Utilizacion_de_tubos_para_recuento_hemat

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Resumen
Para realizar los recuentos hematológicos,
nuestro centro dispone de tubos de cristal con
EDTA 3K, preparados para extracción al vacío.
No obstante, diversas consideraciones nos hacen
pensar en la posibilidad de cambiarlos por otros,
también preparados para extracciones por sistema
de vacío, pero fabricados en polipropileno ( plástico)
y con EDTA 2K como anticoagulante. El objetivo de
este estudio es comprobar si el cambio en el sistema
de tubos empleado puede hacer resentir la calidad
en el servicio prestado.
Para ello se seleccionó un total de 101 pacientes
tomados al azar que fueron divididos en dos grupos. A
los pacientes del primero ( grupo 1, n = 57) se les
extrajeron 2 tubos para recuento sanguíneo, uno de
cristal con EDTA 3K y otro de polipropileno con EDTA
2K, siendo estas muestras procesadas en el transcurso
de las 2 horas siguientes a la extracción y también a las
24 y a las 48 horas de la misma, conservándolas a 4 °C.
En el segundo grupo (grupo 2, n = 44) , se realizó
idéntico procedimiento, aunque las muestras se
conservaron a temperatura ambiente. Se analizaron
estadísticamente los resultados del hemograma y las
alarmas morfológicas leucocitarias, junto con los tests
intra e interensayo. Así mismo, se realizó una
investigación cualitativa con los profesionales que
colaboraron en la extracción de las muestras.
Concluimos que el tubo de plástico para hemograma
con EDTA 2K como anticoagulante ofrece resultados
fiables, aunque se han detectado ciertos problemas en
la manipulación de las muestras que merecen ser
estudiados más profundamente.
Palabras clave: Hemograma. Tubos de extracción sanguínea.
Sistema de vacío. EDTA 2K.
The use of polypropylene tubes with EDTA
2K as an anticoagulant for hematologic
count in a Department of Hematology
To carry out hematologic counts our center uses
glass tubes with EDTA 3K prepared for vacuum
extraction. Nonetheless, different considerations have
led to the possibility of changing these for other tubes
which are also prepared for vacuum extractions but
which are made of polypropylene (plastic) with EDTA
2K as the anticoagulant. The aim of this study was to
prove whether the change in the tubes used may alter
the quality in the service rendered. A total of 101
patients were randomly selected and divided into two
groups. In group 1 (n = 57) 2 tubes were used for blood
counts, one of glass with EDTA 3K and the other of
polypropylene with EDTA 2K. These samples were
processed over 2 hours after the extraction and also at
24 and 48 hours and were preserved at 4 ºC. In group 2
(n = 44) an identical procedure was carried out,
although the sample were preserved at room
temperature. The results of the hemogram and the
leucocyte morphologic alarms, together with the intra-
and interassay tests were statistically analyzed.
Moreover, a qualitative investigation was made with the
professionals who collaborated in sample extraction. It
was concluded that the plastic tubes with EDTA 2K as
the anticoagulant provide reliable results for blood
counts, although certain problems were detected in
sample manipulation which should be more closely
studied.
Key words: Hemogram. Blood extraction tubes. Vacuum
system. EDTA 2K.
Originales
18 ENFERMERÍA CLÍNICA, VOL. 11, NÚM. 1
Utilización de tubos para recuento hematológico
de polipropileno con EDTA 2K como
anticoagulante en un servicio de hematología
ADOLFO ROMERO*, JOSÉ MANUEL PEREA*, JOSEFA GONZÁLEZ** y JAVIER TRONCHONI***
*Enfermero especialista en Análisis Clínicos. **Enfermera. ***Supervisor. Servicio de Hematología. Hospital Universitario. Málaga.
24
Correspondencia: A. Romero Ruiz. 
Avda. Dr. Marañón 5, 1.o A. 29009 Málaga.
