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MEJORAMIENTO GENÉTICO EN EL ECUADOR TALLER EDICIÓN GÉNICA EN CULTIVOS Y GANADERÍA PARA AMÉRICA LATINA Y EL CARIBE. FONDO SEMILLA – FONTAGRO 16-18 de Octubre de 2019 Bogotá, Colombia Ubicación de las Estaciones, Granjas Experimentales y Unidades de Desarrollo Tecnológico del INIAP 7 estaciones experimentales y 1 Centro de Bio conocimiento en Galápagos 6 granjas experimentales 13 Unidades de Desarrollo Tecnológico (UDT) 1 Invernadero automatizado para producción de semilla de papa Administración Central Áreas estratégicas y líneas de investigación del INIAP 2018-2022 Incrementar la productividad del sector agropecuario - Mejoramiento genético - Agrobiotecnología - Manejo integrado del cultivo y ganado Generación de elementos de apoyo para la dirección, planificación y toma de decisiones relacionadas con la investigación, desarrollo tecnológico e innovación del sector agropecuario Manejo y conservación de los recursos naturales de interéspara la agriculturay alimentación - Conservación de suelos y aguas - Conservación y uso de recursos genéticos Incorporación de valor agregado a la producción agropecuaria -Transf. y agreg. de valor de productos vegetales, lácteos, cárnicos. -Transformación y agregación de valor de subpr. agropec. 274 materiales mejorados entre variedades, híbridos y clones en diferentes rubros, entregados al agricultor ecuatoriano Producción de semilla básica y registrada: promedio anual superior a las 1000 t. Conservación del mayor banco de germoplasma (30 000 accesiones) Centro de capacitación de técnicos y especialistas, y de transferencia de tecnologías al sector agropecuario EL INIAP: Instituto público de referencia en las investigaciones agropecuarias Principales Rubros Programa de Raíces y Tubérculos Programa de Cereales Programa de Maíz Programa de Leguminosas y Granos Andinos Programa de Frutales Programa de Forestería Programa de oleaginosas Programa de Café y Cacao Programa de bananos, plátanos y otras musáceas Programa de Palma aceitera Programa de Arroz Programa de Raíces y Tubérculos Rubros: Papa (Solanum tuberosum L.), Yuca(Manihot sculenta) y Camote (Ipomoea batatas L.) 21 Variedades mejoradas de papa Métodos de Mejoramiento: 1) Selección Clonal 2) Selección por pedigrí 3) Selección recurrente 4) Retro cruzamientos 5) Inducción de mutaciones con radiaciones gamma y selección in vitro Programa de Cereales Rubros: Cebada (Hordeum vulgare), Trigo (Triticum aestivum), Avena (Avena Sativa), Triticale (X Triticosecale Wittman) Métodos de Mejoramiento: 1) Cruzamientos y retrocruzamientos, 3) Mutaciones, inducidas, 4) Doble haploides homocigóticas 43 Variedades mejoradas (13 de cebada, 21 de trigo, 6 de avena y 2 de triticale) Programa de Maíz Rubro: Maíz duro y maíz suave (Zea mays) Métodos de Mejoramiento: 1) Hibridaciones, 2) Mutaciones inducidas (radiaciones) 3) Adaptación (colecciones) 15 Variedades mejoradas Programa de Leguminosas y granos andinos Rubros: Fréjol (Phaseolus vulgaris), Haba (Vicia faba), Arveja (Pisum sativum), Quinua (Chenopodim quinoa), Chocho (Lupinus mutabilis) Métodos de Mejoramiento: 1) Cruzamientos simples, dobles, triples 2) Retrocruzamientos 33 Variedades mejoradas (18 de frejol, 2 de haba, 6 de arveja, 5 de quinua, 2 de chocho) Programa de Fruticultura Rubros: Tomate de árbol (Solanun betaceum), Naranjilla (Solanum quitoense), Mora (Rubus sp.) y Durazno ( Prunus persica), Aguacate (Persea americana) Métodos de Mejoramiento: 1) Hibridaciones y cruzamientos 2) Adaptación (colecciones) 1 variedad mejorada de mora (sin espinas) Programa de café y cacao Métodos de Mejoramiento: 1) Hibridaciones y cruzamientos 2) Obtención de clones y adaptación Materiales de cacao nacional generados por el INIAP EET-19, EET-48, EET-95, EET-96, EET-103, EET-544, EET-558, EET-575, EET- 559, EET-576, EET-577, EET-450, EET-454, EET-800 AROMA PICHILINGUE y EET- 801 FINO PICHILINGUE Programa de palma aceitera Métodos de Mejoramiento: 1) Hibridación, autofecundación y cruzamientos (GxG y OxG) 2) Inducción de mutaciones, ploidía