidamente
Nombre y 
Apellido
5- Colocar los tubos que contiene la sangre 
entre hielo o en el refrigerador (No congelar)
6- La separación del suero debe hacerse en campana d e flujo laminar o frente a una 
llama (Lamparita) y con tapa boca en el mismo día d e la extracción
TECNICAS DE EXTARCCIONY PREPARACION DE LAS SANGRE
AISLAMIENTO VIRAL Y PCR DEL DENGUE
7- Remitir el suero al Laboratorio Central de Salud Pública en condiciones 
refrigeradas con la ficha epidemiológica junto con el pedido méd ico
Hoja de 
Pedido
Fecha 
Epidemiológica
No olvidar los 
datos Contenedor
Observación: Las muestras para aislamiento viral deben ser
colectadas entre los 3 primeros días del inicio de la fiebre
datos 
laboratoriales 
como ser: 
Hepatograma, 
Creatinina y otros 
indicados en la 
ficha !!!!
D.G.V.S.
DIVET
SENEPA LCSP
Otros 
Laboratorios 
Públicos y 
privados
Flujograma de Envíos de Muestras y Resultados Flujograma de Envíos de Muestras y Resultados 
Laboratoriales de Fiebre AmarillaLaboratoriales de Fiebre Amarilla
REGION 
SANITARIA
Hospital
Centro de 
Salud
Puesto de 
Salud 
Otros Servicios 
de Salud 
Públicos y 
Privados
Ficha Epidemiológica de Ficha Epidemiológica de 
Fiebre Amarilla y Fiebre Amarilla y 
Criterios de rechazo de Criterios de rechazo de 
muestrasmuestras
• Muestra de paciente sin cuadro febril
ictérico agudo
• Muestra extraída y remitida en• Muestra extraída y remitida en
condiciones inapropiadas (en jeringa,
frasco inadecuado, muestra inadecuada,
transporte inadecuado)
• Muestra sin ficha epidemiológica o no
completada correctamente (importante
indicar fecha de inicio de síntomas y
antecedentes de vacunación)