Correo electrónico: jadolfo@ airtel.net
Presentado de manera incompleta ( resultados preliminares) como co-
municación oral al IV Congreso de la Asociación Nacional de Enfermería
Hematológica ( ANEH) . Vigo, octubre de 1999.
Conclusiones finales presentadas en el XIX Congreso Nacional de En-
fermería Especialista en Análisis Clínicos, Alicante, mayo de 2000.
Aceptado para su publicación el 27-9-2000.
Introducción
Para realizar lo s rec uento s hemato ló gic o s,
nuestro centro dispone de tubos de cristal con
sal trisódica de ác ido épsilon-diamín tetraacético
( EDTA 3K) , preparados para extracc ión al vac ío .
No obstante, diversas considerac iones nos hacen
pensar en la posibilidad de cambiarlos por otros,
también preparados para extracciones por sistema
de vacío, pero fabricados en polipropileno ( plásti-
co) y con sal disódica de EDTA ( EDTA 2K) como
anticoagulante.
El EDTA 3K es quizás en la actualidad el anticoa-
gulante más utilizado para recuento hematológico,
pero una serie de recomendaciones del ICSH ( In-
ternational Committee of Standarisation in Hema-
to logy) obtenidas a partir de varios trabajos ( de
Goosens et al entre otros1) sugieren un mejor com-
portamiento del EDTA 2K para esta labor, puesto
que:
1. Respeta la morfología sanguínea, por lo que
permite una demora de hasta 2 horas en la realiza-
ción de la extensión sanguínea tras la extracción.
2. Asegura la conservación de las células sanguí-
neas durante 24 horas si la sangre se mantiene a 
4 °C.
3. Al suministrarse en forma de sal seca, no ejer-
ce ningún efecto dilutorio sobre la sangre total.
4. Al inhibir la aglutinación de las plaquetas, faci-
lita su recuento o su apreciación semicuantitativa a
partir de la extensión2.
Todo ello, sumado a los datos suministrados por
Ridyard et al en pruebas de coagulación3, de Djokic
en determinac iones inmunohemato lógic as4 y de
Tjandra-Maga et al en determinación de concentra-
ciones plasmáticas farmacológicas5 acerca del buen
comportamiento de los tubos de polipropileno, nos
hace pensar en la posibilidad de elegir este tipo de
soporte en nuestro servicio.
Además de estas consideraciones previas, en un
estudio llevado a cabo por Terumo Europa, se pone
de manifiesto que no existe incremento en el núme-
ro de muestras coaguladas por el uso de este siste-
ma de tubos ( plástico y EDTA 2K) , lo que deja un
tanto sin efecto una de las principales razones esgri-
midas por los profesionales que recomendaban la no
utilización del EDTA 2K, al tener que mover el tubo
de manera más concienzuda ( Terumo Europe N.V.
Internal report: comparative study between glass
and plastic tubes) . El objetivo de este estudio es po-
der evaluar el impacto producido tanto por el cam-
bio de material en el tubo como el de anticoagulan-
te, comparando este nuevo equipamiento con otro
ampliamente implantado en nuestro medio.
Material y métodos
Muestras
Para la realización del presente estudio se dise-
ñó un estudio prospectivo probabilístico. Para ello, se
seleccionó a un total de 101 pacientes tomados al azar
procedentes de la sala de extracciones del laboratorio
y de las plantas de hospitalización de nuestro hospital,
en las que se realizan unas 60.000 extracciones anua-
les. De estos pac ientes se obtuvo un total de 202
muestras ( 2 por paciente) . Los pacientes fueron divi-
didos en dos grupos. En el primero ( grupo 1, n = 57) a
los sujetos seleccionados se les extrajeron 2 tubos pa-
ra recuento sanguíneo, uno de cristal con EDTA 3K y
otro de polipropileno con EDTA 2K, siendo estas
muestras procesadas en el transcurso de las 2 horas si-
guientes a la extracción ( recuento inmediato) y tam-
bién a las 24 y a las 48 horas de la misma, conserván-
dolas a 4 °C. En el segundo grupo ( grupo 2, n = 44) , se
realizó idéntico procedimiento, aunque las muestras
se conservaron a temperatura ambiente ( TA) .