y regeneración de plantas vía embriogénesis somática 1 híbrido INIAP-Tenera de rendimiento superior (más de 20 t/ha) Programa de Arroz Métodos de Mejoramiento: 1) Selección por pedigrí 2) Cruzamientos simples, dobles, triples 2) Selección recurrente 3) Retro cruzamientos 4) Inducción de mutaciones con EMS y selección in vitro 5) Doble haploides homocigóticas 16 variedades liberadas por el INIAP Obtención de 18 mutantes con tolerancia temprana al tizón tardío (Phytophtota infestans) en variedad de papa superchola, mediante radiaciones gamma y selección in vitro Obtención de líneas doble haploides homocigóticas en maíz duro a partir del cultivo de anteras irradiadas con radiaciones gamma Monitoreo de la Homogeneidad Genética de la variedad de Quinua INIAP- Tunkahuan en campo de agricultores Validación de dobles haploides en maíz (Zea maiz L.) por marcaje molecular Caracterización molecular de la colección nacional de maní (Arachys hipogea L.) Caracterización molecular de germoplasma de mora con RAPDs y AFLPs Caracterización molecular de la colección nacional de frejol arbustivo con fines de uso y mejoramiento genético Desarrollo de la embriogénesis somática en Genotipos de Cacao Nacional (Theobroma cacao L.) para asistir el mejoramiento genético. Caracterización molecular de la colección de Genotipos de Cacao Nacional (CGN) y Sabor Nacional Arriba (SNA) del INIAP, utilizando marcadores tipo microsatélites (SSRs) Caracterización molecular de genotipos de soyas (Glycine soja) Principales investigaciones biotecnológicas desarrolladas por el INIAP aplicadas al mejoramiento genético Inducción de mutaciones en el híbrido INIAP-Tenera de palma aceitera Cruzamientos dirigidos (DxP) Colecta de frutos del racimos 3 meses después de la antesis Extracción de embrión cigótico inmaduro Inducción de callos embriogénicos Regeneración de las plantas vía embriogénesis somática Figura 1. Regeneración de plantas vía ES del híbrido INIAP-Tenera de palma de aceite, a partir de embriones cigóticos tratados con DL50 de EMS. A) Racimo de frutos cosechado 13 semanas después de la antesis, mesocarpo con embrión cigótico utilizado para el tratamiento con EMS (flecha blanca), embrión cigótico extraído (flecha roja). B) Embriones cigóticos extraídos de los frutos y sembrados in vitro. C) Callo embriogénico obtenido a las 12 semanas de cultivo. D, E, F) Callos embriogénicos con clúster de poliembriones (flecha roja) obtenidos después de tres subcultivos sucesivos en medio de maduración de embriones. G) Diferenciación de embriones al cuarto subcultivo en medio de maduración. H,I) Iniciación de brotes a partir de los clúster de embriones. (C,E,F, barra=4 mm; G, barra=5 mm). Transferencia ex vitro de plantas regeneradas del híbrido INIAP-Tenera 21% de frecuencia de inducción de CE 52% de regeneración de plantas 2,3 plantas regeneradas por CE 42% de supervivencia ex vitro Inducción de ploidía con colchicina en el híbrido INIAP-Tenera Investigaciones que desarrolla el laboratorio de Biotecnología-EELS Rubro Arroz ACCIONES ÁREA DE INFLUENCIA IMPACTO ESPERADO 1-Inducción de mutaciones con Etilmetanosulfonato (EMS) y regeneración de plantas vía embriogénesis somática para el mejoramiento de la tolerancia a salinidad Los Ríos, Guayas y El Oro Disponer de una tecnología para la inducción de mutaciones en arroz y de líneas mutantes seleccionadas por su tolerancia temprana a la salinidad 2- Cultivo de anteras a partir de cruzamientos con variedades Indica para la mejora de la tolerancia a la salinidad y la calidad del grano Los Ríos, Guayas y El Oro Disponer de una tecnología de obtención de líneas doble haploides homocigóticas con tolerancia temprana a la salinidad (reducir de 10a 5 años la obtención de una variedad mejorada) 3- Implementación de un protocolo para la selección in vitro (Biorreactores de inmersión temporal) e invernadero de líneas promisorias (mutantes y doble haploides homocigóticas), con tolerancia temprana a la salinidad Los Ríos, Guayas y El Oro Disponer de una tecnología para la selección temprana de líneas promisorias de arroz