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ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ELABORACION DE LA MAQUETA DEL EQUIPO PCR CONVENCIONAL Denys Hernán Flores Apaza Presentado por Dr. Hébert Hernan Soto Gonzales Revisado por: INTRODUCCION La a p lic a c ió n d e la s té c n ic a s g e n é t ic a s a l e s tu d io d e la b io d ive rs id a d c o n trib u ye n o ta b le m e n te a l e s tu d io d e la flo ra y fa u n a s ilve s tre s . La c a ra c te riza c ió n y c u a n tific a c ió n d e la b io d ive rs id a d s e p u e d e lo g ra r c o n e l e q u ip o PCR. Qu e m u e s tra la c a p a c id a d d e id e n t ific a r c u a lq u ie r tra za d e m a te ria l g e n é t ic o q u e s e e n c u e n tre e n u n a m u e s tra d e t ie rra , a g u a o a ire . Ap lic a c io n e s q u e s e lo g ra n e n e l la b o ra to rio y q u e n o s p e rm ite n id e n t ific a r a lo s o rg a n is m o s q u e e s té n o h a ya n e s ta d o e n c o n ta c to c o n la m u e s tra a a n a liza r. —OBJETIVOS Ob je t ivo Ge n e ra l Ela b o ra r la m a q u e ta d e l e q u ip o PCR c o n ve n c io n a l. Ob je t ivo s e s p e c ífic o s . Re c o n o c e r la s p a rte s d e l e q u ip o PCR c o n ve n c io n a l. Fu n d a m e n ta r d e ta lle s d e l e q u ip o PCR c o n ve n c io n a l. Inventor Re a c c ió n d e Ca d e n a Po lim e ra s a ( Po lim e ra s a Ch a in Re a c t io n ) fu e d is e ñ a d a p o r e l Dr. Ka ry Mu llis e n e l a ñ o 19 78 y p a te n ta d a e n e l a ñ o 19 8 5 , u t ilizo la PCR p a ra a m p lific a c ió n d e l g e n β- h e m o g lo b in a h u m a n a y e l d ia g n o s t ic o p re n a ta l d e a n e m ia fa lc ifo rm e . Ga n ó e l p re m io n o b e l d e q u ím ic a p o r s u in ve n to Dr. Kary Mullis PCR punto fina l o PCR convencional Técnica de la biología molecular que sirve para la identificación y amplificación de regiones específicas del ADN. APLICACIONES ESPECIALES DE lA PCR • Amplificar e identificar las secuencias blanco in situ • Estudiar la evolución de las secuencias de un gen y los efectos de variabilidad de la secuencia en la función del cromosoma. • Generación de sondas de hibridación específicas para cromosoma. • Usar las secuencias repetidas en el genoma como marcadores genéticos. El equipo PCR es una herramienta que se usa para el análisis del genoma humano. Además de generar cantidades grandes de templado para secuenciar, la PCR se ha utilizado para el mapeo de cromosomas y para analizar cambios grandes y pequeños en estructura cromosómica. El Uso del PCR en la Ingeniería Am bienta l PCR es una técnica para ver las características de cierto ADN por lo que aplicarlo a la ingeniería ambiental ayudaría en obtención de material genético proveniente del medio (ya sea suelo, agua o aire) para el estudio de las especies o poblaciones que habitan o han habitado en él. El Uso del PCR en el suelo Desnaturalización Apareamiento Polimerización Amplificación Bacterias Hongos virus Muestreo de suelo ADNTubo PCR El PCR convencional sirve para saber si esta o no el gen buscado. Imagen 4. Trazado de otros puntos (puntos del borde, tapa del calentador PCR) Imagen 3. Trazado de la base sobre el cartón 56x37 cm 1er Paso: Trazado de puntos sobre el cartón. Elaboración de la maqueta PCR Convencional o PCR punto final. Imagen 8. Corte sobre líneas auxiliares del Termociclador PCR Imagen 7. Corte sobre las líneas trazadas de la base de la maqueta Termociclador PCR 2do Paso: Corte del trazado. Se realiza el corte sobre el trazado que se realizo en el anterior paso obteniendo como resultado las siguientes imágenes Imagen 10. Forma del cartón después del corte Luego de haber acabado con el corte se procede a doblar el cartón para darle forma del equipo termociclador de PCR convencional a continuación las imágenes del procedimiento 3er Paso: Doblado del cartón. Imagen 16. Comprobación del pegado. Imagen 15. Pegado de la base para el calentador PCR Imagen 14. Pegado del papel sobre el cartón 4to Paso: Unión del cartón y pegado del papel blanco Imagen 20. Presentación final de la maqueta Pantalla LCD Tapa del calentador PCR Celda Pertier Imagen 18. Culminación de la maqueta Imagen 19. Añadimiento de la pantalla mediante una imagen de internet Conclusiones Una de las ventajas principales del uso de ADN en el medio ambiente es facilitar el muestreo, puesto que no es necesario capturar a los individuos sino tomar una muestra del sustrato por donde estos pasaron (tierra/agua/aire). El equipo PCR tiene importancia debido a que su diseño tiene como objetivo la diversificación del ADN para identificar y amplificar una región en este caso regiones a nivel de genes. Por lo cual es usado en áreas medicas como de biología. La elaboración de la maqueta PCR se realizó con éxito. REFERENCIAS Foy CA, Parkes HC. Emerging homogeneous DNAbased technologies in the clinical laboratory. Clin Chem. 2001; 47: 990-1000. Higuchi R, Dollinger G, Walsh PS, Griffi th R. Simultaneous amplifi cation and detection of specifi c DNA sequences. Biotechnology. 1992; 10: 413-417. Bustin S. A. Absolute quantification of mRNA using real-time reverse transcription polymerase chain reaction assays. Journal of Molecular Endocrinology. 2000. 25,169-193. Rizza S, Nobile G, Tessitori M, Catara Aand Conte E. 2009. Real time RT-PCR assay for quantitative detection of Citrus viroid III in plant tissues. Plant Pathology 58: 118- 185. Links. • http://www.espanol.pcrlinks.com/ ¡GRACIAS! ESCUELA PROFESIONAL�DE �INGENIERIA AMBIENTAL ELABORACION�DE LA MAQUETA �DEL EQUIPO PCR CONVENCIONAL Denys Hernán Flores Apaza INTRODUCCION Número de diapositiva 5 Inventor APLICACIONES ESPECIALES DE lA PCR El Uso del PCR en la Ingeniería Ambiental� El Uso del PCR en el suelo Número de diapositiva 10 Se realiza el corte sobre el trazado que se realizo en el anterior paso obteniendo como resultado las siguientes imágenes 3er Paso:�Doblado del cartón. Número de diapositiva 13 Número de diapositiva 14 Número de diapositiva 15 Número de diapositiva 16 ¡GRACIAS!
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