Equipamiento
Para el presente estudio se han utilizado tubos
para extracción por vacío de vidrio con EDTA 3K de
Vacutainer ( Becton-Dickinson) y tubos para idénti-
co procedimiento, pero de polipropileno y EDTA 2K
como anticoagulante, Venoject II ( Terumo Europa) .
Como equipo analítico se utilizó un autoanalizador
hematológico H3 RTX de Bayer Diagnóstica. Para el
test interensayo se procesaron las muestras con un
autoanalizador ABX Pentra 120.
Variables y estudioestadístico
Se planteó como hipótesis principal la no existen-
cia de diferencias significativas entre los dos tipos de
tubos estudiados. Para ello, en primer lugar se estu-
diaron estadísticamente los parámetros hematológi-
cos básicos ( leucocitos, hematíes, hemoglobina, he-
matócrito, volumen corpuscular medio [VCM] y pla-
quetas) en los grupos 1 y 2, comparando todos los
recuentos inmediatos entre sí y los resultados obte-
nidos tras las diferentes incubaciones con sus res-
pectivos resultados inmediatos. Estas comparacio-
nes estadísticas se realizaron utilizando el test de la t
de Student para muestras apareadas y el cálculo del
coeficiente r de Pearson. También se obtuvieron me-
dias, desviaciones estándar y rangos. En segundo lu-
gar se estudió la fórmula leucocitaria en ambos gru-
pos, siguiendo idéntico procedimiento estadístico. 
A continuación, se comprobó la existencia o no de
alarmas morfológicas leucocitarias en las muestras in-
cubadas que no las poseían previamente, tal y como
Romero et al señalaban en su estudio6, seleccionando
las muestras que no presentaban este tipo de alarmas
para comprobar si aparecían tras la conservación du-
Utilización de tubos para recuento hematológico de polipropileno con EDTA 2K 
como anticoagulante en un servicio de hematología
ENFERMERÍA CLÍNICA, VOL. 11, NÚM. 1 1925
rante 24 horas. Se obtuvieron 90 muestras ( 38 del gru-
po 1 y 42 del grupo 2) , observando la presencia o no de
estas alarmas, el tipo de las mismas y su distribución
porcentual. Posteriormente se procedió a un estudio
intra e interensayo para controlar la repetitividad y re-
producibilidad de los resultados en los tubos emplea-
dos, según la técnica habitual de obtención de una se-
rie determinada de muestras ( en este caso, 10 con tu-
bo de EDTA 2K y 10 con EDTA 3K) procedentes de un
mismo paciente tomado al azar que se repiten sucesi-
vamente en el día, a las 24 y a las 48 horas, siguiendo el
sistema de diferentes incubaciones previamente des-
crito. En este apartado se obtuvieron medias, desvia-
ciones estándar y coeficientes de variación (CV) .
Por último, se realizó una investigación cualitativa
mediante el uso de la técnica de grupo focal o de dis-
cusión, técnica que por sus especiales características
se consideró la idónea para este caso 7, en la que se
preguntó a los profesionales que realizaron las extrac-
ciones sus impresiones acerca del nuevo tubo. Se pi-
dió a los participantes que expusieran sus experien-
cias con el tubo, tanto en la extracción de sangre co-
mo en la manipulación durante el trabajo diario. Los
partic ipantes fueron c inco enfermeros, uno de los
cuales actuó de moderador. Antes de comenzar, se
dispuso de cierta información complementaria para
que los profesionales opinasen con mayor conoc i-
miento de causa. Por ello se incidió en dos puntos: 
– En la obtención de muestras no se usó el adapta-
dor para extracción al vacío propio del tubo probado.
– El estudio previo sobre el EDTA K2 ofreció bue-
nos resultados.
La discusión llevada a cabo en el grupo se resume
en el apartado de resultados.