con tolerancia temprana a la salinidad Figura 1. Embriogénesis somática a partir de semillas maduras de cultivares de arroz (Oryza sativa L.) ecuatorianos. A y B) Desarrollo del callo a partir del embrión cigótico. C) Callo embriogénico (CE) en medio de proliferación (presencia de estructuras nodulares compactas de color blanco-amarillento opacas, flechas rojas). D) Callo no embriogénico (CNE). E) Callo rizogénico (CR). F). Callo mixto (brotes y raíces). G) Callos en medio de cultivo de regeneración. H, I) Regeneración de plantas. (A,B,C,D,F: barra=5 mm; G,H,I: barra= 1 cm). Tres variedades: INIAP 10, INIAP FL-Arenillas e INIAP FL-1480 Cristalino Frecuencia de inducción de callos: 56, 61 y 62% Frecuencia de regeneración: 80, 82 y 92% Nro. de plantas regeneradas: 3-6 plantas regeneradas/CE Protocolo de embriogénesis somática desarrollado en variedades de arroz ecuatorianos Figura 2. Regeneración de plantas a partir de callos embriogénicos en diferentes variantes de medio de cultivo. 95-100% de Regeneración de plantas a partir de CE, en dependencia de la variedad Optimización de la fase de regeneración Protocolo de inducción de mutaciones desarrollado en variedades de arroz ecuatorianos DL50 con EMS para tres variedades (INIAP 10, INIAP FL-Arenillas e INIAP FL-1480 Cristalino) y regeneración de plantas posibles mutantes Cultivo de anteras (Inducción de microcallos) Regeneración de plantas a partir de microcallos 73 plantas verdes a partir de 3 200 anteras sembradas ( F2) más de 300 plantas verdes a partir de 10 000 anteras sembradas ( F3) Protocolo para la selección in vitro (NaCl) en medios semisólidos y Biorreactores de Inmersión Temporal (BIT) Inoculación de los BIT 1ra Selección (Fase de regeneración) 3ra Selección (Cultivo de brotes en diferentes condiciones de salinidad) Cosecha, evaluación del material vegetal y selección de líneas 2da Selección (Fase de multiplicación) Agradecimientos: Ing. William Viera Ing. Luis Ponce Ing. Eduardo Murillo Ing. Saúl Mestanza Ing. Andrés Factos Ing. Roberto Celi CIBE: Estrategias y Fortaleza para el Agro Banco de germoplasta de colección internacional de Musa spp. 2003, 26 accesiones Ingeniería Genética en Banano (Variedad ‘Williams’) • Protocolos de transformación genética mediada por A. tumefaciens: • ARF, Spartina alterniflora. • Folato, GTPCHI Drought screening (7days) Luis E. Sánchez Timm Ph.D. WT KD OE1 OE2 OE3 Drought screening (14 days) WT KD OE1 OE2 OE3 OE4 bHLH-Myc2 transcription factor Marco Legal: • La Constitución del Ecuador en el ARTÍCULO 401, se indica que el país es libre de cultivos y semillas transgénicas: “Se declara al Ecuador libre de cultivos y semillas transgénicas. Excepcionalmente, y sólo en caso de interés nacional debidamente fundamentado por la Presidencia de la República y aprobado por la Asamblea Nacional, se podrán introducir semillas y cultivos genéticamente modificados. El Estado regulará bajo estrictas normas de bioseguridad, el uso y el desarrollo de la biotecnología moderna y sus productos, así como su experimentación, uso y comercialización. Se prohíbe la aplicación de biotecnologías riesgosas o experimentales (Constitución de la República del Ecuador, 2008).” Actualización • Registro Oficial del órgano del Gobierno del Ecuador , expedida el 27 de enero del 2015 (N° 425) inca mediante el MAE: • Comisión Nacional de Bioseguridad (CONABIO) para garantizar un adecuado nivel de protección en la transferencia, manipulación y uso seguro de OGM. • 13 facultades y atribuciones (Art. 13): “d. proponer y gestionar ante los organismos competentes la aprobación de normas relacionadas con OGMs, sus derivdos y productos que las contengan; f. proponer a la autoridad ambiental nacional el otorgamiento o denegación de autorizaciones, de acuerdo al caso, para actividades con OGMs, sus derivados y productos que los contengan, tales como: desarrollo, introducción, manipulación, producción, distribución, liberación, propagación, uso confinado, transporte, almacenamiento, cultivo, exportación o importación fundamentado en informe técnico de la Comisión