Para el cálculo estadístico se utilizaron los progra-
mas Microstat 2.0 para MS DOS, SPSS 6.0 para Win-
dows y MS Works 3.0 para Windows.
Resultados
En la comparación de los resultados inmediatos
de los 101 pacientes no se observaron diferen-
c ias estadísticamente significativas en ninguna de
las variables estudiadas ( p > 0,1) , y los coeficientes
de correlación oscilaron entre r = 0,910 del hemató-
crito y r = 0,991 de los hematíes. 
En el grupo 1, en los parámetros hematológicos bá-
sicos no se observaron diferencias estadísticamente
significativas en ninguna de las variables estudiadas 
(p > 0,1) , salvo en la hemoglobina ( tubo con EDTA 2K
48 h p < 0,001) . Los coeficientes de correlación fueron
superiores a r = 0,900 en todos los casos. En la fórmula
leucocitaria tampoco se encontraron diferencias esta-
dísticamente significativas ( p > 0,1) , salvo en los linfo-
citos ( tubo con EDTA 2K 48 h, p < 0,001) , obteniéndo-
se buenos coeficientes de correlación ( desde r = 0,80
en los monocitos tubo EDTA 2K 48 h a r = 0,997 en
neutrófilos tubo EDTA 2K 24 h) salvo en los basófilos
( r = 0,58 a r = 0,84) . En el grupo 2, los resultados tam-
poco fueron estadísticamente significativos ( p < 0,1) ,
salvo en las plaquetas ( tubo con EDTA 3K 24 h, p <
0,001) , aunque los coeficientes de correlación fueron
algo peores. En la figura 1 se pueden observar las me-
dias obtenidas. En la fórmula se hallaron cuatro varia-
bles en las que había diferencias estadísticamente sig-
nificativas ( eosinófilos tubo EDTA 3K 24 h y 48 h, y eo-
sinó filo s tubo EDTA 2K 24 y 48 h, p > 0,1) . Los
coeficientes de correlación fueron en general peores,
sobre todo en los monocitos ( r = 0,54 a r = 0,75) y co-
mo ocurría en el grupo 1, en los basófilos.
En cuanto a la aparición de alarmas morfológicas
leucocitarias, los datos obtenidos coinciden con el
estudio de Romero et al, apareciendo alarmas del ti-
po desviación a la izquierda ( LS) y granulocitos in-
maduros ( IG) en las muestras incubadas a 4 °C que
no las poseían previamente6. Las diferentes distribu-
ciones se pueden ver en la figura 2.
Las pruebas intra e interensayo arrojaron resulta-
dos excelentes. Los CV obtenidos no superaron en
ningún caso el 5%, valor considerado en nuestro en-
torno como de referencia en este tipo de procedi-
mientos7,8. Los resultados se pueden ver en su totali-
dad en la tabla 1.
Utilización de tubos para recuento hematológico de polipropileno con EDTA 2K 
como anticoagulante en un servicio de hematología
20 ENFERMERÍA CLÍNICA, VOL. 11, NÚM. 1 26
Fig. 1. Medias de los recuentos inmediatos con ambos
tubos.
100
80
60
40
20
0
Leucocitos Hematíes Hemoglobina Hematócritos Volumen
corpuscular
medio
4
3
2
1
0
M
ile
s
Neutrófilos Linfocitos Monocitos Eosinófilos Basófilos
EDTA 2K EDTA 3K
EDTA 2K EDTA 3K
La investigación cualitativa aportó como resultado
una serie de ideas que se exponen a continuación sin
categorizar, marcando a la derecha con numeral roma-
no el número de veces que fue citada cada una de ellas:
1. Toma de muestras:
– En la extracción usando jeringa, al llenar el tubo
rezuma una gota de sangre. 
– Este problema aparece también con otros tubos
( como el de velocidad de sedimentación globular) .
– Usando el adaptador de vacío, el tubo es repelido.
– Como ventaja, el tubo no se rompe al caerse ( ya
que es de plástico) .
2. Manipulación:
– El tubo no está diseñado para el trabajo manual
( III) .
– Su manejo es problemático ( no ofrece seguri-
dad) ( III) .
– El destaponador no funciona bien, se mancha y
es difícil de limpiar, con lo que se pueden contami-
nar las muestras ( II) y es posible pincharse ( I) .
– Los tapones son incómodos, hay varios tipos y
para volver a tapar el tubo hay que usar otro dis-
tinto.
– Al abrir los tubos son muchas las posibilidades
de mancharse de sangre.
– El tubo parece que está diseñado para el trabajo
automatizado. No se han tenido en cuenta las seccio-
nes que trabajan manualmente ( II) .
– Da la sensación de que se parchean las solucio-
nes a los problemas que presentan los tapones ( II) .
– Se plantean dudas acerca de la receptividad a
las sugerencias de la casa comercial.
– La posibilidad de mancharse presenta el proble-
ma de tener que cambiar el uniforme en repetidas
ocasiones.
– Los tubos de 2 cc ofrecen problemas en los con-
tadores automáticos.
Discusión
Tal y como se comentaba en la Introducción, el
EDTA 2K posee un buen aval bibliográfico para
ser c o nsiderado e l antic o agulante de e le c c ió n 
para el recuento no sólo sanguíneo, sino también para
otros líquidos orgánicos9. Una de las ventajas es su
menor interferencia en el recuento de plaquetas, de
manera que inhibe su aglutinación y por tanto dismi-
nuye la aparic ión de seudotrombopenias llamadas
“inducidas por EDTA”, producidas mayoritariamen-
te por el EDTA 3K10. Por ello pensamos que aunar
tubo de plástico y EDTA 2K ponía a nuestroalcance
un sistema interesante por las perspectivas previas y
por no haber sido analizado anteriormente. Esto es
así puesto que la bibliografía consultada ofrece refe-
rencias por separado primero sobre el anticoagulan-
te utilizado1,2 y luego sobre el tubo de polipropile-
no3,4. Como quiera que en nuestro servicio se tiene
Utilización de tubos para recuento hematológico de polipropileno con EDTA 2K 
como anticoagulante en un servicio de hematología
ENFERMERÍA CLÍNICA, VOL. 11, NÚM. 1 2127
TABLA 1. Resultados de los tests intra e interensayo ( CV)
Intraensayo Interensayo
EDTA 2K EDTA 3K EDTA 2K EDTA 3K
0 h 24 h 48 h 0 h 24 h 48 h 0 h 24 h 48 h 0 h 24 h 48 h
Leucocitos 4,1 2,7 3,38 4,3 2,73 0,91 1,25 1,16 2,24 1,72 1,09 2,01
Hematíes 0,82 0,83 1,06 1,55 0,83 0,80 0,54 0,53 0,97 1,36 0,59 0,87
Hemoglobina 1,48 0,32 0,79 1,13 0,32 0,70 0,57 0,43 0,61 0,9 0,47 0,45
Hematócrito 1,05 1,81 1,10 1,89 1,81 0,92 0,79 0,51 1,08 1,67 0,41 0,98
Volumen
corpuscular
medio 0,56 0,93 0,18 0,44 0,93 0,56 0,57 0,58 0,47 0,70 0,57 0,53
Plaquetas 2,04 2,63 3,03 2,21 2,63 2,22 1,54 3,36 3,99 3,13 2,32 3,59
Fig. 2. Distribución porcentual de las alarmas mor-
fológicas leucocitarias en las muestras incubadas.
LS++ 50,0%LS+ IG 38,9%
NO 11,1%
EDTA 2 K
LS++ 50,0%LS+ IG 33,3%
NO 16,7%
EDTA 3 K
alguna experiencia en el estudio de la estabilidad de
las muestras y su comportamiento durante diferen-
tes períodos de incubación11, afrontamos este traba-
jo con la idea de obtener el máximo volumen de da-
tos posible para poder conseguir unas conclusiones
válidas. Se analizan los parámetros hematológicos
con la idea de detectar posibles diferencias causadas
por los anticoagulantes. 