Nacional.” • Artículo 26, de la Ley Orgánica del Régimen de la Soberanía Alimentaria del Ecuador expedida en diciembre del 2010 indica que “las materias primas que contengan insumos de origen transgénico únicamente podrán ser importadas y procesadas, siempre y cuando cumplan con los requisitos de sanidad e inocuidad, y que su capacidad de reproducción sea inhabilitada, respetando el principio de precaución, de modo que no atenten contra la salud humana, la soberanía alimentaria y los ecosistemas. Los productos elaborados en base a transgénicos serán etiquetados de acuerdo a la ley que regula la defensa del consumidor”. • La presencia de cultivos o semillas transgénicas estaría limitada en el Ecuador, el consumo de alimentos proveniente de OGMs o sus derivados está permitido debido a que se requiere de su correcto etiquetado. • Ley orgánica de agrobiodiversidad, semillas y fomento de agricultura, 2017 indica: • “dictar medidas de control del uso ilegal de semillas y cultivos transgénicos” • “vigilar y controlar la condición del país como territorio libre de semillas y cultivos transgénicos • Art. 56 que “se permite el ingreso de semillas y cultivos transgénicos al territorio nacional, únicamente para ser UTILIZADOS CON FINES INVESTIGATIVOS…”. • El Código Orgánico Del Ambiente, • Art. 75 que “las normas de bioseguridad regularán los productos de la biotecnología moderna, con el objeto de contribuir a la conservación y el uso sostenible de la biodiversidad y de garantizar los derechos a la salud humana y al ambiente. La Autoridad Ambiental Nacional, en coordinación con las instituciones competentes, establecerá las normas, las políticas públicas y los planes de bioseguridad para el control de los riesgos de los productos de la biotecnología moderna” • Art.79 se indica que “se fomentará la investigación, la educación y la difusión de información científica sobre la biotecnología moderna, sus productos y la gestión de la bioseguridad”. Reglamento al código orgánico del ambiente • Art. 229. Las instituciones competentes en materia de bioseguridad emitirán las normativas sectoriales pertinentes para prevenir o evitar los posibles riesgos que pudieran ocasionar los organismos vivos genéticamente modificados resultantes de la biotecnología moderna al ambiente. • Art 230. Excepciones; Organismos provenientes de mejoramiento genético de especies que no posean ADN recombinante o foráneo en el genoma resultante. Puntos claves: • Las regulaciones no se refieren específicamente a New Breeding Techniques (NBTs), incluyendo la edición de genomas. • Los organismos genéticamente mejorados que resultan de la edición del genoma u otros NBT no se someterán a una evaluación de riesgos en el caso de que el ADN extraño o recombinante no esté presente en el organismo mejorado resultante. Además, las normas de bioseguridad están indicadas para un análisis adecuado de evaluación de riesgos (arts. 229-240), y se estableció un Sistema Nacional de Bioseguridad (SINABIO) (Art. 241). • Ecuador con respecto a la edición del genoma y / u otros NBT aún no están establecidos. Sin embargo, el Gobierno y los sectores académicos en Ecuador a través de sus correspondientes centros de investigación en agricultura y / o biotecnología están dispuestos a iniciar proyectos para cultivos genéticamente mejorados utilizando NBT,incluidas especies de Musa (plátanos y plátanos), arroz y papa. Futuras Perspectivas • Establecer los protocolos de cultivo in vitro (embriogénesis somática y androgénesis) adecuados a los arroces criollos. • Desarrollar la plataforma de edición génica en arroz y otros cultivos de importancia en Ecuador. • Editar y regenerar in vitro germoplasma de arroz criollo ecuatoriano • Obtener plantas de arroz sometidas al proceso de edición genética con resistencia a salinidad y sequia. • Producir la primera generación de semilla de los materiales editados (para iniciar procesos de incremento de semilla a fin de poner a disposición de los agricultores de insumo apto para la siembra).
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