En la primera parte ( parámetros hematológicos bá-
sicos) , los resultados obtenidos en el estudio de las di-
ferentes variables hematológicas hacen pensar que en
efecto el EDTA 2K ofrece buenos resultados a la hora
de realizar los recuentos, ya que las escasas diferen-
cias estadísticamente significativas halladas no ofre-
cen significación clínica al no existir grandes diferen-
cias entre las medias y ser buenos los coeficientes de
correlación. En la fórmula leucocitaria sí se aprecian
diferencias que han de tenerse en cuenta, sobre todo
en las muestras incubadas a temperatura ambiente, lo
que nos hace pensar en la conveniencia de almacenar
las muestras a 4 °C cuando nos veamos obligados a
postergar los recuentos, y a este respecto coincidimos
con otros estudios llevados a cabo previamente en los
que incluso se coincide con el mal comportamiento
que ofrecen los basófilos, aun siendo un equipo analíti-
co con una tecnología diferente12. Con respecto a la
aparición o no de alarmas morfológicas leucocitarias,
el comportamiento de las muestras procesadas con
Venoject II ha sido idéntico a las analizadas por Rome-
ro et al6, aunque aquellas muestras se procesaron con
tubos Vacutainer. En los tests intra e interensayo com-
probamos la capacidad de repetición de resultados, y
son por tanto indicadores de la precisión del objeto del
estudio. Los resultados obtenidos han sido muy bue-
nos. Quizá la mayor controversia la podamos hallar en
el apartado dedicado a obtener la opinión de los profe-
sionales. Tal y como Pope et al señalan, el uso de un
test de investigación cualitativa permite obtener infor-
mación directamente de la experiencia diaria13. En es-
te orden de cosas, la toma de muestras no ha sido con-
siderada como muy problemática ( usando jeringa, al
llenar el tubo rezuma una gota de sangre; usando el
adaptador de vacío, el tubo es “escupido”) , no así la
manipulación del tubo en las distintas secciones de
trabajo. Resulta muy llamativo que aquellos profesio-
nales que no se ven obligados a manipular el tapón del
tubo apenas estén disconformes con su uso ( tan sólo
una referencia a los problemas con el tubo de 2 cc) y
que los que sí tienen que hacerlo sean muy remisos a
aceptar el tubo, con argumentos como “el tubo no está
diseñado para el trabajo manual”, o que “su manejo es
problemático ( no ofrece seguridad) ”, etc. Esto nos ha-
ce pensar en que efectivamente parece que el tubo no
ha sido diseñado pensando en taparlo y destaparlo re-
petidas veces, acc ión que en algunas secc iones de
nuestro servicio es necesario llevar a cabo con asidui-
dad. La frecuente aparición de problemas asociados a
este procedimiento ( “me he tenido que cambiar de
uniforme dos veces en un día”) hacen al enfermero
sentirse “desprotegido”, y se llega a plantear si los pro-
blemas detectados son en realidad bien entendidos
por la casa comercial ( “da la sensación de que se par-
chean las soluciones a los problemas que presentan los
tapones”, “¿se aceptarán las sugerencias que se ha-
gan?”) . Todas estas consideraciones nos hacen plante-
arnos una investigación más concienzuda al respecto,
ya que no hemos encontrado referencias bibliográficas
en referencia a este asunto.
Concluimos que el sistema de tubo de vacío de po-
lipropileno con EDTA 2K como anticoagulante Veno-
ject II de Terumo garantiza la calidad de los resulta-
dos hematológicos, como demuestran los resultados
obtenidos, aunque se plantean serias dudas sobre el
tapón utilizado a la hora de trabajar manualmente,
cuestión que nos parece interesante estudiar con más
profundidad.
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22 ENFERMERÍA CLÍNICA, VOL. 11, NÚM. 1 28
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